北京大学临床肿瘤学院、北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所淋巴肿瘤科，恶性肿瘤 发病机制及转化研究教育部重点实验室，1 肿瘤分子生物学实验室，2 病理

目的:探讨RIP3(受体相互作用蛋白-3)在淋巴瘤患者病理组织中是否表达及其亚细胞定位,并初步观察RIP3的表达是否与淋巴瘤病理恶性度相关。方法:(1)利用免疫组化技术检测48例淋巴瘤和非肿瘤侵润淋巴结病理组织中RIP3表达,并观察RIP3亚细胞定位。结果:(1)RIP3在淋巴瘤患者病理组织中均有表达,其亚细胞定位主要在细胞核,在细胞质中相对弱表达。(2)RIP3表达与淋巴瘤病理恶性度可能存在相关性。结论:RIP3在淋巴瘤患者病理组织中存在阳性表达,为研究RIP3是否与淋巴瘤的发病、临床表现和预后相关,提供了新的探索途径。     

RIP3介导程序性坏死与炎症研究进展CSCD

受体相互作用蛋白激酶3(receptor-interacting protein kinase 3,RIP3/RIPK3)是RIP家族中的一员,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性,通过与RIP1形成坏死复合体能够介导caspase非依赖的细胞坏死。研究发现,RIP3也参与众多感染和无菌性炎性疾病的病理进程。本文就RIP3在细胞程序性坏死方面的调控机制和其在坏死依赖性与非依赖性炎症方面作一综述。     

RIP140在各种组织中的作用

受体相互作用蛋白140(receptor-interacting protein 140,RIP140)作为一种转录辅抑制因子,参与机体代谢调节。RIP140与核受体结合后能够负向调节脂肪、肌肉、心肌以及肝脏等多种组织中靶基因的转录。对其进行靶向沉默可上调多种组织中相关基因的表达,影响糖酵解、甘油三酯代谢、三羧酸循环、脂肪酸β氧化、炎症因子表达以及机体时钟变化等多种代谢过程,因此RIP140有望成为治疗代谢综合征的候选靶点。     

应用组织芯片技术研究抑癌候选基因NDRG2在淋巴瘤组织中的表达及其意义

目的:应用组织芯片技术分析抑癌候选基因NDRG2在人类淋巴瘤组织、淋巴结正常组织及淋巴结良性病变组织中的表达情况.方法:采用小鼠抗NDRG2单克隆抗体的免疫组织化学ABC法,研究NDRG2在不同淋巴结组织的表达,并分析NDRG2在不同淋巴结组织中的表达差异.结果:免疫组化结果显示,淋巴瘤组织与淋巴结良性病变组织中DNRG2的表达相比呈显著性差异(P<0.05),淋巴瘤组织与正常淋巴结组织中DNRG2的表达相比呈显著性差异(P<0.05).淋巴结良性病变组织与正常淋巴结组织中DNRG2的表达相比呈显著性差异(P<0.05).正常淋巴结,淋巴结良性病变及淋巴瘤组织中NDRG2的阳性表达率分别为92.5%(37/40)、67.5%(27/40)和18.51%(15/81),3者间比较,差异有统计学意义.结论:NDRG2在淋巴瘤组织中呈低表达,提示其可能对淋巴瘤的发生或发展有重要作用,这不仅为研究淋巴瘤的发病机制进一步提供了线索,而且对淋巴瘤的诊断和治疗具有重要意义.     

