镉对平菇菌丝生长及同工酶表达的影响

采用液体培养研究了不同浓度镉（Cd）处理7d对平菇（Pleurotus ostreotus）菌丝体生长及其同工酶表达的影响.结果表明,50 μmol/L Cd处理对平菇菌丝生长抑制率为55.6%,2000μmol/L Cd为菌丝生长致死浓度.同工酶活性电泳图谱显示,Cd处理不仅改变酯酶（EST）、乳酸脱氢酶（LDH）、过氧化物酶（POD）和超氧化物岐化酶（SOD）同工酶带数,而且也影响各酶带的表达强度.50 μmol/L和100μmol/L Cd处理分别诱导出2条和3条新的POD同工酶带,而抑制一条分子量较大的POD酶带的表达,但明显增强总的POD活性.正常生长的平菇菌丝体LDH同工酶谱只出现2条酶带,50 μmol/L以下Cd处理不影响其同工酶的表达,100 μmol/L Cd处理组2条同工酶带均消失.50和100μmol/L Cd处理能够显著增强SOD活性,且诱导2条SOD同工酶表达.100μmol/L及其以下浓度Cd处理均能提高EST的活性,这可能具有加速细胞内酯类化合物水解而增加羧基的数量以螯合更多的游离Cd离子而解Cd毒的作用.Cd浓度在50μmol/L以下时,随着处理浓度的增加,对金属硫蛋白的诱导作用呈逐渐增强的趋势,而100 μmol/L Cd的诱导作用减弱.     

6-苄基腺嘌呤对平菇和香菇菌丝体4种胞外酶活性的影响

在马铃薯液体培养基中,通过活加不同剂量的6－苄基腺嘌呤（6－BA）,测定了平菇和香菇菌丝体4种胞外酶活性的变化。结果表明,低浓度的外源6－BA对平菇、香菇菌丝体4种胞外酶活性都有促进作用,高浓度时则逐渐抑制酶活性。其中,培养液浓度为1．5mg/100mL时,它们扔包外粉酶（Amy）、羧甲基纤维素酶（CMC）、过氧化氢酶（CAT）的活性最高;而它们的胞外蛋白酶的最适浓度为0．5mg/100mL。     

红豆草体细胞胚胎发生早期过氧化物酶和酯酶同工酶酶谱变化

红豆草下胚轴切段接种于含1mg/l BA,1mg/l KT的LS培养基上,通过筛选和繁殖由一块外植体而来的淡黄色愈伤组织,而得到生理状态比较一致具有较高胚性发生能力的非胚性愈伤组织,将其转移到含1mg/l BA的LS培养基上后可诱导体细胞胚眙发生。在体细胞胚胎发生早期发现过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶酶谱均有规律性变化。过氧化物酶同工酶酶谱在胚性培养的第10天,两条明显的A_1、A_2带消失。酯酶同工酶各酶带之间酶活性比例在胚性培养过程中变化很大,培养后期酶带变得不明显或酶带数下降。说明胚性发生过程遗传信息的表达有选择性并为激素所调控。     

香菇和侧耳属间原生质体的电融合研究

从培养在液体培养基中的香菇、美味侧耳和平菇的单核菌丝用酶法分离了原生质体。施加0.5MHz、500PV/cm的正弦波和μs、6000PV/cm方形脉冲的电场诱导下使其电融合。电融合后的融合子和原生质体在固体培养基上植板培养成菌落。在显微镜下检查融合子菌株菌丝的锁状联合选出从融合子长成的菌株。香菇和美味侧耳的融合菌株产生频率为61.53%,香菇和平菇的融合菌株产生频率为32.58%。根据融合菌株与亲本的拮抗作用和他们的过氧化物同工酶和酯酶同工酶的电泳酶谱与其亲本酶谱的不同,证实这些融合菌株是从融合的异核体生长成的。同时讨论了电融合方法和结果。     

两种光合细菌生物转化槲寄生培养液菌体中几种同工酶的变化

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对两种光合细菌的生物转化槲寄生培养液中菌体的蛋白质和几种同工酶进行研究,并以纯光合细菌培养液中菌体作对照。结果表明,光合细菌生物转化槲寄生过程中,两种光合细菌的蛋白质、酯酶同工酶和过氧化物酶同工酶均发生改变,某些蛋白质、酯酶和过氧化物酶的合成受到抑制,并有新的蛋白质、酯酶和过氧化物酶生成;超氧化物歧化酶的表达未明显改变。由此可见,槲寄生能诱导光合细菌合成新的酯酶和过氧化物酶,这些诱导酶可能参与了槲寄生的生物转化。为光合细菌生物转化槲寄生转化机理的研究及槲寄生在抗肿瘤领域的进一步应用奠定了基础。     

