γ-氨基丁酸对盐酸引起的狗胰液分泌的影响

本实验用5只具有胰瘘及巴索夫胃瘘的狗进行,观察静脉注射GABA(1毫克/公斤)对其胰腺外分泌机能的影响。主要结果如下: (一)在正常情况及麻醉剂戊巴比妥钠(30毫克/公斤,静脉注入)作用下,GABA对0.25％HCl注入肠内(10毫升)引起的胰液分泌量及胰蛋白酶输出量产生降低效应。 (二)GABA对静脉注射促胰液素(0.35毫克/公斤)引起的胰液分泌量无任何影响。 (三)GABA能短暂地降低颈动脉压,随后则有加压效应,但与胰液分泌活动的变化在时间进程方面不相平行。 (四)根据以上结果及以往文献,初步认为:GABA对胰腺的外分泌活动似无直接作用,但似可影响小肠粘膜对HCl刺激的反应水平。在这一影响中,中枢神经系统的高级部位看来似并未参予,全身血压的变化也似与之无关。     

半胱胺对鹅胰液分泌及胰酶活性的影响

目的 :研究半胱胺对鹅胰液分泌及胰酶活性的影响。方法 :12只装有胰腺～十二指肠长久性瘘管的成年鹅。试验采用自身对照 ,试验期在日粮中一次性添加半胱胺 (10 0mg/kgbw)。连续收集计量胰液并测定胰酶活性。 结果 :①半胱胺使鹅胰液的分泌速率较对照期显著上升 (2 4 0 .16 % ,P <0 .0 1) ,其中白天升高 2 34.4 5 % ,夜间增高了2 5 3.70 %。②试验期单位容积胰蛋白酶的活性较对照期升高了 4 9.0 5 % (P <0 .0 1) ,而胰脂肪酶和胰淀粉酶的活性却较对照期分别降低了 2 5 .4 4 %和 2 1.95 % ,且变化幅度具有昼夜的差别。③试验期胰腺每小时分泌胰蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶的总活性较对照期分别升高 4 0 6 .88% (P <0 .0 1)、15 3.5 8% (P <0 .0 1)和 16 6 .5 9% (P<0 .0 1) ,白天增加的幅度较夜晚大。结论 :半胱胺能促进鹅胰液的分泌 ,增加胰液中蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶分泌的总量 ,从而提高鹅对饲料的消化能力 ,适应机体生长对营养的需求     

刺激迷走神经和酸化十二指肠对狗胰液分泌的相互影响

用5条制备有 Thomas 胰瘘和胃瘘的狗作慢性麻醉实验,观察刺激迷走神经和酸化十二指肠对胰液分泌的相互影响,结果如下:1.在酸化肠的情况下,刺激迷走神经所引起的胰蛋白质和碳酸氢盐的排出量显著增多,其效应超过单独刺激迷走神经和酸化肠所产生效应之和。2.在酸化肠引起胰分泌停止后的短时间内,再刺激迷走神经,胰液分泌的潜伏期缩短,蛋白质和碳酸氢盐排出量增多。3.阻断迷走冲动或注射阿托品后,酸化肠所引起胰液的分泌明显减少。4.用利多卡因麻痹肠粘膜后,酸化肠所引起胰液的分泌也明显降低。这些结果提示,在酸化十二指肠引起胰液分泌的机制中,有迷走神经和局部神经参与,迷走冲动和促胰液素及促胰酶素共同作用靶器官时,有相互加强作用,一旦迷走冲动被阻断,这两种激素的作用即明显降低。     

吗啡和纳洛酮对酸化十二指肠引起狗胰液分泌的影响

本工作用制备 Thomas 胰瘘和胃痿的5条狗进行慢性实验。实验时用0.1N 盐酸灌入十二指肠以刺激胰液分泌,并分別注射吗啡或/和纳洛酮,观察它们对胰液分泌和对胰液中碳酸氢盐和蛋白质浓度的影响。另外我们还观察了吗啡和纳洛酮对6条狗离体胰主导管紧张性的影响。结果表明:(1)吗啡抑制了胰液分泌量,对胰液中碳酸氢盐和蛋白质浓度无影响,由于分泌量减少故两者的排出量显著减少(P<0.05),(2)纳洛酮本身对胰液分泌量和碳酸氢盐及蛋白质浓度均无影响;(3)纳洛酮可以加强吗啡抑制胰液分泌的作用(P<0.01);(4)吗啡能增加狗的离体胰主导管肌条的紧张性,纳洛酮不能阻断或翻转吗啡的这一效应,相反能加强其效应。本工作表明,吗啡抑制酸化十二指肠所引起的胰碳酸氢盐和蛋白质排出量,其机制可能是吗啡刺激胰导管收缩,而纳洛酮则加强吗啡的这种抑制效应。     

