β-catenin、cyclinD1 在胸腺肿瘤中的表达及意义

目的:研究β-catenin、cyclinD1在胸腺肿瘤的表达及其意义。方法:采用免疫组化pv6000法检测69例胸腺肿瘤中β-catenin及cyclinD1的表达。结果:β-catenin与cyclinD1在胸腺肿瘤中的阳性表达率均为(53.62%)明显高于正常胸腺组织(0%)(P=0.027)。β-catenin的阳性表达的差异在A、AB、B1、B2、B3及C型胸腺肿瘤各型之间存在统计学意义(X2=24.676,P<0.01)。其表达的在A、AB及B1型与B2、B3及C型(无/低度危险组肿瘤与中/高度危险组肿瘤)之间表达的差异存在统计学意义(X2=21.955,P<0.01)。CyclinD1在A、AB、B1、B2、B3及C型胸腺肿瘤中的阳性表达的差异存在统计学意义(X2=14.393,P=0.013)。其表达在A、AB及B1型与B2、B3及C型(无/低度危险组肿瘤与中/高度危险组肿瘤)之间表达的差异存在统计学意义(X2=10.470,P=0.001)。在胸腺肿瘤中,β-catenin的表达与cyclinD1表达呈正相关关系(r=0.449,P<0.01)。结论:β-catenin、cyclinD1对于判定胸腺肿瘤的恶性程度可能有重要的参考价值。Wnt/β-catenin信号传导通路在胸腺肿瘤的发生过程中可能发挥重要作用。     

EBV阳性与阴性NPC细胞中AKR1B10的差异表达及生物学意义

研究EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）阳性与阴性鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma,NPC）细胞中醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)的差异表达及生物学意义。收集NPC组织并检测EBV感染情况及AKR1B10表达水平，比较EBV阳性与阴性NPC组织中AKR1B10表达水平的差异；培养EBV阳性的NPC细胞株HK-1和C666-1、EBV阴性的NPC细胞株CNE-1及CNE-2，检测AKR1B10的表达水平。HK-1和C666-1进行分组，给予10μmol/L、20μmol/L AKR1B10抑制剂处理，20μmol/L AKR1B10抑制剂联合对照溶剂或20μmol/L β-catenin激动剂处理，检测细胞增殖水平、侵袭数目及c-myc、MMP2、MMP9的mRNA表达水平，AKR1B10、总β-连环蛋白（β-catenin）、核β-catenin的蛋白表达水平。结果显示HK-1和C666-1细胞中AKR1B10的蛋白表达水平高于CNE-1及CNE-2;10μmol/L、20μmol/L AKR1B10抑制剂组HK-1和C666-1...     

β-catenin与NF-κB在结直肠腺癌中的表达及其相关性研究

目的：直肠腺癌组织中β-catenin和NF-κB的表达水平及二者与结直肠癌临床病理特征之间的相关性。方法：采用免疫组化SP法检测65例结直肠腺癌和20例正常结直肠组织中β-catenin与NF—κB蛋白表达水平。结果：结直肠癌和正常结直肠组织中β-catenin的阳性表达率分别为67．7％、0％,NF—κB的阳性率分别为75．4％、15．0％,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结直肠癌组织中β-catenin与NF．κB的表达与患者的年龄、性别、肿瘤发生部位均无关（P〉0．05）,但与TNM分期和淋巴结转移显著相关（P〈0．05）;NF-κB的表达与组织学分化程度呈显著负相关（P〈0．05）,B-catenin的表达与肿瘤的远处转移显著相关（P〈0．05）。结直肠腺癌组织中p-catenin的表达与NF—κB的表达呈显著正相关（r=0．293,P=0．018）。结论：结直肠癌中β—catenin与NF—κB的表达异常上调,在结直肠癌发生发展中起重要作用,二者联合检测有助于结直肠癌的病情和预后评估。     

