海南岛4市县人群口腔假丝酵母菌分布情况的初步调查

目的：调查海南岛海口、三亚市、五指山市和保亭县四市县人群口腔假丝酵母菌的分布情况,为口腔假丝酵母菌分子生物学和遗传学特点研究提供基础资料。方法：分离出的假丝酵母菌经过菌落特征、制片乳酸酚棉蓝染色、芽管形成试验、厚膜孢子形成试验等初步鉴定,并用科玛嘉显色培养基培养确定。结果：海口、三亚市、五指山市和保亭县人群口腔假丝酵母菌总分离率为25．23％．其中白假丝酵母菌占54．48％,光滑假丝酵母菌占14．04％,热带假丝酵母菌占11．06％,克柔假丝酵母菌占9．36％。住院病人和健康人口腔假丝酵母菌的分离率分别为39．95％和11．61％,差异有统计学意义（P〈0．01）,结论：海南地区人群口腔假丝酵母菌的总分离率高于国内其它省份,分离出的假丝酵母菌以白假丝酵母菌为首位,病人口腔假丝酵母菌分离率明显高于健康人。     

伏曲酵母菌的分类鉴定及来源分析的研究

目的:统计分析酵母菌的来源,为大曲微生物物种及其来源变化提供基础资料.方法:利用Biolog微生物自动分析系统进行精确鉴定,并通过统计分析得出微生物菌种的来源.结果:从伏曲样品中分离纯化出7株酵母菌J-1,2,3,4,5,6,7,利用Biolog微生物自动鉴定系统进行鉴定,确定其分别为白吉利丝孢酵母A、无名假丝酵母菌、汉逊德巴利酵母C、海隐球酵母菌、东方伊萨酵母菌、解脂耶罗威亚酵母菌、皱落假丝酵母菌.这些物种主要来源于原料本身和空气,原料为了人室大曲提供了J-1,2,3三种酵母菌,其比例为25.45%、19.23%和7.5%.结论:空气巾含有大曲中所有的酵母菌的种类,曲房空气中的酵母菌数量和种类均较多.     

浙江雁荡山山脉叶栖酵母菌资源与物种多样性

对北雁荡山、中雁荡山、南雁荡山、西雁荡山和东雁荡山等广阔区域内的叶栖酵母菌资源进行考察,旨在弄清雁荡山山脉叶栖酵母菌资源和多样性。采用PDA平板对雁荡山地区的叶栖酵母菌资源进行分离和纯化,根据酵母菌培养物26S rDNA D1/D2序列和系统发育关系明确酵母菌的分类地位,分析该地区叶栖酵母菌群落的多样性、组成和分布情况。结果发现,分离自雁荡山山脉的1118株叶栖酵母菌可以被鉴定为56个已知类群和19个疑似新种,其中38种酵母菌在该地区比较常见。常见的酵母菌类群中,包括Derxomyces属5种,Sporobolomyces属3种,Bannoa、Bulleribasidium、Rhodosporidiobolus、Symmetrospora、Taphrina、Tilletiopsi和Udeniomyces属各2种,Bullera、Coniochaeta、Coniosporium、Cryptococcus、Elsinoe、Erythrobasidium、Fellozyma、Golubevia、Kockovaella、Kondoa、Leucosporidium、Moesziomyces、Oberwinklerozyma、Phyllozyma、Ruinenia和Saitozyma属各1种。根据常见酵母菌类群的相对频率,在该地区分离到的叶栖酵母菌中Derxomyces mrakii具有明显分布优势,并探讨了Derxomyces mrakii株间26S rDNA D1/D2序列的稳定性和变异幅度。根据雁荡山地区常见叶栖酵母菌组成和相似程度,可以推测地理上相近地区的酵母菌物种分布具有更大相似性。基于雁荡山山脉常见叶栖酵母菌种类和数量而绘制出的物种累积曲线,证明雁荡山地区绝大多数的叶栖酵母菌种类已经被分离到,研究结果可以真实反映该地区叶栖酵母菌资源和物种多样性的存在状况。     

