猴头多糖分离纯化的初步研究

目的：确定适合于猴头多糖分离纯化的方法。方法：以液体发酵生产的猴头菌丝为材料,提取猴头菌丝多糖进行分离纯化,以得到多糖纯品。结果：猴头菌丝粗多糖采用Sevag法除蛋白的次数应该控制在5-8次,而且Sevag法除蛋白所得的HMP,经DEAE-纤维素柱层析初步纯化,多糖主要分布在蒸馏水洗脱部分,命名为HMPⅠ,其含量为67.5%;HMPⅠ经Sephadex G-100凝胶柱层析纯化,得到两个组分：HMPⅠa、HMPⅠb;HMPⅠa为多糖主要组分,含量为71.8%;HMPⅠa经纯度鉴定为多糖纯品。结论：DEAE-纤维素柱层析结合Sephadex G-100凝胶柱层析的纯化方法,可以获得猴头多糖纯品。     

龙须菜免疫活性多糖的分离纯化及结构鉴定

利用小鼠淋巴细胞增殖模型,筛选龙须菜中具有免疫活性的多糖,并对其结构进行鉴定。活性筛选与分离纯化相结合,经室温提取,DEAE-Sepharose F.F.离子柱和凝胶Sephacryl S500层析,分离纯化得到具有刺激小鼠脾淋巴细胞增殖活性的龙须菜多糖GCpF2-3B。免疫实验表明,GCpF2-3B在较低浓度10μg/mL就表现出刺激作用(增殖率135%),当浓度为50μg/mL时增殖率达到最高(195%)。高效渗透色谱HPSEC层析纯度鉴定和紫外扫描表明GCpF2-3B为均一多糖,分子量约为1.03×105Da。红外光谱扫描显示,GCpF2-3B为典型的含硫酸基团多糖,具有糖类特征峰和总硫酸基吸收峰;13C NMR谱显示GCpF2-3B主要由交替相连的(1→3)-β-D-半乳糖和(1→4)-α-L-3,6-内醚半乳糖重复二糖组成。     

芦荟多糖的分离纯化及性质研究

采用水提醇沉法提取芦荟多糖,经DEAE-C32柱层析分离,Sephades G-100进一步纯化,得AⅠ、AⅡ和AⅢ三种芦荟多糖。Sephadex G-100凝胶色谱表明,AⅠ组分为均一组分,其分子量约为3.8×10~4。借助气相色谱技术,研究了芦荟粗多糖和AⅠ组分的单糖组成。另外,红外光谱鉴定芦荟多糖主要为吡喃多糖。     

灰树花粗多糖的提取方法比较及其分离纯化

比较了几种常规粗多糖提取法与超临界CO2提取法对灰树花粗多糖提取的差异,同时对灰树花粗多糖进行脱蛋白、脱色研究。试验结果表明:热水浸提法所得灰树花粗多糖得率最高,为28.1%,而超临界CO2提取法所得粗多糖纯度最高,为39.3%。聚酰胺法脱蛋白及脱色效果较好,蛋白脱除率及脱色率分别为69.9%、61.9%,且多糖吸附率较低。将超临界CO2法提取的灰树花粗多糖采用聚酰胺法脱蛋白及脱色后,多糖得率为79.3%,纯度为50.1%。因此聚酰胺法是分离纯化灰树花粗多糖的一种简便、高效的方法。     

黄芪多糖的分离及其免疫活性的研究

本文报道了黄芪多糖的分离纯化方法、理化性质、组成并进行免疫作用的研究,黄芪水提,经732(H~+)树脂初步纯化,得粗多糖,再经超滤,Sephadex G-150,透析等方法进一步纯化,得白色粉末状多糖M wt:37500。证明为α-糖甙键连接,水解多糖检出葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖,克分子比为:葡萄糖:半乳糖:阿拉伯糖=1:0.95:0.70。体外试验结果表明:(1)黄芪多糖可刺激小鼠脾细胞增殖,但与ConA联合刺激脾细胞时,未见有协同作用;(2)未见黄芪多糖有诱生脾细胞IL-2的作用;(3)黄芪多糖和IL-2均能增加人体LAK细胞活性,且两者合用,效果更佳,体内试验结果表明:(1)黄芪多糖可促使小鼠外周血白细胞数量增加,并且能完全纠正环磷酰胺引起的白细胞数量下降;(2)黄芪多糖对体内淋转无明显促进作用,但对CY所致免疫功能低下有一定的纠正作用;(3)黄芪多糖可增强NK细胞活性,并可完全纠正CY引起的免疫功能低下;(4)黄芪多糖可促进1g G的产生,与PWM无协同作用。     