TGF-β_2在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞分化的研究

目的：探讨转化生长因子β2（TGF-β2）在低氧条件下诱导骨髓基质干细胞（BMSCs）向软骨细胞分化的作用。方法：无菌条件下分离Wistar大鼠股骨骨髓,采用全贴壁培养法纯化BMSCs。传6代后,将细胞随机分为3组,A组加入25 ng/mL TGF-β2在1%氧浓度条件下培养;B组加入25 ng/mL TGF-β2在21%氧浓度条件下培养;C组仅加入含10%胎牛血清的DMEM-α培养液在1%氧浓度条件下培养。3周后,通过甲苯胺蓝染色检测细胞糖胺多糖,聚合酶链反应检测Ⅱ型胶原和蛋白聚糖（Aggrecan）的表达水平。结果：骨髓细胞经换液后贴壁聚集生长,形态均一,连续传代后形态无明显改变。分组培养第1周,A、C组生长速度低于B组;第2周各组均出现不规则形态细胞,A、C组细胞形态小于B组;第3周各组均可见透明样基质,以A组最明显。3周后行甲苯胺蓝染色,A组细胞内外均可见丰富的蓝染颗粒,B、C组染色较A组略浅。A组Ⅱ型胶原的表达相对量（1.246±0.287）高于B组（0.973±0.365）、C组（0.802±0.196）,差异有统计学意义（P〈0.05）;B、C组比较无明显差异（P〉0.05）。A组Aggrecan的表达相对量（0.833±0.375）高于B组（0.724±0.173）、C组（0.602±0.091）,差异有统计学意义（P〈0.05）;B、C组比较无明显差异（P〉0.05）。结论：TGF-β2联合低氧环境可明显促进骨髓基质干细胞分化为软骨细胞。     

姜黄素对兔骨关节炎软骨组织学及CL-2、Mmp9、COX-2、IKKβ、NF-Кb mRNA表达的影响

目的：研究姜黄素对兔关节炎软骨组织的影响。方法：30只新西兰白兔,随机分成对照（A）组、姜黄素（B）组、关节炎（C）组,每组10只。除A组外,其余两组木瓜蛋白酶造骨性关节炎早期模型,后使用5%姜黄素9mg/（kg.week）,生理盐水0.5ml关节腔注射治疗后,采用RT-PCR检测三组的CL-2、Mmp9、COX-2、IKKβ、NF-Кb的mRNA表达情况;采用Tunel法检测软骨细胞的凋亡情况。结果：经过四周治疗,B组的CL-2的mRNA表达比C组增强（P〈0.05）,Mmp9、COX-2、IKKβ、NF-Кb的mRNA表达明显减弱（P〈0.05）,而B组和C组的CL-2的mRNA表达均比A组减弱（P〈0.05）,在Mmp9、COX-2、IKKβ、NF-Кb的mRNA表达增强（P〈0.05）。B组和C组凋亡指数有统计学意义（P〈0.05）。结论：姜黄素关节腔注射可以明显缓解关节软骨的退变,其作用可能与IL-1β/IKKβ/NF-Кb/COX-2、Mmp9两个正反馈信号阻断有关。     

柚皮苷和木犀草素联合应用对大鼠BMSCs诱导成骨过程中Wnt/β-cantein通路相关基因表达的影响

摘要 目的：探讨柚皮苷和木犀草素联合应用对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）诱导成骨过程中Wnt/β-cantein通路相关基因表达的影响。方法：取大鼠股骨中提取的BMSCs,分别建立A组（空白组）、B组给予柚皮苷溶液10 μmol/L,C组给予木犀草素溶液5 μmol/L;D组给予骨碎补总黄酮溶液10 mg/mL;E组给予柚皮苷-木犀草素混合溶液配伍比为10 μmol/L：5 μmol/L,并诱导其向成骨细胞分化。应用碱性磷酸酶（ALP）染色及分光光度法检测第7 d各组细胞ALP活性。应用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测第7 d各组细胞Wnt/β-cantein通路相关基因及成骨基因的表达。结果：B组、C组、D组、E组细胞562 nm波长下光密度（OD）值显著高于A组,E组细胞562 nm波长下OD值最高,显著高于B组、C组、D组（P＜0.05）。B组、C组、D组、E组细胞ALP、骨钙素（OCN）、Runt相关转录因子2（RUNX2）基因表达水平显著高于A组,E组ALP、OCN、RUNX2基因表达水平最高,显著高于B组、C组、D组（P＜0.05）。B组、C组、D组、E组细胞β-catenin、Cyclin D1基因表达水平显著高于A组;B组、E组LEF-1基因表达水平显著高于A组;E组β-catenin、LEF-1、Cyclin D1基因表达水平最高,显著高于B组、C组、D组（P＜0.05）。结论：柚皮苷和木犀草素均具有促进大鼠BMSCs增殖和诱导其成骨向分化的作用,柚皮苷和木犀草素联合应用诱导大鼠BMSCs增成骨作用最强,其主要机制与Wnt/β-cantein通路激活有关。     

