螺内酯对单肾切除糖尿病大鼠肾脏保护作用研究

目的:研究螺内酯对单肾切除糖尿病SD大鼠的肾脏保护作用及机制。方法:48只雄性SD大鼠随机分为单肾切除对照组C组、单肾切除糖尿病模型组D组、单肾切除糖尿病螺内酯干预组S组(50mg/kg/day灌胃)。给药6周后观察各组大鼠生化指标改变,肾组织形态学改变,RT-PCR及Western Blot检测肾组织中HGF水平的变化。结果:给药6周后,D组与C组相比,血糖、24h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐和肾重/体重显著增高(P<0.05),螺内酯治疗后可降低糖尿病大鼠的24h尿蛋白定量和肾重/体重,但对其它指标无明显影响;形态学显示,D组与C组相比肾小球系膜区细胞外基质增多及系膜细胞增生,肾小球基底膜增厚,足细胞足突融合、消失;螺内酯治疗后上述病理改变均有不同程度的减轻;RT-PCT、Western Blot结果显示D组和S组HGF表达均增加(P<0.05),而D组HGF表达明显低于螺内酯治疗组。结论:螺内酯可能通过上调HGF的水平从而起到保护糖尿病大鼠肾脏作用。     

淫羊藿总黄酮对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用

目的：研究淫羊藿总黄酮（TFE）对链脲佐菌素（STZ）致糖尿病大鼠肾脏损伤的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法：健康雄性SD大鼠一次性尾静脉注射STZ（40 mg/kg）建立糖尿病模型。动物随机分成3组（n=10）：对照组、模型组和TFE组（100 mg/kg,i.g.）。12周后,处死大鼠。测定空腹血糖,肾脏脏器系数,血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）含量;测定肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量;Masson染色观察肾组织胶原纤维增生;免疫组化测定转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白的表达。结果：与对照组比较,模型组肾脏脏器系数增大、肾功能下降、肾组织抗氧化能力降低;病理学可见肾小球、肾小管间质纤维化;同时TGF-β1蛋白表达水平上调。TFE组明显改善上述指标。结论：TFE对STZ致糖尿病大鼠肾脏损伤有明显的改善作用,其作用机制可能与抗氧化作用和抑制TGF-β1蛋白表达有关。     

肝细胞生长因子的分子生物学研究

肝细胞生长因子 (HGF)是一种多功能细胞因子 ,其分子为异二聚体糖蛋白 ,有NK1,NK2 ,NK4三个变种。HGF启动子的结构很复杂 ,其表达受多种因素和调控元件的调节。因HGF在体内有重要作用 ,HGF的基因工程表达和基因治疗正在研究中     

金樱子提取液对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用

目的:研究金樱子提取液对糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)大鼠的肾脏保护作用。方法:在高糖高脂饲料喂食SD(Sprague-Dawley)大白鼠的基础上腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病肾病大鼠模型,随机分为糖尿病肾病模型组(DN组)和金樱子治疗组(DN+RLM组),同时另设正常对照组(NC组)和金樱子对照组(NC+RLM组)。检测金樱子提取液对各组大鼠血糖(fasting blood-glucose,FBG)、糖化血红蛋白(glycosylated haemoglobin,GHb)、24小时尿微量白蛋白和尿量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及肾脏结构的影响。结果:与DN大鼠相比,糖尿病肾病大鼠经金樱子提取液治疗后,大鼠FBG、GHb水平、24 h尿微量白蛋白、24 h尿量、肾脏指数明显降低,血脂紊乱、肾功能损害以及DN肾脏病理明显改善,且无明显副作用。结论:金樱子提取液可明显降低DN大鼠血糖,改善DN大鼠血脂、肾功能紊乱及肾脏病理变化,对糖尿病大鼠肾脏具有较强的保护作用。     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠的肾脏保护

