冷冻取代和干膜显微放射自显影

显微放射自显影技术已经在生物学研究中得到广泛的应用。但由于常规制片一系列操作中出现有各种溶液的取代更替,从而难以对一些水溶性放射性化合物在组织和细胞内的定位予以确切鉴定,同时放射性化合物     

植物组织中光合产物的放射自显影定位——冷冻取代树脂包埋法

本文采用以简易的广口冰瓶内加干冰作冷冻剂,以替代超低温(-80℃)冰箱。用以冷冻无水丙酮作取代液,对植物材料进行冷冻取代脱水,固定。经无水GMA预聚合后浸透、包埋、低温紫外线照射聚合,半薄切片、制片和涂敷核_4型乳胶,曝光后显、定影等操作。为植物体中溶性物质(包括引进外源溶性物质)放射自显影定位、定向研究、提供技术方法。     

压碎法制片技术在植物细胞放射自显影中的应用

放射自显影技术是放射性同位素示踪研究中最常用的方法之一,由于灵敏度高,既能准确定位又能精确定量,对研究生物体内物质的动态具有独特的优点。在植物细胞放射自显影研究中,常用的石蜡切片法虽能制出很薄的连续切片,但实验周期长,材料经脱水与浸蜡之后,易发生收缩,一些醇溶性或脂溶性物质并易产生移位或流失,而影响实验结果。为此,我们进行了研究。     

3D-SIM结构照明超分辨率显微镜实现蛋白质在植物亚细胞器内的定位

基因表达产物蛋白质的亚细胞定位是解析基因生物学功能的重要证据之一。近年来出现的超分辨率光学成像技术已成功应用于人类和动物细胞中,预示着显微成像技术继激光共聚焦技术后的又一重要进步。由于植物细胞的特殊性和成像技术的研发取向,超分辨率光学成像技术在植物细胞蛋白质亚细胞定位的应用尚未见报道。该研究利用Delta Vision OMX显微镜技术,克服了叶绿体基粒中叶绿素自发荧光与融合蛋白荧光不易区分的缺陷,解决了受分辨率局限无法将植物细胞中蛋白质在亚细胞器内可视化精确定位的技术难题,成功地将植物蔗糖合成酶Zm SUS-SH1定位在烟草表皮细胞叶绿体基粒周围。该研究同时建立了一套基于撕片制片法的简便OMX显微镜制片方法,并针对OMX显微成像技术在植物细胞中蛋白质亚细胞定位的应用进行了讨论。     

用同位素标记法来研究分泌蛋白的合成和运输的具体详细过程究竟是怎样的？

这项研究工作所涉及的基本实验技术称为电子显微镜放射自显影技术（electron microscopic autoradiography）简称电镜放射自显影技术。了解这一技术的基本原理,就比较容易理解所提出的上述问题。放射自显影技术是利用放射性同位素放出的电离射线使乳胶（含AgBr或AgC1）感光的作用,对细胞内生物大分子进行定性和定位研究的一种细胞化学技术。根据研究对象的需求,分为光镜（显微）放射自显影和电镜放射自显影技术。     

植物显微自显影及双标记彩色自显影技术的应用研究

放射自显影技术作为示踪研究的一种测定手段,已普遍应用于生物学的各个学科的研究工作中,特别是它具有灵敏度高、定位性强、可保存生物机体及组织细胞的完整,以及自显影标本可以长期保存等特点,更显得具有独到之处。成为研究生物机体和细胞结构与功能之间关系的重要方法之一。     

蕨类植物腊叶标本叶表皮制片技术的改进

对蕨类植物腊叶标本叶表皮的制片技术进行了一些改进,克服了传统叶表皮制片中易出现的不足之处,简化了整个制作过程.这种方法使得蕨类植物叶表皮显微制片技术更加完善,可以为从事植物形态分类学基础研究的工作者提供技术支持.     

外源基因在转基因油菜染色体上的定位及分析

原位杂交技术 ( in situ hybridization,ISH)是基因定位的主要技术之一。近来 ,随着植物细胞染色体制片技术的发展 ,以及酶联放大检测系统的采用 ,在植物中已有低拷贝和单拷贝甚至小于 1 kb的 DNA序列定位的成功报道 [1 ,2 ]。染色体原位杂交技术不仅可以用于基因的物理作图 ,而且可以用来对转基因植物中的外源基因进行染色体定位 [3 5] 。研究表明 ,外源目的基因在转基因植物中的表达与整合位点有关 [6] 。因而 ,进行外源基因在转基因植物染色体上的定位以及研究外源基因的整合位点与表达之间的关系 ,对于开发和利用转基因植物具有重要…     

猪传染性水泡病病毒在去核细胞内的复制

本实验利用CB去核技术制备了IBRS-2细胞的胞质体,研究了SVDV在胞质体内的复制与发生。运用显微自显影,单个去核细胞定位包埋及其电镜自显影以及液体闪烁计数技术等综合方法,证实SVDV可在去核的细胞内复制病毒的RNA,而且可致细胞病变,并用细胞显微操作技术直接证实胞质体内可以产生有感染性的子代病毒,从而说明SVDV可利用胞质体作为活试管进行复制,无需细胞核直接参加调控。     