乙肝病毒X蛋白通过β-catenin通路调控肝癌细胞增殖、细胞周期的研究

乙肝病毒X蛋白(HBx)是由乙型肝炎病毒(HBV)DNAX基因编码的蛋白,具有促癌作用且与乙肝相关肝癌的发生有关,但其发挥促癌作用的机制尚不清楚.在乙肝相关肝癌中,β-连环蛋白(β-catenin)通路过度激活并介导了促进细胞增殖、加速细胞周期的效应.为了观察HBx是否通过β-catenin通路调控肝癌细胞增殖、细胞周期,本实验培养肝癌Huh7细胞株并分为对照组、转染HBx质粒的HBx组、转染HBx并用β-catenin抑制剂ICG-001处理的HBx+ICG-001组、转染HBx并用β-catenin抑制剂XAV939处理的HBx+XAV939组,检测细胞增殖活力OD490nm、细胞周期及生存素(survivin)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、c-myc、β-catenin、磷酸型GSK-3β(p-GSK-3β)的表达量.结果显示,HBx组的OD490nm水平、细胞周期S期、G2/M期的比例、survivin、bcl-2、cyclinD1、c-myc、β-catenin、p-GSK-3β的表达量均高于对照组,细胞周期G0/G1期的比例低于对照组(P＜0.05);HBx+ICG-001 组、HBx+XAV939组的OD490nm水平、细胞周期S期、G2/M期的比例、survivin、bcl-2、cyclinD1、c-myc、β-catenin、p-GSK-3β的表达量均低于HBx组,细胞周期G0/G1期的比例高于HBx组(P＜0.05).结果表明,HBx促进肝癌细胞增殖、加速细胞周期的作用与激活β-catenin通路有关.本研究的创新之处在于阐明HBx促进肝癌细胞增殖、加速细胞周期的分子机制,激活β-catenin通路是介导HBx上述作用的分子机制之一,这也为今后乙肝相关肝癌的防治提供了新思路、新靶点.     

飞燕草素通过Wnt/β-catenin信号通路抑制乳腺癌的机制研究

为研究飞燕草素对乳腺癌MDA-MB-231细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响。免疫组化检测裸鼠乳腺肿瘤组织和肺组织转移瘤Ki-67及乳腺肿瘤组织蛋白水解酶超家族基质金属蛋白酶-7(matrix metallopeptidase 7,MMP-7)的表达水平;Western blot检测移植瘤Wnt/β-catenin通路β-联蛋白(β-catenin)、磷酸糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)及通路下游细胞周期相关蛋白cyclinD1、原癌基因c-myc和MMP-7的蛋白水平表达,体内外实验发现飞燕草素不仅能抑制裸鼠异种移植瘤生长及乳腺癌肿瘤组织和肺组织转移瘤Ki-67表达还可以明显降低乳腺癌MDA-MB-231细胞Wnt/β-catenin信号通路β-catenin和p-GSK-3β下游靶基因c-myc、cyclin D1和MMP-7蛋白的表达。本研究证实飞燕草素能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,发挥抑制乳腺癌的作用。     