目的:探讨a-硫辛酸对2型糖尿病肾病的保护作用。方法:腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型,并将大鼠分成非糖尿病组(NC),糖尿病组(DM),硫辛酸治疗组(DM+ALA),每组7只。12周后检测血糖、血脂、24小时尿蛋白定量水平,同时取大鼠肾脏,测定组织匀浆中氧化应激指标。结果:12周后,DM+ALA组较DM组的血糖、血脂水平差异无统计学意义(P>0.05),24小时尿蛋白定量差异有统计学意义(P<0.05);DM组比NC组的MDA增加,GSH、SOD减少;DM+ALA比DM组MDA减少,GSH、SOD增加,差异均有统计学意义(P<0.05);24小时尿蛋白定量与GSH、SOD水平负相关,与MDA水平正相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:a-硫辛酸能改善2型糖尿病大鼠体内的氧化应激状态,延缓糖尿病肾病进展。     

C肽对糖尿病大鼠肾脏的影响

比较C肽和胰岛素对大鼠糖尿病肾病的治疗作用。方法:选取Wistar大鼠40只,分为正常对照组(NG组)和糖尿病组(DM组),糖尿病组链脲佐菌素诱发大鼠成模后,随机分为三组:糖尿病组(DM组)、胰岛素组(IG组)和C肽组(ICG组)。治疗8周后测定各组大鼠24小时尿白蛋白排泄率(UAER)、肾重/体重,并观察糖尿病大鼠肾脏超微结构变化。结果:24小时尿白蛋白排泄率:糖尿病组明显增加,C肽组明显低于糖尿病组和胰岛素组,差异具有显著性。大鼠肾脏超微结构变化:各组大鼠肾小球截面积、肾小球平均体积(MGV)、细胞外基质/肾小球截面积比值、细胞外基质截面积、肾小球基底膜厚度相比,糖尿病组明显升高,C肽组较胰岛素组和糖尿病组明显下降,差异具有显著性。结论:C肽治疗可以降低24小时尿白蛋白排泄率,改善糖尿病大鼠肾脏超微结构病变。     

大鼠心肌梗死后螺内酯与氯沙坦干预对其心肌胶原变化的影响

目的:观察大鼠急性心肌梗死(acmemyocardial infarction,AMI)后左心室心肌重构分析和非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的变化,分别使用螺内酯和氯沙坦以及将两药合用对AMI模型进行干预,探索醛固酮受体拮抗剂和血管紧张素受体阻断剂对AMI后心室重构和胶原增生的影响.方法:将50只雌性SD大鼠随机分为AMI组、螺内酯组、氯沙坦组、联合用药组和假手术组,每组10只,结扎大鼠左前降支建立急性心肌梗死模型.术后8周进行血流动力学测定、病理分析和非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的测定.结果:AMI组与假手术组相比,左心室舒张末压(LVEDP)、容积、重量和非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量均显著增加(P<0.05);左心室球形指数、左心室内压最大上升和下降速率(±dp/dt/LVSP)均显著降低(P<0.05).螺内酯组与AMI组相比,左心室非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量显著减少(P<0.05),其余各指标差异无统计学意义(P>0.05).氯沙坦组和联合用药组与AMI组相比,LVEDP、左心室实际重量显著降低(P<0.05);左心室容积仅联合用药组有显著降低(P<0.05);而两组的±dp/dt/LVSP显著增加(P<0.05).螺内酯、氯沙坦和联合用药3组与AMI组相比,左心室非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原含量均显著减少(P<0.05);且3组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:螺内酯能有效抑制AMI左心室非梗死区Ⅰ、Ⅲ型胶原的增生,提示螺内酯可能有改善左心室重构的潜在作用.氯沙坦与螺内酯合用可更有效防治AMI后左心室重构,改善左心室舒张功能.     