RIP3及其生物学功能研究进展

受体相互作用蛋白3(receptor-interacting protein 3,RIP3)是RIP家族成员之一,具有特异的丝氨酸/苏氨酸激酶活性。其独特的C端结构不具有介导死亡所需要的蛋白结构域却能够感受细胞内环境的变化从而调控细胞的死亡;它具有RIP同型结构域(RIP homotypic interaction motif,RHIM),能与RIP1结合并发生磷酸化从而调控核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的活性变化,这与细胞的存活密切相关。本文对RIP3的结构特性、它与其他信号分子的相互作用、其所具有的生物学功能等方面的研究情况作一综述。     

鼻腔原发性淋巴瘤的CT表现及手术病理对照

目的:研究鼻腔淋巴瘤的CT影像,探讨其相对特异的CT表现.方法:回顾性分析7例病理证实的鼻腔淋巴瘤的临床、手术及CT资料.结果:7例中有5例为NK/T细胞淋巴瘤,2例为T细胞淋巴瘤.有5.例累及鼻前部或前庭,6例引起鼻背部皮肤及皮下软组织肿胀,病变大部密度较均匀,轻中度强化.结论:CT可发现鼻腔前部肿物,本病CT表现较具明显特征,不伴或伴轻微骨结构破坏或变形,邻近鼻背部皮下肿胀,应考虑鼻腔淋巴瘤的可能,同时可行病理检查方能确诊.     

ATF2与ATF3在结直肠癌中表达及临床病理意义

目的：观察结直肠癌组织中活化转录因子2（ATF2）和活化转录因子3（ATF3）的表达并分析其表达的临床病理意义。方法：收集结直肠癌病例,明确其病理诊断并收集临床资料,应用免疫组织化学SP法检测活化转录因子2和活化转录因子3蛋白的表达。结果：ATF2在癌旁肠组织、腺瘤、腺癌组的阳性表达率分别为38%,32%,64%,差异有统计学意义,其中癌旁肠组织、腺瘤分别与腺癌有显著性差异。ATF3在癌旁肠组织、腺瘤、腺癌组的阳性表达率分别为56%,44%,52%,差异无统计学意义。ATF2表达与浸润肠壁深度,淋巴结转移有关,而与肿块大小、部位、分化程度无关。ATF3表达与肿块直径、浸润肠壁深度,而与淋巴结转移、部位、分化程度无关。结论：ATF2与结直肠癌反生和发展有关,而ATF3与结直肠癌的恶性演进有关。     

ATF2 与ATF3 在结直肠癌中表达及临床病理意义

目的:观察结直肠癌组织中活化转录因子2(ATF2)和活化转录因子3(ATF3)的表达并分析其表达的临床病理意义。方法:收集结直肠癌病例,明确其病理诊断并收集临床资料,应用免疫组织化学SP法检测活化转录因子2和活化转录因子3蛋白的表达。结果:ATF2在癌旁肠组织、腺瘤、腺癌组的阳性表达率分别为38%,32%,64%,差异有统计学意义,其中癌旁肠组织、腺瘤分别与腺癌有显著性差异。ATF3在癌旁肠组织、腺瘤、腺癌组的阳性表达率分别为56%,44%,52%,差异无统计学意义。ATF2表达与浸润肠壁深度,淋巴结转移有关,而与肿块大小、部位、分化程度无关。ATF3表达与肿块直径、浸润肠壁深度,而与淋巴结转移、部位、分化程度无关。结论:ATF2与结直肠癌反生和发展有关,而ATF3与结直肠癌的恶性演进有关。     

