铝酞菁光敏反应中间产物的实验研究

铝酞菁(AISPC)是有潜力用于光动力癌症疗法(PDT)的新光敏剂.本文应用ESR波谱技术,对AISPC光敏反应的中间产物进行实验研究,探讨了重水,β—胡萝卜素、迭氧钠、SOD、细胞色素C、甘露醇及乙醇等活性氧增进或抑制剂对光敏反应的影响.结果表明,(Al-SPC)在水溶液中的光敏反应,除之有~1O_2生成外,还有O_2~-及·OH自由基产生.但以~1O_2.中间产物为主.光敏疗法是一种有希望的肿瘤治疗新方法.但由于光敏剂血卟啉衍生物(HPD)组份复杂、红光吸收太弱等局限性,1985年以来,探寻结构明了、成份稳定、主吸收峰位于红光区(人体绍织透射的最佳波段)的新光敏剂的研究工作不断增多,其中尤以对酞菁类染料的研究较为集中.我组在研究出可溶于水的磺化铝酞菁后,亦已在离体人癌细胞及小鼠移植瘤实验中(待发表)获得杀伤癌细胞、癌组织的功效.随着酞菁染料作为新光敏剂的潜力被挖掘,其反应机制的研究也受到重视,但目前尚不甚明了,且较系统的研究也不多.本文应用ESR波谐技术,可2、2.6、6—四甲基—4羟基哌啶醇为探针,并利用~1O_2,0_2~1·OH消除剂,研究了磺化铝酞菁的光敏反应中间产物,探讨了其可能的反应机制.     

血卟啉衍生物(BHPD)光敏反应的原初过程Ⅰ.活性氧的产生

为了阐明血卟啉衍生物(HPD)的光敏作用机理,本文以我国自行研制、并已应用的第一代产品——北京血卟啉衍生物(简称BHPD)为对象,采用电子自旋共振(ESR)和自旋捕捉(Sping-Traping)等技术,从光生物物理角度,探讨了BHPD光敏反应的原初过程.结果表明,不仅观察到~1O_2的产生,而且还观测到O_2~(?)和·OH的产生.这提示,在BHPD对生物系统的光敏损伤过程中,不只是~1O_2,O_2~(?)和·OH等活性氧,很可能也起重要作用.     

铝酞菁:人癌细胞的吸收及光敏杀伤的研究

本文比较了光敏剂铝酞菁(AISPC)及血卟啉衍生物(HPD)在人癌细胞的吸收及光敏杀伤中的差异.探讨了两光敏剂在细胞中的分布、摄入量,血清的影响、及细胞对两光敏剂的吸收动力学过程,结果显示,除了类似的特征外,细胞对AISPC的吸收速度慢于HPD.光敏杀伤的结果表明,在红光照射下,两光敏剂对细胞有相近的杀伤效率;在室内自然光下,AISPC对细胞的损伤明显低于HPD,显示出其较低的光毒付作用,具有适合临床应用的优点.     

磺化铝酞菁的磺化程度对光敏活性的影响

磺化铝酞菁为新一代的光敏剂,为了研究其平均磺化程度对光敏活性的影响,本文比较测定了平均磺化度为三的铝酞菁Alpcs(3)及平均磺化度为二的铝酞菁A1pcs(2)的单态氧(~1O)产率,细胞的吸收及光敏杀伤。结果表明,磺化度的不同并不影响~1O_2的生成及细胞的吸收动力学规律,但人体肝癌细胞对Alpcs(2)的摄入量比Alpcs(3)高出5倍左右,且Alpcs(2)比Alpcs(3)对癌细胞有更强的光敏杀伤效应。提示,可通过调节降低磺化程度,增进细胞吸收,获得更佳的光敏效率。     

卟啉类光敏药物HPD活性组分DHE的光敏作用：Ⅱ.产生…

本文用ＥＳＲ方法研究了血卟啉衍生物（ＨＰＤ）和ＰｈｏｔｏｆｒｉｎⅡ的活性成分双卟啉醚酯混合物（ＤＨＥ）生成＾１Ｏ２的光敏作用。利用２,２,６,６－Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ－４－ｐｉｐｅｒｉｄｏｎｅ（Ｔｅｍｐｏｎｅ）对＾１Ｏ２的捕捉,测定所生成的氮氧自由基的ＥＳＲ信号,并经加ＮａＮ３和Ｄ２Ｏ的实验,证实了ＤＨＥ光敏反应有＾１Ｏ２的生成,并在实验的浓度范围内,随ＤＨＥ浓度增大,生成的＾１Ｏ２也增加。结合     

