海藻色素糖蛋白对肝癌细胞Caspase-3 和Bax 蛋白表达的影响

目的:研究麒麟菜海藻色素糖蛋白(SPG)对肝癌细胞Caspase-3和Bax蛋白表达的影响。方法:将50只皮下接种H22肝癌细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只。高、中、低剂量组分别每天经口灌胃给予100、50、10mg/kg的SPG,肿瘤对照组灌胃生理盐水,连续10d。环磷酰胺组隔天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg.bw。取肝癌组织用MTT法测定各组肝癌细胞增殖活性,免疫组化法检测各组肝癌组织Caspase-3和Bax蛋白表达水平。结果:高剂量组Caspase-3和Bax蛋白表达率分别为40.20%和38.10%,而肿瘤对照组分别为5.00%和4.68%,差异均有显著性(P<0.05)。高剂量SPG组和肿瘤对照组的肝癌细胞增殖活性分别为0.711±0.028和1.135±0.032,差别有显著性(P<0.05)。结论:SPG可促进肝癌细胞Caspase-3和Bax蛋白表达,诱发肝癌细胞凋亡。     

明日叶查尔酮对小鼠肝癌细胞PCNA和BCL-2蛋白表达影响

目的：研究明日叶（Angelica keiskei Koidz）查尔酮对小鼠肝癌细胞PCNA和BCL-2蛋白表达的影响。方法：将50只皮下接种肝癌H22细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只。高、中、低剂量组分别每日经口灌胃给予40、20、5mg/kg的查尔酮,肿瘤对照组给予等量生理盐水,连续10d,环磷酰胺组隔天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg。取肝癌组织用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法测各组小鼠肝癌细胞增殖活性,免疫组化法检测各组肝癌细胞增殖细胞核抗原（PCNA）和凋亡相关蛋白BCL-2表达水平。结果：高剂量查尔酮组和肿瘤对照组的肝癌细胞增殖活性分别为（0.716±0.018）和（1.135±0.032）,差别有显著性（P〈0.05）。高剂量组PCNA和BCL-2蛋白表达率分别为28.33%和16.77%,肿瘤对照组分别为72.77%和65.17%,差异均有显著性（P〈0.05）。结论：查尔酮可降低小鼠肝癌细胞PCNA和BCL-2表达水平,对肝癌细胞增殖有一定抑制作用。     

明日叶查尔酮对小鼠肝癌细胞PCNA 和BCL-2 蛋白表达影响

目的:研究明日叶(Angelica keiskei Koidz)查尔酮对小鼠肝癌细胞PCNA和BCL-2蛋白表达的影响。方法:将50只皮下接种肝癌H22细胞株的小鼠随机分为5组,每组10只。高、中、低剂量组分别每日经口灌胃给予40、20、5mg/kg的查尔酮,肿瘤对照组给予等量生理盐水,连续10d,环磷酰胺组隔天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg。取肝癌组织用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测各组小鼠肝癌细胞增殖活性,免疫组化法检测各组肝癌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和凋亡相关蛋白BCL-2表达水平。结果:高剂量查尔酮组和肿瘤对照组的肝癌细胞增殖活性分别为(0.716±0.018)和(1.135±0.032),差别有显著性(P<0.05)。高剂量组PCNA和BCL-2蛋白表达率分别为28.33%和16.77%,肿瘤对照组分别为72.77%和65.17%,差异均有显著性(P<0.05)。结论:查尔酮可降低小鼠肝癌细胞PCNA和BCL-2表达水平,对肝癌细胞增殖有一定抑制作用。     

萘乙酸诱发小鼠睾丸生精细胞损伤作用的研究(英文)