miRNA-26a靶向调控GSK-3β参与Wnt/β-catenin信号通路调节IgA肾病肾纤维化

目的:通过检测IgA肾病不同程度肾间质纤维化患者肾组织miRNA-26a、β-catenin、GSK-3β、α-SMA的表达,探究miRNA-26a通过靶向调控GSK-3β参与Wnt/β-catenin信号通路所致肾间质纤维化。方法:根据肾间质纤维化程度将46例IgA患者分为实验组(轻度组、中度组、重度组),对照组为7例肾脏肿瘤远离肿瘤组织的正常肾组织。采用RT-qPCR方法检测各实验组及正常对照组共53例IgA肾病患者肾组织miRNA-26a的表达水平,分析miRNA-26a与IgA肾病肾纤维化的关系。分别采用RT-qPCR技术及免疫组化技术检测各组肾组织β-catenin、GSK-3β、α-SMAmRNA及蛋白的表达水平,各组之间进行比较,并与miRNA-26a进行相关性分析。结果:(1)与正常对照组相比,IgA肾病患者肾活检组织miRNA-26a呈低表达,且随着肾间质病变程度加重,miRNA-26a表达水平显著降低,各组间差异具有统计学意义(P0.05);(2)与正常对照组比较,IgA肾病患者肾组织GSK-3β、β-catenin、α-SMAmRNA和蛋白的表达升高,且表达程度随着肾间质病变程度加重逐渐增强,各组间比较差异具有统计学意义(P0.05);(3)相关性分析:肾组织miRNA-26a与肾间质纤维化程度呈负相关(r=-0.943,P0.05),肾间质及肾小管GSK-3β、β-catenin、α-SMA的表达强度与肾间质纤维化程度正相关(r=0.917,P0.05;r=0.943,P0.05;r=0.926,P0.05),肾间质GSK-3β与β-catenin蛋白表达正相关(r=0.834,P0.05)。结论:miRNA-26a可通过靶向调控GSK-3β参与Wnt/β-catenin信号通路肾间质纤维化。     

食管鳞状细胞癌中DICKKOPF-3基因的甲基化状态及表达

目的检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)中Wnt通路拮抗基因DICKKOPF-3(DKK3)的甲基化状态,探讨其与ESCC发生的关系。方法应用甲基化特异性PCR(methylation specificPCR,MSP)及RT-PCR的方法检测78例ESCC及相应癌旁非肿瘤组织中DKK3基因的甲基化状态及mRNA表达情况,应用免疫组化的方法检测通路中心因子-βcatenin蛋白及下游靶基因cyclinD1的表达,并分析其与食管癌发生的关系。结果在ESCC组织中,DKK3基因的甲基化频率为37.2%(29/78),明显高于癌旁非肿瘤组织(χ2=35.622,P=0.000);癌组织中该基因的甲基化率与肿瘤患者临床分期相关(χ2=4.705,P=0.030),而与组织学分级无关;食管癌中DKK3基因mRNA的阳性表达率为65.4%(51/78),明显低于癌旁非肿瘤组织(χ2=13.298,P=0.000)。在发生甲基化的食管癌组织中该基因的mRNA表达缺失及-βcatenin蛋白的异质表达率均明显高于未发生甲基化的癌组织,且差异有统计学意义(χ2mRNA=29.141,P=0.000;χ2-βcatenin=6.245,P=0.012)。食管癌中cyclinD1的表达明显高于癌旁组织,且癌组织中该蛋白的表达与DKK3基因的甲基化状态相关(χ2=4.921,P=0.027)。结论 ESCC组织中DKK3基因高甲基化导致的转录沉默可能与食管癌的发生有关,并可能通过活化Wnt/-βcatenin信号转导通路促进下游靶基因cyclinD1的过表达发挥作用。     

