高温胁迫对花生幼苗光合速率、叶绿素含量、叶绿体Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase及Ca2+分布的影响

将水培后盆栽的花生幼苗,置于培养箱42℃高温培养,定时测定幼苗叶光合速率、叶绿素含量和叶绿体Ca²⁺-ATPase、Mg²⁺-ATPase的相对活性,并观察幼叶细胞内Ca²⁺分布的变化。试验结果表明：高温胁迫过程中,光合速率及叶绿素含量都随处理时间的延伸而下降,并呈显著正相关;叶绿体Ca²⁺-ATPase和Mg²⁺-ATPase高温胁迫过程中相对活性呈先升后降趋势,Ca²⁺-ATPase热敏性高于Mg²⁺-ATPase;高温胁迫过程中,Ca²⁺具有从胞外转运到胞质内和叶绿体中的趋势,Ca²⁺能够稳定高温胁迫下叶肉细胞膜和叶绿体的超微结构。     

大豆下胚轴质膜H+-ATPase质子转运的测定

以大豆下胚轴为材料,采用改进的匀浆介质,通过两相法制得具有质子转运活力的高纯度质膜微囊.并且发现冻融处理可以促进质膜微囊的翻转而提高荧光猝灭效率.质子载体和质子转运特性分析表明,由Mg^2＋-ATP引发的荧光猝灭可以被质子载体CCCP恢复,并被质子通道抑制剂DCCD抑制;并且发现质膜H^＋-ATPase专一抑制剂钒酸钠可以完全抑制荧光猝灭,同时发现荧光猝灭依赖于Mg^2＋,并受K^＋刺激,最适pH为6.5.以上证明所测荧光猝灭是由质膜H^＋-ATPase所进行的质子转运引起的.结果同时表明,维持H^＋-ATPase合适构象和提高质膜微囊封闭性是制备具有H^＋转运活力质膜微囊的两个关键因素.     

盐或低温胁迫对花生幼苗下胚轴ATP酶和质膜中PIP2含量的影响

经６％－１２％Ｄｅｘｔｒａｎ Ｔ７０密度梯度离心,获得了纯度较高的７ｄ龄花生幼苗下胚轴质膜和液泡膜制剂。１５０ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ或１０℃低温处理花生幼苗２４ｈ,其下胚轴质膜上的Ｍｇ＾２＋激活的ＡＴＰａｓｅ活性分别提高了３７．６％和１７．２％;Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性分别提高４５．８％和３３．６％。上述盐或低温处理也提高了液泡膜上Ｍｇ＾２＋激活的ＡＴＰａｓｅ活性,分别为对照的１４１．２％和１     

豚鼠精子质膜Ca2+ -ATPase活性与精子顶体反应关系的研究

用生化测定法首次证实豚鼠精子质膜Ca²⁺-ATPase活性在精子获能和顶体反应过程中显著下降.Ca²⁺-ATPase抑制剂利尿酸(ethacrynic acid)抑制质膜Ca²⁺-ATPase活性,但钙调素(50μg/mL)的拮抗剂三氟拉嗪(TFP,200～500μmol/L)对该酶活性没有影响,说明钙调素不直接参与精子依赖于ATP的Ca²⁺的主动泵出.但钙调素与精子的Ca²⁺内流有关,钙调素拮抗剂TFP显著促进精子顶体反应和精子对Ca²⁺的摄入.Ca²⁺-ATPase抑制剂栎皮酮(quercetin)、原钒酸钠(sodiumorthovandate)、利尿磺胺(furosemide)和利尿酸均显著促进豚鼠精子的顶体反应,但却抑制精子对Ca²⁺的摄入,这无法用它们对质膜Ca²⁺-ATPase活性的抑制作用解释.推测这可能是由于Ca²⁺-ATPase抑制剂在抑制质膜Ca²⁺-ATPase活性的同时也抑制了顶体外膜或线粒体外膜上的该酶的活性,导致Ca²⁺在细胞质内的积累,进而通过负反馈机制抑制Ca²⁺进一步内流所致.另外,Ca²⁺-ATPase抑制剂对糖酵解的抑制作用也可能是Ca²⁺在细胞质中积累和抑制精子Ca²⁺摄入的原因.     