目的:探讨萘乙酸(?α-naphthlcetic acid,NAA)对小鼠睾丸生精细胞的损伤作用。方法:将50只健康雄性昆明种小鼠随机分为5组,每组10只。正常对照组和阳性对照组小鼠喂饲普通颗粒饲料,高、中、低剂量组分别将5000、1000、200mg/kg的萘乙酸加入饲料中喂饲小鼠,阳性对照组于处死前3天每天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg体重。4周后处死小鼠取睾丸组织,用MTT法测定各组睾丸生精细胞增殖活性,用免疫组织化学方法检测各组Bcl-2和半光天冬酶(Caspase-3)表达。结果:高剂量组和正常对照组的睾丸生精细胞增殖活性分别为0.464±0.022和0.866±0.024,差别有显著性意义(P<0.05)。高剂量NAA组Bcl-2和Caspase-3阳性表达率分别为11.4%和40.2%,正常对照组分别为30.6%和8.6%,经检验,差异均有显著性(P<0.05)。结论:萘乙酸能诱发睾丸生精细胞凋亡,对睾丸生精细胞增殖活性有抑制作用。     

新加良附方对移植性小鼠肝癌抑制率及其凋亡影响研究

目的:观察新加良附方对移植性小鼠肝癌(H22)生长抑制作用及其对肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达影响。方法:建立移植型H22动物模型,并将动物模型随机分模型对照、环磷酰胺(CTX)与新加良附方大、中、小剂量5组。新加良附大、中、小剂量组给药量分别为10g/kg、5g/kg和2.5g/kg;CTX组给药计量为17mg/kg;模型组给予等量无菌生理盐水。连续给药、给水12天处死模型小鼠分离肿瘤,检测肿瘤大小、称重计算肿瘤抑制率,并将肿瘤组织切片,免疫组化法检测Bcl-2和Bax基因。结果:新加良附大剂量组肿瘤抑制率为48.5%,与模型对照组比较,有统计学意义(P<0.01);新加良附大、中剂量可降低肿瘤组织中Bcl-2蛋白基因表达,升高Bax蛋白基因表达,与模型组比较,有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。结论:新加良附方可抑制H22瘤体生长,且下调Bcl-2蛋白基因表达,上调Bax基因,提示新加良附方在抗肿瘤方面具有进一步深入研究价值。     

人参多糖对环磷酰胺的增效减毒作用

目的探讨人参多糖（ginseng polysaccharide,GPS）对化疗药物环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）抗肿瘤的增效减毒作用。方法建立小鼠肝癌H22实体瘤模型,随机分组,设模型对照组（生理盐水）、环磷酰胺组（30 mg/kg）、人参多糖给药组（7.5、15、30 mg/kg剂量组）和联合给药组（GPS 7.5、15、30 mg/kg,CTX 30 mg/kg）;人参多糖尾静脉注射,CTX腹腔给药,连续给药10 d;测定抑瘤率、血液学指标、脾脏系数和胸腺系数,评价人参多糖对环磷酰胺的增效减毒作用。结果 GPS、GPS＋CTX各组肿瘤生长明显低于模型对照组（P〈0.01）,GPS中、高剂量＋CTX联合给药组肿瘤生长明显低于CTX组（P〈0.05,P〈0.01）。GPS高剂量＋CTX组与CTX组相比,体重、脾脏指数和胸腺指数明显升高（P〈0.05）。结论人参多糖对化疗药物环磷酰胺抗小鼠肝癌H22肿瘤具有增效减毒作用。     