XPA及XPG基因多态性与晚期非小细胞肺癌铂类药物化疗疗效及预后的关系

目的：研究DNA修复基因XPAA23G及XPGC46T位点基因多态性与晚期非小细胞肺癌铂类化疗疗效及预后的关系。方法：经病理学确诊的晚期非小细胞肺癌患者89例,化疗前提取其外周血DNA,用DNA测序技术检测XPA、XPG基因型,所有患者均接受2-4个周期铂类药物为基础的化疗。结果：1）89例患者中,携带XPA23A/A及A/G＋G/G基因型的化疗有效率分别为47.5%和24.5%,差异有统计学意义（x2=5.137,P=0.023）;携带XPG46C/C及C/T＋T/T基因型的患者治疗有效率分别为47.6%、23.4%,二者间也有统计学差异（x2=5.729,P=0.017）,联合分析显示A/A及C/C型化疗有效率最高,达63.0%,而A/A及C/T＋T/T型最低,仅15.4%,四组间有显著统计学差异（x2=14.080,P=0.003）。2）89例患者中位TTP为7个月,XPA23A/A基因型中位TTP为11个月,A/G＋G/G基因型为6个月,两者比较差异有显著性（x2=44.640,P〈0.01）;XPG46C/C基因型中位TTP为10个月,C/T＋T/T基因型为6个月,两者也有统计学差异（x2=32.236,P〈0.01）。联合分析显示,XPAA/A＋XPGC/C型中位TTP最长,达到11个月,而A/G＋G/G及C/T＋T/T基因型最短,仅有4个月,四组间差异有显著统计学意义（x2=59.295,P〈0.01）。结论：XPAA23G及XPGC46T单核苷酸多态性可单独及联合用于预测晚期NSCLC病人对铂类药物的化疗疗效及TTP,初步提示可以根据患者基因型来指导个体化治疗。     

早期吸入不同浓度布地奈德对哮喘大鼠气道炎症和重构的干预

目的：研究早期吸入不同浓度布地奈德对哮喘大鼠气道炎症和气道重构的干预情况。方法i32只Wistar大鼠随机分为4组：A对照组8只,B卵蛋白（OVA）致哮喘组8只,C卵蛋白致哮喘后吸入低浓度布地奈德治疗组8只,D卵蛋白致哮喘后吸入高浓度布地奈德治疗组8只。分别测定各组大鼠血中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及肺泡灌洗液（BALF）中内皮素．1（ET-1）的水平,计数BALF中细胞总数及分类。各组大鼠行肺组织切片HE染色,再行胶原染色、免疫组化NGF、TGF-β1染色,借助计算机图象分析软件测量单位气道面积炎性细胞数目,基底膜周径（Pbm）、平滑肌面积（WArn）、气道内壁面积（WAi）、胶原面积（Wcol）,NGF及TGF-β1阳性信号积分吸光度。结果：B组BALF中细胞总数、嗜酸细胞分类及TNF—α、ET-1水平与A组比较均明显增加,差异有统计学意义（P〈0．01）,C组及D组较B组均明显降低,差异有统计学意义（P〈0．01）。B组NGF及TGF-β1的表达、气道壁炎性细胞计数、气道内壁面积、平滑肌面积、胶原面积与A组比较均明显增加,差异有统计学意义（P〈0．01）,C组及D组与B组比较均明显降低,差异有统计学意义（P〈0．01）,C组及D组与A组比较差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）,C组与D组差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论：早期吸入不同浓度的布地奈德均可明显抑制气道炎症和气道重构,高浓度较低浓度对气道炎症和气道重构的影响更明显。     

2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化与血尿酸水平的相关性研究

目的：探讨2型糖尿病（T2DM）患者颈动脉粥样硬化与血尿酸水平的相关性。方法：测定214例T2DM患者血清尿酸、血脂、糖化血红蛋白水平及颈动脉中层内膜厚度（IMT）,按颈动脉IMT分为4组：A组：无动脉粥样硬化组;B组：动脉粥样硬化组,C组：斑块形成组,D组：管腔狭窄组。比较各组生化指标,并分析颈动脉粥样硬化与血清尿酸水平的相关性。结果：各组性别、年龄、TC、HDL、LDL无显著差异;C组血清TG水平较A组低（P=0.02）,D组血清HbA1c水平较A组（P=0.038）及B组（P=0.015）显著降低。D组血清尿酸水平与A组相比显著升高（P=0.001）,但D组与B、C组及A组与B、C组间差异均无统计学意义;相关分析显示颈动脉粥样硬化程度与血清尿酸水平呈显著正相关（P=0.002）,相关系数为0.201。结论：高血清尿酸水平可能是导致T2DM患者颈动脉粥样硬化的危险因素之一,需慎重处理T2DM患者高尿酸血症问题。     