氯沙坦和螺内酯对急性前壁心梗左心室纤维化抑制作用研究

目的:观察急性前壁心梗患者分别使用螺内酯和氯沙坦治疗后血浆Ⅲ型前胶原(PⅢNP)、层黏连蛋白(LN)和透明质酸(HA)浓度变化.探索醛固酮受体拮抗剂和血管紧张素受体阻断剂对AMI后心室重构和胶原增生的影响.方法:132例AMI患者均为2007年5月至2008年11月于我院住院患者.其中男性82例,女50例,年龄41～65岁之间.按入院时间分为3组:氯沙坦组48例,螺内酯组48例和对照组48例.入院后(9±1)天及发病后3月、6月和12月分别测定血浆PⅢNP、LN和HA的浓度.结果:入院后(9±1)天氯沙坦组与螺内酯组患者血浆PⅢNP、LN和HA浓度无明显差异,与对照组比较明显增高,但3月、6月和12月后比较其浓度进行性降低,且对照组高于治疗组.结论:氯沙坦和螺内酯可抑制急性前壁心梗左室纤维化.     

黄芪皂苷Ⅱ对STZ诱导的糖尿病大鼠的肾脏保护作用研究

摘要 目的：研究黄芪皂苷Ⅱ（Astragaloside-Ⅱ, AS-Ⅱ）对链脲佐菌素（Streptozocin,STZ）诱导的糖尿病肾病（Diabetic nephrology,DN）大鼠肾脏的保护作用。方法：将8周龄雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠随机选取5只作为正常对照组,其余大鼠予腹腔注射55 mg/kg剂量STZ建立糖尿病模型。造模成功的大鼠随机分为模型组与AS-Ⅱ 治疗组,每组5只。AS-Ⅱ 治疗组予AS-Ⅱ 3.2mg/(kgod）连续口服灌胃治疗9周,同时正常对照组和模型组给予等量生理盐水溶液灌胃。第9周末,收集大鼠24 h尿液测定尿微量白蛋白浓度,留取肾脏组织观察肾脏病理改变并检测肾组织中足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin、WT1和caspase-3的表达。结果：与糖尿病模型组比较, AS-Ⅱ 治疗组DN大鼠肾脏病理损伤明显改善, caspase-3表达明显减少,Nephrin和WT1表达增加,尿蛋白排泄减轻( P＜0. 05)。结论：AS-Ⅱ 治疗可改善DN大鼠肾脏足细胞凋亡,降低尿蛋白,具有肾脏保护作用。     

黄连解毒汤对2型糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制探讨

目的:探讨黄连解毒汤(HLJDT)对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=10)和用STZ诱导的模型组。将成功造模的大鼠随机分为模型组(n=12)、低、中和高剂量组(每组n=12),分别给予对照组和模型组灌胃饮用水,而给其他三组分别灌胃HLJDT(60、120和240 g·kg-1·d-1)。12周后处死大鼠并测量生化指标,实时荧光定量PCR和western blot检测TGF-β1,p38MAPK和Caspase-3的基因和蛋白表达。结果:与模型组比较,HLJDT中高剂量组体重、肾脏重、肾重体重比和FBG显著提高。与对照组比较,模型组的TG、BUN、Scr和UP 24 h均显著提高;而与模型组比较,HLJDT高剂量组均显著降低TG、BUN、Scr、UP 24 h和MDA的水平,升高NO,SOD的水平。另外,TGF-β1,P38MAPK和Caspase-3的表达,模型组显著高于对照组,但经过HLJDT的治疗后,与模型组比较有显著降低。(所有取值为P0.05,P0.01)。结论:我们的研究提供了HLJDT是通过调控血糖、降低氧化应激的水平和下调TGF-β1,p38MAPK和Caspase-3的表达来保护DN大鼠的实验依据。     