麻醉劑(巴比妥類)對於鹽酸引起胰液分泌的影響

本實驗比較急性實驗狗、慢性胰瘻狗和經過麻醉的慢性胰屢狗對於鹽酸注入小腸所引起的胰液分泌量和潛伏期,結果證明: (1)在急性實驗情况下,狗胰腺對鹽酸刺激小腸所引起的胰液分泌量遠較在慢性實驗時為少,且潛伏期較長。 (2)巴比妥類麻醉劑:硫賁妥鈉(sodium pentothal)和戊烷巴比妥鈉(sodiumpentobarbital)對鹽酸所引起的胰液分泌量及潛伏期影響極微。 (3)在急性實驗情况下,由鹽酸所引起的胰液分泌量的減少和潛伏期的加長,似乎不是由於巴比妥類麻醉劑的作用,而可能是由於手術創傷的影響。 (4)注射阿托平後,胰腺對於鹽酸刺激小腸所引起的反應顯著减小,故推测在鹽酸引起胰液分泌的機制中可能有神經反射作用的參與。本工作在进行過程中,承蘇聯專家同志親切地給予指導,并承沈(?)淇、劉曾復二教授关懷和支持,(?)此誌謝。     

神經与激素因素在胰液分泌調节中的相互关系

本实验系用狗为对象,分慢性和急性实验两种,但实验均在戊皖巴比妥钠的麻醉下进行。我们观察了神经与激素二因素,于不同的结合方式的情况下,对胰液分泌调节中的相互关系,结果证明: (一)在激素刺激(注促胰液素入静脉或注盐酸入小肠)对胰腺的效应停止后的10分钾内,紧接着刺激切断4—6天后的颈部迷走神经离中端,所引起的胰液分泌,较单独刺激同一神经时所引起的胰液分泌量多,潜伏期短, (二)神经与激素二因素同时作用,所引起的胰液分泌量,大大超过此二因素分别作用所得的效应的总和。 (三)在激素对胰腺的刺激效应停止后的10分钟内,紧接着注射毛果芸香硷,所引起的胰液分泌量,较单独注射毛果芸香碱为多。根据以上结果可以认为:神经与激素二因素在胰液分泌调节中有相互加强的作用。     

波叶大黄多糖对胰腺五种酶的抑制作用

 本文报道波叶大黄多糖(Rheum hotaoense polysaccharide,RHP)对胰腺五种酶的抑制作用。结果表明。(1)RHP对胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶、胰弹性蛋白酶和胰激肽释放酶均有很明显的抑制作用。IC_(50)分别为250μg/mL、21μg/mL、18μg/mL,189μg/mL和300μg/mL。(2)动力学研究表明,RHP对胰蛋白酶和胰脂肪酶的抑制均是非竞争性的,Km值分别为1.2×10~(-4)μmol/mL和1.2mg/mL,Ki值分别为355.0μg/mL和63.85μg/mL。(3)牛血清白蛋白(BSA)对RHP抑制胰蛋白晦和胰脂肪酶具有拮抗作用。当BSA浓度达72.0mg/mL时,对胰蛋白酶活性的恢复率为71.54％。当BSA浓度达20.0mg/mL时,对胰脂肪酶活性的恢复率为63.64％。上述结果表明,RHP对胰腺五种酶的抑制作用,可能是大黄治疗急性胰腺炎作用的生化机制之一,预示RHP在临床上将有重要应用前景。     

胰蛋白酶的天然抑制剂

一、引言在自然界存在着一类能抑制胰蛋白酶的蛋白质。它们中固有些专一地抑制胰蛋白酶;有些除胰蛋白酶外,还能抑制其他生物活性物质,如胰凝乳蛋白酶、溶血纤维蛋白酶(plasmin)等;近年还发现一些所谓多头抑制剂(multiheaded inhibitor),它们能同时,并按一定比例地抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。胰蛋白酶抑制剂广泛地分布在动、植物中。这类蛋白质的生理作用,还不很清楚。在胰脏和胰液中的胰蛋白酶抑制剂据推想,此抑制剂可能使那些由胰蛋白酶原转变而来的胰蛋白酶在胰脏或其导管系统中失去活性,从而对于胰脏本身具有保护作用。显然,对它们的研究,将有助于对动、植物机体内某些     

