LC-MS测定黑豆中异黄酮和花色苷的含量

采用高效液相色谱质谱联用技术(HPLC-MS),建立黑豆异黄酮和花色苷含量测定方法。应用Waters Xselect HSS T3色谱柱,以乙腈-0.1%乙酸水溶液为流动相梯度洗脱黑豆异黄酮;应用X-Terra MS C18色谱柱,以10%甲酸水溶液-甲醇/乙腈/水/甲酸(22.5/22.5/40/10,V/V)混合液为流动相梯度洗脱黑豆花色苷;以电喷雾离子源(ESI)选择离子监控模式(SIM)检测目标化合物,并通过标准品对照比较,实现黑豆12个异黄酮及8个花色苷单体化合物的定量测定。该方法操作简便、稳定、耗时少,具有良好的灵敏度、重现性和回收率,可用于黑豆种质资源的化学评价及质量控制。     

‘黑杞一号’与野生黑果枸杞的酚类物质分析

以‘黑杞一号’和野生黑果枸杞为研究对象,对其总酚、总花色苷、总单宁、单体花色苷和非花色苷单体酚类物质进行测定分析。结果表明:(1)与野生黑果枸杞相比,‘黑杞一号’的总酚、总花色苷、总单宁含量分别高出14 250、390和3 330μg/g。(2)‘黑杞一号’和野生黑果枸杞中均检测出4种单体花色苷,包括双葡萄糖苷1种、咖啡酰化葡萄糖苷2种和香豆酰化葡萄糖苷1种,且‘黑杞一号’的4种单体花色苷均显著高于野生黑果枸杞,其中单体花色苷总量比野生黑果枸杞高116.88%(5 672.8μg/g),二甲花翠素咖啡酰化葡萄糖苷含量为野生黑果枸杞的14.93倍。(3)‘黑杞一号’和野生黑果枸杞中均检测到29种非花色苷单体酚,包括黄烷醇类7种、羟基苯甲酸类4种,黄酮醇类18种,并以原儿茶酸含量最高,但‘黑杞一号’非花色苷单体酚总量较野生黑果枸杞低51.42%(2.71μg/g)。     

AB-8树脂对蓝靛果花色苷的吸附性能研究

以AB-8树脂分离蓝靛果花色苷的吸附性能为研究内容,具体研究了AB-8树脂的吸附等温线、吸附热力学性质和动态吸附参数。结果表明,在静态吸附实验条件下,AB-8树脂对蓝靛果花色苷的吸附是放热过程,吸附能力较强,吸附参数能用Freundlich方程较好拟合,相关系数大于0.98;动态吸附研究表明,AB-8树脂纯化蓝靛果花色苷的最佳上样浓度为280±5 mg/m L、洗脱流速2.5 m L/min,通过对乙醇梯度洗脱浓度进行液质分析,确定了各洗脱液中的花色苷种类,为模拟移动床色谱纯化蓝靛果花色苷奠定了理论基础。     

影响逆流色谱分离效率的动力学因素

逆流色谱是一种无固态支撑物的液液色谱,它的色谱动力学过程有其特殊性,分析逆流色谱的动力学过程,推导适用于逆流色谱的速率方程式,结合实验,讨论影响色谱峰展宽的因素;理论推导和实验的结果都显示,管径、容量因子、质量传递系数和流动相液滴的直径和线速度是影响逆流色谱峰展宽的主要因素.     

花色苷对高等植物器官颜色的决定及其影响因素

综述了花色苷对高等植物器官颜色的决定作用及其影响因素的研究进展。花色苷本身的呈色属性、液泡定位及其在植物器官中的非均一性分布决定了花色苷能赋予植物器官颜色。花色苷单体和聚合体分子结构及其变化的多样性,以及花色苷合成与植物生长发育阶段的相关性决定了植物器官颜色的多样性。温度、光、水和矿质通过影响花色苷在液泡中的积累量而制约植物器官色度,液泡pH、氧化剂和还原剂通过影响花色苷的分子结构变化而制约植物器官色相。同时,细胞形状也通过影响花色苷的光学属性而制约器官颜色的变化。最后,还对植物器官颜色的机理和人工改良研究进行了展望。     

