Untersuchungen zum Geschlechtsdimorphismus von sechs Enzymen der Mäuseniere mit Hilfe von Cyproteronacetat

Zusammenfassung Geschlechtsreife männliche Mäuse erhielten 3 Wochen lang täglich 3 mg Cyproteronacetat s.c. Eine zweite Tiergruppe wurde orchidektomiert und 1 Woche später 20 Tage lang mit Testosteronpropionat oder Testosteronpropionat plus Cyproteronacetat behandelt. Als Kontrollen dienten intakte und orchidektomierte männliche sowie weibliche Mäuse.Einen Tag nach Ende der Behandlung wurden die Nieren entnommen und folgende Nierenenzyme histochemisch dargestellt: -Hydroxy-Buttersäure-Dehydrogenase, Succino-Dehydrogenase, alkalische und saure Phosphatase, unspezifische Esterase und -Glucuronidase. Für alle 6 Fermente ergaben sich hinsichtlich des Enzymverteilungsmuster geschlechtsgebundene Unterschiede.Wie die Befunde nach Orchidektomie und Orchidektomie plus Androgensubstitution zeigten, scheinen diese Geschlechtsunterschiede zumindest partiell androgenabhängig zu sein. Cyproteronacetat vermochte sowohl an intakten, als auch an orchidektomierten, mit Testosteron substituierten Mäusen die Androgenwirkungen auf das Enzymverteilungsmuster weitgehend zu hemmen.

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Investigations of sexual dimorphism of six renal enzymes in mice using cyproterone acetate

Summary Adult male mice received daily doses of 3 mg Cyproterone acetate s.c. over a three weeks period. A second group of animals was orchidectomized and, beginning one week later, was treated with Testosterone propionate (TP) or TP plus Cyproterone acetate. Intact and orchidectomized male and female mice were used as controls.24 hours after the end of treatment the kidneys were removed and the following renal enzymes were prepared histochemically: -hydroxy-butyric acid dehydrogenase, succinodehydrogenase, alkaline and acid phosphatase, unspecific esterase and -glucuronidase. For all six of these enzymes sex-dependent differences in the pattern of enzyme distribution were found.As shown by the findings following orchidectomy and orchidectomy plus androgen replacement, these sexual differences appear to be at least partially androgen-dependent. Cyproterone acetate was capable of blocking the androgen effects on the pattern of enzyme distribution to a great extent, both in intact and in orchidectomized, testosterone substituted mice.

     

Über die Natürlichen Indolverbindungen im Blumenkohl

Zusammenfassung Aus Blumenkohl (Brassica oleracea var.botrytis L.) wurden die darin enthaltenen Indolverbindungen nach vier verschiedenen Methoden extrahiert.Nach der papierchromatographischen und papierelektrophoretischen Aufgliederung der Extrakte aus Blumenkohlrosengewebe konnten insgesamt 13 mit Sprühreagentien färbbare Zonen nachgewiesen werden, bei denen es sich zum größten Teil um Indolderivate handeln dürfte. Hiervon wurden Tryptophan, -Indolylcarbonsäure, -Indolylessigsäure, -Indolylpropionsäure, -Indolylaldehyd und -Indolylacetonitril identifiziert.In den Blättern des Blumenkohls kommen im wesentlichen die gleichen Indolverbindungen wie in den Blumenkohlrosen vor.Die in den verschiedenen Entwicklungsstadien und Pflanzenteilen des Blumenkohls vorliegenden Mengen an -Indolylcarboxylsäure, -Indolylessigsäure und -Indolylpropionsäure wurden quantitativ bestimmt und untereinander verglichen; die Menge des jeweils vorhandenen -Indolylacetonitrils konnte aus methodischen Gründen nur relativ bestimmt werden.Bei der quantitativen Bestimmung konnte — bezogen auf das Frischgewicht — in den Blättern im Laufe der Ontogenie eine Zunahme im Gehalt an -Indolylcarboxylsäure, -Indolylessigsäure und -Indolylpropionsäure festgestellt werden. Beim -Indolylacetonitril-Gehalt der Blätter zeigte sich gleichfalls eine Zunahme während der Entwicklung; ausgewachsene Blätter von Pflanzen mit Rosen (Tabelle 3, Stadium 4) wiesen aber einen geringeren Gehalt an -Indolylacetonitril auf als die Blätter jüngerer Pflanzen (Stadium 1–3).Der Gehalt an -Indolylcarboxylsäure, -Indolylessigsäure, -Indolylpropionsäure und -Indolylacetonitril ist im Gewebe von Blumenkohlrosen wesentlich höher als in den anderen extrahierten Pflanzenteilen (Blätter, Blütensprosse und Blüten, unreife Früchte).Mit 1 TextabbildungErster Teil einer Dissertation der Naturwissenschaftlich-Philosophischen Fakultät der Justus Liebig-Universität, Gießen.Die Abkürzungen der Indolverbindungen sind auf S. 467 und in Tabelle 1 zusammengestellt.     