黄芪汤对延缓~(12)C~(6+)离子辐射致大鼠肾组织细胞凋亡的影响及相关机制

目的:探讨黄芪汤抑制~(12)C~(6+)离子辐射脑模型鼠肾组织细胞凋亡的分子保护机制。方法:50只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组,单纯辐射模型组,黄芪汤(高、中、低剂量)组。正常对照组和单纯辐射模型组给予等体积生理盐水灌胃10 ml/(kg·d),黄芪汤治疗组分别灌胃给予黄芪汤18、9、4.5 g/(kg·d),连续给药2周。7d后除正常对照组外,其余各组大鼠脑组织给予4Gy~(12)C~(6+)离子束单次照射,辐射后第7日处死各组大鼠。HE染色法观察大鼠肾脏的病理形态变化,ELISA法检测大鼠血清IL-6的含量,实时荧光定量PCR法测定大鼠肾脏Bcl-2、Bax和Caspase-3的基因表达,免疫组化法检测大鼠肾脏Bcl-2、Bax、Caspase-3和NF-κB的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,单纯辐射模型组体重和肾脏指数均显著降低,血清IL-6的含量显著升高,肾脏Bcl-2的基因表达和蛋白表达均显著降低,Bax和Caspase-3的基因表达和蛋白表达均显著升高,NF-κB的蛋白表达也显著升高(P0.01),单纯辐射组肾小球系膜细胞明显增生,肾小管间质血管明显扩张充血,肾小管管腔狭窄、不规则。与单纯辐射模型组相比,黄芪汤高剂量组体重和肾脏指数均明显升高,黄芪汤各干预组肾脏Bcl-2的基因表达和蛋白表达均显著升高(P0.05或P0.01);而黄芪汤中、高剂量组Bax和Caspase-3的蛋白表达均显著降低,各干预组血清IL-6的含量显著降低,肾脏Bax和Caspase-3的基因表达均显著降低,肾脏NF-κB的蛋白表达显著下降(P0.05或P0.01),黄芪汤高剂量组可见肾小球系膜细胞增生情况明显改善,肾小管轮廓清晰。结论:黄芪汤对~(12)C~(6+)离子辐射脑模型鼠的肾损伤具有一定的防护作用,其作用机制可能与调控Bcl-2/NF-κB信号通路有关。     

黄芪汤对延缓C离子辐射致大鼠肾组织细胞凋亡的影响及相关机制

目的: 探讨黄芪汤抑制¹²C⁶⁺离子辐射脑模型鼠肾组织细胞凋亡的分子保护机制。方法: 50只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组,单纯辐射模型组,黄芪汤(高、中、低剂量)组。正常对照组和单纯辐射模型组给予等体积生理盐水灌胃10 ml/(kg·d),黄芪汤治疗组分别灌胃给予黄芪汤18、9、4.5 g/(kg·d),连续给药2周。7 d后除正常对照组外,其余各组大鼠脑组织给予4Gy ¹²C⁶⁺离子束单次照射,辐射后第7日处死各组大鼠。HE染色法观察大鼠肾脏的病理形态变化,ELISA法检测大鼠血清IL-6的含量,实时荧光定量PCR法测定大鼠肾脏Bcl-2、Bax和Caspase-3的基因表达,免疫组化法检测大鼠肾脏Bcl-2、Bax、Caspase-3和NF-κB的蛋白表达。结果: 与正常对照组比较,单纯辐射模型组体重和肾脏指数均显著降低,血清IL-6的含量显著升高,肾脏Bcl-2的基因表达和蛋白表达均显著降低,Bax和Caspase-3的基因表达和蛋白表达均显著升高,NF-κB的蛋白表达也显著升高(P＜ 0.01),单纯辐射组肾小球系膜细胞明显增生,肾小管间质血管明显扩张充血,肾小管管腔狭窄、不规则。与单纯辐射模型组相比,黄芪汤高剂量组体重和肾脏指数均明显升高,黄芪汤各干预组肾脏Bcl-2的基因表达和蛋白表达均显著升高(P＜0.05或P＜0.01);而黄芪汤中、高剂量组Bax和Caspase-3的蛋白表达均显著降低,各干预组血清IL-6的含量显著降低,肾脏Bax和Caspase-3的基因表达均显著降低,肾脏NF-κB的蛋白表达显著下降(P＜0.05或P＜0.01),黄芪汤高剂量组可见肾小球系膜细胞增生情况明显改善,肾小管轮廓清晰。结论: 黄芪汤对¹²C⁶⁺离子辐射脑模型鼠的肾损伤具有一定的防护作用,其作用机制可能与调控Bcl-2/NF-κB信号通路有关。     

