PEG(NH4)2SO4双水相体系在加杨叶总黄酮萃取分离中的应用

目的:寻找加杨叶粗提液中的总黄酮的有效方法.方法:利用双水相体系萃取分离、紫外分光光度法直接测定.结果:萃取分离加杨叶总黄酮的最佳双水相体系是25%PEG 400与12%(NH4):SO4,最佳萃取条件为:pH-9,NaCl的添加量为3%,粗提液3mL,温度25℃.结论:该方法的相对标准偏差(RSD)(≦) 0.28%(n=5),具有良好的精密度和选择性,为黄酮类化合物萃取分离的一种有效方法.     

响应面法优化白头翁总黄酮提取工艺

采用无水乙醇C2H5OH/硫酸铵(NH4)2SO4双水相体系分离白头翁中的黄酮。确定双水相体系组成为21%C2H5OH/22%(NH4)2SO4,通过单因素试验和Box-Benhnken实验设计探讨黄酮粗提液质量分数、NaCl质量分数和pH值对萃取效果的影响。确定最佳萃取条件为:黄酮粗提液质量分数12.5%,NaCl质量分数1.5%,pH 5.99,在此条件下,白头翁总黄酮主要分布在上相,萃取率可达73.6%。     

利用双水相萃取技术分离纯化尿激酶

通过研究双水相萃取系统的各种影响因素：乙醇／（NH4）2SO4的组成比例、pH值、无机盐的加入、粗酶的浓度等,探索以乙醇／（NH4）2SO4组成的双水相萃取体系纯化尿激酶的最佳条件。建立以乙醇／（NH4）2SO4组成的双水相萃取体系分离纯化尿激酶的新途径。结果表明：双水相萃取系统冰乙醇浓度为65％,（NH4）2SO4浓度为10．0％,pH8．0,酶加入量为30％,且不加入任何其他无机盐的条件下,尿激酶的纯化倍数可达到9．2倍,回收率最高达92％。     

(乙醇+丙酮)/硫酸铵二元双水相萃取分离螺旋藻中β-胡萝卜素

采用(乙醇+丙酮)(v/v=1:2)/硫酸铵双水相体系分离螺旋藻β-胡萝卜素,确定其体系组成为15%(乙醇+丙酮)(v/v=1∶2)和24%硫酸铵。通过单因素和Box-Behnken实验探讨β-胡萝卜素粗提液、p H、萃取温度对萃取效果的影响。结果表明:β-胡萝卜素粗提液质量分数为6%、体系p H 8.0、萃取温度30℃时,萃取率可达94.55%。研究结果为β-胡萝卜素提取分离提供了新途径,双水相萃取技术在天然β-胡萝卜素提取中具有良好应用前景。     

Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶的双水相萃取和酶学性质

初步研究双水相体系对Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶的萃取分离效果,选用PEC4000／NaH2 PO4作为戍相系统进行系统研究,考察影响脂肪酶萃取的各种因素（如PEG相对分子质量及质量分数、NaH2PO4质量浓度、pH）,并采用正交实验进一步优化实验条件,确定双水相萃取体系为PEG质量分数为30％、NaH2PO4质量分数为20％、体系pH为6,在此条件下Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶经硫酸铵沉淀和双水相萃取两步纯化的纯化倍数达到最大,较Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶粗酶纯化了22倍。Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶纯酶为低温碱性脂肪酶,最适反应温度为15oC,最适pH为9．5,相对分子质量为3．58×10^4。     

双水相萃取丽江山慈菇中的秋水仙碱

建立了由聚乙二醇(PEG6000)与(NH4)2SO4形成的双水相体系萃取丽江山慈菇中秋水仙碱的新方法。考察了PEG分子量、PEG的浓度、(NH4)2SO4的浓度和pH值对双水相成相及秋水仙碱萃取率的影响,并结合HPLC对萃取相进行检测。结果表明:PEG6000质量分数为8%,(NH4)2SO4质量分数为20%,pH为7.0时,双水相体系对丽江山慈菇粗提液中秋水仙碱萃取率达82.09%,富集倍数为6.84倍。此方法可用于丽江山慈菇中秋水仙碱的初步分离富集,且操作简单,绿色无污染。     

番石榴叶中总黄酮最佳提取条件的探讨及其抑菌作用的研究

设计正交实验,采用超声波法从番石榴叶中提取总黄酮,综合各因素确定最佳提取条件为乙醇浓度40％,固料比（番石榴干叶：浸提剂）=1g：60mL,浸泡25h超声波处理时间50min,获得提取液总黄酮含量为9．9167％。采用牛津杯法做抑菌实验,结果表明番石榴叶和果实的水提、醇提粗提液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、阴沟肠杆菌、溶血葡萄球菌等均有很好的抑菌效果。叶和果实的总黄酮提取液的抑菌作用也很明显。番石榴有望作为药食同源产品和天然食品防腐剂进行开发利用。     

