发现任氏溶液的一百周年

用离体器官或组织进行实验,必须防止干燥并保持其正常机能。英国生理学家任格(Syd-ney Ringer,1835～1910),于十九世纪八十年代初期开始探索血液中各成份对蛙心收缩的影响,借以为配制可替代血浆或全血的生理溶液提供可能性。他用生理盐液灌流蛙心,得到某种程度的初步成功。但在1883年发现,他的生理盐液不是用蒸馏水,而是用自来水配制的,其中含有少量的钙和其它无机物。发现此错误之后,他立即用蒸馏水配制盐液,重复实验,得到的结果却与1882年所发表的报告有所不同。如果灌流液中无钙,心室收缩不能     

各种离体蛙心磁化灌流液的效果观察

在任氏液中分别加入家兔脱纤血清和计定浓度的Na、K、Ca、Ad、Ach磁化溶液,配制成血清灌流液和磁化灌流液。用这两种灌流液和任氏液进行离体蛙心灌流实验,在二道生理记录仪上描记蛙心搏动曲线。可观察到血清灌流液能加强心脏功能,磁化灌流液有显著的效果。     

各种离体蛙心 磁化灌流液的效果观察

在任氏液中分别加入家兔脱纤血清和计定浓度的Na、K、Ca、Ad、Ach磁化溶液,配制成血清灌流液和磁化灌流液。用这两种灌流液和任氏液进行离体蛙心灌流实验,在二道生理记录仪上描记蛙心搏动曲线。可观察到血清灌流液能加强心脏功能,磁化灌流液有显著的效果。     

用越冬蟾蜍进行心脏灌流实验时的标本预处理

离体蛙心灌流是生理教学中必做的实验之一,实验成功与否与标本的功能状态密切相关。实践中我们发现,当每年冬季或2～3月份用越冬蟾蜍进行心脏灌流实验时,常出现异常现象,如在灌流液中滴加3％氯化钙1～2滴后,心肌收缩力增强不明显,有的甚至减弱,很难观察到钙僵,结果导致实验失败。这种情况     

期前收缩与代偿间歇教学实验的改进

期前收缩与代偿间歇实验,传统的方法是将普通电极接触在体蛙(或蟾蜍)心心室,在心舒张期给予单个刺激,通过描记装置观察心室的反应。由于电极与心室接触的紧密程度不易控制,一般均有接触不良或妨碍心搏影响描记等缺陷。我们参考了有关实验方法,改进了这一实验,收到了较好的效果。器材离体蛙心灌流实验装置一套,漆包线。实验方法和原理在离体蛙心灌流实验装置的基础上,用一直径约0.2毫米的漆包线(线端去掉漆膜)系在蛙心夹上。再取另一同规格的漆包线插入蛙心插管内任氏(Ringer)液中作为无关电极。将两漆     

2001年普通高等学校招生全国统一考试(广东、河南卷)生物(3)

(续 2 0 0 1年第 9期第 36页 )37.(8分 )用插管插入蛙心的心室腔中 ,制备带神经的搏动的离体蛙心 (见图甲 )。插管内的液体是任氏液 (能够维持蛙心跳动的生理溶液 ) ,心脏内的血液已被任氏液代替 ,插管内的任氏液液面随蛙心的收缩与舒张而上下移动。请回答 :(1)刺激支配蛙心甲的神经 ,心跳减慢减弱 ,起这种作用的神经是。(2 )现提供 2支吸管、2个带有与甲相同装置的离体蛙心 (乙和丙 )、任氏液。　　利用上述材料和用具 ,设计 1个简单实验 ,证明神经受刺激后 ,心室腔内存在引起蛙心搏动变化的某种“物质”。得分38.(8分 )为证实“二氧化碳是…     

蛙心灌流实验中心肌收缩力不稳定的原因分析与对策

1866年蛙心灌流技术的建立开创了离体器官灌流的新纪元,目前蛙心灌流依然是医学和生物学专业学生培养中的重要实验。简要回顾蛙心灌流技术的历史及利用蛙心灌流实验曾经取得的成就,结合当前实验教学的实际问题,从生理学角度分析蛙心灌流过程中心肌收缩力不稳定的根源,并采取一些简单有效的措施进行改进,使蛙心灌流实验中心肌收缩力的稳定性和精确性大幅提高。     

滇重楼多糖对牛蛙心脏和腓肠肌影响的比较研究

目的:探讨不同浓度滇重楼多糖对牛蛙心脏和腓肠肌二者生理特性的影响,并比较其异同.方法:用斯氏蛙心插管法制备离体蛙心,灌流低(1.25 mg/mL)、中(2.5 mg/mL)、高(5 mg/mL)浓度的滇重楼多糖溶液,利用BL-420F生物信息采集处理系统记录给药前后的心肌收缩幅度和心率.制备牛蛙在体坐骨神经-腓肠肌标本...     