菊花不同生长阶段不同器官POD和EST同工酶比较

采用过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)2个酶系统的12个同工酶位点,分析了4个菊花品种营养生长和生殖生长阶段不同器官(嫩叶、老叶、嫩茎、木质化茎)的同工酶变化.结果表明:(1)4个品种共有16种POD酶带,15种EST酶带;(2)菊花的POD和EST具有组织特异性和阶段特异性,其中以嫩叶的酶带最多,其次为老叶,再次为嫩茎,而木质化茎的酶带最少;(3)与生殖生长阶段相比,营养生长阶段的POD酶带更清晰,更整齐,分离更好,但生殖生长阶段的EST同工酶比营养生长阶段的更清晰;(4)营养生长阶段的嫩叶最适合用于菊花POD同工酶分析,而EST同工酶研究宜取生殖生长时期的嫩叶.     

铜陵牡丹和垫江牡丹的同工酶分析

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对铜陵牡丹和垫江牡丹进行过氧化物酶（POD）和酯酶（EST）同工酶的测定分析。结果显示,两个品种牡丹的POD同工酶酶谱共栓出7条酶带,其中铜陵牡丹分离带为7条,垫江牡丹为3条,铜陵牡丹多出4条特有酶带,且活性较强;EST酯酶同工酶中,两种牡丹共有酶带为5条,活性上略有差异,铜陵牡丹特有2条酶带,垫江牡丹特有1条酶带。     

阿魏菇耐高温转化子测定和同工酶分析

经过电击新疆阿魏菇(Pleurotus ferulae Lanzi)原生质体转化平菇(Pleurotus ostreatus)总DNA获得3株转化子,在高温生长条件下对转化子及其母本、父本测定菌丝长度,并采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶分析。研究结果表明:转化子生长速度远大于母本而趋向于父本。电泳共获得6种过氧化物酶谱带,21种酯酶谱带。根据酶谱分析得知3株转化子酶带数与母本相似,但部分酶带亮度大于母本,与父本较为相似,与菌丝结果一致。酯酶酶谱聚类分析结果与传统分类学结果一致。     

空间条件对草地早熟禾植株过氧化物同工酶和酯酶同工酶的影响

将草地早熟禾(Poa pratensis L.)巴润(baron)干种子分别进行蒸馏水和硼酸处理后利用返回式卫星搭载,以未搭载干种子作为对照.对不同处理植株过氧化物同工酶(POD)和酯酶同工酶(EST)酶谱进行分析.结果表明,空间条件处理引起部分草地早熟禾植株POD和EST的差异,在酶带位置、数量、强弱等方面与对照相比出现了一定的变化,说明空间条件作用后草地早熟禾种子后代植株产生了一定变异.     

盐胁迫下胡杨愈伤组织生理生化特性

目的：探讨胡杨愈伤组织的耐盐性与生理生化指标的关系。方法：不同浓度NaCl胁迫下,对胡杨愈伤组织的丙二醛（MDA）含量、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及酯酶同工酶、过氧化物酶同工酶、超氧化物歧化酶同工酶酶谱进行研究。结果：随着盐浓度的增加,丙二醛（MDA）含量逐渐升高;从三种保护酶活性来看,过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性均呈先上升后下降的趋势,在70mmol/L NaCl胁迫下达到最高值,POD、CAT酶活分别为2748u/g．min和152u/g．min,分别比对照高104％和72％;超氧化物歧化酶（SOD）活性则呈先降低后稍上升的趋势,总体均比对照低。过氧化物酶同工酶的第2、3条酶带在70mmol/L NaCl胁迫下颜色最深,且酶带较宽;超氧化物歧化酶同工酶的第1条酶带仅在未经盐胁迫时存在,说明该酶带所代表的酶对盐很敏感;第4条酶带随盐胁迫浓度加大先消失后出现,可能是愈伤组织逐渐适应盐胁迫的结果。结论：经盐胁迫的胡杨愈伤组织中,POD和CAT酶主要起保护作用;结合同浓度盐胁迫下愈伤组织的形态观察,总体上看,胡杨愈伤组织能较好地耐受70mmol/L NaCl。     

洋桔梗体细胞胚性愈伤组织诱导过程中超氧化物歧化酶和酯酶变化

通过转移洋桔梗非胚性愈伤组织到含有1.0mg/L2,4-D的MS培养基(ecIM)上诱导了洋桔梗胚性愈伤组织形成,而非胚性愈伤组织在含1.0mg/L2,4-D和0.5mg/LKT的MS培养基(necSM)上继代培养。本研究比较分析了洋桔梗愈伤组织在ecIM和necSM上的超氧化物歧化酶(SOD)活性及其同工酶酶谱、酯酶同工酶酶谱随着培养天数的变化。实验结果表明在ecIM和necSM上培养的洋桔梗愈伤组织的超氧化物歧化酶(SOD)活性在培养早期较低,然后随着培养天数增加而升高,维持在较高水平上,但SOD活性变化无明显规律性;另一方面,SOD同工酶在第4天后出现一新的同工酶谱带;此外,在ecIM和necSM上培养洋桔梗愈伤组织的酯酶(EST)同工酶在培养至第16~20天期间呈现显著缺失。     