Caspase-3在肝癌组织中的表达及其与HBV感染的关系

目的探讨天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（Cysteinyl aspartate-specific proteinase-3,Caspase-3）和生存素（survivin）在原发性肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及其与乙肝病毒（HBV）感染的关系。方法用免疫组化SP法检测21例肝癌组织和10例癌旁组织Caspase-3和survivin的表达．并分析两者表达与HBV感染的关系。结果在肝癌和癌旁组织Caspase-3表达的阳性率分别为33．33％和66．67％（P〈0．05）．survivin在肝癌和癌旁组织表达的阳性率分别为85．71％和0（P〈0．01）。Caspase-3在HBsAg阳性和阴性组表达的阳性率分别为27．78％和66．67％（P〈0．05）;survivin在HBsAg阳性和阴性表达的阳性率分别为88．89％和100％（P〉0．05）。Caspase-3在高、中、低分化组表达的阳性率分别为66．67％、31．25％、33．33％．高分化组与中、低分化组比较差异有显著性（P〈O．05）;survivin在高、中、低分化组表达的阳性率分别为50％、87．5％、100％,高分化组与中、低分化组比较差异有显著性（P〈0．05）。Caspase-3和survivin在HCC的表达呈显著负相关。结论HBV感染能使肝癌组织Caspase-3的表达降低,与survivin共同抑制肝细胞的凋亡,三者在HCC的发生及发展过程中起一定作用。     

藻蓝蛋白的抑瘤活性及抗氧化作用的研究

目的:观察藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)对接种S180肉瘤小鼠的肿瘤生长及抗氧化功能的影响。方法:昆明小鼠随机分为6组(10只/组)。即模型组、PC低、中、高、最高剂量组(25,50,100,200mg/kg·d)、环磷酰胺组(CY对照组)。各组小鼠右前腋窝皮下接种S180肉瘤细胞,第二天除模型组外,其余5组分别以不同剂量的PC灌胃、CY(40mg/kg·d)腹腔注射,15天后处死,完整剥离出肿瘤,称重,计算抑瘤率;测定血浆中SOD活力、MDA含量及红细胞溶血度。结果:1.除PC低剂量组外,中、高、最高剂量组肿瘤生长比模型组显著缓慢(P<0.01),抑瘤率分别为34.8%、56.9%、68.4%、61.9%。2.PC高、最高剂量组可升高小鼠血浆中SOD酶的活力(P<0.05);PC各剂量组均能降低小鼠血浆中MDA的含量,最高剂量组与模型组比较有统计学意义(P<0.05),PC低、中、高剂量组与模型组比较有显著差异(P<0.01)。3.除PC低剂量组外,中、高、最高剂量组均能降低红细胞溶血度(P<0.05),其中高剂量组与模型组比较有显著差异(P<0.01)。结论:PC各剂量组可以抑制小鼠S180肿瘤...     