迷走-胃泌素机制在胃液分泌神經反射期中的重要性

本工作利用具有食道瘘和新设计的胃肠四通瘘的狗进行慢性实验,以收集完整神经支配的全部胃底和胃体部的胃液分泌,观察切除胃窦前后假饲和胰岛素低血糖刺激所引起的胃酸分泌的变化,企图阐明迷走-胃泌素机制在胃液分泌神经反射期中的重要性,结果如下: (一)切除胃窦后,由于取消了迷走-胃泌素的作用,胃腺对假饲及胰岛素低血糖所引起的3.5小时总酸排出量分别较切窦前减少了86.6％及80.6％。 (二)给切除胃窦后的狗皮下注射一定量的胃泌素并与假饲同时作用,使其总酸排出量基本上恢复至切除胃窦前假饲的水平,然后分别测定单独假饲及单独注射该剂量胃泌素时的总酸排出量。结果指出,单独假饲与单独注射胃泌素的作用比例约为1∶4。这表明在胃液分泌神经反射期中迷走-胃泌素作用较迷走直接作用为强。 (三)注射胃泌素与假饲同时作用所引起的总酸排出量较两者单独作用时所引起的总酸排出量之机械总和高出约一倍。这表明迷走直接作用与迷走-胃泌素作用之间有相互加强效应。总结以上结果,可以认为:在胃液分泌的神经反射期中,确实存在有迷走直接作用和迷走-胃泌素作用两种机制,后者起着重要作用,而二者又有相互加强效应。     

对牛胰多肽抑制胰酶分泌作用的离体研究

为探讨胰多肽抑制胰酶分泌的机制,我们利用大鼠离体胰腺泡制备观察了牛胰多肽(BPP)在细胞受体水平对氨甲酰胆碱等促分泌物作用的影响。实验结果显示,BPP 对氨甲酰胆碱诱导的胰腺泡淀粉酶分泌具有抑制作用,并存在剂量反应关系。BPP0.1μmol/L 和0.2μmol/L,可分别使氨甲酰胆碱诱导淀粉酶分泌的效价降低3倍和10倍;BPP 还可抑制氨甲酰胆碱刺激胰腺泡释放~(45)Ca。以上结果提示,BPP 对胰腺泡的胆碱能 M 受体具有拮抗作用。此外,BPP 对促胰液素及其同类激动剂和氨甲酰胆碱协同作用诱导的胰腺泡淀粉酶分泌具有抑制作用,提示胰多肽在整体对促胰液素诱导的胰酶分泌的抑制,可能是通过拮抗胰腺泡细胞上的 M 受体而抑制了促胰液素和胆碱能刺激协同作用引起的胰酶分泌。     

小白鼠胰腺分泌周期内酶原粒、核糖核酸和脂肪酶的细胞化学变化及其与三种主要消化酶的活性的关系

(一) 在小白鼠的胰腺分泌周期中胰腺细胞的三种消化酶(淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶)的活性在休息期中都很高,在发放期中都很低,在注射毛果芸香碱后恢复12小时的时候均为最高。它们的变化是大致平行的。用组织学方法观察到的酶原粒变化与上述酶活性变化相一致,表明三种消化酶的活性与腺细胞内的酶原粒有密切关系。 (二) 小白鼠的胰腺分泌周期中,腺泡细胞内的RNA与DNA的反应并无大的改变。 (三) 在正常饥饿24小时的小白鼠胰腺组织中,用组织化学方法所显示的脂肪酶与胞浆内酶原粒有关,以极粗的颗粒形式分布于腺细胞近腺腔端。在胰腺的分泌周期过程中,脂肪酶的组织化学反应与生物化学的测定结果是一致的。表明了用Gomori氏法所显示的脂肪酶确能代表胰腺内所合的脂肪酶。     

乙醇能增加狗血浆胰泌素浓度和胰的分泌

近年来有报道,人摄入乙醇后,血浆胰泌素(secretin)浓度增加。Nishiwaki等观察了乙醇对狗的血浆胃泌素浓度及胰分泌的影响,并对其机理进行了探讨。选用杂种狗,雌雄不拘,事先给狗分别做胃瘘和胰瘘手术,术后三周进行实验。于实验前禁食18小时,然后将狗分成禁食和摄食两组。禁食组,在经外周静脉取血和收集胰液作为正常测定值后30、60、90分钟,分别经胃瘘灌注40%乙醇(2g/kg),于灌注后10和15分钟,各取血和收集胰液;摄食组,在取对照血和收集胰液后30分钟,按下法分组:(1)单纯喂饲肉食组;(2)饲肉+胃内灌注乙醇组;(3)甲氰咪胍+饲肉+灌注乙醇组,即在喂肉前10分钟静脉注射甲氰咪胍150mg;(4)以生理盐水代替乙醇作为对照组。同时作者还用上述方法,观察了有海氏小胃狗在30分钟内胃酸排出量。各组均以禁食组方法取     