血卟啉衍生物的生物学作用与制备

一、血卟啉衍生物是一种诊治癌瘤的光敏物质早在本世纪初,人们在研究血卟啉衍生物(Hematoporphyrin derjrative,简写 HPD)的光动力学过程时就发现其对人和哺乳动物癌瘤的光敏治疗作用。近年来,随着激光技术的发展,利用血卟啉加激光诊治癌瘤,在世界各国得到了广泛的应用。我国学者也在进行大量研究,还组织过攻关组来协调这方面的工作。HPD 光敏诊治癌瘤具有安全、简便、诊断率高,治疗效果好,对正常组织损伤少等优点,是一种很有前途的诊治癌瘤方法。     

血啉甲醚体外光敏效应观察

本文用化学发光法检测ＨＭＭＥ的’Ｏ２和ＲＯＳ产量,并与ＨｐＤ相比较,同时观察ＨＭＭＥ光敏效应与浓度、激光照射功率密度、照射时间、激光波长的关系。结果显示：ＨＭＭＥ浓度在２．５－４０μｇ／ｍｌ范围内,其光敏效应随浓度的增加而呈线形上升,以后便略下降;５７８．２ｎｍ激光以１０ｍＷ／ｃｍ＾２照射２．５μｇ／ｍｌ,ＨＭＭＥ的’Ｏ２和ＲＯＳ产量是ＨｐＤ的８倍;ＨＭＭＥ光敏效应与激光照射的功率密度密切相关。各     

Bai醌衍生物光敏作用的量子化学计算研究

用ＡＭ１方法对北醌衍生物进行量子化学计算,得到生成熟,ＨＯＭＯ,ＬＵＭＯ能级,自由基自旋密度分布等参数,结合实验解释上ＰＱＤ的若干光化学,光物理性质,为深入研究ＰＱＤ的光敏反应机制奠定了理论基础。     

醌衍生物光敏作用的量子化学计算研究

用ＡＭ１方法对醌衍生物（ＰＱＤ）进行量子化学计算,得到生成热、ＨＯＭＯ、ＬＵＭＯ能级、自由基自旋密度分布等参数。结合实验解释了ＰＱＤ的若干光化学、光物理性质,为深入研究ＰＱＤ的光敏反应机制奠定了理论基础。     

光敏反应对过氧化氢酶的影响

光氧化反应中,纯过氧化氢酶活性受光敏化剂血卟啉Ⅳ和核黄素的抑制。随光敏化剂浓度增高及照光时间延长,抑制程度加大。酶与光敏化剂反应后吸收光谱位移,峰形改变。紫外差示吸收光谱出现229nm负峰(血卟啉)和236—240nm峰(核黄素)。结果表明酶活的抑制与其蛋白构象的变化相关。     

血卟啉衍生物（HPD）对紫膜菌紫质（bR）的光敏化作用

研究了血卟啉衍生物（ＨＰＤ）对嗜盐菌紫膜上蛋白质菌紫质（ｂＲ）的光敏化作用,结果表明,ＨＰＤ与紫膜结合并不影响ｂＲ的光学性质及活性;但经光照射、ＨＰＤ光敏反应后,ｂＲ丧失光循环活性。进一步的探测显示ｂＲ中的视黄醛色素团及色氨酸均在光敏反应中受损,反映了除视黄醛色素团有可能直接受损外,深埋于折叠蛋白内部的部分色氨酸残基。亦可能在ＨＰＤ光敏化过程中被损伤。实验证明,单线态氧（＾１Ｏ２）的作用是ＨＰＤ光     

血卟啉光分解性质的研究

本文阐述了血卟啉的光分解性质。Ｈｕｃｋｅｌ分子轨道理论指出,共轭分子随着π电子数的增加,分子的πＭ０能级变密,激发能降低,分子的激发带边红移。因此通过红移分析可以计算出共轭分子的π电子数。在强紫外光照射下血卟啉发生了光分解,其激发光谱发生了明显的变化,根据光谱数据可计算出血卟啉开环。     

竹红菌素及其衍生物对脂质体空间结构的微观光敏损伤的Raman光谱特征

竹红菌素及其衍生物对DPPC脂质体空间结构的微观光敏损伤的Raman光谱特征是明显的 :该脂质体反式构象减少 ,扭曲构象增加表明链内纵向有序度降低 .与此同时其链间侧向相互作用序参数也有不同程度的减少 ,它们的侧向堆积已变得松弛 .经比较 ,对该脂质体空间结构的损伤 5 Br 竹红菌乙素强于竹红菌甲素和竹红菌乙素 .     