姐妹染色单体分化染色中IdUrd和BrdUrd的效果比较

自从Taylor用~3H-放射自显影技术首次发现了姐妹染色单体交换以来,已在许多动、植物细胞里观察到姐妹染色单体交换。直到1974年Korenberg等改进了Latt、Wolff等用BrdUrd-33258 Hoechst荧光染料染色的方法,     

生物学中的电镜放射自显影术

放射自显影是利用放射性同位素发射的带电粒子(α或β粒子),作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影,再经显影把“像”显示出来,以研究该放射性物质在生物机体(整体的、组织的或细胞的和亚细胞水平的)内的径迹或颗粒定位的一种技术。由于采用各种     

植物叶表皮永久制片技术的改进

对植物叶表皮永久装片的制作过程,在实践中通过摸索而进行了一些改进,克服了传统叶表皮制片中易出现的几点不足之处,完善并简化了整个制作过程。新的永久的制片技术可以为从事植物形态分类学基础研究的工作者们提供基础的技术支持。     

一种新的染色体制片永久封片法

细胞的有丝分裂和减数分裂制片是植物细胞学和细胞遗传学研究不可缺少的技术。对于一些重要的染色体制片进行永久封片,不仅为实验结果保存了必要的细胞学证据,而且也为特殊细胞学现象的重新观察和研究提供了可能性。传统染色体制片的封片剂主要有加拿大树脂(Canada balsam)、Euparal胶和DPX     

改进的植物染色体制片方法

文章以外来物种肿柄菊和濒危物种三棱栎的根尖和茎尖为材料,改进植物染色体制片技术的结果表明:改进后的方法能明显提高植物染色体制片的质量和所需目的细胞的获得率。     

景深合成技术在植物光学微形态研究上的应用

介绍了利用电脑景深合成技术在光学显微镜上获得植物标本大景深图片的摄影方法。概述了此方法获取植物光学微形态特征清晰图片的基本步骤和优缺点。该方法制片简单,可利用最普通的生物显微镜、电子目镜结合计算机进行摄影,成本低,观察特征明显,获得的图片具有真色彩,并可拍出植物最鲜活的状态。此方法有可能成为未来植物微形态研究的一个重要手段。     

简单快速的植物花粉母细胞分裂期染色体致畸研究的制片技术

本文描述了改进的简单、快捷、效果好的植物花粉母细胞分裂时期染色体致畸研究的制片技术程序,及其在环境生物研究中的重要意义。它比其它技术节省时间达24～30小时。     

巴西橡胶制片法

巴西橡胶(Hevea brasiliensis)是生产天然橡胶最优良的橡胶植物,国内外很多人曾做过树皮解剖的研究,探讨结构与产胶量的关系。但是这一种植物乳管组织的形态结构比较特别,由于制片方法没有改进,研究成果一直未在生产上应用。作者经过多年摸索,研究出一套制片方法,即:乳管层临时制片法,乳管层永久制片法和切片制片法三种。前两种方法比较简单,不需要切片机之类的设备,只要通过简单的处理,便能把大     

用大体放射自显影术研究家蚕精液在雌虫生殖系统中的分布和转移

在生物学研究中,利用放射性同位素于示踪实验时,除一般测定样品放射性强度的方法外,大体放射自显影术也是一种简便的技术。从事于昆虫的生殖生理、毒理、营养代谢等方面的研究,大体放射自显影术具有一定的优点。一般昆虫的虫体较狭小,以不同器官或系统进行整体放射自显影时,获得的自显影图经过放大,可以把示踪原子的分布情况清晰地显示出来。此外,在研究营养物质或杀虫药剂在机体内的掺入及转移的速度以及雌雄成虫交配授精后精液在雌虫生殖系统内的转移与分布等问题时,如使用化学分析或组     

O’Farrell电泳的显示方法

本文对O’Farrell电泳的显示方法做了比较,特别对荧光谱技术的实际操作步骤进行了探讨。在考马斯亮蓝染色、银染、放射自显影及荧光谱四种方法中,荧光谱是最为灵敏的方法之一,且其结果显示时间较之放射自显影又大大缩短。     

茎尖分生组织染色体制片技术

在植物染色体研究中,大多利用种子萌发后取其根尖进行制片,这在许多植物是极为方便而有效的。因为幼嫩很尖细胞生长旺盛,分生组织活跃,制片干扰因素少,因此根尖已成为染色体研究的主要材料,但对于一些多年生草本或木本植物以及长期无性繁殖的植物,取其幼根比较困难,而植物芽的外面常被有苞片或幼叶,具茸毛,质地较硬及含有色素,采用常规的盐酸水解、孚尔根法或醋酸洋红法染色后压片很难得到满意的效果。我们在苎芝麻染色体的研究中,除利用根尖外还采用了茎尖和腋芽进行去壁低渗火焰烤片染色体制片技术,并获得成功。