假丝酵母菌尿路感染临床观察及耐药性分析

目的 调查和分析尿路感染假丝酵母菌的分布及耐药情况,为临床合理选用抗菌药物提供依据.方法 尿液采用经典型浸片Uricult培养,使用ATB-Fungus板条进行药敏试验,利用WHONET 5.6对浙江萧山医院2008年1月至2012年12月间尿培养分离菌株及药敏结果进行回顾性分析.结果 共分离出假丝酵母菌273株,其中白假丝酵母菌占37.4％,光滑假丝酵母菌28.9％、热带假丝酵母菌27.8％;临床分离数量以ICU(58)最多,其次为泌尿外科(50)和内科(49).药敏结果显示:两性霉素B、5-氟胞嘧啶对白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌仍保持较强的抗菌活性,敏感率≥98.6％,伏立康唑敏感率≥86.3％.结论 尿路感染分离得到的假丝酵母菌以白假丝酵母菌为主,其次为光滑假丝酵母菌和热带假丝酵母菌;两性霉素B、5-氟胞嘧啶对假丝酵母菌保持较强的抗菌活性,是治疗假丝酵母菌感染的首选药物.临床应重视假丝酵母菌的培养和其药敏试验,根据药敏结果科学合理使用抗真菌药物.     

医院内假丝酵母菌感染菌种的分布及耐药分析

目的了解医院内假丝酵母菌感染菌种的分布及抗真菌药物的耐药谱,为临床抗真菌治疗提供正确数据。方法采用VITEK-32微生物自动鉴定仪进行假丝酵母菌菌种的鉴定,同时用ATB FUNGUS真菌药敏条作药敏试验。结果从住院患者的血液、痰、尿、分泌物、胆汁等标本中共检出真菌505株。其中白假丝酵母菌281株,热带假丝酵母菌124株,光滑假丝酵母菌21株,季也蒙假丝酵母菌17株,近平滑假丝酵母菌16株,克柔假丝酵母菌10株,皱折假丝酵母菌8株,异常汉逊假丝酵母菌6株,5氟-胞嘧啶和两性霉素抑菌效果最好,其耐药率分别为2.8%和3.4%。其他4种抗真菌药物制霉菌素、氟康唑、伊曲康唑和酮康唑的耐药率分别为6.1%、13.7%、9.3%和28.3%。结论医院假丝酵母菌感染耐药率逐年上升,非白假丝酵母菌感染明显增加。氟康唑对白假丝酵母菌有很强的抗菌活性且毒副作用小。假丝酵母菌感染的迅速增加同广泛应用超广谱抗菌药物、激素及免疫抑制剂等有关。假丝酵母菌感染死亡率高,因此早期诊断及有效性治疗是减少死亡率的关键。     

酱香型白酒酿造酒醅中酵母菌多样性研究

为解析酱香型白酒酿造酒醅中酵母菌的菌群结构,获取酒醅中的主要酵母菌,采用高通量测序法分析酱香型白酒酒醅中酵母菌多样性及主要功能菌群,同时采用可培养分离方法获取酒醅中酵母菌活性菌株。从酱香型白酒下沙至五轮次酒醅中共检出59个属、129个种的酵母菌,分离得到酵母菌活性菌株41种,检测到的酵母菌种类与获得的酵母菌活菌在各香型白酒中最多。不同时期酒醅中的酵母菌种类和数量差异明显,其中下沙、造沙轮次以Pichia kudriavzevii为绝对优势酵母菌;一至五轮次随着轮次的递增,酒醅中优势酵母菌的种类增多,其中主要的优势酵母菌有Pichia kudriavzevii、Pichia manshurica、Zygosaccharomyces bailii、Saccharomyces cerevisiae、Candida apicola。酱香型白酒酒醅中蕴藏着极其丰富的酵母菌资源,对酵母菌菌群结构的解析有助于科学地认识酱香型白酒酿造过程中产酒与风味代谢机理,为发酵过程的调控提供一定依据。     

