γ射线辐照嘧啶核苷水溶液的电子自旋共振（ESR）研究

亚硝基特丁烷（ＭＮＲ）为捕集剂,利用自旋捕集技术,对γ射线辐照嘧啶苷水溶液进行了ＥＳＲ研究,确定了胸苷、尿苷和胞苷可产生的自肇捕集自由基的类别,并讨论了自由基形成的机制。     

电子自旋共振-自由基捕获技术在生物学中的应用

本文结合作者实验室的工作,简要回顾了电子自旋共振-自由基捕获技术在生物领域的应用,包括新型自由基捕获探针的分子设计与合成,以及该技术在细胞、植物体系中的应用实例,并结合该技术的研究现状初步讨论了它的未来发展前景。     

自旋捕捉结合液相色谱/电子自旋共振/质谱联用技术用于检测多不饱和脂肪酸过氧化过程中产生的自由基(英文)

ω-6和ω-3类多不饱和脂肪酸是两种人体所需的重要营养物质。人体内的很多生理病理过程均涉及到这些多不饱和脂肪酸,以及它们在环氧合酶(cyclooxygenase,COX)和脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)催化下产生的过氧化代谢物。环氧合酶和脂氧合酶催化的多不饱和脂肪酸的过氧化是复杂的生化过程,会产生一系列的自由基产物。这些自由基产物又会与蛋白质、DNA和RNA结合,从而导致很多生理功能的改变。然而一直以来,缺乏合适的分析方法来有效分离和鉴定这些自由基产物,限制了人们对环氧合酶和脂氧合酶,以及多不饱和脂肪酸的过氧化在生理作用方面的研究。直到最近,才出现了对COX/LOX催化产生的活泼自由基定性和定量分析的报道。这里将对一种可以用来鉴定体外脂类过氧化产生的自由基产物的自旋捕捉-LC/ESR/MS联用技术的发展与改进过程进行综述。这种新颖的LC/ESR/MS联用技术首次使得直接检测多不饱和脂肪酸代谢产生的自由基成为可能,这对自由基的生理学作用研究是一个重大突破,为人们在多不饱和脂肪酸的生理作用以及环氧合酶和脂氧合酶催化的脂质过氧化方面的研究带来了极大便利。     

用电子自旋共振（ESR）研究肾缺血移植和再灌注过程产生的自由基

在低温（－１００℃）用ＥＳＲ检测和分析了大鼠肾缺血,移植和再灌注过程中出现的ＥＳＲ信号,发现在体（ｉｎｖｉｖｏ）肾缺血１小时再灌注２分钟肾组织除了出现ｇ＝２．００４０的醌类自由基以及ｇ＝１．９３７０和ｇ＝１．９７３０处与过渡金属离子有关的信号外,在低场区又出现一个很明显的信号（ｇ＝２．０８１２）,该信号的位置同及ＬＯＯ．的ｇ     

用电子自旋共振（ESR）研究肾缺血移植和再灌注过程产生的自由基

在低温（－１００℃）用ＥＳＲ检测和分析了大鼠肾缺血,移植和再灌注过程中出现的ＥＳＲ信号,发现在体（ｉｎｖｉｖｏ）肾缺血１小时再灌注２分钟肾组织除了出现ｇ＝２．００４０的醌类自由基以及ｇ＝１．９３７０和ｇ＝１．９７３０处与过渡金属离子有关的信号外,在低场区又出现一个很明显的信号（ｇ＝２．０８１２）,该信号的位置同及ＬＯＯ．的ｇ     

脱氧核糖核酸(DNA)对过氧化氢酶(CAT)活性的影响研究

机体在新陈代谢过程中,不断产生自由基,自由基对细胞结构损伤较大,机体内存在清除自由基的酶类,正常条件下,自由基的产生和清除是动态平衡的。过氧化氢酶是重要抗自由基酶类之一。试验企图探讨DNA对对氧化氢酶活性影响,从而探索核酸对抗自由基和抗衰老的作用。     

植物体内超氧物自由基（O2^—）检测的EPR自旋捕捉技术

McCord和Fridovich在1968年发现了超氧物歧化酶(SOD)并研究了其生物学作用,提出了氧毒害的超氧物自由基学说。此学说已为越来越多的实验证实。在研究动物和植物的衰老以及逆境生理时,常需测定SOD酶,因此超氧物自由基(?)检测就显得十分重要。用酶学分析技术检测(?),不仅灵敏度低,而且由于(?)和羟自由基(·OH)均可产生     

羟自由基、γ射线和重离子束致死效应的比较

以集落法测存活率、用双链断裂模型分析实验数据,比较研究了羟自由基、γ射线和125．5keV/μm碳离子束对B16细胞和V79细胞的致死效应。结果表明：三种处理对细胞都有明显的致死作用,剂量越大,效果越明显;重离子束的致效效应比γ射线强,而且对抗常规辐射的黑色素瘤也有效,证明了重离子治癌的优势;羟自由基与DNA的作用没有一次击中的成分,碳离子束则以一次击中为主,γ射线介于两者之间,两种细胞对羧自由基的敏感性与对电脑辐射的敏感不同,揭示电离辐射的间接作用不是简单的自由基行为。     