ERK活化对哮喘大鼠气道重塑及CyclinD1表达的影响

目的探讨细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）对哮喘大鼠气道重塑及CyclinD1表达的作用。方法原代培养大鼠的平滑肌细胞（ASMCs）,给予ERK激动剂表皮生长因子EGF和抑制剂PD98059干预ASMCs生长,依处理方式不同分为5组：（1）正常对照组（2）哮喘对照组;（3）E组：EGF20 ng/mL;（4）P＋E组,PD98059 10μmol/L1 h后添加EGF 20 ng/mL;（5）PD组,PD98059 10μmol/L。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖能力,流式细胞术（FCM）测定细胞周期和cyclinD1的蛋白含量,RT-PCR方法检测cyclinD1mRNA表达水平。结果（1）与哮喘对照组比较,E组ASMCs S＋G2/M期比例、吸光度A值、cyclinD1蛋白阳性表达率和cyclinD1 mRNA的A值均显著升高,PD组均显著降低（P〈0.05）。P＋E组与哮喘对照在此4项指标上比较无明显差异。（2）哮喘（对照组、E组、PD组和P＋E组）组与正常对照组,其S＋G2/M期比例、吸光度A值、cyclinD1蛋白和cyclinD1 mRNA的表达均显著增高（P〈0.05）。结论ERK活性促进哮喘大鼠ASMCs的增殖,增加cyclinD1在哮喘平滑肌细胞中的表达,导致气道重塑的形成,提示ERK可能对CyclinD1的表达具有调节作用。     

Tenascin，β-catenin，TGF—β1在胃癌中的表达及意义

目的：探讨胃癌组织中Tenascin、β—catenin、TGF－β1的表达及意义。方法：采用免疫组织化学方法检测70例胃癌组织和20例癌旁正常组织中Tenascin、β-catenin、TGF—β1的表达。结果：①Tenascin主要表达于胃癌组织中癌相关纤维母细胞的胞质,且与胃癌的Lauren分型、分化程度、临床分期、淋巴结转移关系显著（P〈0．05）;②β－catenin在胃癌的异常表达与胃癌的Lauren分型及分化程度关系显著（P〈0．05）;③TGF—β1在胃癌组织中主要表达于肿瘤细胞的胞质,其表达强度与胃癌的临床分期、浸润深度及淋巴结转移显著相关（P〈0．05）;④Tenascin与β—catenin在胃癌中的表达呈负相关（r=－0．505,P〈0．05）。结论：胃癌组织中Tenascin、β—catenin、TGF—β1蛋白的表达与肿瘤的侵袭、转移关系密切,β-catenin对间质中Tenascin的聚集具有抑制效应。     

针灸联合手法推拿对腰椎间盘突出症的应用效果及血浆β-内啡肽及腰椎功能的影响

摘要 目的：探讨针灸联合手法推拿对腰椎间盘突出症的应用效果及血浆β-内啡肽（β-EP）及腰椎功能的影响。方法：选取我院2020年1月到2022年12月收治的102例腰椎间盘突出症患者作为研究对象,随机分为A（n=35）、B（n=35）、C（n=32）三组。A组患者采取针灸治疗,B组患者采取手法推拿治疗,C组患者采取针灸联合手法推拿治疗,对比三组患者临床疗效,治疗前与治疗1个月后的血清炎症因子及血浆β-内啡肽表达水平,疼痛水平以及腰椎功能情况。结果：C组治疗总有效率明显高于A组和B组（P＜0.05）,但A组与B组对比无明显差异（P＞0.05）;三组患者治疗前肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、白细胞介素-1β（IL-1β）、β-EP对比无差异（P＞0.05）,治疗后三组患者TNF-α、MMP-3、IL-1β水平均降低,且C组低于A组与B组（P＜0.05）,β-EP水平升高,且C组高于A组与B组（P＜0.05）;三组患者治疗前简式疼痛量表（MPQ）与视觉模拟疼痛量表（VAS）评分对比无差异（P＞0.05）,治疗后三组患者VAS、MPQ评分均降低,且C组低于A组与B组（P＜0.05）;三组患者治疗前脊柱功能指数量表（SFI）评分、Osweatry功能障碍指数（ODI）对比无差异（P＞0.05）,治疗后三组患者SFI评分均升高,且C组高于A组与B组（P＜0.05）,ODI指数均降低,且C组低于A组与B组（P＜0.05）。结论：针灸联合手法推拿比单一针灸与推拿更能够提升腰椎间盘突出症的治疗效果,且可降低炎症因子,提升?茁-内啡肽,减轻疼痛程度,进一步提升腰椎功能,值得临床应用推广。     