Über die Eignung von Naphthyl-α-l-fucosiden zur Untersuchung der α-l-Fucosidasen

Zusammenfassung Verglichen mit 1- und 2-Naphthyl--d-glucosid,--d-galactosid,--d-glucuronid,--d-N-acetylglucosaminid,--d-glucosid,--d-galactosid und--d-mannosid werden 1- und 2-Naphthyl--l-fucosid schneller oder im gleichen Ausmaß von Homogenaten verschiedener Rattenorgane hydrolysiert. Trotzdem fällt der histochemische Nachweis der -l-Fucosidasen methodenunabhängig im Gegensatz zu dem der anderen Glykosidasen überwiegend negativ aus. Ursache dafür ist die massive Hemmung der -l-Fucosidase durch Aldehydfixation und Diazoniumsalze; die Inhibitionsrate liegt bei 90% bzw. zwischen 85 und 98%; die - und -d-Glucosidase, - und -d-Galactosidase, -d-Mannosidase, -d-Glucuronidase sowie -d-N-Acetylglucosaminidase werden durch Aldehydfixation oder Kuppler höchstens zu 70% gehemmt. Daher können 1- und 2-Naphthyl--l-fucosid für die histochemische Darstellung der -l-Fucosidase nicht einschränkungslos empfohlen werden. Kleine Mengen Dimethylformamid hemmen die meisten Glykosidasen nicht.Für biochemische Messungen der -l-Fucosidase eignet sich speziell 1-Naphthyl--l-fucosid und läßt sich an Stelle von p-Nitrophenyl--l-fucosid werwenden. Bei der fluorometrischen Untersuchung der -l-Fucosidase in Rattenorganen mit dem 2-Naphthylderivat ergeben sich bemerkenswerte Aktivitätsunterschiede.

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Suitability of naphthyl--l-fucosides for the investigation of -l-fucosidases

Summary In comparison with 1- and 2-naphthyl -d-glucoside, -d-galactoside, -d-glucuronide, -d-N-acetylglucosaminide, -d-glucoside, -d-galactoside and -d-mannoside 1- and 2-naphthyl -l-fucoside are hydrolyzed more quickly or to the same extent by homogenates prepared from freezedried cryostate sections of various rat organs. Nevertheless, when the fucosides are employed for the histochemical demonstration of -l-fucosidase mostly negative data were obtained independent on the method used, whereas all other naphthyl glycosides deliver positive results. The reasons for these discrepancies are the marked inhibition of -l-fucosidase by aldehyde fixation and diazonium salts. Then, -l-fucosidase activity is suppressed to 90% and between 85 and 98% respectively; the inhibition of - and -d-glucosidase, - and -d-galactosidase, -d-mannosidase, -d-glucuronidase and -d-N-acetylglucosaminidase by the fixative or coupling reagent does not exceed 70%. Therefore 1- and 2-naphthyl -l-fucoside cannot be recommended in general for histochemical purposes. Small amounts of dimethylformamide do not influence the activity of most of the glycosidases investigated.For biochemical measurements, however, especially 1-naphthyl -l-fucoside represents a suitable alternative in a fluorometric procedure instead of p-nitrophenyl -l-fucoside used for the photometric evaluation of -l-fucosidase. With the fluorometric method the enzyme was measured in rat organs, which posses remarkably different activities of -l-fucosidase.

