肝素钠精制工艺研究

为提高肝素钠粗品效价,改善产品色泽,采用二次盐解、双氧水氧化和脱色等工艺对肝素钠粗品进行精制,并探讨工艺条件对产品效价、收率的影响。结果得到最佳精制工艺条件:盐解质量浓度为2％,盐解pH为8.0,醇沉体积浓度45％,氧化剂(双氧水)体积分数为3％。该精制工艺能够有效地提高效价(平均比粗产品提高1.5倍),收率较高,并具有操作简便、省时等特点。     

肝素钠精制工艺研究

为提高肝素钠粗品效价,改善产品色泽,采用二次盐解、双氧水氧化和脱色等工艺对肝素钠粗品进行精制,并探讨工艺条件对产品效价、收率的影响。结果得到最佳精制工艺条件：盐解质量浓度为2％,盐解pH为8．0,醇沉体积浓度45％,氧化剂(双氧水)体积分数为3％。该精制工艺能够有效地提高效价(平均比粗产品提高1．5倍),收率较高,并具有操作简便、省时等特点。     

肝素钠树脂精制工艺的研究

利用 D2 5 4 树脂可以将原始粗品肝素钠的效价提高到 179.8U SP U/m g,进一步纯化可得 2 0 1.5U SP U/m g的精品 ,其 H2 O2 用量 ( 1.5% )和氧化时间 ( 2 4 h)均少于传统工艺 ,产品光吸收和收率 ( 85.8% )最优     

小剂量低分子肝素钠、精制蝮蛇抗栓酶治疗急性脑梗死80例临床分析

急性缺血性脑梗死是中老年人的常见病、多发病,上世纪80年代初,在常规治疗的基础上,在超早期及早期加用低分子肝素钠或精制蝮蛇抗栓酶治疗,取得了较满意效果.但有时剂量稍大或适应证掌握不当,也带来严重不良反应.我院自1998年以来,分别使用小剂量低分子肝素钠或小剂量精制蝮蛇抗栓酶治疗急性缺血性脑梗死,疗效满意,不良反应少,现报告如下.     

精制三酶试制投产

湖南津市酶制剂厂去年试制成功精制糖化酶,精制α—淀粉酶、葡萄糖异构酶。在食品工业的制糖中,用在含饴糖、口服葡萄糖、葡萄糖异构糖的生产中。目前国内生产的酶制剂多为粗制品,由于含过量的硫铵(提取过程中加入),     

同源重组酶的精制

横浜市立大学木原生物学研究所研究助理三品裕司、教授小山秀机等和森永乳业公司首次从小鼠乳癌细胞精制出进行同源反应的2种酶,此工作已在11月京都召开的日本分子生物学会上发表.同源重组是在碱基序列相同或非常类似的2个DNA之间发生的反应.如果能在特定的基因部位发生重组,就有可能用于基因治疗等.目前的问题是重组频率低.已知精制酶仅在体外有活性,还不知道准确的分子量.进一步进行研究能在重组频率上升时起作用.     

沉淀剂YNB99-1在肝素钠精制中的应用

在ｐＨ３．０时,去除８５和９５￣１０５ＵＳＰ ｕ／ｍｇ粗品肝素钠的杂蛋白分别使用０．０５％和０．０３％的ＹＮＢ９９－１。１２０ＵＳＰ ｕ／ｍｇ以上的粗品在ｐＨ中性下直接使用０．０５％的ＹＮＢ９９－１即可。在氧化精制中,加入０．００５％的ＹＮＢ９９－１可使Ｈ２Ｏ２用量减少至１．５％,氧化时间缩短到１２ｈ。精品效价１７０ＵＳＰ ｕ／ｍｇ以上,产品收率９０％以上。     

PAHs降解基因及降解酶研究进展

由于环境中的多环芳烃(PAHs)具有高遗传毒性和"三致"性(致癌、致畸和致突变),其生物降解基因和降解功能酶研究备受关注.多环芳烃双加氧酶是近年来研究较多的多环芳烃降解的关键酶系之一,主要由细菌产生,可通过氧化反应使多环芳烃开环生成小分子的中间产物并最终氧化成CO2和水.目前,有关这类酶的理化性质、结构特点、功能等的研究相继开展,本文对PAHs降解基因、降解酶的研究现状与发展趋势进行综述.     