14-3-3theta 蛋白在人骨肉瘤中的表达和临床意义

目的：研究14-3-3theta蛋白在人骨肉瘤中的表达和临床意义。方法：在62 例人骨肉瘤和正常骨组织样本中,通过免疫组化 的方法检测14-3-3theta 蛋白的表达情况,并分析其表达与骨肉瘤临床病理学特征间的关系。结果：在62 例骨肉瘤和正常骨组织 中,14-3-3theta 蛋白表达的阳性率分别为80.6%和17.7%。统计学分析表明,14-3-3theta 蛋白的表达与骨肉瘤肿瘤大小（P=0.016）、 高组织学类型（P=0.001）、高Enneking分级（P=0.047）具有显著相关性,而与骨肉瘤患者的年龄（P=0.901）、性别（P=0.691）、肿瘤部 位（P=0.802）、碱性磷酸酶（P=0.884）、血清白蛋白（P=0.822）、血沉（P=0.836）等均无关。Spearman 相关性分析检测发现,14-3-3theta 蛋白高表达与肿瘤大小（r = -0.34, P = 0.034）、高组织学分级（r = -0.27, P = 0.031）、高Enneking 分级（r = -0.05, P = 0.025）呈正相 关,而与骨肉瘤患者的年龄、性别、肿瘤部位、碱性磷酸酶和血沉等均无相关性（P > 0.05）。结论：在骨肉瘤组织中,14-3-3theta 作为 癌基因表达增加,与骨肉瘤的疾病进展密切相关,14-3-3theta 可以作为骨肉瘤疾病监测的一种分子指标。     

14-3-3θ蛋白在乳腺癌中的表达和预后的临床研究

目的:研究14-3-3夼蛋白在人乳腺癌中的表达和预后的临床意义。方法:在210例人乳腺癌组织样本中,通过免疫组化的方法检测14-3-3夼蛋白的表达情况,并分析其表达与乳腺癌临床病理学特征间的相关性及与患者总生存期的关系。结果:在210乳腺癌组织中,14-3-3夼蛋白的阳性表达为64.3%。卡方检验分析表明,14-3-3夼蛋白的表达与患者的发病年龄、肿瘤大小、组织分化程度以及HER2状态均没有相关性(P0.05);而14-3-3夼蛋白高表达与高TNM分期(P=0.013)、淋巴结转移(P0.0001)以及ER阴性(P=0.006)存在相关性。Spearman相关性分析检测发现,14-3-3夼蛋白高表达与高TNM分期(r=-0.187,P=0.006)、阳性淋巴结转移(r=-2.272,P0.0001)呈正相关,而与ER阳性状态(r=-0.046,P=0.003)呈负相关。Kaplan-Meier分析结果显示:伴有14-3-3夼蛋白高表达患者的DFS与OS明显少于14-3-3夼蛋白低表达的患者,log-rank检验提示P值分别为0.0379和0.0037,具有统计学意义。结论:在乳腺癌组织中,14-3-3夼作为癌基因表达增加,与乳腺癌的发展和转移发生呈正相关,14-3-3夼可以作为乳腺癌患者预后和疾病复发的检测指标。     

生长抑素受体亚型SSTR2、SSTR3 在淋巴瘤中的表达 及临床意义

目的:探讨生长抑素受体亚型SSTR2和SSTR3在不同类型、不同部位淋巴瘤中的表达情况并分析其临床意义.方法:采用RT-PCR法检测105例4种不同淋巴瘤石蜡标本中SSTR2和SSTR3的基因表达情况.结果:SSTR2及SSTR3在粘膜相关性淋巴瘤阳性表达率分别为(8/27),(6/27),弥漫大B细胞型淋巴瘤(14/36),(12/36),NK/T细胞淋巴瘤(9/22),(6/22),伯基特淋巴瘤(6/20),(7/20),SSTR2的总阳性率为(37/105),SSTR3的总阳性率为(31/105).其中病变位于膈上的SSTR2的总阳性率为(24/105),膈下的总阳性率(14/105),而SSTR3在膈上的总阳性率为(19/105),膈下的为(11/l0S).结论:部分淋巴瘤组织中至少表达一种生长抑素受体,且表达率较低,但淋巴瘤是对放射性敏感的肿瘤,低表达的生长抑素受体对淋巴瘤的诊断及靶向治疗方面是否有意义,还需要进一步研究.     

Expression of the MDR1 and MRP Genes in Patients with Lymphoma with Primary Bone Marrow Involvement

Expression of MDR1 and MRP genes in patients with low‐grade and high‐grade non‐Hodgkin's lymphomas with primary bone marrow involvement before and after chemotherapy was investigated. The data demonstrate that overexpression of MDR1 and MRP genes in hematological malignancies elevates in patients after chemotherapy and correlates with poor clinic prognosis and more frequent recurrences of the malignancies.     