香菇菌丝体多糖的分离鉴定与免疫功能研究

从香菇（Ｌｅｎｔｉｎｕｓｅｄｏｄｅｓ）菌丝体提取得到的粗多糖,经ＤＥ５２柱层析,得到均一的多糖成分,命名为ＬＥ。其平均分子量为５．０８×１０５,ＬＥ经红外（ＩＲ）和紫外（ＵＶ）光谱分析,为多糖蛋白质复合体,其中糖含量为９４．２％,蛋白质含量为５．８％。完全酸水解表明糖组成为单一的葡萄糖,蛋白质组成主要为Ａｌａ等１６种天然氨基酸。ＬＥ经完全甲基化、酸水解、乙酰化、薄层层析（ＴＬＣ）和［１Ｈ］核磁共振（［１Ｈ］ＮＭＲ）分析,确定其多糖部分的基本结构为１→３连接的葡聚糖,含有部分１→６侧链。此外,用反转录聚合酶链式反应（ＲＴＰＣＲ）和生物测定法分别研究了健康人外周血单核细胞中白细胞介素２（ＩＬ２）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）的基因表达和活性,结果发现ＩＬ２和ＴＮＦα的基因表达和活性均高于空白对照组,这表明ＬＥ可诱导某些免疫反应。     

现代提取分离技术在食药用菌多糖分离纯化中的应用

详细综述了超声波法,酶解法,超滤法,透析法,色谱法等现代提取分离技术在食药用菌多糖分离纯化中的应用,简单阐述了各种技术的优缺点,并对其应用前景作了简要探讨。     

鬼臼多糖的分离纯化及其抗肿瘤活性

鬼臼经乙醚脱脂后用热水抽提,用蛋白酶法和Sevag法相结合除去蛋白质,乙醇分级沉淀,经DEAE－Sepharose和Superdex G-75或Sephacryl S-200HR柱层析纯化得到两种多糖组分EPS－A和EPS－B。经分析该两种多糖均为单一组分,用分子筛层析法测定了EPS－A和EPS－B的分子量分别为15kD和175kD。纸层析和气相层析分析得知,EPS－B含有木糖,阿拉伯糖,鼠李糖,葡萄糖,甘露糖和半乳糖,其摩尔比为0．37：2．20：0．57：9．83：1．0：3．42,而EPS－A中仅含葡萄糖,体内试验结果表明,EPS－B多糖对小鼠腹水肝癌细胞生长有一定的抑制作用。     

云芝菌丝体多糖的分离纯化研究

利用热水抽提从云芝菌丝体中提取胞内多糖,初步纯化后,用DEAE-Sepharose CL-6B进行分离,从中分离出两个带电荷多糖组分即CVP-I和CVP-Ⅱ,对这两个组分分别用Sepharose CL-6B凝胶柱层析进行纯度鉴定,均出现单一峰,然后用紫外扫描发现这两个组分均出现蛋白多糖的特征吸收,从而可以判断这两个组分是蛋白结合多糖。     

桑枝提取物及抗炎作用研究

桑支（Ramulus mori)乙醇提取物经不同有机溶剂萃取,浓缩得到石油醚提取物（I）,乙酸乙酯提取物（Ⅱ）和正丁醇提取物（Ⅲ）三部分,分别进行定性分析。并灌胃给药进行抗炎实验,结果显示,I和Ⅲ的0.30g/kg组对二甲苯致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用,I的0.15g/kg组有明显的抑制毛细血管通透性的作用。     

桑枝总黄酮的提取工艺研究

研究桑枝总黄酮的最佳提取工艺,本试验以桑枝（Tang10）为材料,以桑枝总黄酮得率为考察目标,采用二次回归正交旋转组合设计方法研究了提取温度、提取时间、乙醇浓度、料液比对桑枝总黄酮提取得率的影响,运用DPS软件对最佳工艺进行优化和验证。结果显示：试验范围内各因子对桑枝总黄酮提取率作用影响大小依次为提取温度〉料液比〉乙醇浓度〉提取时间;最佳提取参数为温度80℃,提取时间3．5h,乙醇浓度60％,料液比1：40部。因此,所建立数学回归模型在试验范围内能较准确的预测桑枝总黄酮的提取率．预测值与实测值相吻合,证明最佳工艺条件切实可行。     

An ethanol extract of Ramulus mori improves blood circulation by inhibiting platelet aggregation

Inappropriate platelet aggregation can cause blood coagulation and thrombosis. In this study, the effect of an ethanol extract of Ramulus mori (ERM) on blood circulation was investigated. The antithrombotic activity of ERM on rat carotid arterial thrombosis was evaluated in vivo, and the effect of ERM on platelet aggregation and blood coagulation time was evaluated ex vivo. To evaluate the safety of ERM, its cytotoxicity to platelets and its effect on tail bleeding time were assessed; ERM was not toxic to rat platelets and did not prolong bleeding time. Moreover, administering ERM to rats had a significant preventive effect on carotid arterial thrombosis in vivo, and significantly inhibited adenosine diphosphate- and collagen-induced platelet aggregation ex vivo, whereas it did not prolong coagulation periods, such as prothrombin time and activated partial thromboplastin time. The results suggest that ERM is effective in improving blood circulation via antiplatelet activity rather than anticoagulation activity.     