电离辐射降低大鼠胰淀粉酶和胰蛋白酶活性机制的一些初步分析

1.丙线照射后胰淀粉酶、胰蛋白酶活性明显降低,胰酶活性降低程度和胰腺重量有关。在一定照射剂量范围内,胰酶活性和腺重量随着照射剂量的增加而下降。2.同样剂量的丙线照射后,胰腺组织匀浆上清液中的胰酶活性无变化。3.丙线照射后胰腺腺泡由M受体激动剂氨甲酰胆碱引起的淀粉酶分泌量明显减少。4.电镜观察表明,丙线照射后大鼠胰腺腺泡内合成及分泌酶原的内质网、线粒体等超微结构紊乱,这可能是电离辐射后胰酶活性降低的主要原因。     

胰島素性低血糖对狗大、小弯小胃分泌活动的影响

本工作在4只同时具有胃大弯与小弯托馬斯氏小胃的慢性实驗狗身上,进行了21次有关胰島素性低血糖对胃液分泌的观察,并与注射組織胺的作用进行比較,結果如下: (一)在胰島素性低血糖的作用下,小弯分泌的潛伏期比大弯为短,而在分泌量、酸度和消化力方面,小弯一般也都高于大弯。 (二)如以組織胺引起的大、小弯小胃的反应为准,进行比較,則在胰島素性低血糖的作用下,胃大弯部与小弯部分泌的量和酸度,有大致相同程度的增加。 (三)胰島素性低血糖对大、小弯粘膜的胃酶細胞,均有相当強的刺激作用。 (四)根据以上結果,我們认为,迷走神經无論在胃小弯部或大弯部的分泌活动中都似起着主要的作用。     

氯丙嗪对兎皮层电反应的影响

(一)本工作研究了静脉注入氯丙嗪对兔皮层体感觉性诱发电位与直接皮层电反应各相成分的影响,并观察了该药对隔离皮层电反应的影响。(二)每公斤体重注入4—5毫克的氯丙嗪可使诱发电位与直接皮层电反应的表负波受到显著的阻抑作用,但它们的表正波却受影响不大。诱发电位的次反应(第二正波)亦受到明显的阻抑作用。(三)静脉注入同剂量的氯丙嗪对隔离皮层的直接皮层电反应几乎不发生影响,局部施加氯丙嗪只在浓度很高时始能对皮层电位有阻抑作用。这表明在本实验条件下,氯丙嗪对皮层电位的影响可能是通过对网状结构上行激动系统的阻抑作用而引起的,而不是直接作用于皮层的结果。(四)静脉注入同剂量的氯丙嗪可使血压明显降低,其变化过程与皮层电变化的过程在时程上十分一致,说明氯丙嗪对网状结构上行系统的阻断作用也可能与其对血压的影响有关。     

全身照射后大鼠胰腺分泌及其酶活性的变化

本文观察了电离辐射后大鼠胰淀粉酶和胰蛋白酶活性变化,并在离体胰腺腺泡水平探讨了各种促分泌物对腺泡分泌机能的影响。实验结果表明,电离辐射可引起大鼠胰淀粉酶和胰蛋白酶活性明显降低,照射后胰酶活性变化与照射剂量有关。在一定范围内,随照射剂量增加胰酶活性降低程度亦增加,利用离体胰腺腺泡制备方法,进一步观察电离辐射后胰腺腺泡对Carbachol、CCK-OP和VIP刺激的淀粉酶分泌反应亦明显降低,这提示,照射后大鼠胰腺腺泡分泌机能发生了改变。综上所述,电离辐射后大鼠胰外分泌酶活性降低及胰酶分泌减少可能是胰腺外分泌功能障碍的原因之一。     