簡便蛙心灌流装置

为了配合初中生理卫生循环系统一章教学,可以进行离体蛙心灌流的演示实验,帮助学生更直观了解心脏机能。在大学生理实验室常用八木氏插管和斯氏插管进行蛙心灌流实验。我们则利用一只眼药瓶和一段普通细塑胶管,制成简易的灌流器。此仪器装置简单,效果又好。适合于一般中学教学。实验材料眼药水瓶,细塑料胶管(空心的,扎小辫用的);化学实验用铁支架,简易杠杆(参阅生物学通报1960年3月号),简易记纹板,任氏溶液,蟾蜍(或蛙)。实验方法 (1)灌流器的制作:把眼药瓶的细口在酒精灯火焰上加热。加热时应集中在一圈,当玻璃     

在哺乳动物心肌中可记录出钠-钙交换电流

产电性Na-Ca 交换是心肌细胞膜排Ca~(2 )的重要机制,其交换率为3 Na∶/Ca。日本Kimura 用细胞灌流和全细胞电压钳制术,首次直接记录到外向Na-Ca 交换电流。用宽斜面玻璃管(直径4～5μm,阻抗1～2MΩ)将溶液注入豚鼠心室肌细胞。配制的浸浴液和管溶液可阻断大多数通道电流和产电性Na-K 泵,以减少时间依赖性电流成分,使电流-电压(I-V)近乎为直线关系。实验先用不含Na~ 的胞内溶液和不含游离Ca~(2 )的胞外溶液灌流,再灌流1 mmol/L Ca~(2 ),外向膜电     

试论离体蛙心灌流实验改进措施比较

目的:比较和评价两种离体蟾蛛心脏灌流实验方法的应用及效果。方法:分别用传统实验操作方法和改进后的实验操作方法进行"蛙心灌流"实验,观察和分析两种方法在心脏插管所需时间、从处死动物到心脏离体所用时间、离体后心脏存活时间、操作中动脉瓣受损率及心律失常发生率等方面的差异。结果:与传统的离体蛙心实验操作方法相比,采用改进后的方法进行实验的成功率更高,标本的存活时间更长,蛙心的收缩力更强,并且差异均能够达到显著水平。     

一种简易的家兔离体心脏灌流方法

生理实验中的经典实验,蛙心灌流给研究药物对心脏的影响提供了很好的实验平台,但是蛙心的结构毕竟区别于哺乳动物的心脏,研究结果不能说明药物对哺乳动物心脏的影响。然而哺乳动物是恒温动物,体外存活条件苛刻,设备复杂,非一般教学实验室能够实现。介绍了一种在常规生理教学实验室可以实现的简易的哺乳动物心脏离体灌流的方法。     

阿司匹林对离体蟾蜍心功能影响的实验研究

目的:观察阿司匹林(aspirin)溶液对离体蟾蜍心脏心率和心肌收缩力的影响。方法:根据斯氏蛙心插管方法,用不同浓度的阿司匹林对离体蟾蜍心脏进行灌流,采用BL-410生物机能实验系统记录心率和心肌收缩力的变化。结果:灌注0.1g/ml的阿司匹林溶液时,离体蟾蜍的心脏收缩力明显下降和心率明显减慢(P0.05),心脏甚至停止跳动,0.05g/ml的阿司匹林溶液时,离体蟾蜍的心脏收缩力降低和心率减慢程度不如0.1g/ml,并且随着阿司匹林浓度的降低离体蟾蜍的心脏收缩力和心率降低程度逐渐较少。结论:阿司匹林溶液降低离体蟾蜍心肌收缩力和减慢心率,并随着阿司匹林浓度升高,其心肌收缩力和心率降低程度更加明显。     

耐钙心肌细胞的分离和电生理特性观察

用快速、恒压的无钙和胶原酶Ｔｙｒｏｄｅ液相继灌流豚鼠心脏冠脉系统后,再经无钙液室温浸泡心脏和用改变的Ｋ－Ｂ液帮助分离细胞的恢复,可获得耐钙的游离心肌细胞。全细胞电流记录：静息电位为－７２±９ｍＶ（ｎ＝１２）,并显示出快内向电流（ＩＮａ）,可被异搏定阻断的慢钙离子流和时间依赖性外向钾流（Ｉｋ）;单通道记录分别显示了Ｎａ＋Ｃａ２＋和Ｋ＋通道的电压依赖性等特征。结果表明了用此法分离的细胞具有耐钙性和正常电生理特性。     

一种简易蛙心套管的制作

在进行高体蛙心灌流实验时,常用斯氏蛙心套管或八木氏蛙心套管进行实验。但这两种玻璃蛙心套管难制作,又不易买到,而且极易破损。这里介绍一种利用一次性注射器空筒、12号或9号注射针头和一次性输液器的细塑料管制作简易蛙心套管的方法。把12号或9号注射针头用钳子在距针检约Icm处将针梗前端剪掉,断口最好斜些,用毁髓针将断口复原,并用砂纸将断口磨钝（避免断口锋利在插入血管时划破组织）。然后将处理过的针头安到Zml一次性注射’器空筒上,即制成了斯氏蛙心套管（12号注射针头）或用作八木氏蛙心套管（静脉套管,9号注射针头）。把…     

