担子菌菌丝体的液体保藏及其产生乙醇的研究

为寻找一种既不破损细胞,又不需要复杂设备的简易保藏方法,我们曾介绍过担子菌菌丝体的保藏方法。为完善这一方法,又设计了液体保藏法,并根据Lemeke将蘑菇分为生乙醇和不生乙醇两类的见解,探索了保藏菌株产生乙醇与菌丝体存活的关系,现报告如下。     

超低温冻结保藏担子菌

本文报道了担子菌菌种24属43种122株经过液氮超低温冻结后的结果。122株担子菌分别用5％或10％二甲亚砜(DMSO)和10％甘油作保护剂,经快速和慢速冻结其成活率分别是,以甘油作保护剂,快速冻结为81％;慢速冻结为94％;以DMSO作保护剂时,快速冻结为97％;慢速冻结为100％。14属23种41株担子菌经冻结保存不同时间后,进行结菇试验,除银耳 (Tremella fucifor-mis) 的对照和冻结样品均未形成子实体外,其余属种均保持着结菇这一特性。     

担子菌地星菌丝体中一个新的甾醇酯

从担子菌地星(Astraeus hygrometricus)发酵培养菌丝体中分离得到一个新的多羟基甾醇酯,其化学结构通过波谱学方法包括二维核磁共振鉴定为:3β,5α-二羟基-(22E,24R)-麦角甾醇-7,22-二烯-6α-棕榈酸酯。同时还从该菌中分离得到其它三个甾醇类化合物。     

两株多孔菌属担子菌菌丝体中的三萜成分

用组织分离法从采集于广东鼎湖山的2株多孔菌属担子菌子实体中分离得到2株菌丝体,并对菌丝体分别进行固体发酵培养,培养物经乙醇提取后,用柱层析分离得到4个化合物,用光谱法鉴定均为羊毛脂烷型三萜,它们分别是多孔菌酸C（polyporenic acid C）（1）、茯苓酸（pachymic acid）（2）、齿孔酸（eburicoic acid）（3）和硫磺菌酸（sulphurenic acid）（4）。其中化合物2为首次从多孔菌属中发现。     

一种溶高等担子菌细胞壁酶的制备

我们试图以高等担子菌（主要是食用菌）为 材料进行原生质体融合,以期获得新型杂种菌 株。我们先后采用过制备植物原生质体的纤维 素酶（上海东风生化试剂厂生产和从日本进 口）、制备酵母菌原生质体的蜗牛酶（来源于中 国科学院生物物理研究所）、和制备细菌原生质 体的溶菌酶（上海禽蛋二厂生产）单独或混合酶 解担子菌菌丝,均难以获得担子菌原生质体。其 原因可能是它们的细胞壁的成分不同所致^[1]     

一种溶高等担子菌细胞壁酶的制备

我们试图以高等担子菌(主要是食用菌)为材料进行原生质体融合,以期获得新型杂种菌株。我们先后采用过制备植物原生质体的纤维素酶(上海东风生化试剂厂生产和从日本进口)、制备酵母菌原生质体的蜗牛酶(来源于中国科学院生物物理研究所)、和制备细菌原生质体的溶菌酶(上海禽蛋二厂生产)单独或混合酶解担子菌菌丝,均难以获得担子菌原生质体。其     

一种海洋型担子菌在中国的首次报道

担子果最初淡黄色,后变深桔色,最后变成桔褐色,球形,菌核状,无柄,基部有一层白色的菌丝层,表生,单生或群生,大,直径达到1-3mm,革质,包被薄,内部胶质化。担孢子无柄,卵形、长椭圆形至盾牌形,单胞,有一根端生附属丝,3-5根侧生附属丝,附属丝渐尖,直或轻微曲折,透明。     

介绍一种保藏菌种的简易方法

保藏菌种以真空冷冻干燥法最佳。但基层限于设备条件,常采用半固体覆盖液体石蜡4℃保藏,该法除必须定期转种外,菌株还容易发生变异。从1982年11月以来,我们采用简易干燥法保藏菌种,经几年观察,效果良好。现介绍于下:     

一种简易的幽门螺杆菌保藏方法

为了摸索出一种易于推广的幽门螺杆菌长期保藏方法,将临床分离培养的幽门螺杆菌置于三种不同的保藏介质中保藏,在保藏后的第1、3、5个月分别进行复苏,并对复苏的菌株进行鉴定检测。结果显示以含有20%甘油或20%蔗糖的改良布氏肉汤作为保藏介质的保藏效果较好。并且复苏的菌株符合幽门螺杆菌鉴定标准。     

保藏曲霉菌种的一种简易方法

我们用麸皮斜面加干燥剂常温保藏曲霉菌种,得到较好效果,现将方法介绍如下。一、方法取新鲜的含淀粉较少的麸皮加55—75%永拌匀,分装在小试管中,装量为试管长度的3/4—4/5,然后用玻棒将其压成斜面状,压后的麸皮应为试管长度的2/5—1/2(简称麸皮斜面)。1公斤蒸汽灭菌30分钟后,将在琼脂斜面上长好的曲霉菌种接种麸皮斜面,在适当温     