促胰液素、八肽胆囊收缩素和迷走神经刺激对狗胰液和血清中胰多肽含量的影响

对10只麻醉下主胰管内插置导管的家狗进行急性实验。用放射免疫测定法测定静脉注射促胰液素(8μg/kg)和八肽胆囊收缩素(CCK_8,40ng/kg)以及电刺激胸迷走神经前后的胰液和血清中胰多肽的含量。结果表明,基础胰液中含有大量胰多肽免疫活性物质,平均排出量为3130±2200pg/15min,其平均浓度高于血清水平40倍左右,但是个体之间的变异范围较大。当静脉注射促胰液素和 CCK_8以及电刺激胸迷走神经后,胰液胰多肽排出量和血清胰多肽水平均增多,其中以电刺激迷走神经后尤为明显。高峰都在刺激后15min 内出现。经促胰液素,CCK_8和迷走神经刺激后,胰液中胰多肽排出量比刺激前分别增加105%,52%和200%。外源性促胰液素或 CCK_8刺激后,胰液中胰多肽与 HCO_3~-出量之间或胰液中胰多肽与淀粉酶排出量之间,分别均呈一致的关系。本文结果提示,胰多肽不仅是一种内分泌,它亦具有外分泌的特性。迷走神经、促胰液素和胆囊收缩素对胰多肽的释放具有调节作用。     

牛胰多肽对急性胰腺炎大鼠胰组织中磷脂酶A和胰蛋白酶活性的影响

以0.25％牛磺胆酸钠-0.25％胰蛋白酶溶液注入大鼠胰导管制备急性(出血坏死性)胰腺炎模型。观察剂量为 3μg/kg的牛胰多肽(BPP)对胰腺炎大鼠胰组织磷脂酶 A(PA)活性、钙含量、胰蛋白酶活性以及血清α_1-抗胰蛋白酶抑制力(STIC)的影响。结果如下:1.在伴注BPP的胰腺炎组,PA 活性、钙含量、胰蛋白酶活性及STIC 分别降为胰腺炎组的51％(P<0.001),75％(P<0.001)、20％(P<0.001)以及24％(P<0.001);2.在伴注碳酰胆碱的胰腺炎组,上述四项指标的水平升高。但在伴注碳酰胆碱及BPP 两者的胰腺炎组却分别降至伴注碳酰胆碱的胰腺炎组的39％(P<0.005)、51％(P<0.001)、40％(P<0.001)以及 59％(P<0.001);3.在伴注Ca~(2 )的胰腺炎组,上述四项指标剧升,注射 BPP对其无影响。结果提示,BPP 能降低大鼠胰组织内磷脂酶A 和胰蛋白酶活性及胰内钙沉积量。机制可能与 BPP打断胰酶活化链有关,是否还影响腺泡细胞膜上M受体的功能,有待探讨。     

抗小鼠PLRP1多克隆抗体的制备以及特异性鉴定和应用

小鼠胰泡细胞表达和分泌一种被称为胰甘油三脂酶(PTL)的脂肪酶,主要参与食物来源的甘油三脂的消化吸收,胰泡细胞同时也表达胰脂肪酶相关蛋白1(PLRP1),它同PTL具有很高的同源性．为了研究PLRP1的生物学功能,需要制备其抗体．应用谷胱甘肽S-转移酶(GST)表达系统表达了GST融合蛋白,亲和纯化后用以免疫新西兰大白兔,获得了抗PLRP1的多克隆抗体．免疫印迹分析表明,该多克隆抗血清能检测出0.6 ng的融合蛋白抗原以及在3 μg的小鼠胰液提取物中检测出PLRP1蛋白．在证明抗体的特异性方面,尝试了一种新的方法：用PLRP1基因剔除的小鼠作为阴性对照,通过免疫印迹和免疫组化实验证明了该多克隆抗血清具有很高的特异性．进一步的研究发现,进食能促进胰腺中PLRP1的外分泌,这表明PLRP1可能在食物的消化过程中具有一定的生物学功能．     

信号肽优化在枯草芽孢杆菌体系中对脂肪酶LipS分泌表达的影响

枯草芽孢杆菌具有良好的安全性和优异的外分泌能力,是目前常用的脂肪酶异源分泌表达体系。在枯草体系中如何提高脂肪酶分泌量是目前的研究热点。该体系中信号肽与目的基因不匹配和目标蛋白总表达量不高是导致脂肪酶LipS分泌表达效果较差的重要原因。针对这些问题,依据信号肽结构特征的不同(正电荷与疏水氨基酸个数的差异)对枯草芽孢杆菌体系中Sec和Tat这两个主要分泌途径的信号肽进行了筛选,结果显示Tat途径中的phoD信号肽分泌效果明显优于其他信号肽。在此基础上,通过替换使用诱导型表达载体、突变优化phoD信号肽,并考察了表达条件的影响,显著提高了脂肪酶LipS的分泌表达量,发酵液中转酯酶活达到62.07U/L,占总酶活的62.30%,较原始分泌表达体系的分泌量提高了13.7倍。