全反式维甲酸联合替莫唑胺对胶质瘤U251细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究全反式维甲酸（ATRA）联合替莫唑胺（TMZ）对胶质瘤细胞株U251增殖及凋亡的影响。方法：体外培养胶质瘤细胞株U251,分为ATRA组、TMZ组、ATRA＋TMZ组和空白对照4组,应用MTT法测定U251细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,westernblot法检测细胞维甲酸受体β（RARβ）蛋白和凋亡相关蛋白Caspase．3蛋白的表达情况。结果：对照组、ATRA组、TMZ组及ATRA＋TMZ组的细胞生长抑制率分别为（1．72±0．12）％、（9．87±0．87）％、（23．87＋1．32）％及（35．74±1．44）％,ATRA＋TMZ组的细胞生长抑制率显著高于单独应用TMZ（P〈0．01）。对照组、ATRA组、TMZ组及ATRA＋TMZ组的细胞凋亡率分别为（1．32±0．11）％、（4．16±0．35）％、（8．44±0149）％、（15．27±1．03）％,ATRA＋TMZ组的凋亡率显著高于单独应用TMZ有更高的凋亡率（P〈0．01）。对照组、ATRA组、TMZ组及ATRA＋TMZ组RARp蛋白相对表达量分别0．452±0．054、0．837±0．068、0．195±0．021、0．376±0．039,ATRA＋TMZ组RARβ蛋白相对表达量显著高于TMZ组（P〈0．01）。ATRA＋TMZ组Caspase．的3蛋白表达相对水平为（0．832±0．059）,明显高于ATRA组（0．334±0．041）及TMZ组（0．521＋0．032）,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：全反式维甲酸联合替莫唑胺能更有效抑制U251细胞的增殖,增加其凋亡率,这可能与其增加RARβ和Caspase-3蛋白的表达抑制U251细胞增殖、诱导细胞凋亡有关。     

磁感应热疗联合放疗对小鼠4T1移植瘤的杀伤作用

目的:探讨磁感应热疗联合放疗在小鼠4T1乳腺癌细胞株皮下移植瘤模型中的治疗作用.方法:小鼠经皮下移植4T1乳腺癌细胞株,建立皮下移植瘤模型,待肿瘤直径达到10mm左右,然后将其分为以下4组进行处理:标准对照组(未做任何特殊处理,C组)、单纯热疗组(48±2℃10min,MIH组)、单纯放疗组(10Gyx2次,R组)、热放联合组(10Gyx1次+48±2℃10min,MIH+R组).观察各治疗组和对照组的肿瘤体积的大小、肿瘤体积抑制率.每组分别在实验处理后24小时处死小鼠应用免疫组化检测肿瘤组织中Bcl-2和Caspase-3的表达情况.结果:热疗后的第1-4周MIH+R组的肿瘤体积抑制率分别为(64.38±17.97)％、(73.90± 9.48)％、(77.43±0.71)％、(73.17±8.58)％;MIH组的分别为(40.66+ 21.46)％、(54.60±10.20)％、(51.22+ 5.05)％、(39.53±5.49)％;R组的肿瘤体积抑制率分别为(51.60±18.93)％、(57.53±9.76)％、(52.34±7.42)％、(35.42±4.14)％.与对照组相比,各治疗组均能抑制肿瘤的生长(P＜0.05).其中以MIH+R组抑瘤作用最显著.与其它组相比,Bcl-2在MIH+R组的表达显著下降,而Caspase-3的表达显著上升,差异具有显著性(P＜0.05).结论:磁感应热疗与放疗均能诱导肿瘤细胞凋亡,有效地抑制小鼠4T1乳腺癌细胞株皮下移植瘤的生长,而磁感应热疗与放疗的联合治疗的抑瘤作用最显著,而且降低了放疗剂量.     

艰难梭菌毒素A对胆管癌细胞株FRH-0201增殖和凋亡的影响

目的：研究艰难梭菌毒素A（TcdA）对人胆管癌细胞株FRH-0201细胞凋亡影响及作用机制。方法：采用MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光染色检测TcdA作用后细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测Bcl-2表达水平,Caspase3活性检测试剂盒检测Caspase-3的活性。结果：TcdA能抑制胆管癌细胞株FRH-0201细胞增殖且呈时间、剂量依赖性,荧光染色和流式细胞仪检测到细胞凋亡,与对照组相比,TcdA作用后Bcl-2蛋白表达下降,差异有统计学意义（P〈0.05）,Caspase-3活性增强,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：TcdA可以通过下调Bcl-2蛋白表达表达,激活Caspase-3而诱导FRH-0201细胞凋亡。     

