S1PR1在心血管系统中的作用及研究进展

1-磷酸鞘氨醇受体1(sphingosine 1-phosphate receptor 1,S1PR1)是5个S1P受体之一,最早发现于内皮细胞分化和新生血管形成过程中。S1PR1广泛表达于内皮细胞、免疫细胞、淋巴细胞、巨噬细胞及肌肉等多种组织细胞。随着研究的不断深入,已经证实S1PR1参与多种机体病理生理过程,可阻止细胞凋亡,促进细胞生长和繁殖,能调节机体免疫和炎症反应并应用于临床。在心血管系统中,S1PR1在血管新生、淋巴细胞运输、心脏的生长发育以及维持血管的正常通透性等方面具有重要作用。本文将着重就S1PR1在心血管系统中作用及其机制的研究进展作一介绍。     

鞘氨醇激酶-磷酸鞘氨醇轴在血管生成相关性疾病中的作用

血管生成是指在原有血管的基础上形成新血管的过程.病理性血管生成是癌症、心血管类疾病和视网膜病变等一系列疾病的标志.1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)是一种信号脂质,由鞘氨醇激酶(sphingosine kinases,SPHK)合成,通过5种G蛋白偶联受体(sphingosine-...     

1-磷酸鞘氨醇受体

1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)对动脉粥样硬化等心血管疾病的发生发展具有重要作用。最近研究发现S1P在不同细胞发挥的生物学效应由其受体(sphingosine-1-phosphate receptor,S1PR)介导,以S1PR及其信号机制为基础的研究及治疗策略成为新的研究热点。本文主要综述S1PR的功能、信号通路及对心血管疾病的影响,为心血管疾病的预防和诊疗提供新的靶点。     

鞘氨醇-1-磷酸与免疫细胞的调节

鞘氨醇-1-磷酸（sphingosine-1 phosphate,S1P）是来源于鞘脂代谢途径的多效性信号分子,其代谢受到多种因素调控。S1P由细胞内的鞘氨醇激酶（sphingosine kinases,SphKs）催化鞘氨醇的磷酸化而合成,可通过转运蛋白释放至细胞外。S1P可通过在胞外结合其特异性G蛋白偶联受体及胞内作用而调节多种重要生物学效应。作为细胞外介质和细胞内信使,S1P在免疫系统中也发挥重要的调节作用。S1P参与免疫细胞的迁移、增殖、分化及死亡细胞清除等过程。本文对S1P的代谢以及其对于免疫细胞的调节作用进行综述。     

鞘氨醇激酶活性测定方法的建立及其初步应用

目的:建立生物样品中鞘氨醇激酶(SPK)活性和1-磷酸鞘氨醇(S1P)含量的测定方法.方法:用Flag标记的SPK基因表达载体转染ECV304细胞,用Western blot方法检测转染后SPK基因的表达,用酶促反应、同住素掺入和薄层层析的方法检测SPK的活性.提取细胞或组织的S1P,碱性磷酸酶消化去除磷酸根,然后利用SPK的催化活性和同位素标记的方法对S1P进行定量.结果:转染基因后细胞的SPK表达明显升高,活性显著增强,细胞内S1P的含量也明显增多.肝细胞生长因子(HGF)刺激能增强ECV304细胞SPK的活性和细胞内S1P水平.结论:建立了SPK活性和S1P含量的测定方法.     

脂质活性信号分子鞘氨醇-1-磷酸及其生物学特性

鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)是目前颇受关注的脂质信号分子.体内S1P主要由红细胞内鞘氨醇激酶催化鞘氨醇合成,后经由ATP结合盒式转运子释放入血浆.血浆S1P超过半数存在于高密度脂蛋白和血清白蛋白上.S1P可通过直接胞内作用和激活其特异性G蛋白偶联受体产生多种重要生物学效应.S1P1-5型受体在体内各类型组织和细胞表达水平不同,参与包括细胞增殖、存活、迁移等多种生物学过程.     

鞘氨醇1- 磷酸受体4 研究进展

鞘氨醇1-磷酸(Sphingosine-1-phosphate,S1P)是一种具有生物学活性的溶血磷脂信号分子,在体内通过G蛋白偶联受体(G protein coupled receptor,GPCR)家族鞘氨醇1-磷酸受体(S1P receptors)的5个亚型(S1P1-5)介导多种生物学功能。S1P4也称内皮分化基因受体6(Endothelial differentiation gene receptor 6,Edg-6),主要在淋巴组织和造血组织中表达。近年的研究发现,免疫细胞的迁移分化、骨骼肌前体细胞的迁移、乳腺癌细胞的增殖、TGFβ1介导的抑制骨骼肌细胞凋亡均与S1P4相关。本文将综述近几年来关于S1P介导S1P4的生理病理应答及相关的信号转导机制。     