饲喂外源性DNA对小鼠体内LPO和Lf生成的影响

目的：探讨外源性DNA对体内LPO和Lf生成的影响。方法：分别用外源性DNA和VE定时定量喂养小鼠,测定和比较小鼠体内LPO、Lf含量变化。结果：外源性DNA与VE一样,有效地降低了小鼠体内LPO、Lf含量,对肝、心脏的作用较对脑组织明显,高剂量DNA抑制效果强于低剂量DNA。结论：外源性DNA具有抗氧化剂的作用,对动物体内LPO、Lf的生成有明显抑制作用。     

60Co-γ射线辐照玉米种子对基因组DNA分子的影响

以不同剂量的60Co-γ射线辐照玉米种子,对各处理组分单株,采用CTAB抽提法提取幼叶组织基因组DNA,并对基因组DNA进行酶切,研究辐照对基因组DNA分子的损伤效应。结果表明:辐照剂量不同,得到的基因组DNA分子在各处理组间存在差异,当辐照剂量>200 Gy时,差异更为明显;辐照不仅能引起DNA分子链的断裂,还能改变核苷酸链上的碱基位置和顺序,使酶切位点发生改变。实验还对同一辐照剂量处理下的不同单株幼叶基因组DNA进行了重复实验,结果是一致的。     

红曲菌产生的DPPH自由基捕捉物质的筛选

从浙江长兴县农村传统家酿红酒的小曲中分离出一 红曲菌菌株(Monascus sp.),对它产生的DPPH自由基捕捉物质进行了筛选。结果表明：自由基捕捉活性和得率以醋酸乙酯的中性提取物较高;培养时间以30℃,100r/min摇床5d为好;对醋酸乙酯的中性提取物进一步进行了硅胶柱层析、LH20柱层析、MPLC、HPLC分部收 集,并用HPLC检验其纯度,获得收量在2mg以上,纯度在85%以上的自由基捕捉物质15个,对其中有代表性的B13、C317进行了1HNMR和13CNMR分析,确定它们的大致结构为苯的三取代衍生物,C317很可能是3羟基,4甲氧基苯甲酸;并对B13、C317的自由基捕捉活性进行了测定,40μmol/L的B13其自由基捕捉活性约为65%,40μmol/L的C317其自由基捕捉活性小于56%,均略低于Vc和Ve。     

红松越冬针叶的电子自旋共振（ESR）波谱

用ESR波谱仪在越冬红松针叶及叶绿体冻干粉中检出了g值分别为2.0044和2.0037的明确的单峰信号。针叶伤害愈重,信号愈强。此信号可被Vc或富含SOD等多种自由基清除剂的沙棘果汁所抑制。针叶受害愈重,沙棘果汁对信号的抑制作用愈强,Vc的抑制作用愈弱。据此认为红松苗越冬伤害和有机自由基的形成有关。在伤害发展的不同阶段,有机自由基的种类组成也不同。     

用电子自旋标记法研究γ辐照对红细胞膜的影响

本文用5-氮氧自由基硬脂酸、12-氮??氧自由基硬脂酸和16-氮氧自由基硬脂酸三种脂肪酸自旋标记物对人红细胞膜(血影)的不同深度膜脂的流动性作了进一步的研究,所得到的电子自旋共振波谱表明它们的序参数都随γ照射剂量的增大而增大。本文还用马来酰亚胺氮氧自由基标记在膜蛋白的SH基团上,所得到的波谱表明其旋转相关时间和强固定化对弱固定化组分的谱线高度的比值也都随γ辐照剂量增大而增大。结果说明γ辐照后,人红细胞膜的流动性降低。这与我们用荧光探针研究所得到的结果相似。     

γ射线诱导DNA链断裂的机制研究

通过凝胶电泳扫描法测试了γ射线辐射下ｐＢＲ３２２超螺旋ＤＮＡ的单链断裂（ＳＳＢ）和双链断裂（ＤＳＢ）与辐射剂量的关系,验证了ＳＳＢ的产生方式,发现ＤＳＢ的形成与ＤＮＡ溶液中自由基清除效能σ有关：一方面,αＤＳＢ与βＤＳＢ的比随σ的增大而非线性增大;另一方面,σ＜１０８ｓ－１时,αＤＳＢ可由单自由基传递机制产生,而σ＞２×１０８ｓ－１时,αＤＳＢ则主要通过ＬＭＤＳ机制形成。另外,发现组成βＤＳＢ的两互补链上ＳＳＢ的距离ａ几乎不受自由基清除效能的影响。     

自由基对线粒体DNA的氧化损伤与衰老

自由基是一类氧化剂,对生物具有多种损害作用．衰老的自由基学说是有关衰老机理的诸多学说之一．线粒体DNA组成结构特殊,易受自由基攻击;目前认为,线粒体DNA的氧化损伤是自由基引起衰老的分子基础．     

γ射线辐射诱导质粒DNA单链断裂:与DNA和自由基清除剂浓度的关系

凝胶电脉扫描法研究表明,γ射线辐照下,超螺旋ｐＢＲ３３２ＤＮＡ分子的残余率随剂量的增大而按指数规律减小,而辐射诱导单链断鲜明（ＳＳＢ）数则与剂量线性相关,由于ＯＨ与ＤＮＡ反应遵循非均一动力学过程,平均引起一个ＳＳＢ所需的剂量Ｄ０随自由基清除力的增加而非线性地增大,对含一定浓度甘露醇的ＤＮＡ溶液,Ｇ（ＳＳＢ）与Ｃ（ＤＮＡ）的双倒数具有线性关系,并以二级动力学描述了ＤＮＡ和甘露醇分子对ＯＨ的竞争反应,