核磁共振,磁化水对双孢蘑菇176菌株同工酶的影响

用普通水制备马铃薯葡萄糖培养基（ＰＤＡ）和用磁化水制备马铃薯葡萄糖培养基（ＭＰＤＡ）,分别培养双孢蘑菇１７６ 菌株。用不同磁场强度的核磁共振处理这些双孢蘑菇的菌丝体,以不处理为对照（ＣＫ）。取磁场处理后５ 小时的菌丝体进行酯酶同工酶（ＥＳＴ）,多酚氧化酶同工酶（ＰＯ）酶谱分析,并转接ＰＤＡ 和ＭＰＤＡ上培养１４ 天,再次分析同工酶谱。结果表明：０．１Ｔ磁场强度对双孢蘑菇ＥＳＴ和ＰＯ 产生的影响最明显,可使某些酶带活性降低或消失,某些酶带活性增强甚至诱发出ＰＯ的新酶带。但这些同工酶酶谱所发生的变化,需要培养较长时间才能明显表现出来。核磁共振处理后转接到ＰＤＡ 上培养,会使已发生变化的同工酶,变化更显著,用ＭＰＤＡ 培养双孢蘑菇ＥＳＴ酶谱发生改变,但是能使ＰＯ的酶活性增强。     

矿质营养与其他生长物质对荷叶离褶伞菌丝生长的影响

1mg/mLKCl促进荷叶离褶伞菌丝生长;5或10mg/mLNaCl、5或10mg/mLMgSO4、5或10mg/mLKCl、10mg/mLH2PO4和1mg/mLCaSO4抑制菌丝生长;0.8mg/mL的MnSO4和CuSO4以及0.5mg/mLFeSO4、0.2或0.5mg/mLCoCl2和0.2、0.5或0.8mg/mLZnSO4促进菌丝生长;0.5或0.2mg/mLCuSO4、0.2或0.5mg/mLMnSO4及0.8或0.2mg/mLFeSO4对菌丝生长的影响不显著;维生素B6、维生素C、维生素PP和维生素B1可促进菌丝生长,在含有10μg/L维生素B6的培养基上菌丝生长速度最快,但维生素C试用浓度较低(50μg/L)时对菌丝生长的影响不显著;吲哚丁酸、吲哚乙酸、奈乙酸对菌丝生长具有促进作用,但0.1、0.5或1.0μg/L赤霉素对菌丝生长的影响不显著。     

三种鹅膏菌培养条件及所产肽类毒素的比较研究

以外生菌根菌鹅膏菌属三个种Amanita muscaria,A.pseudoporphyria和A.fritillaria为研究材料,以生长速率为评价指标,对其最适生长温度、pH值、光照、培养基、C及N源的利用等基本培养条件及所产肽类毒素进行了比较研究。研究结果表明,三种菌株最适生长温度有差异,A.pseudoporphyria和A.fritillaria的最适温度为28℃,A.muscaria的最适温度为22℃;A.muscaria菌丝体生长的pH值范围为5-7,另外两个菌株的pH值范围为3-6;24h光照、12h光暗交替和24h黑暗对鹅膏菌的生长速率影响不大;SPDM培养基和MMN培养基都适合三种菌株的生长,但对于A.muscaria来说PDM培养基更适合其生长。鹅膏菌能够利用比较广泛的C、N源,但三个种在利用的C、N源种类上有一定的差别。通过抑芽法实验和HPLC分析分别表明三种鹅膏菌所含肽类毒素在种类和含量上有所不同,但都对绿豆发芽有一定的抑制作用。A.pseudoporphyria和A.fritillaria菌丝体中α-amanitin的含量分别为35.56μg/gDCW(drycellweight细胞干重)和26.02μg/gDCW,不含有phalloidin和β-amanitin;A.muscaria菌丝体中没有检测到α-amanitin、β-amanitin和phalloidin。结果表明供试的三种鹅膏菌在基本培养条件及所产肽类毒素方面存在种水平上的差异。     