钙离子对心脏的反常作用

“钙离子反常作用”是在离体灌流的动物心脏先用无钙灌流液(除Ca~(2+)缺乏外其它成分均正常)灌流一定时间,继而恢复正常灌流时所观察到的一种严重心肌损害现象。该现象的发生可能是由于恢复正常灌流时Ca~(2+)的大量快速内流造成细胞Ca~(2+)过荷所致;而无钙灌流则使细胞膜超微结构和通透性发生变化,对Ca~(2+)通透性显著增高。     

可视化动缘探测系统检测心肌细胞舒缩功能

目的:分离成年大鼠心室肌细胞,利用可视化动缘探测系统检测其收缩/舒张功能.方法:常规酶解法分离制备钙耐受心肌细胞;用Ca2 荧光探剂fura-2/AM(0.5μmol/L)负载心肌细胞30 min(25℃)后,以含氧台氏液灌流并予电场刺激(0.5 Hz,5 ms),采用动缘探测系统检测心肌细胞收缩/舒张功能及细胞内荧光信号变化.结果:可视化动缘探测系统可实时同步观察和记录心肌细胞机械功能和细胞内钙瞬变变化,并可计算得到细胞收缩/舒张和钙瞬变的变化幅度、时程及速率等一系列指标,从而直接反映细胞水平的心肌功能改变.结论:可视化动缘探测系统为人们提供了一个在单心肌细胞水平探讨心肌肌源性功能及其改变的新方法,是当今心血管研究的一项重要技术.     

去氧核醣核酸,多醣类,蛋白质的三色染色

甲)材料及固定:哺乳类、两栖组织,包括甲状腺、肾、小肠、胃、睾丸;昆虫的精巢,肌组织;及数种植物组知,固定于 Carnoy 氏液,福尔马林液,Helly 氏液,或 Smith 氏液皆可。乙)试剂试剂 T:天青 A-schiff 液——溶0.5克天青 A(azureA)于100毫升漂白液内(见下)可保持数周,用前加100%偏亚硫酸氢钾(K-me(?)abisulfite)数滴。试剂Ⅱ:漂白液——1N盐酸5毫升;10%偏亚硫酸氢钾或钠5毫升;蒸馏水90毫升;新鲜制备。试剂Ⅲ:高碘酸液(periodic acid solu)——高碘酸0.8克;蒸馏水90毫升;0.2M醋酸钠10毫升;新鲜配制。试剂Ⅳ:硷性复红 schiff 液——根据 Stowell 氏法(1945)配制,溶液置冰箱内可保持数月。     

蟾蜍皮下淋巴囊麻醉对心脏功能的影响

目的：研究一种对蟾蜍心脏功能影响较小的固定方式,适用于蛙心起搏点以及蛙心室舒缩与心电图同步记录观察期前收缩和代偿间歇实验的固定方式。方法：将一定数量的蟾蜍平均分为三组,分别为对照组捣毁大脑和脊髓组、乌拉坦皮下淋巴囊麻醉组。模拟Ⅱ导联分别将麻醉组、捣毁组蟾蜍连接RM6240,进入心电图实验模块,观察并记录两组组蟾蜍的处理前后心电图的变化情况,以及两组蟾蜍经过处理后痛觉、肌张力、呼吸的对比情况。快速游离三组蟾蜍的心脏,4%甲醛固定,30%蔗糖溶液脱水,修剪后冰冻固定,切片,苏木精-伊红（HE）染色,通过光学显微镜观查。结果：①乌拉坦皮下淋巴囊麻醉组蟾蜍的固定效果与捣毁大脑和脊髓组蟾蜍相当。②给药前后麻醉组蟾蜍的心电图变化幅度小于捣毁前后捣毁组蟾蜍的心电图。③与对照组蟾蜍的心肌细胞相比乌拉坦皮下淋巴囊麻醉组蟾蜍的心肌细胞破坏程度小于捣毁大脑和脊髓组蟾蜍。结论：在蛙心起搏点以及蛙心室舒缩与心电图同步记录观察期前收缩和代偿间歇实验中对蟾蜍进行乌拉坦皮下淋巴囊麻醉是一种优于捣毁蟾蜍大脑和脊髓的固定方法。     

快速显示血细胞及骨髓细胞DNA、RNA的方法

实验对传统的甲绿 派若宁法做了一定的改进 ,使染色时间缩短 ,步骤简化 ,效果良好。并对骨髓和脾造血细胞内ＤＮＡ、ＲＮＡ的定性和定量显示进行了一定的探讨。1.材料和方法1 1　材料 :派若宁Ｙ染液的配制 6%派若宁Ｙ(ＡＭＲＥＳＣＯ分装 ) 1ｍｌ,0 2Ｍ醋酸缓冲液(ｐＨ5 0 ) 8ｍｌ,蒸馏水 8ｍｌ ,优质甘油 1ｍｌ。此过程在磁力搅拌器上进行。 2 %甲绿用 0 1ＭＰＢＳｐＨ7 2溶液配制 ,经三氯甲烷洗脱去影响染色效果的甲紫成分 ,制得较纯的甲绿溶液。1 2　染色方法 :取小鼠股骨 (用ＲＰＭＩ 1640培养液将骨髓冲出 )和脾细胞 ,制成细胞悬液…