聚乙烯醇降解酶研究进展

聚乙烯醇是一种广泛应用的水溶性聚合物,尤其作为纺织浆料。由于其生物难降解性,对水体会造成较大的污染,因此得到较多的关注。对聚乙烯醇生物处理的研究主要集中在生物降解酶和生物降解机理上,特别是随着对环境友好的酶加工纤维技术的不断发展,利用聚乙烯醇降解酶进行纺织脱浆已引起较大的兴趣。已发现的聚乙烯醇降解酶主要包括:聚乙烯醇氧化酶(仲醇氧化酶)、聚乙烯醇脱氢酶、β双酮水解酶(氧化型聚乙烯醇水解酶)。聚乙烯醇降解酶催化聚乙烯醇的生物降解主要分为两步进行。聚乙烯醇酶脱浆技术不仅节省了脱浆能耗,而且提高了脱浆废水的生物可降解性。     

关于精制蝮蛇抗栓酶的问答

于1991年5月下旬在昆明召开的中国蛇毒酶临床应用研讨会后,陆续收到许多读者来信,询问精制蝮蛇抗栓酶有关问题。为了能较全面地回答读者来信,采访了有关专家并做了某些调查,对几个共同问题公开做答,不专门复信,见谅。一、精制蝮蛇抗栓酶的本质是什么?答:根据昆明会议信息。精制蝮蛇抗栓酶就是原来的“江浙蝮蛇毒抗栓酶-3号”,由中国医科大学老年病防治中心在沈阳第一制药厂生产的江浙蝮蛇抗栓酶(Svate)基础上,经过两次分离所得的产物。经过动物实验及临床验证认为:毒副反应明显低于原江浙蝮蛇抗栓酶。为了区别于原江浙蝮蛇抗栓酶,已被辽宁省卫生厅批准正式批量生产。商品名称为“精制蝮蛇抗栓酶”。为什么要取消“江浙”二字,其     

花色苷的酶降解

综述了降解花色苷的酶类及其降解机理的研究进展.降解花色苷的酶有花色苷酶、多酚氧化酶、过氧化物酶和果胶酶.花色苷酶和果胶酶均能水解花色苷糖苷键产生花色素和糖,花色素很不稳定,因吡喃烊环极易开环可自发转换成无色衍生物.花色苷不能直接作为PPO或POD的底物;PPO和POD氧化、降解花色苷须依赖具邻二酚结构的其他酚类的存在,...     

孟鲁司特钠联合肝素钠对小儿过敏性紫癜的效果及对T细胞亚群、凝血功能的影响

摘要 目的：分析孟鲁司特钠联合肝素钠对小儿过敏性紫癜的效果及对T细胞亚群、凝血功能的影响。方法：选择我院自2019年4月至2022年4月接诊的136例过敏性紫癜患儿作为研究对象,随机分为对照组和观察组,各68例。两组均在常规治疗的基础上,对照组予以肝素钠治疗,观察组予以孟鲁司特钠联合肝素钠治疗。比较两组各项临床症状的消退时间,治疗前后的外周血T细胞亚群（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺）、凝血功能指标[纤维蛋白原（FIB）、凝血酶原时间（PT）、凝血活酶时间（APTT）];根据临床症状、体征及实验室指标的改善情况,综合评价疗效,计算两组总有效率。结果：观察组关节疼痛、便血缓解、腹痛缓解和紫癜消退的时间均短于对照组（P＜0.05）;观察组治疗后外周血CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平较对照组高,CD8⁺水平较对照组低（P＜0.05）;观察组治疗后FIB水平较对照组低,PT、APTT均长于对照组（P＜0.05）;观察组总有效率为95.59 %,高于对照组的79.41 %（P＜0.05）。结论：孟鲁司特钠联合肝素钠能协同提高小儿过敏性紫癜的效果,调节T细胞亚群,增强免疫功能,改善凝血功能,值得临床予以重视应用。     

粗品肝素钠质量情况和效价范围的判断

采用测定粗品肝素纳 2 60、2 80 nm光吸收和蛋白质的三氯乙酸浊度法 ,有效地解决了质量和效价的判断问题。结果显示 ,光吸收和蛋白质浊度与样品的效价成反比关系 ,可根据所归纳的光吸收和蛋白质浊度的 6个程度 ,判断30～ 14 0 USP u/m g的样品 ,鉴定样品质量的优劣程度     

Relating Trypsin Enzymatic Properties with Amino Acid Composition

In this paper, the DNA fragment of trypsin genes from eight crustaceans were cloned and sequenced. The amino acid composition of the 24 deduced and 42 selected trypsin sequences were compared. Low arginine, methionine, and proline content and high aspartic acid, glutamic acid, and isoleucine content attributed to the distinct catalytic efficiency of crustacean trypsins.     