羊卓雍措水体可培养酵母菌多样性及其与理化因子相关性

【目的】开展羊卓雍措水体可培养酵母菌多样性研究,探究影响其多样性的主要理化因子。【方法】采用膜过滤平置培养法分离纯化酵母菌,并结合rRNA ITS区域序列分析与经典分类法对酵母菌菌株进行鉴定。运用SPSS 20.0和CANOCO 5分析可培养酵母菌多样性及其与理化因子之间的关系。【结果】羊卓雍措水体可培养酵母菌为16个属25个种,优势属为Vishniacozyma,优势物种为Vishniacozyma victoriae。Pearson相关系数显示,pH、电导率、总溶解固体量、盐度与各样点可培养酵母菌种数和属数呈显著正相关;总磷与各样点及各区域可培养酵母菌属数呈显著负相关,与各样点种数呈显著负相关。冗余分析显示,pH和总磷是影响羊卓雍措水体可培养酵母菌分布的主要环境因子。【结论】羊卓雍措水体酵母菌资源比较丰富且存在明显的空间异质性,人类活动对酵母菌分布有较大影响。酵母菌分布与人类活动的关系值得进一步研究。     

口腔黏膜真菌鉴定方法的比较

比较常见用于黏膜真菌菌种鉴别的多种方法,探寻最佳的鉴别方法。采集230例普通人群口腔黏膜样本,分别用玉米吐温-80培养观察厚膜孢子法、糖发酵生化反应法、CHROMagar假丝酵母菌显色培养基法、ITS基因的PCR-RFLP(聚合酶链反应-限制性片段长度多态性)法、ITS测序菌种鉴定法,鉴别真菌各菌株。结果显示:有56例菌株至少通过1种方法检出真菌;玉米吐温-80分离培养假丝酵母菌37株;50例菌株ITS基因测序共鉴定出8个菌种,白假丝酵母菌(C.albicans)29株,近平滑假丝酵母菌(C.parapsilosis)10株,热带假丝酵母菌(C.tropicalis)5株,Candida metapsilosis 1株,Lodderomyces elongisporus 1株,克柔假丝酵母菌(Candida krusei)1株,乙醇假丝酵母菌(C.ethanolica)1株,季也蒙毕赤酵母菌(Pichia guilliermondii)2株;CHROMagar假丝酵母菌显色培养基法鉴定出3种菌株,分别是白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌;PCR-RFLP法检出5种菌株,分别是白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、季也蒙毕赤酵母菌、克柔假丝酵母菌,与基因的测序鉴定一致率为91%;糖发酵生化反应法阳性标本占被检出真菌例数的46.4%(26/56)。结果表明:ITS基因的测序法可以准确鉴定真菌各个菌种;PCR-RFLP法能鉴定常见的菌种,但操作繁琐;CHROMagar假丝酵母菌显色培养基法能快速准确鉴别3种常见假丝酵母菌菌种;玉米吐温-80可以准确培养鉴别白假丝酵母菌;糖发酵生化反应法,缺乏足够的敏感度和特异性,难以准确鉴别各个菌种。     

48株临床分离假丝酵母菌DNA异质性分析

应用随机扩增多态性DNA技术(RAPD)对48株假丝酵母菌临床菌株进行PCR扩增,并对扩增产物的指纹图谱进行分析,结果显示:48株假丝酵母菌中白假丝酵母菌35株,非白假丝酵母菌13株,引物1和引物2将来源不同的35株白假丝酵母菌分成4型和6型,且RAPD技术可将白假丝酵母菌鉴定至种,并可分辩同种菌的不同型别,是假丝酵母菌致感染、追踪病原的分子流行病学研究有效方法。     

“酵母菌发酵实验”改进

通过对限制酵母菌发酵的温度、酵母菌浓度、蔗糖浓度、液体量等限制因素进行研究,通过正交实验和方差分析发现,温度和液体量对酵母菌发酵影响非常显著,酵母菌浓度影响显著,而蔗糖浓度影响不大,并得出酵母菌发酵实验的最佳条件为:蔗糖浓度5%,酵母菌浓度3%,温度50℃,液体量300 m L,发酵所需时间为4 min 30 s。同时对实验装置进行了改进,使得检测二氧化碳更加简便。用酸性重铬酸钾检测酒精使整个实验更具科学性。