传输靶向COX-2 siRNA联合化疗药物对大鼠胃癌细胞生长的抑制作用

目的：通过动物实验探讨传输靶向COX-2siRNA联合化疗药物对大鼠胃癌细胞生长的抑制作用。方法：24只健康SD大鼠平分为三组,治疗组用COX-2-siRNA转染的胃癌SGC7901细胞接种,同时进行环磷酰胺、丝裂霉素C化疗治疗;阴性对照组,用阴性对照siRNA转染的胃癌SGC7901细胞接种,同时进行环磷酰胺、丝裂霉素C化疗治疗;对照组（n=8）,用未经转染的胃癌SGC7901细胞接种,不进行化疗治疗;三组转染后都接种了裸鼠。结果：治疗组、阴性对照组及对照组胃癌细胞凋亡率分别为（22．28±0．12）％、（1．23±0．17）％和（1．03±0．14）％,治疗组与阴性对照组和对照组比较差异都有统计学意义（t=18．152,17．555,P〈0．05）。治疗组的抑瘤率为76．7％,阴性对照组和对照组分别为12．8％和6．89％,治疗组的抑瘤率明显高于其他两组（x^2=15．211,13．899,P〈0．05）。Western blotting检测结果显示治疗组的COX-2蛋白表达含量得到了明显抑制。结论：传输靶向COX-2 siRNA和化疗药物的配合应用可有效抑制COX-2蛋白的表达,从而抑制胃癌细胞的生长,从而起到更好的治疗效果。     

白藜芦醇对人子宫内膜癌细胞系AN3CA增殖和凋亡效应及其机制探讨

目的：探讨白藜芦醇（resveratrol,Res）对人子宫内膜癌细胞AN3CA的增殖抑制和凋亡诱导效应及可能存在的机制。方法：应用噻唑蓝（MTT）法检测Res对AN3CA的增殖影响;流式细胞术检测Res对细胞周期分布和凋亡影响：荧光实时定量PCR检测Res对细胞Bcl-2、Bax和MMP-9mRNA表达水平的影响;WesternBlot方法检测Res对PCNA、Bcl-2、Bax及ERK1／2、P—ERK1／2蛋白表达水平的影响。结果：Res对子宫内膜癌细胞AN3CA具有显著的生长抑制作用（P〈0．01）,呈时间-剂量依赖性;不同浓度Res处理细胞G0／G1期比例显著增加伴随S期细胞数的减少;细胞凋亡率明显增高,200Dmol／lRes处理48h凋亡率可达30．96％±2．041％（P〈0．01）。与对照组相比,Res能抑制PCNA的蛋白表达量,增加Bax和降低Bcl-2转录和蛋白水平的表达量。Res在短时间内（0．5—1h）激活ERK1／2的磷酸化表达但随着作用时间延长（4—48h）其表现为抑制效应。结论：Res具有抑制AN3CA细胞增殖,诱导细胞G0／G1期阻滞和凋亡的效应。Res诱导凋亡可能是通过上调Bax,下调Bcl-2发挥作用,其抗癌作用机制可能与ERK1／2通路失调相关。     

香蕉皮抗氧化和抑制人肝癌HepG2细胞活性研究

对香蕉皮提取物（banana peel extraction,BPE）的体外抗氧化作用和抗肿瘤活性进行了研究。使用福林酚和硝酸铝法测定BPE中总多酚和总黄酮含量;通过检测DPPH和O₂^-自由基清除能力测定BPE的体外抗氧化活性;采用Alamar Blue法检测BPE对HepG2细胞活性的影响;荧光染色及流式技术检测HepG2细胞凋亡;免疫印迹技术检测凋亡蛋白的变化;Caspase活性检测试剂盒测定Caspase-3和Caspase-9的活性;Caspase-9和Caspase-3抑制剂验证BPE抗肿瘤相关的信号转导通路。结果表明,BPE中总多酚和总黄酮含量分别为39.23 ± 2.35 mg·L^-1和26.53 ± 1.97 mg·L^-1;BPE显示出一定的DPPH和O₂^-自由基清除能力（65.31%±3.82%和51.29%±4.23%）,可明显抑制HepG2细胞的增殖（IC₅₀=54.32 mL·L^-1）;BPE通过上调Caspase-3、Bax、Bid、Apaf-1、Bak、p53、Caspase-9的表达,下调Bcl-2、Bcl-xl的表达诱导HepG2细胞凋亡;Caspase-9和Caspase-3抑制剂（Z-LEHD-FMK、Ac-DEVD-CHO）在一定程度上逆转了BPE的增殖抑制活性。BPE具有一定的自由基清除能力,对HepG2细胞具有明显增殖抑制作用,这些结果为香蕉皮的进一步开发利用提供了数据支撑。     