鞘氨醇激酶1和1-磷酸鞘氨醇受体2在癫痫大鼠海马组织中表达的变化*

目的:检测鞘氨醇激酶1 (SphK1)和1-磷酸鞘氨醇受体2 (S1PR2) 在癫痫大鼠海马中的表达,探讨SphK1和S1PR2在癫痫中的作用机制。方法:成年雄性SD大鼠108只,随机分为对照(Control)组(n=48)和癫痫(PILO)组(n=60)。癫痫组腹腔注射氯化锂(127 mg/kg),18～20 h后注射匹罗卡品,首剂量为30 mg/kg,发作＜IV级的大鼠重复注射匹罗卡品(10 mg/kg);对照组给予等剂量的生理盐水代替匹罗卡品。根据造模后观察时间和行为学改变,随机分为3个大组,6个亚组:急性期组(E6 h、E1 d、E3 d)、潜伏期组(E7 d)和慢性期组(E30 d、E56 d),每个亚组中对照大鼠和癫痫大鼠各8只。每组取4只大鼠麻醉取海马,另4只取大脑组织。运用Western blot检测SphK1、S1PR2在大鼠海马组织中的表达变化,免疫荧光检测星形胶质细胞活化增生情况及SphK1、S1PR2在星形胶质细胞中的定位表达。结果:与Control组比较,SphK1在造模后急性期(E3 d)、潜伏期(E7 d)和慢性期(E30 d、E56 d)海马中的表达均明显升高(P＜0.05或P＜0.01);S1PR2在急性期(E3 d)、潜伏期(E7 d)和慢性期(E30 d、E56 d)海马组织中的表达均明显下降(P＜0.05或P＜0.01);癫痫大鼠(E7 d)海马星形胶质细胞活化、增生明显(P＜0.05),SphK1和S1PR2在E7d的表达到位为海马星形胶质细胞中。结论:SphK1和S1PR2可能通过调控海马星形胶质细胞活化增生和影响神经元兴奋性参与了癫痫的发病。     

S1P 信号通路：心血管疾病治疗的新靶点

1- 磷酸鞘氨醇是一种有生物活性的脂质代谢产物,具有调节细胞增殖、再生、迁移,细胞内钙离子移动,黏附分子表达以及激活单核细胞黏附内皮细胞等功效,在血管生理性再生及动脉粥样硬化斑块发生发展中发挥重要作用。1- 磷酸鞘氨醇在高密度脂蛋白中含量在所有脂蛋白中最高,其参与调节高密度脂蛋白的抗氧化、抗血栓、抗炎等效应,而这些反应与1- 磷酸鞘氨醇的生物学功能如血管发生、内皮保护、抑制平滑肌细胞迁移、心肌缺血再灌注损伤的保护等密切相关。对1- 磷酸鞘氨醇信号通路在心血管系统中的作用及以该通路为靶点的相关药物研究进展进行综述,为今后研究提供参考。     

鞘磷脂代谢与脑缺血

鞘磷脂特别是鞘脂是髓鞘的主要成分,高度集中在中枢神经系统。在生理和病理生理条件下,具有生物活性的鞘磷脂及其代谢产物以及信号传导过程的重要性正在逐步被人们所认识。鞘脂代谢产物鞘氨醇及其前体物质神经酰胺与细胞生长停滞和凋亡有关,而1-磷酸鞘氨醇与增强细胞增殖、分化和细胞生存以及调节细胞的生理和病理过程有关,具有细胞外第一信使和细胞内第二信使的双重功能。这三者之间的相互转换、鞘脂代谢物的相对水平以及细胞的命运,受到鞘氨醇激酶的活性的强烈影响。鞘氨醇激酶可催化磷酸鞘氨醇产生1-磷酸鞘氨醇。1-磷酸鞘氨醇在中枢神经系统中与G蛋白偶联受体家族结合对中枢神经系统发挥作用。本文对鞘磷脂代谢过程中的鞘氨醇激酶、1-磷酸鞘氨醇及其受体与脑缺血之间的关系进行概述。     

鞘氨醇激酶信号途径对骨重建的调节作用

鞘磷脂是哺乳动物细胞质膜的主要成分之一,在其代谢过程中,鞘氨醇激酶（sphingosine kinase, SPHK）是一个关键性的调节酶.鞘磷脂代谢产物鞘鞍醇经SPHK磷酸化作用产生的鞘氨醇-1-磷酸（S1P）是一种具有生物活性的脂类,参与调节骨骼、神经、免疫、血液系统等多种组织细胞的生物学过程.本文阐述了SPHK/S1P信号途径相关分子,并综述了SPHK/S1P通过调节骨组织细胞的形态结构、增殖、迁移、分化形成及凋亡等功能,进而调节骨重建平衡过程的生物学效应及其机制.     