镉胁迫下小麦根尖分生细胞中Ca2+分布的变化

运用透射电镜细胞化学方法对镉胁迫下小麦极尖分生细胞中Ca^2 分布的变化进行了观察。在正常生长条件下,Ca^2 广泛分布于细胞质,细胞核,细胞间隙中,特别是液泡中有大量的Ca^2 ;在镉胁迫条件下,细胞质基质内Ca^2 减少,而细胞核,质膜与细胞壁之间,细胞壁中Ca^2 明显增多,细胞液泡化,液泡中仍有较多Ca^2 。结果表明,Cd^2 引起细胞中原有Ca^2 分布发生明显变化。这很可能引起细胞生理功能紊乱。进而影响植物的生长。     

猪脑突触体质膜(Ca2+-Mg2+)-ATPase的分离纯化与性质

以猪脑为材料,经匀浆、差速离心、蔗糖密度梯度离心分离突触体. 低渗破膜得到突触体膜. Triton X-100增溶后,经钙调蛋白亲和层析可得去脂的质膜Ca²⁺-ATPase. 用大体积亲和柱和大体积低Ca²⁺淋洗液淋洗,可得产率、纯度和活性均较高的质膜Ca²⁺-ATPase. 与大豆磷脂保温后,去脂的Ca²⁺-ATPase的水解活力可恢复达3.32 μmol/(mg·min).SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳银染显示单一蛋白质带,分子质量约为140 ku,纯度在90%以上. 不同Ca²⁺浓度明显影响酶的活力.     

绿豆下胚轴质膜微囊的提取和H+-ATPase活性研究

以两相法提取纯化绿豆下胚轴质膜微囊,材料与两相体系重量之比为32:8时,一次洗膜就可以得到纯度较高的质膜微囊.提取缓冲液中牛血清白蛋白的浓度对质膜H -ATPase的潜在活性有影响.质膜H -ATPase水解活性依赖于Mg2 ,Ca2 对酶活性有明显的促进作用.壳梭孢素(fusicoccin,FC)对酶有明显的刺激作用,活体条件最大刺激达到72%,而离体条件下刺激为30%.     

绿豆下胚轴质膜微囊的提取和H+-ATPase 活性研究

以两相法提取纯化绿豆下胚轴质膜微囊,材料与两相体系重量之比为32∶8时,一次洗膜就可以得到纯度较高的质膜微囊。提取缓冲液中牛血清白蛋白的浓度对质膜H+-ATPase的潜在活性有影响。质膜H+-ATPase水解活性依赖于Mg2+,Ca2+对酶活性有明显的促进作用。壳梭孢素（fusicoccin, FC）对酶有明显的刺激作用,活体条件最大刺激达到72％,而离体条件下刺激为30％。     

质膜Ca2+-ATPase的结构与功能

质膜Ca²⁺-ATPase（PMCA）是P型ATPase家族的一员,在真核细胞中主要负责信号刺激后胞内高浓度Ca²⁺的清除扫尾工作,并对维持静息状态下较低Ca²⁺浓度起着重要的调节作用.PMCA的一级结构已被确定,拓扑学结构显示,它有10个跨膜区和3个胞浆功能区.它的4个编码基因可产生4种亚型(PMCA 1～4),这些亚型在功能与分布上存在差异.PMCA的活性可被钙调蛋白等多种因素调节,这与其结构特征息息相关.近年来,PMCA已被证实与脂筏结构有一定关联,它在信号传导和细胞凋亡中的作用也成为目前科学研究的焦点.本文主要对PMCA的结构、亚型和功能的研究现状进行综述.     

盐生杜氏藻质膜ATPase及其对高渗震动的反应

用水溶性多聚物 ( dextran T5 0 0 PEG 335 0 )两相法制备盐生杜氏藻细胞质膜 ,经检测质膜纯度较高 ,原位膜约占 78%。质膜 ATPase的动力学常数 Km 和 Vmax分别为0 5 8mmol L和 4 3 5 9μmol Pi ( mg protein· h) ;最适 p H值是 7 5。质膜 ATPase的活性随Mg Cl2 和 Ca Cl2 浓度的升高而增加 ,但较高浓度的 Mg Cl2 和 Ca Cl2 有轻微的抑制作用 ;KCl促进质膜 ATPase的活性 ,在 1 0 0 mmol L时达到最大 ,高于 1 0 0 mmol L时抑制效应显著。钒酸钠、DES、DCCD和 NEM明显地抑制质膜 ATPase的活性 ;而 Na N3、Na NO3、Na Mo O4和KCN对质膜 ATPase的活性影响不大。高渗震动刺激了质膜 ATPase的活性。     

渗透胁迫对绿豆下胚轴延伸生长及H^＋分泌的影响

－０．９ＭＰａ甘露醇渗透胁迫处理,明显抑制绿豆幼苗下胚轴延伸生长和生长部位Ｈ＾＋分泌,而且随胁迫时间延长抑制程度增大。ＰＭＨ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性在渗透胁迫下先下降而后升高并超过对照水平。     