维吾尔族2型糖尿病患者糖尿病肾病相关因素分析

目的：探讨维吾尔族2型糖尿病肾病（DN）发病的相关临来因素。方法：分析292例维吾尔族2型糖尿病患者的临床资科。结果：维吾尔族2型糖尿病患者糖尿病肾病（DN）发病率为43,49％（127／292）。DN患者的病程、SBP、TC、TG、FBG、HbAIC、LDL—C、BUN和Cr均显著高于NDN患者（P〈0．05）;但DBP、HDL．C、BMI之间无统计学差异（P〉0．05）。Logistic归分析结果显示,DM病程、患病年龄、SBP、FBP、TC、TG、LDL—C、HbAlc、BUN、Cr是DN的危险因素（OR值〉1）。结论：维吾尔族2型糖尿病患者的Did病程、患病年龄、SBP、FBP、TC、TG、LDL—C、HbAlc、BUN、Cr等参数与糖尿病肾病并发率之间有相关性。     

人参皂甙Rg3对糖尿病肾病大鼠生化指标及病理的影响

目的:探讨人参皂苷Rg3对糖尿病肾病大鼠生化指标及病理改变的影响。方法:30只SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型对照组和人参皂甙Rg3组。采用链脲佐菌素建立糖尿病肾病大鼠模型。造模成功后,Rg3治疗组每天以Rg3(0.5mg/kg)灌胃,余予以等量蒸馏水灌胃。30天后分别测3组大鼠血糖、24小时尿蛋白、血肌酐,并予以HE染色行肾组织活检。结果:与正常组比较,模型对照组大鼠血糖、24小时尿蛋白、血肌酐明显升高,肾小球体积增大,基底膜增厚、细膜基质增多,肾小球内炎细胞浸润(P0.01)。与模型对照组比较,人参皂甙Rg3组血糖、24小时尿蛋白、血肌酐明显降低,肾小球基底膜增厚程度减轻,细胞外基质堆积减少,差异具有显著性(P0.05)。结论:人参皂甙Rg3能显著降低糖尿病大鼠血糖、血肌酐、24 h尿蛋白,能改善其肾脏的病理损害。     

成纤维生长因子-2与肝细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞样细胞的作用比较

比较成纤维生长因子-2(FGF-2)与肝细胞生长因子(HGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)向肝细胞分化的能力,并进一步的研究BM-MSCs诱导成肝细胞所需的最佳诱导因子以及其用量。体外获取、培养大鼠BM-MSCs,将第3代BM-MSCs采用不同剂量的FGF-2和HGF诱导。诱导后,在显微镜下观察细胞形态学的改变;Shiff染色法检测糖原的分泌;ELISA法检测AFP的分泌;免疫细胞化学法检测白蛋白和CK19的分泌。诱导后BM-MSCs由梭形向多角形、卵圆形方向变化,AFP第3天就有分泌,第12天达到高峰,以后逐渐减少;白蛋白、CK19和糖原第12天即有阳性表达,以后随着诱导时间的延长阳性率逐渐升高。第2组和第4组比其他组分泌的白蛋白、CK19和糖原均多。FGF-2比HGF具有更强的诱导BM-MSCs向肝细胞分化的能力。     

骨化三醇干预糖尿病肾病大鼠蛋白尿发生机制的研究

目的:观察骨化三醇对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织中肾素水平,肾小球基底膜乙酰肝素酶(Heparanases,HPA)和足细胞podocin蛋白及m RNA表达的影响,并探讨其可能机制。方法:采用链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射的方法构建DN大鼠动物模型,将造模成功的大鼠随机分为骨化三醇组(T组)、DN组(D组),并设置健康对照组(N组)。T组给予0.03μg·kg-1·d-1的骨化三醇灌胃;D组与N组给予等量花生油灌胃。12周后检测24小时尿蛋白定量及血生化指标,通过ELISA法检测肾组织中肾素和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)浓度变化,免疫组化法和RT-PCR检测HPA、podocin蛋白及m RNA的表达。结果:与N组相比,T组和D组24小时尿蛋白定量、血清肌酐、肾素及AngⅡ水平较高,D组显著高于T组,差异均有统计学意义(P0.05)。与N组相比,T组和D组HPA m RNA及蛋白表达较高,D组显著高于T组;T组和D组podocin m RNA及蛋白表达较低,D组显著低于T组,差异均有统计学意义(P0.05)。肾素和HPA蛋白表达存在正相关趋势(r=0.79,P0.05);和podocin蛋白表达存在负相关趋势(r=-0.65,P0.05)。结论:骨化三醇可显著减少DN大鼠早期蛋白尿,此作用可能通过抑制肾素,下调DN肾小球基底膜HPA、上调足细胞podocin蛋白的表达实现。     

