低密度脂蛋白受体生物化学

低密度脂蛋白受体广泛存在于机体内许多组织和细胞,在脂蛋白代谢中起了十分重要的作用。它是一种酸性糖蛋白,由839种氨基酸组成。根据它的结构特点及其与功能的关系,大致可以区分为5个不同的结构功能区。其中,较为重要的是发现第一、二功能区分别与受体结合特异性有关和与鼠EGF前体同源。     

化学发光法测定正常人皮肤纤维母细胞高密度脂蛋白(HDL)受体功能

A cbemiluminescence assay of human skin fibroblasts HDL receptor function was established.HDL3 was labelled with 6(N-(4-amino butyl)~N-ethyl)-amino-2,3-dihydro phthalazine l,4-dione(ABEI) by the carbodiimide(EDC).The labelled compound (HDL3-ABEI) was water soluble and non-toxic.It was stored at -30*********C before use.HDL3 was isolated by sequential ultracentrifugation.The HDL3 obtained was Apo-E-free.After incubation of HDL3 in waterbath at 52**********C for 3 hours, the HDL3 was labelled with ABEI to a ratio of 0.89 m mol ABEI/mmol HDL3.The HDL3-ABEI showed positive immunore action with antibodies of Apo A-********I and Apo A-*******II, indic-eting that the labelled HDL3 still retained its immunological characteristics.The conditions for determination of HDL receptor function of human skin fibroblasts were studied.The optimum quantity of HDL3-ABEI for combination with fibroblasts HDL receptors at 4癈 was 20********ug.The optimum time for combination of HDL3-ABEI with fibroblasts HDL receptors at 4*********C was 1 hour.The amount of HDL required for blocking HDL receptors was 400********ug.The optimum cell number for combination of HDL3-ABEI with HDL receptors was 1**********X105 cells/ml.In the mean time, the decrease in luminescence intensity with the increase in number of cells was observed.Again a high protein concentration would cause inhibition to the assay system.     

化学发光法测定葡萄糖

葡萄糖在葡萄糖氧化酶作用下氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢,用化学发光法可以测定生成的过氧化氢,从而知道葡萄糖的含量。本法所需样品量少,快速方便,灵敏度较比色法高,适用于大量样品的分析,如血糖,也可用于测定葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、过氧化氢以及金属离子等。测定方法包括葡萄糖的氧化和发光强度的测量两个步骤。     

化学发光法测定氨基酸新进展

就近几年来对氨基酸的化学发光分析方法的研究进展进行了评述。评述了静态化学发光法测定、流动注射-化学发光法测定、毛细管电泳-化学发光法测定、液相色谱-化学发光法测定和电致化学发光法测定氨基酸。     

人淋巴细胞低密度脂蛋白受体酶联测定法的研究

将辣根过氧化物酶与低密度脂蛋白交联,并将人淋巴细胞固定于酶标板上,成功地建立了淋巴细胞 LDL 受体酶联测定法.此法特异、灵敏、可靠,不需放射性同位素。     

淋巴细胞化学发光

本文概要介绍淋巴细胞化学发光(LY-CL)的细胞学基础,LY-CL的生物化学基础,激活LY-CL的物质,LY-CL与淋巴细胞活化关系以及LY-CL测定技术在生物学、医学中的应用。     

人可溶性低密度脂蛋白受体在甲醇酵母中的表达

为获得低密度脂蛋白受体配基结合结构域在甲醇酵母中的分泌表达 ,首先用RT PCR方法以人肝癌Bel 740 2总RNA为模板扩增了编码低密度脂蛋白受体配基结合结构域的基因片段。核酸测序分析表明克隆到的DNA片段的序列与报道的人LDLR的cDNA序列相同。然后构建了甲醇酵母表达质粒pPIC9K sLDLr ,并将其线性化后用电穿孔法导入PichiapastorisGS115。分别用SDS PAGE、Westernblot和Ligandbindingblot对GS115 pPIC9K sLDLr上清中的重组sLDLR进行鉴定。SDS PAGE和Westernblot分析表明表达的sLDLR的表观分子量为 36kD。Ligandbindingblot分析表明表达的sLDLR具有配基结合的生物学活性     

人血清铁的化学发光法测定

研究了鲁米诺化学发光体系测定痕量铁的条件.在选定条件下测定铁(Ⅲ)的线性响应范围为0.2 ng/ml-0.1 μg/ml,检出限为0.0014 ng/ml,对含0.5 ng/ml的试样进行10次重复测定,其结果的变异系数为3.4％.对二十几种常见阴阳离子的干扰情况进行了试验和讨论.将本方法应用于正常人血清中微量铁的测定,结果较满意.     