抗寒剂CR—4对冬小麦幼苗质膜钙泵（Ca^2＋—ATPase）的稳定作用

通过磷酸铈沉淀的细胞化学观察揭示,常温下生长的冬小麦幼苗的Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性主要定位在质膜上,同时,水浸种和抗寒剂浸种的小麦质膜Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性没有差异。然而,小麦幼苗经－７℃冰冻处理１２小时和２４小时后,则表现明显的区别：水浸种的小麦幼苗质膜Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性明显下降,直至完全失活,细胞的精细结构也同时被破坏;而经抗寒剂浸种的小麦幼苗质膜Ｃａ２＋ＡＴＰ酶仍维持较高的活性,细胞结构也保持完整,显示抗寒剂对质膜Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ酶起着明显的稳定作用。     

质膜氧化还原系统中的抑制物及其特性

燕麦（Ａｖｅｎａ ｓａｔｉｖａ）质膜氧化还原系统的酶反应进行一段时间后,酶反应速率逐渐降低到零,加入反应底物ＮＡＤＨ、Ｋ３Ｆｅ（ＣＮ）６ 以及质膜（酶）不能使酶反应速率得到恢复,说明酶被抑制． 酶反应的产物可能为ＮＡＤ＋ 、Ｆｅ２＋ 和Ｈ＋ ,加入ＮＡＤ＋ 、Ｋ４Ｆｅ（ＣＮ）６ 和ＨＣｌ不能使酶活力抑制,因此不是产物反馈抑制． 超速离心除去质膜后,发现抑制物存在于反应介质中,这种抑制物的抑制效果随时间延长而降低,所以此抑制物不稳定． 本文首次报道质膜氧化还原系统中存在抑制物     

低温对杂优水稻及其亲本幼苗中超氧物歧化酶的影响

本试验表明,超氧物歧化酶(SOD)普遍存在于“杂优”水稻及其亲本的叶绿体、线粒体及细胞溶质中。在细胞溶质和线粒体中分离出三条 Cu-Zn-SOD 和一条 Mn-SOD 的同工酶,而叶绿体中只分离出三条 Cu-Zn-SOD 的同工酶。各细胞器以叶绿体中的 SOD 对低温反应最敏感,线粒体次之。杂交后代(F_1)叶绿体的 SOD 对低温的敏感性接近母本。     

盐生车前根液泡膜ATPase对盐胁迫的响应

用蔗糖密度梯度离心法从对照和盐处理的盐生车前根中分离出液泡膜,并对其ＡＴＰａｓｅ某些特性进行了比较研究,蔗糖连续密度梯度离心后ＮＯ＾－３敏感的ＡＴＰａｓｅ活性主要分布在２２％－３５％蔗糖浓度之间,用不连续密度梯度离心法从２２％－３５％界面收集到的膜主要源于液泡膜。因为,这种膜ＡＴＰａｓｅ活性受到Ｃｌ＾－的促进和ＮＯ＾－３的强抑制,而叠氮化钠和正钡酸钠只抑制酶活性的１０％左右,最适ｐＨ８．０。     

低温胁迫对水稻幼苗PEP羧化酶的影响

水稻幼苗经低温(0℃)处理后,叶片中PEP羧化酶活性明显地降低.Km值增大。经1—2天低温处理者,增加反应底物的浓度,有减少PEP羧化酶活性降低的幅度;当低温伤害严重时(0℃4天),这种效应则消失。这些结果表明:水稻叶片中PEP羧化酶对低温反应是敏感的,其活性的下降是由于该酶对底物的亲和力的降低。     

外源Ca~(2 )预处理对高温胁迫下辣椒叶片细胞膜透性和GSH、AsA含量及Ca~(2 )分布的影响

以辣椒 (Capsicum annuum)幼苗的叶片为材料 ,研究了外源 Ca2 预处理对热胁迫下细胞质膜透性和谷胱甘肽 (GSH)、抗坏血酸 (As A)含量变化及 Ca2 分布的影响。结果表明 :外源 Ca2 预处理能减轻热胁迫引起的细胞膜破坏 ,能够减少叶片中 GSH和 As A的破坏。热胁迫后 ,Ca2 具有从胞外转运到胞质内和叶绿体中的趋势 ;外施Ca2 预处理能够明显增加细胞间隙、液泡和叶绿体中的 Ca2 颗粒密度 ,能够稳定热胁迫下叶肉细胞膜和叶绿体的超微结构。结果表明 ,外施 Ca2 预处理可能通过改变细胞内外的 Ca2 分布 ,减轻热胁迫对叶肉细胞的伤害     

玉米对渗透胁迫的反应和生理适应

利用不同渗透势的培养液模拟土壤干旱条件,研究了玉米杂交种“中单2号”在此条件下的生长和生理的变化。实验表明,各指标对于渗透胁迫的变化敏感性顺序为叶片延伸速率、叶水势、脯氨酸含量>净光合速率>相对透性。玉米幼苗在渗透胁迫下具有一定的生理适应能力,表现在一定的渗透胁迫范围内随胁迫时间的延长,生长、生理变化有趋于缓和或恢复的趋势。