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利用紫外差谱、荧光光谱和园二色谱法对比地研究了α-淀粉酶盐酸胍和碳酸胍变性,分析了两种胍变性明显差异的原因。通过等同的胍基浓度下,α-淀粉酶两种胍变性的构象变化与活性关系的实验,表明同等摩尔浓度的两种胍盐变性能力上的明显差异并不主要是由于它们胍基含量上的不同。将盐酸胍从中性pH(6.5)调至碱性pH(10.4),其变性能力大增,紫外差谱与碳酸胍变性相似,出现了290nm的正肩和296nm的正峰,与此同时,酶的荧光强度大大降低,大部分酶活性丧失。由此推论,两种胍变性能力的明显差异的重要原因之一是在碱性介质中胍基的变性能力明显增强,并分析了其增强的原因。 相似文献
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利用紫外差光谱,荧光光谱和圆二色谱法对比地研究了淀粉液化茅孢杆菌α-淀粉酶在盐酸胍和碳酸胍变性过程的构象变化与活性关系以及在变性早期钙离子对酶构象的稳定作用。 相似文献
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利用蛋白质内源荧光和酶活性两种信号以及荧光偏振,HPLC和停流等方法研究了盐酸胍诱导的α淀粉酶去折叠与重折叠的平衡转变和动力学。实验结果表明α淀粉酶去折叠与重折叠是两个不同的过程;变性与复性过程中可能伴有聚集体生成;去折叠与重折叠均为双相过程,重折叠大约始于2秒之后。 相似文献
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利用蛋白质内源荧光和酶活性两种信号以及荧光偏振,HPLC和停流等方法研究了盐酸胍诱导的α淀粉酶去折叠与重折叠的平衡转变和动力学。实验结果表明α淀粉酶去折叠与重折叠是两个不同的过程;变性与复性过程中可能伴有聚集体生成;去折叠与重折叠均为双相过程,重折叠大约始于2秒之后。 相似文献
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五种α—淀粉酶测活方法的比较研究 总被引:16,自引:0,他引:16
对常用的五种α-淀粉酶活力测定方法进行了比较。研究了酶的稀释倍数和反应时间等因素对α-淀粉酶活力测定的影响,确定了α-淀粉酶活力测定的最佳条件。通过比较研究,认为Yoo改良法是α-淀粉酶活力测定的最佳方法,并确定了各方法不同活力单位之间的相互换算关系。 相似文献
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利用紫外差吸收光谱和荧光发射光谱等监测手段研究天然铜锌SOD(holo-SOD)和脱铜锌SOD(apo-SOD)在不同浓度胍溶液中的去折叠及活力变化.结果表明holo-SOD和apo-SOD分别在4.0和2.0mol/L胍溶液中去折叠,而分别在2.0和0.5mol/L胍溶液中其构象尚未发生明显改变时活性几乎完全丧失.提示金属离子对维持酶的整体及活性部位构象具有重要作用,脱去金属离子的酶分子的构象特别是活性部位的构象更易受到变性剂的破坏. 相似文献
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α—淀粉酶基因表达中启动子上游区EcoRI—BclI片段的生理功能 总被引:1,自引:0,他引:1
本文从pAmy41和pNL201出发,构建一系列α-淀粉酶基因上游区EcoRi-BclII片段的人或部分缺失的质粒,并构建了pAmy41系列质粒pAmy41系列、pNL201系列双质粒工程菌,通过对这些工和力α-淀粉酶基因表达水平的分析显示,B.licheniformis α-淀粉酶基因上游区EcoRI-Bcll片段在α-淀粉酶基因表达中行使负的调控功能。 相似文献
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耐高温α—淀粉酶基因在马铃薯中的表达 总被引:3,自引:0,他引:3
The thermostable alpha-amylase gene cloned from Bacillus lichemiformis was reconstructed into an expression vector pAMY721M under the CaMV35S promoter. The vector was transferred into A. tumerfaciens ABI. The thermostable alpha-amylase gene was transferred into Solanum tuberosum L. via Agrobacterium mediation according to the revised method of ZHAO Shu Juan et al (1997) and YANG Mei Zhu et al (1992). Shoots were induced and regenerated on MS medium with 2 mg/L ZT, 0.1 mg/L IAA and 100 mg/L kanamycin. Putative transformants were selected with kanamycin and roots induced on MS medium with 0.15 mg/L IAA. PCR analysis and thermostable alpha-amylase activity assay were done to identify the transgenic plantlets. Among them, 102,001, 102,607, and 110,402 were showed to have a higher alpha-amylase activity than untransformed control. 相似文献
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本文着重研究了耐高温α-淀粉酶与BF-7658α-淀粉酶(即普通中温淀粉酶)在超高麦芽糖浆生产中的区别,使用耐高温α-淀粉酶可使淀粉液化更完全,并且可降低酶的用量,同时生产的超高麦芽糖浆中麦芽糖含量大大提高,具有一定的推广,使用价值。 相似文献