低密度脂蛋白受体相关蛋白与纤溶系统

低密度脂蛋白受体相关蛋白（ＬＲＰ）是近年新发现的一种细胞表面蛋白,为低密度脂蛋白受体（ＬＤＬＲ）家族的一员,能与多种配体结合,参与纤溶系统多种成分的代谢,从而调节纤溶系统功能的稳定。     

人中性粒细胞与淋巴细胞化学发光反应的比较

研究人中性粒细胞化学发光(PMNCL)反应与淋巴细胞化学发光(LY—CL)反应的差别。结果表明,刀豆蛋白A、植物血凝素,葡萄球菌蛋白A和(?)理酵母多糖刺激后,PMN—CL纯峰值高于LY—CL 3—10倍,而(?)抗(?)IgG刺激后,LY—CL的峰值则稍高于OMN—CL。氧自由基清除剂作用于PMN—CL和LY—CL反应的结果表明,L—组氨酸均明显抑制PMN—CL和LY—CL反应;苯甲酸钠和甘露醇抑制LY—CL反应的抑制率(IR)明显高于PMN—CL;而超氧化物歧化酶和过氧化氢酶抑制LY—CL的IR明显低于PMN—CL。结果提示,PMN—CL和LY—CL反应在CL形成的分子机制上并不完全相同。     

邻苯三酚自氧化—化学发光法测定SOD活性

有关超氧化物歧化酶(superoxide dis-mutase,SOD)活力测定方法已有不少研究。人们根据各自的条件建立起快速、有效的SOD测定分析手段。本文介绍一种以邻苯三酚为O_2~-发生系统的化学发光测定方法。并通过对测定条件的研究,得到测定的最佳方案,证明了方法的可行性和稳定性。     

有氧运动对高胆固醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体活性调节…

本文研究了实验性在醇血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体（ＬＤＬ－Ｒ）活性变化及有氧运动时ＬＤＬ－Ｒ活性调节的影响,发现,高脂（ＨＣ）组肝组织匀浆ＬＤＬ－ＲＩ自古以来生较正常对照（ＮＣ）组降低３７％（Ｐ〈０．０５）,同时血清大醇（ＴＣ）、低密度脂收白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）及血清栽脂蛋白Ｂ（ＡｐｏＢ）均显著高于ＮＣ组（Ｐ〈０．０１）;高脂＋运动（ＨＥ）组ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ及ＡｐｏＢ均明显低于ＨＣ组,而ＬＤＬ－Ｒ     

血管紧张素Ⅱ对氧化低密度脂蛋白受体LOX1基因表达的调控

目的：观察不同浓度血管紧张素Ⅱ对氧化低密度脂蛋白内皮受体LOX1基因表达的影响,并探讨其机制。方法：采用反转录-聚合酶链反应（RT PCR）。结果：（1）血管紧张素Ⅱ可上调LOXI的mRNA水平,且呈剂量依赖效应;（2）应用血行之有效紧张素Ⅱ一型受体阻断齑osartan后抑制了血紧张素Ⅱ对LOX1的上调作用。结论：血管紧张素Ⅱ可显著上调LOX1的基因表达,且呈剂量依赖效应。这一作用是通过激活血管紧张素Ⅱ一型受体发生的。     

凝血素样氧化低密度脂蛋白受体结构与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化(As)早期改变是内皮功能紊乱,新型受体-植物凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)在氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的内皮功能紊乱过程中起关键性作用.LOX-1主要在内皮细胞表达,其结构和功能与其他可吞噬ox-LDL的清道夫受体显著不同,但与自然杀伤细胞受体却高度一致.目前对LOX-1基因和蛋白结构以及功能尚不完全清楚.因此,进一步研究LOX-1的功能及其表达的调控机制,不仅有助于了解脂代谢和As发病机制,对心血管病防治也有十分重要的意义.本文对LOX-1其结构、功能及其调控因素等最新研究进行综述.     

直接法测定低密度脂蛋白胆固醇

为了提高血脂检验技术,探讨直接法测定低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),选用市售的两种直接测定LDL-C的试剂盒进行方法学的实验评价,结果表明：直接法具有简便、快速、准确和适合自动分析等特点.两种试剂盒的测定结果都能满足建立分析方法要求的目标,不精密度＜４％,两法显著相关r=0.994, y=1.0572x－0.1052, S_y/x=0.1913,且各种方法学检验结果相近,使用者可结合实际选作常规测定之用.