Separation of Flavonoids from Bamboo Leaves by Aqueous Two-Phase Extraction

以竹叶黄酮水提溶液为原料,采用PEG(聚乙二醇)/(NH4 )2SO4双水相体系对竹叶黄酮进行萃取,考察了PEG平均相对分子质量、PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数、pH值、NaCl质量分数、原液质量分数、萃取温度等对双水相及竹叶黄酮萃取效果的影响.双水相萃取法提取竹叶黄酮的最优条件为:PEG 400 31％,(NH4)2 SO4 11％,pH3.9,NaCl 0.7％,原液51.5％,萃取温度20℃,在此条件下得到的竹叶黄酮萃取率为97.8％.结果说明,双水相萃取法操作简单方便,成本低,不会引起生物质失活或变性,适合于黄酮类化合物的萃取分离.     

1-辛基-3-甲基咪唑二氰铵盐/硫酸铵双水相体系分离纯化银杏黄酮

建立了由亲水性离子液体1-辛基-3-甲基咪唑二氰铵盐([C8mim][N(CN)2])和(NH4)2SO4形成的双水相萃取体系并应用于银杏黄酮的分离纯化研究。研究了盐浓度、体系温度、pH值、NaCl量等因素对银杏黄酮萃取效率的影响;并对下相中无机盐进行回收。体系由18.52%[C8mim][N(CN)2],25.93%(NH4)2SO4构成,加入1.5 mmol NaCl,在室温下进行萃取时萃取效率最佳,在最佳的条件下[C8mim][N(CN)2]/(NH4)2SO4体系对银杏黄酮的萃取效率达96.73%。与传统的双水相体系相比,该体系的萃取效率高,粘度低,同时(NH4)2SO4的回收率达90.54%。[C8mim][N(CN)2]/(NH4)2SO4双水相体系是一种很好的分离纯化银杏黄酮的方法。     

响应面法优化fHBP-A蛋白双水相萃取工艺的探究

目的 采用双水相萃取技术对重组B群脑膜炎奈瑟菌H因子结合蛋白A(fHBP-A)进行分离纯化,研究不同双水相萃取体系对fHBP-A粗提纯化的影响,应用响应面法优化fHBP-A在PEG/(NH₄)₂SO₄双水相体系中的萃取工艺。方法 首先建立PEG 2 000/(NH₄)₂SO₄、PEG 4 000/(NH₄)₂SO₄、PEG 6 000/(NH₄)₂SO₄和乙醇/(NH₄)₂SO₄ 共4种双水相萃取体系相图;然后考察PEG相对分子质量、PEG质量分数、(NH₄)₂SO₄质量分数、萃取体系pH这4个因素对fHBP-A萃取率、下相中fHBP-A纯度的影响;最后采用Box-Behnken试验设计以及响应面...     

双水相萃取分离技术的评价和展望

双水相萃取分离技术的评价和展望谭天伟（北京化工大学化工系,北京１０００２９）沈忠耀（清华大学化工系,北京１０００８４）自１９５６年瑞典伦德大学的Ａｌｂｅｒｔｓｓｏｎ发现双水相体系［１］到１９７９年德国ＧＢＦ的Ｋｕｌａ等人将双水相萃取分离技术应用于生物...     

白地霉Cryytococcus neoformans脂肪酶的双水相萃取

本文研究了不同无机盐的双水相体系对白地霉脂肪酶的萃取分离效果,对PEG/（NH4）2SO4成相系统进行了系统的研究,通过考察体系PEG分子量、不同的无机盐、PEG浓度、（NH4）2SO4浓度、离子强度、pH值及（NH4）2SO4浓度对反萃取的影响,并通过正交实验进一步优化了实验条件,初步确定在PEG浓度15%,（NH4）2SO4浓度22.5%,pH8.0,不加NaCl的条件下进行双水相萃取,脂肪酶分离系数和纯化倍数分别为6.8和7.5,比活力达到40.3 U/mg蛋白。     

绿豆皮中黄酮类化合物提取工艺

研究了绿豆总黄酮的提取工艺。通过对固液比、乙醇体积分数、提取温度与提取时间的单因素实验确定水平点,设计4因素3水平实验,选用L9（3^4）正交表,优选绿豆总黄酮的最佳提取工艺为固液比1：50,φ（乙醇）为40％,提取温度70℃,提取时间120min。在此基础上得到绿豆皮中总黄酮的提取量为27．57mg／g,且5次平行的相对标准偏差为0．75％,总黄酮的平均回收率达97．5％。     