     

The effects of silt and sand on the invertebrate fauna of streams and rivers

Summary Most of the literature concerned with the effects of silt and sand on the invertebrate fauna of streams and rivers has described changes taking place when biotopes are completely smothered by silt and sand. In few of these studies were the kinds of animals found recorded. There have been few studies of the effect of silt and sand on individual species. The invertebrate fauna of two biotopes in the streams and rivers of the Vaal River system, South Africa, changed with the amount of silt and sand in the watercourses. Where there were large amounts of silt and sand the variety of animals recorded from the stones in current biotopes was reduced, but the density of the fauna as a who did not change (Tables I and II, Unstable Depositing Zones, summer). However the density of many groups of animals was affected (Table III). Some of the animals adversely affected by silt and sand appeared in larger numbers below impoundments in which silt and sand would settle. In the sediment biotopes the summer density of the fauna was lowest where there was a lot of silt and sand (Table IV, the two Unstable Depositing Zones). Large amounts of silt and sand were associated with large summer declines in the surface dwelling animals as a proportion of the whole sediment fauna (Table IV). Differences between the summer proportions of surface dwelling forms in fine and coarse sediments were due to faunal differences. Sediments were not studied below impoundments.It is concluded that there may be considerable changes in the composition of the stones in current fauna due to silt and sand without the biotope being smothered, and that increases in the amount of silt and sand in river beds lead to increased instability of the sediments, which adversely affects their fauna.

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Zusammenfassung Die Abhandlungen, die sich mit dem Einflu von Schlamm und Sand auf die Invertebratenfauna von Bächen und Flüssen befassen, haben meistens die Veränderungen beschrieben, die sich ergeben, wenn Biotope ganz von Schlamm und Sand erstickt werden. In wenigen dieser Forschungen werden die Arten der gefundenen Tiere eingetragen. Es gibt wenige Arbeiten über den Einflu von Schlamm und Sand auf einzelne Arten.Die Invertebraten-Fauna zweier Biotope in Bächen und Flüssen des Vaalsystems, Süd-Afrika, hat sich mit der Menge von Schlamm und Sand in den Flüssen geändert. Wo es groe Mengen von Sand und Schlamm gab, ist die Verschiedenartigkeit der Tiere von Steinen in flüssigem Biotop vermindert worden, aber die Dichte der ganzen Fauna ist dieselbe (Tabellen I und II, Unstable Depositing Zones, Summer). Jedoch die Dichte vieler Tiergruppen ist beeinträchtigt worden (Tabelle III). Einige von Schlamm und Sand ungünstig beeinflute Tiere erscheinen in gröerer Anzahl unter Einsperrungen, wo Schlamm und Sand sich niederschlagen können. In Niederschlagbiotopen ist die Sommerdichte der Fauna am niedrigsten, wo es viel Schlamm und Sand gibt (Tabelle IV, Die zwei Unstable Depositing Zones). Groe Mengen von Schlamm und Sand gehen mit groen Sommerabnahmen der oberflächlich lebenden Tiere im Verhältnis zu der ganzen Niederschlagfauna zusammen (Tabelle IV). Unterschiede zwischen den Verhältnissen oberflächlich lebender Formen in feinen und groben Niederschlägen im Sommer sind die Folge faunaler Unterschiede. Niederschläge unterhalb von Einsperrungen sind nicht untersucht worden.Es wird geschlossen, da es beträchtliche Änderungen in der Zusammenstellung der Fauna der Steine in Flüssen wegen Schlammes und Sandes geben kann, ohne da der Biotop erstickt wird, und da Steigerungen der Menge von Schlamm und Sand in Flubetten zu vermehrter Instabilität der Sedimente führt, welche ungünstig auf die Fauna einwirkt.

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This work forms part of a dissertation submitted to Rhodes University Grahamstown, in fulfilment of the requirements for the degree of Doctor of Philosophy.     