常见元素及其浓度对榆干离褶伞菌丝生长的影响

为研究常见元素对榆木离褶伞菌丝生长的影响,通过其在含有不同离子浓度的PDA培养基中生长速度的观察,探讨不同元素及其浓度对榆木离褶伞菌丝生长的影响。结果表明:1 mg/mL的Mg(Ac)2、KH2PO4和CaO促进菌丝生长;5,10 mg/mL的Mg(Ac)2、CaO,10mg/mL的Na2SO4、NaCl抑制菌丝生长;其他种类及浓度的离子对菌丝生长的影响不显著。     

不同因子对山药愈伤组织诱导的影响

研究了基因型、外植体、植物激素和光暗等因子对山药愈伤组织诱导的影响。结果表明 :(1)不同基因型山药均能诱导形成愈伤组织 ,但出愈率不同 ,其排列顺序是 :“4 7号”山药 >铁棍山药 >太谷山药。 (2 )不同外植体在同一种培养基上的诱导率存在差异。同一外植体在不同植物激素浓度配比中 ,诱导率也不同。叶片、茎段、零余子的最佳激素配比均为 6 - BA2 (mg/ L,以下单位同 ) +NAA2 ,诱导率分别为 53.3%、 6 5.6 %、 10 0 % ,茎尖的最佳激素配比为 6 - BA2 +NAA0 .2 ,诱导率为 93.3%。 (3)植物激素在愈伤组织诱导过程中起关键的作用。细胞分裂素与生长素组合使用优于单一激素。二者的浓度配比不同 ,出愈率也不同。 (4 )光暗条件对不同外植体愈伤组织诱导的影响不同。暗培养有利于零余子的诱导 ,而光培养则有利于叶片的诱导。     

八角莲组织培养研究

以八角莲种子为外植体,MS为基本培养基,通过不同的激素种类和浓度配比,对八角莲进行组织培养研究。结果表明:种子在MS+BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+GA34.0mg/L培养基上容易萌芽,发芽率为72.4 %;培养基MS+BA10.0mg/L+GA30.5 mg/L可诱导种子幼苗形成丛生芽;继代繁殖在MS+BA(8.0～10 .0)mg/L+GA32 .0mg/L与低浓度BA或无BA的培养基上进行循环培养效果较好;MS+NAA1.0 mg/L+AC0.2g/L适宜诱导生根获得再生植株,生根率100%。带叶叶柄在MS+BA1.0mg/L+2-ip(0.5～1.0) mg/L+NAA0.02 mg/L培养基上可诱导愈伤及根,直接形成再生植株。生根苗移栽成活率90 %。     

A two-stage pretreatment of seedlings improves adventitious shoot regeneration in sugar beet (<Emphasis Type="Italic">Beta vulgaris</Emphasis> L.)

The effects of a two-stage pretreatment of seedlings on the subsequent shoot regeneration capacity were investigated. Pretreated seedlings were obtained by germinating seeds on three different germination media and then further culturing on six different growth media. Lamina and petiole explants of two sugar beet (Beta vulgaris L.) breeding lines were then excised from the pretreated seedlings and cultured on five different shoot regeneration media. In both breeding lines, petiole explants produced significantly more shoots than lamina explants with higher frequencies of organogenic capacities; petiole explants of the lines M1195 and ELK345 produced a mean of 2.1 and 2.7 shoots per explant while their lamina explants produced 1.5 and 2.2 shoots per explant, respectively. A genotypic variation was evident as the line ELK345 was more productive for shoot development from both types of explants. In overall comparisons of different germination, growth and regeneration media, germination medium was most effective when supplemented with 0.5 mg/l 6-benzyladenine (BA) while both growth and regeneration media were most productive when contained a combination of 0.25 mg/l BA and 0.10 mg/l indole-3-butyric acid (IBA). Of all the treatments tested, the highest mean number of shoots per explant (8.3 shoots) and frequency of organogenic explants (75.6%) were obtained on regeneration medium supplemented with 0.25 mg/l BA and 0.10 mg/l IBA when petiole explants of the line ELK345 were excised from the seedlings that had been germinated on medium containing 0.5 mg/l BA followed by further growth on medium containing 0.25 mg/l BA and 0.10 mg/l IBA.     

蔗糖和多效唑对试管生姜形成的影响

用不同浓度的蔗糖、NAA、Ca3(PO4)2、多效唑(Pac)和光照条件对江西兴国九山生姜(ZingiberofficinaleRosc.cv.Jiushan)进行试管姜的诱导,成功诱导出试管姜。结果表明,诱导试管姜的最佳培养基为:MS 6-BA0.2mgL-1 NAA0.5mgL-1 Ca3(PO4)22.5mgL-1 Pac2.5mgL-1 蔗糖8%;适宜浓度的Pac、Ca3(PO4)2、蔗糖有利于试管姜诱导;NAA和6-BA对试管姜的诱导不起促进作用;延长光照时间有利于试管姜膨大。