Claudin-7和β-catenin在正常、增生和恶性子宫内膜组织中的表达和意义

目的恶性肿瘤转移过程与细胞间粘附作用的丧失密切相关。本研究旨在探讨细胞间粘附分子claudin-7和β-catenin在正常、增生和恶性子宫内膜组织中的表达及其在子宫内膜癌中的临床病理意义。方法应用免疫组化检测30例正常增生期子宫内膜、27例非典型增生子宫内膜和43例子宫内膜癌组织中claudin-7和β-catenin的表达情况,统计分析它们与子宫内膜癌病理分级、临床分期、浸润深度及淋巴结转移等指标之间的关系,并对二者表达之间的关系进行探讨。结果在正常增生期子宫内膜、非典型增生子宫内膜和子宫内膜癌中,claudin-7的表达依次减低,阳性率分别为96.7%,66.7%和39.5%,三组之间具有显著差异（P〈0.05）;β-catenin在非典型增生子宫内膜和子宫内膜癌组织中的异位表达率分别为40.7%和74.4%,均显著高于正常增生期子宫内膜（3.3%）（P〈0.01）,子宫内膜癌组织中β-catenin的异位表达率显著高于非典型增生子宫内膜（P〈0.01）。在子宫内膜癌中,claudin-7的表达与临床分期、浸润深度和淋巴结转移有关（P〈0.01）;β-catenin的异位表达与病理分级、临床分期、浸润深度和淋巴结转移有关（P〈0.01）;Claudin-7的表达和β-catenin的异位表达呈显著负相关（r=-0.813,P〈0.01）。结论Claudin-7和β-catenin的异常表达与子宫内膜癌的发生发展有关,并且在此过程中claudin-7逐渐缺失以及β-catenin的异位表达可能对肿瘤的侵袭和转移产生一定作用。     

LncRNA MEG3通过抑制Wnt/β-catenin信号通路对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)人母系表达基因(Maternally expressed gene 3,MEG3)对骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:选取我院住院的OA患者和半月板损伤患者各40例,采用RT-PCR检测两组患者软骨组织和细胞中MEG3的表达。在OA软骨细胞中,转染si RNA-MEG3(si-MEG3)或过表达MEG3的慢病毒载体(LV-MEG3),采用CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况,RT-PCR和western blot检测PCNA、Dvl2、GSK-3β、cyclinD1和β-catenin m RNA和蛋白表达。结果:OA患者膝关节软骨组织中MEG3的表达水平明显低于半月板损伤患者软骨组织(P0.05),同时OA软骨细胞中MEG3的表达水平明显低于正常软骨细胞(P0.05)。OA软骨细胞转染siMEG3后,细胞增殖能力和PCNA表达明显下降(P均0.05),G0/G1期细胞比例明显升高(P0.05),S期细胞比例明显下降(P0.05),细胞凋亡率明显增加(P均0.05)。低表达MEG3能够显著降低Dvl2、GSK-3β、cyclinD1和β-catenin m RNA和蛋白表达水平(P均0.05),增加GSK-3βm RNA和蛋白表达水平(P均0.05)。在OA软骨细胞转染LV-MEG3后,细胞增殖能力和PCNA表达明显升高(P均0.05),G0/G1期细胞比例明显下降(P0.05),S期细胞比例明显增加(P0.05),细胞凋亡率明显减少(P均0.05)。高表达MEG3能够显著增加OA软骨细胞中Dvl2、GSK-3β、cyclinD1和β-catenin m RNA和蛋白表达水平(P均0.05),降低GSK-3βm RNA和蛋白表达(P均0.05)。同时,采用XAV939阻滞Wnt/β-catenin信号通路能够显著逆转过表达MEG3对OA软骨细胞增殖和凋亡的影响。结论:MEG3在OA患者和软骨细胞中均显著低表达,并能够通过阻滞Wnt/β-catenin信号通路激活影响OA软骨细胞增殖和凋亡。MEG3可能成为OA治疗的重要靶分子。     