黑小豆种皮花色苷的提取及体外抗氧化活性研究

为了探索新的花色苷资源,以黑小豆种皮为原料,对其花色苷类色素的提取工艺进行了研究。通过单因素和L_9(3~4)正交试验,考察了乙醇浓度、料液比、温度和p H对粗提液中花色苷含量的影响。结果表明,最佳提取条件为:乙醇浓度60%、料液比1∶20(g∶m L)、温度50℃、p H=2.0。此条件下,黑小豆种皮粗提液中花色苷的含量最大(5.912 mg/g);黑小豆种皮花色苷粗提物得率为19.1%,纯度为3.06%;粗提物具有一定的总抗氧化能力和清除O~(-·)_2、·OH和DPPH自由基的能力。黑小豆种皮可作为一种新型花色苷资源加以利用。     

梅花‘南京红’花色色素花色苷的分子结构

经特殊颜色反应、纸层析、紫外 -可见光谱、高效液相色谱、气相色谱和核磁共振波谱分析表明 :梅花‘南京红’花色色素的 3种主要花色苷分别是 :花青素 3 氧 (6″ 氧 α 吡喃型鼠李糖基 β 吡喃型葡萄糖 )苷 ,花青素 3 氧 (6″ 氧 没食子酰 β 吡喃型葡萄糖 )苷和花青素 3 氧 (6″ 氧 反式阿魏酰 β 吡喃型葡萄糖 )苷。花青苷在根本上决定着‘南京红’的粉红色花色 ,并可能强化‘南京红’的耐寒能力 ,也奠定了开发和利用该种花色色素的基础。     

射干中乳酸脱氢酶抑制剂的筛选分离与质谱分析

本研究采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-ESI-MS)对射干提取物中异黄酮类化学成分进行分析鉴定,以乳酸脱氢酶作为生物靶分子,运用超滤质谱技术筛选出6种酶抑制剂,分别为鸢尾苷(tectoridin)、鸢尾新苷A(Iristectorin A)、野鸢尾苷(iridin)、鸢尾苷元(tectorigenin)、野鸢尾黄素(irigenin)和次野鸢尾黄素(irisflorentin),并采用半制备型高效液相色谱技术(Semi-prep·HPLC)分离纯化射干提取物中的活性成分。所得单体分离收集液经分析型高效液相色谱法检测,纯度均大于90%。结果证明利用液相色谱-超滤-质谱-半制备型高效液相色谱联用技术可以快速筛选、鉴定、分离射干中的活性物质。此方法对于筛选酶抑制剂有快速和灵敏等优势,具有广泛的应用前景。     

双水相体系逆流色谱技术在蛋白质分离中的应用

双水相体系逆流色谱技术结合了逆流色谱的高效率、高制备量以及双水相体系适于蛋白质分离的特点,因此在蛋白质的分离方面具有独特的应用价值。本文综述了近年来基于正交轴逆流色谱仪器的双水相体系逆流色谱技术在多种蛋白质分离中的应用。并对一些新兴的蛋白质逆流色谱分离技术及新型逆流色谱柱分离系统进行了介绍。     

不同中式烹饪热加工方式对鲜食及加工紫薯花色苷含量影响分析

目的：探讨鲜食/加工紫薯中花色苷类色素的种类及其组成的差异性,同时研究在5种常见中式烹饪热加工方式下紫薯总花色苷的损失情况,以得到一种紫薯最佳的食用方式。方法：采用液质联用(HPLC-PDA-ESI-MSn)分析紫薯花色苷种类和结构,并用pH示差法探讨了5种中式烹饪热加工对紫薯总花色苷含量的损失。结果：鲜食紫薯共鉴定出17种花色苷,而加工用紫薯鉴定出9种花色苷。紫薯在5种热加工方式作用下,总花色苷含量均有损失,其损失率由小到大依次是微波＜蒸＜煮＜低温油炸＜烤。结论：经鉴定紫薯色素中花色苷种类组成非常丰富,但鲜食紫薯与加工用紫薯在其花色苷组成上还有较大差别。从花色苷损失率角度考虑,在5种中式烹饪热加工条件下,微波是其最佳食用方式。     