鞘氨醇-1-磷酸对人脐带间充质干细胞增殖及表面标记物表达的影响

鞘氨醇－1－磷酸（sphingosine－1 phosphate, S1P）是一种脂质信号分子,与细胞增殖、凋亡和迁移等有密切关系．本研究发现,S1P促进人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC－MSCs)增殖,但目前关于其作用信号通路及S1P对hUC－MSCs表面标记表达的影响尚不十分清楚．Real－time PCR检测hUC－MSCs中S1P受体mRNA表达情况,发现在hUC－MSCs中优势表达S1PR1 3,而S1PR4、S1PR5的表达很少．MTT法检测S1PR1/3拮抗剂VPC23019、S1PR2拮抗剂JTE013、S1PR3拮抗剂CAY10444、Gi蛋白抑制剂PTX和ERK抑制剂PD98059对S1P诱导hUC－MSCs增殖的影响．结果显示,VPC23019完全抑制S1P诱导的hUC MSCs增殖,JTE013对此没有明显影响,CAY10444部分抑制S1P诱导的hUC MSCs增殖,PTX、PD98059完全抑制S1P诱导hUC－MSCs增殖．进一步用Western印迹检测ERK1/2磷酸化水平揭示,S1P通过促进ERK1/2磷酸化进而促进hUC MSCs增殖．流式细胞术检测发现,S1P对hUC MSCs表面标记物(CD45、CD34、CD90、CD29、CD105、CD44、CD73、CD71)表达没有明显影响．本研究证明,S1P通过S1PR1/3、Gi偶联蛋白及ERK1/2信号通路促进hUC MSCs增殖,而对hUC MSCs表面标记物表达无明显影响．     

1-磷酸鞘氨醇改善缺氧诱导的肺上皮细胞损伤

目的:如何减轻缺氧造成的肺损伤是平原人群进入高原环境时面临的难题。本研究旨在探索外源性1-磷酸鞘氨醇(S1P)对低氧暴露诱导肺上皮细胞损伤的改善作用。方法:对肺上皮细胞(BEAS 2B细胞)进行4 h不同浓度的S1P预处理,之后放入低氧培养箱(氧气浓度为1%)模拟24 h和48 h的低氧暴露,检测细胞的增殖活性、早期凋亡以及线粒体相关功能;通过实时荧光定量PCR检测受体基因(S1PR1-3)的表达水平。结果:外源性S1P预处理可在BEAS 2B细胞中显著提高S1PR3的表达水平;对于24 h-48 h的急性低氧暴露,给予1μM浓度的S1P预处理时对细胞具有显著的保护作用,主要表现在线粒体功能改善、细胞增殖活性提升及早期凋亡率下降,包括:线粒体膜电位(MMP)和三磷酸腺苷(ATP)水平显著升高(P<0.0005),线粒体活性氧(ROS)产生显著减少(P<0.0001),从而显著提高了细胞的增殖活性(P<0.005),并降低早期凋亡率。结论:外源性S1P预处理能通过改善低氧诱导的氧化应激损伤保护肺上皮细胞。S1P在预防急性高原病、改善高原反应方面具有潜在应用价值。     

T淋巴细胞与血管紧张素Ⅱ的升压作用

血管紧张素(angiotensin,Ang)Ⅱ诱导水钠潴留及血管损害导致血压升高部分依赖于T淋巴细胞的活动.AngⅡ通过1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)通路促进T淋巴细胞组织浸润,且AngⅡ可促进T淋巴细胞炎症因子释放及自身RAS激活,而T淋巴细胞的活动可正反馈式导致AngⅡ水平...     

1- 磷酸鞘氨醇受体调节剂的研发现状

1- 磷酸鞘氨醇（S1P）具有多种生物学功能,S1P 受体（S1PR）调节剂可以用于治疗多种免疫性疾病。芬戈莫德是首个上市的 S1PR 调节剂,用于治疗多发性硬化症（MS）,2015 年销售额达到27 亿美元。药渡网数据显示：目前全球有14 个S1PR 调节剂进入临床, 适应证包括MS、银屑病、类风湿性关节炎和炎症性肠病等。国内目前针对S1PR 靶点的药物有1 个新药奥芬米洛已获批临床,另1 个 新药CBP-307 处于临床在审评阶段。简介S1PR 的生物学功能和S1PR 调节剂在国内外的开发情况,为靶向S1PR 的药物开发提供参考。     

植物体内的鞘氨醇-1-磷酸(S1P)