肝素修饰尿激酶某些性质的研究

本文对比研究了溴化氰活化及高碘酸活化肝素修饰的两种修饰尿激酶的性质。结果表明尿激酶在溴化氰活化肝素(肝素CN),高碘酸钠活化肝素(肝素I_4)的共价修饰后,其残余自由氨基分别是64％和52％;酶活性分别保留94％和90％;抗胃蛋白酶水解以及抗冻融变性的能力均高于天然酶;在离体血浆中的失活速变低于天然酶。本文还对修饰酶进行了萤光及紫外差光谱的分析,讨论了修饰过程对构象的影响。     

Enzymatic synthesis of heparin related polysaccharides on sensor chips: rapid screening of heparin-protein interactions

The biological roles of heparin (HP) and heparan sulfate (HS) are mediated mainly through their interaction with proteins. In the present work, we provide a rapid method for screening HP/HS-protein interactions providing structural data on the key sulfo groups that participate in the binding. A library of polysaccharides structurally related to HP was prepared by immobilizing the biotinylated N-sulfated K5 polysaccharide (N-sulfoheparosan) on sensor chips followed by selective modification of this polysaccharide with enzymes that participate in HP/HS biosynthesis. The polysaccharides synthesized on the surface of the sensor chips differ in the number and position of sulfo groups present both on uronic acid and glucosamine residues. Surface plasmon resonance was used to measure the interaction of each member of this polysaccharide library with antithrombin III (ATIII), to afford structural information on sulfo groups required for this HP/HS-protein interaction. This method is viewed as widely applicable for the study of the structure-activity relationship (SAR) of HP/HS-protein interactions.     

嗜冷枯草芽孢杆菌低温脂肪酶纯化与酶学性质研究

从筛选出的产低温脂肪酶的菌株发酵液中,经硫铵沉淀、疏水色谱和阴离子交换色谱纯化得到电泳纯酶。酶的最适作用温度为25℃,0℃以下仍可保持25%左右的相对酶活;在pH5.8～8.8的范围内有较高活力,其最适作用pH为7.8;对热很敏感,在60℃保温30min活性即全部丧失,具有典型的低温脂肪酶特征;酶催化不需要金属离子的参与,结构中可能含有二硫键。在25℃,pH8.0测得酶水解反应的Km值为2.65×10-5mol/L,Vmax值为5.21mmol/(L.min)。     

人己糖胺酶D的原核表达、纯化及酶学特性研究

糖基化修饰是一种重要的蛋白质翻译后修饰,参与生物体中的信号传导、细胞识别等多种细胞活动,糖基缀合物的正常水解是生物体代谢的必需途径.人己糖胺酶D( Hexosaminidase D)是新发现的一种存在于人细胞质中的切除GalNAc糖基化修饰的外切酶,但该酶的酶学特性尚不清楚.利用PCR的方法,将Hex D的cDNA序列构建到质粒pET3C中,重组质粒转化大肠杆菌BL21( DE3) plysS后,通过优化异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)浓度(0.1mmol/L)和诱导时间(10 h)获得了高可溶性表达的重组蛋白酶.采用Ni-NTA亲和层析对重组蛋白进行了纯化,SDS-PAGE检测分子量的大小(58 kDa)和纯度(95％以上).以4-甲基伞形酮-2-乙酰氨基-2-脱氧半乳糖(4-MU-O-GalNAc)为荧光底物,测定该酶的最适反应pH值为5.5,最适反应温度为37℃,且该酶的热稳定性较好,在50℃下放置半小时仍有较高活性,1mmol/L的金属离子(CuSO4、FeSO4·7H2O、MgCl2· 6H2O、CaCl2、NiSO4·6H2O、AlCl3·6H2O、ZnSO4·7H2O、MnCl2)及EDTA对该酶活性影响不大,10mmol/L AlCl3、CuSO、FeSO4·7H2O对该酶有不同程度的抑制.在最适条件下(pH 5.5,37℃)下,该酶的Km为0.16mmoL/L,最大反应速率为3.06 μmol/( min·mg).