应用高速逆流色谱分离桑枝酚类成分

建立了高速逆流色谱(HsCCC)分离制备高纯度的桑枝酚类成分的新方法.分离条件如下:溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇冰(1∶1∶1∶2,v/v),上相为固定相,下相为流动相;流速2.0 mL/min;转速900rpm;进样量75 mg.收集得到三个高纯度化合物,经HPLC、MS、1H和13C NMR等分别鉴定为反式氧化白藜芦醇(25.2mg),反式白藜芦醇(7.4 mg)和桑辛素M(29.1 mg).高速逆流色谱可以高效分离桑枝成分,方法简便,技术可行,优于传统的柱色谱法.     

桑枝提取物对高脂血症大鼠的降血脂及抗氧化作用研究

本文以降血脂药血脂康为阳性对照,对高脂血症大鼠进行降血脂试验,研究了桑枝提取物对高脂血症大鼠的降血脂作用和抗氧化活性。试验结果表明：桑枝提取物具有明显的降血脂功能,能预防动脉硬化,并具有较强的抗氧化能力。     

真菌多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

利用筛选的9383多糖、944、945三种多糖提取液按一定比例注入小鼠腔,能明显提高巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数,与对照组相比,前者增加3．2—4．7倍,后者增加2．8—5．9倍,抗疲劳试验中,多糖组小鼠游泳时间比对照组平均多游20分钟,表明真菌多糖能使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能增强,具有增强机体能量,强身健体之功效,是一种很好的非特异性免疫激活剂。     

芦荟多糖及其分离分析

介绍了芦荟多糖的提取方法及分析方法 ,包括芦荟多糖的纯度鉴定 ,分子量测定以及组成分析和功能团的鉴定     

九里香多糖和蛋白多糖的分离、纯化和分析

九里香(Murraya Paniculata L.Jack)皮部经热水提取、乙醇沉淀、SephadexG—100柱层析分离、磷酸氢钙吸附、酸溶,再通过Sephadex G-200柱层析纯化,得到灰白色粉末状九里香蛋白多糖。总糖含量为52.1％(其中葡萄糖醛酸含量为10.9％),蛋白质含量为20.0％。九里香蛋白多糖去蛋白后,即得九里香多糖,总糖含量为88.2％(其中葡萄糖醛酸含量为20.0％),经纸层析和聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳鉴定为单一斑点和单一区带。平均分子量约为1.7×10~(-5)。组成单糖的摩尔比为葡萄糖:露甘糖:木糖:阿拉伯糖:岩藻糖:葡萄糖醛酸=1.0:0.40:0.16:0.17:0.20:0.48.     

红曲多糖抑瘤作用初步研究

以昆明种小鼠为试验动物,通过皮下注射建立小鼠移植性S180肿瘤模型,红曲多糖灌胃2周后,摘取瘤体和脾脏,计算抑瘤率和脾指数,并用SPSS软件进行统计分析。结果显示,红曲多糖低、中、高剂量组均能抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长,抑瘤率分别达24.70%、31.03%、39.82%,呈量效关系,对S180肉瘤生长有明显的抑制作用;红曲多糖能提高小鼠的免疫力,高剂量组免疫器官质量显著增加。研究表明红曲多糖有抗肿瘤作用,具有一定的开发价值。     

家蚕(Bombyx mori)主要血浆蛋白质及其基因表达的研究

本文用SDS-PAGE法观察不同发育阶段蚕血液中主要血浆蛋白质sp、30KP浓度的变化;从不同发育阶段的蚕脂肪体提取RNA和poly(A)~+-RNA,在兔网织红细胞系作体外翻译并检测翻译产物。结果表明,5龄蚕脂肪体mRNA合成蛋白质的速率为初蛹的2倍;5龄及初蛹脂肪体30KP mRNA活性的发育变化与其相应蛋白质在血液中的浓度变化一致;sp-1在5龄幼虫脂肪体内的表达及卵黄原蛋白(Vg)在蚕蛹脂肪体内的表达具有雌特异性,其表达和性特异性大体是在前翻译水平被调节的。