Diverse Sequence Determinants Control Human and Mouse Receptor Interacting Protein 3 (RIP3) and Mixed Lineage Kinase domain-Like (MLKL) Interaction in Necroptotic Signaling

Receptor interacting protein 3 (RIP3) is a protein kinase essential for TNF-induced necroptosis. Phosphorylation on Ser-227 in human RIP3 (hRIP3) is required for its interaction with human mixed lineage kinase domain-like (MLKL) in the necrosome, a signaling complex induced by TNF stimulation. RIP1 and RIP3 mediate necrosome aggregation leading to the formation of amyloid-like signaling complexes. We found that TNF induces Thr-231 and Ser-232 phosphorylation in mouse RIP3 (mRIP3) and this phosphorylation is required for mRIP3 to interact with mMLKL. Ser-232 in mRIP3 corresponds to Ser-227 in hRIP3, whereas Thr-231 is not conserved in hRIP3. Although the RIP3-MLKL interaction is required for necroptosis in both human and mouse cells, hRIP3 does not interact with mMLKL and mRIP3 cannot bind to hMLKL. The species specificity of the RIP3-MLKL interaction is primarily determined by the sequence differences in the phosphorylation sites and the flanking sequence around the phosphorylation sites in hRIP3 and mRIP3. It appears that the RIP3-MLKL interaction has been selected as an evolutionarily conserved mechanism in mediating necroptosis signaling despite that differing structural and mechanistic bases for this interaction emerged simultaneously in different organisms. In addition, we further revealed that the interaction of RIP3 with MLKL prevented massive abnormal RIP3 aggregation, and therefore should be crucial for formation of the amyloid signaling complex of necrosomes. We also found that the interaction between RIP3 and MLKL is required for the translocation of necrosomes to mitochondria-associated membranes. Our data demonstrate the importance of the RIP3-MLKL interaction in the formation of functional necrosomes and suggest that translocation of necrosomes to mitochondria-associated membranes is essential for necroptosis signaling.     

小鼠Toll样受体3基因的克隆及真核表达

采用RT-PCR方法从小鼠巨噬细胞中克隆小鼠Toll样受体3(TLR3)基因,基因测序表明获得了小鼠全长TLR3cDNA,构建了真核表达质粒p3XFLAG-CMV-7.1-TLR3.重组质粒转染293T细胞,Western blotting检测蛋白表达,表达蛋白质的相对分子量与预计相符.采用TLR3的阳性刺激物poly(I∶C)刺激重组质粒转染的293T细胞,双荧光素酶报告基因系统检测发现能激活下游转录因子NF-κB的转录活性,并能诱导TLR3下游细胞因子IL-6和TNF-α的表达.小鼠TLR3基因的克隆和表达,为研究TLR3介导的信号通路及其在抗病毒免疫中的作用打下基础.     

琥珀酸索利那新对女性膀胱活跃症患者P2X3受体表达的影响

目的:探讨琥珀酸索利那新对女性膀胱活跃症患者的治疗效果及对膀胱内P2X3受体的表达的影响。方法:选取我院收治的女性膀胱活跃症患者76例,随机分为两组,对照组38例,予托特罗定2 mg,早晚日2次口服;实验组38例,予琥珀酸索利那新5mg,日1次口服,2周为1个疗程,治疗2个疗程。比较两组患者的24 h排尿次数和尿急次数情况,初始尿意容量、最大尿流率、最大膀胱压容量的变化,以及膀胱内P2X3受体的表达情况。结果:治疗前两组患者尿急次数、排尿次数、尿意容量、最大尿流率及最大膀胱压容量无统计学差异,P0.05;治疗后,患者尿急次数及排尿次数降低,尿意容量、最大尿流率、最大膀胱压容量升高,与对照组比较,实验组改善更明显,差异具有统计学意义,P0.05。P2X3受体主要表达于膀胱黏膜层和黏膜下层,染色为棕黄色或金黄色;实验组P2X3表达低于正常组,差异具有统计学意义,P0.05。结论:琥珀酸索利那新能够缓解女性膀胱活跃症患者临床症状,其治疗机制可能为抑制了P2X3受体的表达。     