激光、血卟啉对肿瘤细胞DNA单链断裂及其重接的影响

用简化的Kohn氏碱洗脱法,观察了光敏剂血卟啉衍生物(HPD)对小鼠S-180肿瘤细胞DNA单链断裂及其重接修复的影响。激光HPD能导致S-180细胞DNA单链断裂明显增加,而且这种断裂随着保温时间的延长,继续增多。在本实验条件下没有观察到HPD对X线的增敏作用,HPD不能增加X线所致的DNA单链断裂,也不能影响其重接。单链断裂重接动力学的实验进一步证明了这个论点。     

血卟啉衍生物光敏引起NAD(P)H氧化作用研究

血卟啉衍生物(HPD)光敏引起NAD(P)H氧化为中介的luminol化学发光(CL)与多种因素有关,如pH、激光功率密度、照光时间以及luminol、HPD以及底物NAD(P)H浓度等的改变都可引起CL的变化.当NAD(P)H浓度远远大于HPD浓度时,CL强度与HPD浓度成正比关系,这表明化学发光测定可以作为检测HPD光敏反应的指标,而且HPD敏化的NAD(P)H光氧化过程中化学发光的产生是与活性氧物质(ROS)有关的.选择性应用O_2、H_2O_2、OH、~1O_2的专一性清除剂研究ROS及~1O_2在HPD敏化的NAD(P)H氧化过程中的作用,其主要结果如下:(1)NAD(P)H光氧化为中介的lumlnol化学发光在水溶液中受到铜锌超氧化物岐化酶(CuZn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和甲酸钠(F)的抑制,在D_2O中受到His和Met的抑制.1μg/ml的CuZn-SOD抑制可达84%,但再增加酶量,抑制程度不再增加;CAT的抑制作用也出现类似情况;F的抑制作用较弱,在14—42mM浓度范围内,抑制程度不超过60%.(2)CuZn-SOD对化学发光的抑制作用随照光时间延长而持续下降,而CAT和F的抑制作用却随照光时间延长而有上升的趋势.His和Met在D_2O中的作用比较复杂.(3)观察伴随NAD(P)H光氧化失活时OD_(340)值的变化,发现ROS清除剂在H_2O中对失活有保护作用,而~1O_2猝灭剂His和Met在D_2O中对失活有保护作用.上述清除剂和猝灭剂     

用共振喇曼光谱研究血卟啉衍生笺对紫膜菌紫质的光敏作用

本文用准共振喇曼光谱作为研究光动力损伤过程的探讨，从分子水平上研究了光敏剂血卟啉衍生物与紫膜菌紫质的作用。在观察到损伤现象的基础上对损伤部位进行了定位。初步确定生色团视黄醛中Ｃ－Ｃ和Ｃ＝Ｃ等键为其易受损部位。     

酞菁类光敏剂对肝癌细胞线粒体和微粒体的光辐射效应

酞菁(Phthalocyanin,PC)化合物结构类似卟啉,是一种新的光敏剂。它的四个苯环上各取代一个磺酸基成为四磺酸酞菁(phthalocyanine tetrasulfonate, TSPC)。TSPC-30μg/ml合并照光30分钟,肝癌细胞线粒体ATP酶和微粒体G-6-P酶明显受抑,对线粒体单胺氧化酶(MAO)没有明显影响。在上述剂量和照光条件下,线粒体和微粒体膜蛋白巯基含量显著减少,而膜脂质过氧化产物增多,线粒体膜通透性改变,导致线粒体肿胀。     

卟啉类化合物光敏助氧化作用的生物学效应

本文介绍了卟啉类光敏物质助氧化作用的应用,并分析其助氧化作用机理;由卟啉类化合物构效关系,探讨了卟啉类光敏助氧化作用的生物学应用前景。