荔枝果皮花色苷提取及稳定性研究

通过对荔枝果皮花色苷提取方法的比较,认为盐酸甲醇为最适提取剂,提取的色素液对光照和温度均较稳定,而pH值显著影响花色苷的稳定性。     

三七绿紫过渡地上茎的花色苷和皂苷组织定位及其含量分析

为探究三七绿紫过渡地上茎的花色苷和皂苷组织定位与含量的相关性,采用显微组织化学法研究云南文山三七的一年生植株绿紫过渡地上茎各茎段花色苷和皂苷的组织定位,用分光光度法检测茎段的总花色苷(TAC)和总皂苷含量(TSC),用高效液相色谱检测了茎段的皂苷单体含量。结果表明:(1)在三七绿紫过渡地上茎的中部横截面上,花色苷主要定位在皮层薄壁组织外侧的2层或2~3层细胞中,而皂苷主要定位在维管束中;各茎段的皂苷单体均主要为人参皂苷Rb1。(2)从茎顶向茎基,茎段中TAC、TSC和Rb1的含量总体上分别表现为一条"单峰"、"V形"和"降-升-降三段式"曲线;其中,花色苷主要积累在茎的中、上部,总皂苷在茎的下、基部,Rb1则在茎的上半段,而且TAC最高以及TSC和Rb1含量最低的茎段均恰好定位在中上部的黄金分割点处。(3)不同茎段间的TAC含量差异显著,Rb1含量差异极显著,但TSC含量的差异不显著;不同茎段间的TAC与TSC、Rb1含量呈不同的相关性,整个地上茎的TAC与TSC含量间呈极显著负相关关系、TAC与Rb1含量间呈不显著正相关。研究认为,在三七绿紫过渡地上茎中,花色苷和皂苷的横向组织定位不同,二者含量在纵向上总体呈负相关。     

荔枝果皮花色苷提取及稳定性研究

通过对荔枝果皮花色苷提取方法的人为盐酸甲醇为适提取剂，提取的色素液对光照和均较稳定，而ＰＨ值显著影响花色苷的稳定性。     

黑莓果渣中花色苷的提取工艺研究

通过提取方法优选,表明超声法对黑莓果渣中花色苷的提取效果最佳。以60%乙醇为超声法提取溶剂,通过单因素实验分别考察了料液比、超声时间、温度、功率、提取次数对提取黑莓果渣中花色苷的影响。综合单因素实验结果,通过响应面法筛选出最佳的工艺条件为:液料比14∶1(mL∶g),时间40 min,温度58℃,功率300 W,提取2次。通过提取物中花色苷含量与其清除DPPH.活性的相关性分析发现,黑莓果渣提取物清除DPPH.活性与其花色苷含量之间存在相关性,由此推断花色苷为黑莓果渣中主要的自由基清除物质。     

高速逆流色谱技术在生物大分子分离纯化中的应用

高速逆流色谱是一种连续液-液色谱技术,具有无固相载体、样品无需严格预处理等优点。近10年来,在设备结构和溶剂体系等方面进行了大量的研究开发,已推广应用于生物技术、医药、天然产物、环境监测、食品等领域。为适应生物大分子和活性细胞的分离,采用条件温和的双水相体系,研究开发相应的高速逆流色谱设备已成为热点。针对双水相体系的特点,已经开发出了多种具有较高固定相保留率的新型高速逆流色谱设备,通过优化实验条件,成功地进行了多种蛋白质的分离纯化。本对该领域的最新进展进行了综述与评价。     

黑豆种皮花色苷酶法辅助提取工艺优化及其抗氧化活性分析

优化黑豆种皮花色苷复合酶法辅助提取工艺,并对其抗氧化活性进行评价。通过单因素试验和响应面法优化确定了黑豆种皮花色苷生物酶法辅助提取的最佳工艺为:复合酶(纤维素酶400 U/g,α-淀粉酶50 U/g),酶解温度50℃,液料比26∶1 mL/g,乙醇体积分数64%,酶解时间为59 min。在此条件下,提取花色苷的含量为2.019 mg/g。抗氧化试验研究表明,黑豆种皮花色苷的还原能力、对超氧阴离子自由基清除能力低于抗坏血酸,但对亚硝酸根离子和DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力强于抗坏血酸。因此,生物酶法辅助提取是一种高效的黑豆种皮花色苷提取方法,且作为一种新型花色苷资源,黑豆种皮花色苷有着挖掘和应用价值。     

高速逆流色谱分离制备甘草中的甘草苷和芒柄花苷

应用高速逆流色谱分离制备甘草中的甘草苷和芒柄花苷。将甘草乙酸乙酯提取物经聚酰胺柱粗分后,30%乙醇洗脱物用高速逆流色谱进一步分离,所用两相溶剂系统为乙酸乙酯-水(5∶5,v/v),转速850 rpm,流速2.0 mL/min,检测波长254 nm,从50 mg30%乙醇洗脱物中得到甘草苷8.7 mg、芒柄花苷4.2 mg,纯度分别为99.5%和97.3%。所得产物的结构经核磁共振谱(NMR)鉴定。利用该方法可以对甘草中的甘草苷和芒柄花苷进行快速的分离和纯化。     