鞘氨醇-1-磷酸（S1P）在植物体内也可作为一种信号分子参与ABA介导的保卫细胞信号转导过程,这一途径和异三聚体G蛋白相耦联。文章对此问题的研究进展作了介绍。     

1-磷酸鞘氨醇(S1P)对H9c2心肌细胞肥大反应的保护作用

目的:研究1-磷酸鞘氨醇(S1P)对H9c2心肌细胞肥大反应的影响。方法:将培养的H9c2心肌细胞随机分为4组,即正常对照组、S1P(1μmol/L)处理组、苯肾上腺素(PE,100μmol/L)处理组、PE(100μmol/L)加S1P(1μmol/L)处理组,每组设3个复孔。处理24 h后应用Actin-Trakcer Green免疫荧光染色检测各组心肌细胞形态大小;Real-Time PCR技术测定各组H9c2心肌细胞中肥大标志物ANP、BNP及β-MHC的转录水平;Western印迹法测定各组中ANP的蛋白表达情况。然后将H9c2心肌细胞随机分为5组,即正常对照组、PE(100μmol/L)组、PE(100μmol/L)加低浓度S1P(0.1μmol/L)组、PE加中浓度S1P(1μmol/L)组、PE加高浓度S1P(10μmol/L)组,每组设3个复孔。处理24 h后应用Western印迹法测定低、中、高浓度S1P干预下磷酸化的Janus激酶2(JAK2)及信号转导和转录激活子3(STAT3)的蛋白表达水平。每项试验独立重复三次。结果:与正常对照组比较,PE组的H9c2心肌细...     

S1P对心肌细胞的保护作用研究

目的：探究1-磷酸鞘氨醇（S1P）对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞的保护作用及其分子机制。方法：在大鼠乳鼠心肌细胞原代培养基础上,应用液体石蜡覆盖法制备心肌细胞缺氧／复氧模型,采用流式细胞术PI染色法和流式细胞术罗丹明123染色法检测S1P对缺氧／复氧心肌细胞的细胞凋亡和线粒体膜电位的影响;Western Blot分析法检测S1P作用后的心肌细胞p-Akt1蛋白水平变化,并且观察PI3K（磷脂酰肌醇3-激酶）阻断剂渥曼青霉素（wommamin）对S1P上述作用的影响。结果：在S1P的影响下,缺氧／复氧心肌细胞的凋亡率显著下降（P〈0．01）,线粒体膜电位的去极化被明显抑制（P〈0．05）,p-Akt1水平明显升高（P〈0．01）,wormannin能够部分阻断S1P的上述效应。结论：S1P能够显著抑制缺氧／复氧引起的心肌细胞凋亡,其机制可能与S1P激活PDK-Akt信号通路进而稳定线粒体膜电位有关。     

半乳糖凝集素-3(galectin-3)基因沉默对Eca109人类食管癌细胞的影响

半乳糖凝集素-3(galectin-3)是一种多功能的β-半乳糖苷结合凝集素,涉及包括细胞生长、粘附、增殖、进展、转移以及凋亡等多种生物学功能,在恶性肿瘤中高表达。以前的研究已经证实了galecin-3过表达在Eca109人食管癌细胞的生物学作用。本研究试图通过进行小干扰RNA(siRNA)介导的galectin-3沉默,以分析galectin-3沉默对食管癌细胞生物学行为的影响。我们采用Western blotting和RT-qPCR被用来证实在蛋白质和mRNA水平上的galectin-3低表达,使用细胞计数试剂盒-8评估细胞增殖,用Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒和流式细胞术检测Eca109细胞的凋亡。研究结果表明,转染后72 h,si Gal-3组Eca109细胞增殖明显低于siRNA对照组和未处理组(p<0.001)。Transwell实验结果显示,与其他组相比,galecin-3的抑制作用显著降低Eca109细胞的迁移和侵袭能力(p<0.05)。与siRNA-对照组和未处理组相比,galectin-3敲低显著增加Eca109细胞的凋亡率(p<0.05)。敲低Eca109细胞中galecin-3的表达后,细胞增殖、迁移和侵袭能力下降,而细胞凋亡增强,说明galectin沉默可作为食管癌治疗的新策略。     

鞘氨醇-1-磷酸的定量测定——一种新的竞争性结合方法

鞘氨醇-1-磷酸（SPP）是重要的细胞第二信使,影响细胞的生长和死亡.通过培养和收集转染SPP受体-EDG-1的HEK293细胞,与标记及非标记SPP共孵育,利用它们与HEK293细胞的竞争性结合,测定细胞、血清和组织中SPP含量.该法无需特殊仪器,可以测到皮摩尔水平的低含量,批间差异小于15%（6次）.