地黄对于糖尿病大鼠微炎症状态的作用

目的:研究地黄对于糖尿病模型大鼠血糖以及微炎症状态的作用。方法:采用高糖高脂饲料喂养加腹腔注射链尿佐菌素(STZ)破坏胰岛细胞的方法构建糖尿病大鼠模型。将大鼠分为空白对照组、糖尿病模型组与药物治疗组。空白对照组以及糖尿病模型组给予蒸馏水,用药组分别给予不同剂量丹参、地黄、格列本脲灌胃治疗,每日一次,连续60日。应用血糖仪动态监测血糖,ELISA法检测血清中超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度变化情况,以观察地黄对血糖及糖尿病微炎症状态的改善效果。结果:造模成功后,糖尿病大鼠血糖明显升高(P0.05),血液中炎症因子Hs-CRP、IL-6、TNF-α含量升高,与空白对照组相比,差异显著(P0.05)。地黄治疗后血糖明显降低(P0.05),血液中炎症因子Hs-CRP、IL-6、TNF-α含量均显著减低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:地黄可以明显降低糖尿病大鼠的血糖水平,显著改善糖尿病大鼠的微炎症状态。     

缬沙坦对糖尿病大鼠心肌保护作用以及氧化应激的影响

目的:探讨缬沙坦对糖尿病大鼠心肌的保护作用及氧化应激影响。方法:以链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,缬沙坦干预治疗12周后,采用ELISA法检测血清中8脱氧鸟酐(8-OHd G)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,PCR测定心肌NADPH氧化酶亚型NOX2m RNA、p47phox m RNA表达,采用原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡。结果:糖尿病大鼠经缬沙坦干预治疗后,8-OHd G含量,NOX2和p47phox m RNA表达均显著降低(P0.05),SOD活性升高(P0.01),心肌细胞凋亡指数显著降低(P0.05)。结论:高血糖导致糖尿病大鼠氧化应激增强和心肌细胞凋亡增加,缬沙坦可降低糖尿病大鼠氧化应激反应及减少心肌细胞凋亡,因而对心肌有一定的保护作用。     

绞股蓝多糖对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用及其机制研究

目的:探讨绞股蓝多糖对糖尿病大鼠肾功能的影响及其保护的可能机制。方法:采用大鼠高脂高糖饲料结合腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病模型。灌胃给予绞股蓝多糖8周后,测定大鼠空腹血糖(FBG),血清肌酐、血清尿素氮、24 h尿量及尿蛋白等指标;组织病理切片观察肾形态,肾小球体积;Western blot法检测肾皮质NF-κB的表达。结果:绞股蓝多糖(GPS)可剂量依赖性的降低DN组的FBG、血肌酐、24 h尿量和尿蛋白;但血尿素氮模型组与GPS组无统计学差异;中、高剂量GPS治疗后,肾脏指数较模型组明显降低(P0.05);与模型组(149.8±12.2%)比较,高剂量GPS可抑制肾小球体积肥大至108.9±9.6%。进一步研究发现,GPS可剂量依赖性的降低DN组肾脏NF-κB蛋白的表达,高、中剂量组水平与模型组相比有统计学差异(P0.05)。结论:绞股蓝多糖对实验性糖尿病肾病具有保护作用,其机制可能与抑制肾炎症相关通路NF-κB的表达有关。