高浓度藏红花溶液导致大鼠肝损伤中caspase-3、bcl-2、NF-kB表达及意义

目的：通过研究高浓度藏红花溶液引起肝损伤大鼠肝功能、肝组织病理及肝组织中半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）,bcl-2,NF-kB表达,探讨半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）,bcl-2,NF-kB在高浓度藏红花溶液导致的肝损伤中的作用及机制。方法：清洁级雄性大鼠45只,随机分为3组,每组15只,分别标记为A组（藏红花组）;B组（酒精组,阳性对照）;C组（生理盐水组,阴性对照）。分别给予藏红花高浓度水煎浓缩溶液、60%酒精、生理盐水灌胃共6周。第6周末,心腔取血测定ALT、AST。肝组织HE染色,免疫组化方法检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3及调控基因Bcl-2、NF-kB的表达。结果：藏红花组大鼠肝功能ALT、AST升高,肝组织正常结构消失,肝细胞肿胀坏死,部分碎裂,凋亡蛋白caspase-3,bcl-2,NF-kB表达增加（69.6%±16.7%vs 5.3%±1.6%;55.4%±14.5%vs4.5%±2.8%;44.1%±12.6%vs2.5%±1.9%;P〈0.05）。结论：高浓度藏红花溶液可以引起大鼠肝损伤,肝组织caspase-3,bcl-2,NF-kB表达增加,细胞凋亡机制参与了藏红花肝损伤过程。     

Survivin和RhoA双基因沉默对卵巢癌细胞的增殖与侵袭影响

目的：探讨RNA干扰（RNAi）双向沉默Survivin和RhoA基因表达对人卵巢癌H08910PM细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法：构建Survivin和RhoA基因的串联microRNA干扰载体（Survivin-RhoA-microRNA）,通过脂质体介导转染人卵巢癌H08910PM细胞作为实验组,对照组为空载体转染组。转染48小时后,RT—PCR检测Survivin和RhoA的mRNA表达,Western．Blot检测Survivin和RhoA的蛋白质表达;利用MTT法、Transwell小室体外侵袭实验及流式细胞术检测转染后卵巢癌细胞的增殖、侵袭及凋亡情况。结果：Survivin—RhoA—microRNA明显抑制了H08910PM细胞中Survivin和RhoA基因mRNA和蛋白的表达：转染48小时后,实验组SurvivinmRNA和RhoAmRNA表达抑制率分别为68．82％、90．23％,Survivin和RhoA蛋白表达抑制率分别为63．91％、88．47％;MTT分析显示实验组细胞OD490的值为0．706±0．177,较对照组（1．172±0．241）明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;流式细胞术检测实验组细胞凋亡率为36．41±3．34％,较对照组（2．92±0．78％）明显升高（P〈0．01）;实验组细胞侵袭百分比为12．56±6．17％,较对照组（32．96±5．14％）明显降低（P〈0．05）。结论：成功构建Survivin和RhoA串联microRNA干扰载体（Survivin．RhoA．microRNA）。Survivin和RhoA双基因沉默显著抑制了卵巢癌H08910PM细胞的增殖和侵袭能力,并增加其凋亡率,两者具有协同作用,为双靶点治疗卵巢癌提供了新的思路和策略。