用双水相萃取分离纯化磷酸甘油酸激酶和磷酸甘油醛脱氢酶

用聚乙二醇（ＰＥＧ）／羟丙基淀粉（ＲｅｐｐａｌＰＥＳ）双水相体系两步法从黄豆中分离磷酸甘油酸激酶（ＰＧＫ）和磷酸甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）。ＰＧＫ在上相收率及ＧＡＰＤＨ在下相收率均在８０％以上。放大采用离心倾析机（ｄｅｃａｎｔｅｒ）连续处理匀浆液,用离心萃取器（ｓｅｐａｒａｔｏｒ）完成双水相体系的萃取两相分离。整个工艺具有处理量大、接触时间短、酶收率高的优点     

双水相萃取法分离竹叶黄酮的工艺研究

以竹叶黄酮水提溶液为原料,采用PEG(聚乙二醇)/(NH4)2SO4双水相体系对竹叶黄酮进行萃取,考察了PEG平均相对分子质量、PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数、pH值、NaCl质量分数、原液质量分数、萃取温度等对双水相及竹叶黄酮萃取效果的影响。双水相萃取法提取竹叶黄酮的最优条件为:PEG 400 31%,(NH4)2SO411%,pH 3.9,NaCl 0.7%,原液51.5%,萃取温度20℃,在此条件下得到的竹叶黄酮萃取率为97.8%。结果说明,双水相萃取法操作简单方便,成本低,不会引起生物质失活或变性,适合于黄酮类化合物的萃取分离。     

家蝇滞育幼虫血淋巴中抗病毒肽甲醇萃取方法的优化

为了优化甲醇萃取滞育家蝇Musca domestica幼虫血淋巴中抗病毒肽的方法, 本实验分别比较甲醇及乙腈萃取血淋巴中抗病毒组分效果及最佳使用梯度、上样蛋白浓度、洗脱次数、洗脱流速及操作环境温度, 用Tricine-SDS-PAGE分析甲醇及乙腈的洗脱组分的构成。结果表明：甲醇萃取的活性组分多于乙腈萃取的; 用连续梯度（10％～100％）甲醇萃取的抗病毒活性组分, 比分别用10％, 30％, 50％, 70％, 90％和20％, 40％, 60％, 80％, 100％间断梯度洗脱的回收率高, 同时获得活性组分的重现性好。在0～4℃冰浴的环境下, 于250 mg/6 mL C18萃取柱内加入1.5±0.4 mg/mL蛋白浓度的血淋巴粗提液, 用1 mL/min流速4次洗脱, 抗病毒活性组分可以得到较好的分离效果。     

红景天根中总黄酮和多糖的微波提取及含量分析

目的;从红景天中提取有效成分总黄酮,多糖,并测定其含量。方法：分光光度法,结果：测得红景天总黄酮含量4．62％,平均回收率为98．59％,RSD1．23（n=3),多糖含量9．12％,平均回收率为99．25％,RSD1．12％（n=3)。结论：运用微波技术辅助测定红景天中总黄酮和多糖的含量,反应速度加快,收率提高。     

氯化三辛基甲胺/氯仿/正丁醇反胶束萃取地木耳多糖

采用阳离子表面活性剂氯化三辛基甲胺(TOMAC)/氯仿/正丁醇反胶束体系萃取地木耳中的多糖。分析有机溶剂氯仿与助表面活性剂正丁醇比例、TOMAC浓度、多糖粗提液浓度、促溶剂盐酸胍浓度、盐离子种类和浓度对前萃取率的影响。结果表明:向0.5 mg/m L多糖粗提液中加入10 mmol/L盐酸胍(Gu HCl)和0.06 mol/L Na Cl,与等体积25 mmol/L TOMAC/氯仿-正丁醇(V∶V=3∶1)的反胶束体系混合,地木耳多糖前萃取率为53.21%;反萃时水相中Na Cl浓度为0.14 mol/L,盐酸胍浓度浓度为0.6 mol/L,在此条件下地木耳多糖反萃取率为93.2%。     

乙醇-磷酸氢二钾双水相体系萃取L-精氨酸

采用乙醇-磷酸氢二钾(K2HPO4)双水相体系萃取L-精氨酸。实验考察了乙醇浓度、K2HPO4浓度、pH、萃取温度对萃取分离L-精氨酸的影响。结果表明,L-精氨酸在该双水相体系的分配系数K随体系乙醇浓度、K2HPO4浓度的增大、萃取温度的升高而增大,随着体系pH的增大而减小;L-精氨酸在该双水相体系的萃取率随体系乙醇浓度和pH的增大而减小,随着体系K2HPO4浓度增大、萃取温度的升高而增大。     

HPLC法定量分析植物组织中ABA,IAA和NAA

近年来有关植物激素的提取、分离方法的报道时有出现,但大都是沿用80％甲醇(MeOH)从植物组织中提取IAA和ABA,用乙酸乙酯萃取酸化的提取液后得到粗提液,粗提液再经过纤维素薄层层析、硅胶层析、