The Benzodiazepine Receptor in Rat Brain and Its Interaction with Ethyl /3-Carboline-3-Carboxylate

[³H]Ethyl β-carboline-3-carboxylate ([³H]β-CCE) binds to a homogeneous population of recognition sites in rat whole brain membranes with high affinity. The [³H]β-CCE binding is completely displaceable by low concentrations of a number of benzodiazepines with similar potencies found when using a ³H-benzodiazepine as the ligand. This suggests that the recognition sites for β-CCE and the benzodiazepines are identical or that they are involved in a close interaction. The binding of [³H]β-CCE does not obey simple mass-action kinetics. [³H]Flunitrazepam dissociation from its receptor population is biphasic, and different methods of initiation of this dissociation indicate that cooperative interactions take place within the receptor population. We conclude that the benzodiazepine receptor is a single entity that can exist in two conformations, the equilibrium between which may be controlled by some as yet unidentified factor.     

女性甲状腺癌的病理与预后分析

目的:探讨女性甲状腺癌的病理特点以及预后影响因素。方法:收集2005年1月至2009年8月,齐齐哈尔和平医院收治的女性甲状腺癌患者148例,回顾分析其临床病理特点以及预后影响因素。结果:病理检查显示131例(88.5%)甲状腺乳头状癌(PTC),6例(4.1%)为滤泡状癌(FTC),3例(2.0%)为髓样癌(MTC),6例(4.1%)为未分化癌(ATC);病理分期Ⅰ-Ⅱ期占45.3%,Ⅲ-Ⅳ期占54.7%;27例(18.24%)为周围组织侵犯,9例(6.1%)为远处转移,10例(6.76%)对侧甲状腺转移,56例(37.84%)颈部淋巴结转移;1年、3年、5年生存率依次为97.3%、93.2%、83.8%;年龄、病理床分期、病理类型、淋巴结转移、远处转移以及周围组织侵犯均是影响临床预后的重要因素(P0.05)。结论:女性甲状腺癌存在病理分期晚、病理分型差、淋巴结转移、远处转移及局部侵犯率高等不良预后因素,早期影像学检查对临床治疗具有指导意义。     

趋化因子CCL11-糖胺聚糖-趋化因子受体CCR3的相互作用研究

目的 探究趋化因子CCL11与受体CCR3、糖胺聚糖（glycosaminoglycans，GAGs）相互作用过程及机制，为深入阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供理论参考。方法 利用基因工程技术，构建筛选了CCR3-EGFP单分子表达水平的CHO稳转细胞系，利用全内反射荧光成像（total internal reflection fluorescence，TIRF）与等温滴定量热（isothermal titration calorimetry，ITC）技术研究了不同体外溶液条件下GAGs与CCL11的相互作用，并利用趋化实验及活细胞单分子成像实验考察了GAGs-CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞趋化行为的调控及CCR3-EGFP在细胞膜上聚集状态的影响。结果 随着硫酸软骨素链长度的增加，其与CCL11结合放热增多，表明其相互作用力增强，其促进CCL11聚集作用增强。单分子荧光成像技术结合趋化试验研究发现，不同种类及不同比例的GAGs均会影响CCL11与CCR3的相互作用，GAGs的加入，抑制了CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞的趋化效应及促CCR3-EGFP聚集的能力，且随着硫酸软骨素分子质量的增加，抑制作用显著增强。结论 GAGs的存在可以显著调控CCL11的聚集状态，进而影响其与受体CCR3的相互作用，本研究为进一步阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供了一定的实验基础。