5-羟色胺受体基因多态性位点与海洛因依赖的关联性研究

目的：5-HT（5-hydroxytryptamine,5-HT）参与了多种中枢神经活动的生理过程,其功能异常可以影响很多行为障碍,已有研究显示,5-HT水平与多种精神疾病密切相关。5-HT受体及其转运体基因在海洛因依赖发生发展中起到了重要的作用,是海洛因依赖的主要候选基因。探讨5羟色胺2A受体（Serotonin 2A receptor,HTR2A）基因启动子区-1438A/G（rs6311）、外显子区102T/C（rs6313）与5羟色胺1B受体（Serotonin 1B receptor,HTR1B）基因外显子区861G/C（rs6296）3个单核苷酸多态性和海洛因依赖的关联性分析。方法：严格按照诊断标准,选取无亲缘关系的海洛因依赖个体616例及健康个体600例提取基因组DNA,采用PCR-RFLP方法检测rs6311、rs6313和rs6296 3个SNPs位点的基因型频率,采用SPSS16.0软件分析各位点等位基因、基因型频率在病例-对照组间差异。结果：HTR2A基因rs6311和HTR1B基因rs6296位点的等位基因及基因型频率分布在2组间存在统计学差异（P〈0.05）,病例组rs6311位点的等位基因A频率显著高于对照组（X2=5.436,P=0.020,OR=1.208,CI=1.031~1.417）,rs6296位点的等位基因C频率显著高于对照组（X2=12.116,P=0.000,OR=1.329,CI=1.132~1.560）。连锁不平衡检验结果显示,HTR2A基因rs6311、rs6313位点处于不连锁状态,D＇〈0.5。结论：HTR2A基因rs6311和HTR1B基因rs6296多态性可能与海洛因成瘾有关,携带有rs6311 A等位基因与rs6296 C等位基因的人可能更容易对海洛因产生依赖。我们的研究为海洛因依赖易感人群筛选及药物靶向治疗提供了理论依据。     

Wnt/β-catenin信号通路对重度子痫前期患者胎盘滋养层细胞侵袭和增殖的影响

为了阐明Wnt/β-catenin信号通路在子痫前期发生发展中的作用机制,本研究应用RT-PCR检测了子痫前期和正常妊娠妇女胎盘中的Wnt1、β-catenin和cyclinD1的mRNA水平。通过Western blotting检测了Wnt1、β-catenin、Dickkopf-1 (DKK1)和糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)蛋白的表达水平。使用免疫组化定位胎盘中Wnt1、β-catenin和DKK1蛋白的表达。研究显示,与对照组正常胎盘相比,重度子痫前期胎盘中Wnt1、β-catenin和cyclinD1的mRNA表达水平显著降低。Western blotting结果显示,对照组Wnt1、β-catenin和GSK-3β蛋白表达水平显著升高,而DKK1表达水平显著降低。此外,与对照组相比,子痫前期组胎盘中Wnt1和β-catenin的染色强度较弱,而DKK1的染色强度明显增强。说明子痫前期患者胎盘中Wnt/β-catenin信号通路及其下游靶基因被抑制,导致滋养层的侵袭和增殖能力降低,从而促进了子痫前期的发生发展。