两个八仙花品种花色苷的提取、鉴定和理化稳定性

为优化八仙花花色苷提取条件，探究具有不同花色可调性的八仙花花色苷组分和理化稳定性差异，初步解释八仙花花色可调性存在差异的原因，该文以花色不可调的‘蒂亚娜(Tijana)’和花色可调的‘拉维布兰(Ravi Brent)’八仙花(Hydrangea macrophylla)为材料，通过L₉(3³)正交试验确定超声波法提取花色苷的最优条件，利用UPLC-Q-TOF-MS法进行花色苷组分的鉴定，分析离体条件下温度、光照、金属离子和糖类对八仙花花色苷理化稳定性的影响。结果表明：(1)花色苷提取的最优条件是‘蒂亚娜’和‘拉维布兰’的乙醇浓度分别为70%和80%,料液比均为1∶20,提取时间均为20 min。(2)二者的主要花色苷组分均为飞燕草素-3-O-葡萄糖苷。(3)八仙花花色苷在温度≤70℃暗处保存效果更好。(4)花色不可调的‘蒂亚娜’八仙花花色苷对光照、糖类和大多金属离子更稳定；只有花色可调的‘拉维布兰’八仙花花色苷加入中低浓度(10～30 mmol·L^-1)Al³⁺后由粉色变为蓝色且稳定性提高，而‘蒂亚...     

" 黑美人" 马铃薯中花色苷提取工艺研究

马铃薯(Solanum tuberosum)是一种重要的粮菜兼用型作物,马铃薯传入我国后产生了许多变种、变型和适合当地种植的地方品种,尤其是块茎的皮色和肉色出现了红色、紫色、黑色品种。"黑美人"马铃薯是甘肃省特有的经航空育种技术培育的新型马铃薯品种,经分析测定"黑美人"马铃薯中花色素含量非常丰富,其富含的花青素还具有抗癌、抗衰老、美容和防止高血压等多种保健作用。因此,"黑美人"马铃薯中花色苷提取工艺的研究,对于花色苷的应用与开发具有重要的研究意义。本研究以甘肃"黑美人"马铃薯为原料,对其所含花色苷提取工艺条件(乙醇浓度,温度,pH,提取时间,料液比,提取次数等)进行优化。研究结果显示最佳提取工艺参数为:乙醇浓度80%,温度75℃,pH 1.0,时间1 h,料液比1:20,提取3次。在优化后的提取工艺条件下,"黑美人"马铃薯的花色苷提取率得到提高,花色苷含量可达到33.05 mg/100g。     

香樟果皮花色苷提取工艺优化及抗氧化研究

为了优化香樟果皮花色苷的最佳提取工艺条件,用乙醇作为提取溶剂,选取提取时间、提取温度、提取剂浓度、料液比、pH五因素,采用Box-Behnken建立三因素三水平模型,用响应面法优化各因素及其相互作用的最佳组合,用Design-Expert 8.0设计回归正交实验;同时用水杨酸比色法和DPPH法,测定了香樟果皮花色苷的抗氧化能力,并比较了不同放置时间对香樟果花色苷稳定性的影响。结果表明:香樟果花色苷最佳提取工艺的回归方程为Y=58.64+2.27A+12.78B+10.18C-14.01A2-11.00B2-7.56C2,R2=0.9796,模型拟合程度良好,在该试验范围内,模型能够准确反映花色苷的提取结果;最佳工艺参数分别为pH1.0、料液比1∶15、乙醇浓度78.59%、提取温度77.14℃、提取时间42.48min,在此条件下香樟果花色苷的得率为67.99mg·100g-1;在一定浓度范围内,香樟果皮花色苷清除羟自由基率和总抗氧化能力均与浓度成正线性相关,回归方程分别为y=0.3388x+13.485(R2=0.9856),y=0.0275x+0.0221,(R2=0.9966)。利用响应面法确定的最佳工艺条件合理,可用于香樟果皮花色苷的提取,同时香樟果花色苷具有良好的抗氧化活性,为天然色素的开发利用提供一定指导意义。