一种保藏小单孢菌的简便方法─滤纸保藏法

用滤纸法保藏７２株小单孢菌在冰箱１０℃无干燥条件下,保藏７年５个月后检查其存活率、抗菌活力,观察其形态特征、培养特征和生化特征。结果表明,所保藏的菌种全部存活,且抗菌活力、生理特征等保持原有菌株的特征水平。我们认为,用滤纸法保藏小单孢菌效果好,方法简便,适用于在临床上、工业生产上和科研中有实用价值的庆大霉素、小诺霉素、西梭霉素、小单孢菌的保藏。     

一种保藏小单孢菌的简便方法─滤纸保藏法

用滤纸法保藏７２株小单孢菌在冰箱１０℃无干燥条件下,保藏７年５个月后检查其存活率、抗菌活力,观察其形态特征、培养特征和生化特征。结果表明,所保藏的菌种全部存活,且抗菌活力、生理特征等保持原有菌株的特征水平。我们认为,用滤纸法保藏小单孢菌效果好,方法简便,适用于在临床上、工业生产上和科研中有实用价值的庆大霉素、小诺霉素、西梭霉素、小单孢菌的保藏。     

一种无孢灵芝菌丝体的活性成分

利用制备型高效液相、凝胶层析、制备型薄层色谱等方法对无孢灵芝龙芝2号的固体发酵菌丝体进行分离纯化,通过波谱分析,化合物分别鉴定为灵芝酸P（1）,灵芝酸T1（2）,灵芝酸Mk（3）,灵芝酸S（4）,灵芝酸T（5）,ganodermanondiol（6）,灵芝酸Me（7）,5α, 8α-epidioxyergosta-6, 22-dien-3β-ol（8）,灵芝酸R（9）,lanosta-7, 9(11), 24-trien-3α-hydroxy-26-oic acid（10）,ganodermenonol（11）。其中灵芝酸T1为首次发现的天然产物。体外细胞实验证实,11种化合物对肿瘤细胞L1210的增殖均有很强的抑制作用,其增殖抑制的IC₅₀值均在39.69μmol/L以下。     

一种炭角菌菌丝体生物活性的研究

从一种牛肝菌Boletus sp.中分离得到一株炭角菌菌株,通过液体深层发酵获得菌丝体,并对其粗多糖石油醚和氯仿提取物进行了体外免疫力、抗氧化和抗肿瘤等活性评价。研究结果表明,此株炭角菌的菌丝体石油醚和氯仿提取物抗氧化和提高免疫活力的效果不明显,但炭角菌石油醚和氯仿提取物相对SPCA-1肿瘤细胞具有良好的抗肿瘤活性,100μg/m L石油醚和氯仿提取物细胞增殖的抑制率分别达到60.08%和68.41%,而50μg/m L石油醚和氯仿提取物可以分别诱导25.4%和26.3%的SPCA-1细胞发生早期凋亡,并引起P53、Caspase-3和Bax抗肿瘤标志蛋白表达上升和抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降,表明两种提取物抗肿瘤效果是通过样品诱导细胞线粒体释放ROS来发挥的。同时,发现炭角菌可以激活细胞自身的保护性自噬,从而降低炭角菌的抗肿瘤活性。以上研究结果将为深入研究和开发以炭角菌为来源的抗肺癌药物提供科学依据。     

一种种系发生分析的新方法

利用所测定的猪脂肪组织表达序列标签以及来源于GenBank中非冗余核酸数据库和表达序列标签数据库中的人、牛及小鼠cDNA序列 ,在随机抽样方法建立的基础上 ,分别采集 70个已知功能基因的cDNA序列 ,分析了 4个物种 70× 15 0bp序列连接体的突变规律 ,建立了不同物种之间的综合种系发生分析方法。结果表明 ,在 4个物种 70个已知功能基因所构成的cDNA序列连接体同源性分析中 ,共发现 391个单碱基突变 ,不同物种之间的突变数量大大超过了同一物种基因组水平预测的 1/ 10 0 0。其中以C/T(T/C)转换和A/G(G/A)转换为主要的单碱基突变类型。种系发生分析结果表明 ,作为偶蹄目的猪和牛的遗传关系最近 ,其次是人类 ,小鼠与家猪和牛的遗传关系最远。 4种动物从共同祖先分化的顺序分别为小鼠最早 ,人类次之 ,然后为猪和牛     

一种玉米螟生物测定的新方法

<正> 生物测定是比较各种药剂对某一昆虫毒力的主要方法。生物测定结果的真实性和准确性在很大程度上决定于实验方法。多年来,对玉米螟的生物测定一般都是将玉米叶浸沾于不同浓度的药液中晾干后饲喂幼虫,然后观察死亡率。用这种生物测定法,由于多数幼虫生长不大健康,空白对照组的死亡率往往超过25％以上,因而所得实验结果难以准确真实地反映测试药剂对玉米螟的实际效果。为了改进对玉米螟室内生物测定的方法以提高研究水平,我们摸索出一种用半人工饲料和测试药剂相混合的对玉米螟幼虫的毒力测定法。用这种测定方法,空白对照组中的幼虫生长健康整齐,自然死     

治疗脑瘤的一种新方法

一种治疗脑瘤的新方法正在为脑癌患者带来新的希望。这种新疗法是使用一种以聚集人体自身的抗癌防御机制去攻击叫做“神经胶质癌”的脑瘤。美国每年大