Azoindoxylverfahren zum Hydrolasennachweis

Zusammenfassung Untersucht wird die Eignung verschiedener Azoindoxyl-methoden zum lichtmikroskopisch-histochemischen Nachweis der -N-Acetylglucosaminidase. Die Inkubationsmedien enthalten 0,5 mg N-Acetyl-(5-bromindol-3-yl)--d-glucosaminid (5-Br-3-Indolyl--d-N-acetylglucosaminid; 1 mg gelöst in 0,05 ml Dimethylformamid) in 1 ml 0,1 M Citronensäure-Phosphat-Puffer, pH 4,5 oder 5. Als Simultankuppler werden 0,02 ml Hexazonium-p-rosanilin oder-neufuchsin oder tetrazotiertes BAXD/ml oder 0,5 mg Fast Blue B oder Fast Garnet GBC/ml erprobt. Die besten Resultate liefert unabhängig von Gewebevorbehandlung und Organ hexazotiertes Neufuchsin.Im Vergleich zur Azofarbstoffreaktion mit Naphthol-AS-BI--d-N-acetylglucosaminid und hexazotiertem p-Rosanilin oder Neufuchsin oder tetrazotiertem BAXD liefert speziell die Azoindoxylmethode mit hexazotiertem Neufuchsin bessere oder identische Resultate. Die Indigogen-, Metallsalzund Tetrazoliumreaktion sind dem Azoindoxylverfahren meistens unterlegen; eine Ausnahme macht die Tetrazoliummethode mit BSPT.Beim Azoindoxylverfahren mit Hexazonium-p-rosanilin ist vorteilhaft, daß der Azoindoxylfarbstoff osmiert werden kann, in organischen Solventien und Kunstharzen weitgehend unlöslich ist und deshalb für die ultracytochemische Darstellung der -N-Acetylglucosaminidase in Frage kommt. Unter den übrigen Methoden ist dies nur noch mit der Tetrazoliumreaktion und BSPT der Fall; sein Formazan läßt sich ebenfalls osmieren.Mit hexazotiertem Neufuchsin zur Simultankupplung und 5-Br-3-Indolyl--d-glucosaminid als Substrat kann die -N-Acetylglucosaminidase nach Blockfixation in Form- oder Glutaraldehyd in den Lysosomen zahlreicher Rattenorgane und-gewebe einwandfrei nachgewiesen werden.

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Azoindoxyl methods for the investigation of hydrolasesIII. Histochemical studies of -d-N-acetylglucosaminidase

Summary The suitability of various azoindoxyl procedures for the light microscopical demonstration of -N-acetylglucosaminidase is described. The incubation media tried consist of 0.5 mg N-Acetyl-(5-bromindol-3-yl)--d-glucosaminide (5-Br-3-indolyl--d-N-acetylglucosaminide; 1 mg dissolved in 0.05 ml N,N-dimethylformamide) in 1 ml 0.1 M citric acid phosphate buffer, pH 4.5 or 5. 0.02 ml hexazotized p-rosaniline or new fuchsine/ml or tetrazotized BAXD or 0.5 mg Fast Blue B or Garnet GBC/ml were employed as a coupling reagent. Hexazotized new fuchsine yields the best results independent on the pretreatment of the tissue and the organ investigated followed by hexazonium-p-rosaniline.Compared with the azo dye method using naphthol AS-BI -d-N-acetyl-glucosaminide as a substrate and hexazotized p-rosaniline or new fuchsine or tetrazotized BAXD for simultaneous coupling especially the azoindoxyl technique with the new fuchsine is equivalent or superior. When the indolyl glucosaminide is used in the indigogenic, tetrazolium or metal precipitation method the results are mostly inferior with the exception of the tetrazolium reaction using BSPT.However, the main advantage of the azoindoxyl procedure is that at least the azoindoxyl dye deriving from hexazotized p-rosaniline can be osmificated and withstands treatment with organic solvents and resins. Therefore, the reaction product seems to be suitable for the electron microscopic demonstration of glucosaminidase. Among the other reaction principles this can reliably be achieved only with BSPT as a tetrazolium salt followed by osmification of its formazan.After fixation of blocks of tissue in form- or glutaraldehyde -d-N-acetylglucosaminidase can be localized with 5-Br-3-indoxyl--d-N-acetylglucosaminide as a substrate and hexazotized new fuchsine for simultaneous coupling in the lysosomes of many rat organs.

     

Kerntrockengewicht und Beteiligung von 3H-Thymidin an der DNS-Synthese in Einzelzellen der regenerierenden Rattenleber

Zusammenfassung Autoradiographische und interferometrische Untersuchungen an Tupfpräparaten der regenerierenden Rattenleber ergeben eine nahezu quantitative Beziehung zwischen Kerntrockengewicht und Einbau von ³H-Thymidin in die DNS. Zur Bestimmung des relativen ³H-Thymidingehalts des Einzelkerns wurde die Silberkornzahl auflichtphotometrisch bestimmt und für die Koinzidenz der -Teilchen sowie für die -Selbstabsorption korrigiert. Die Ergebnisse lassen eine lineare Korrelation zwischen Kerntrockengewicht und ³H-Thymidineinbau zweifelhaft erscheinen.

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Summary Autoradiographic and interferometric investigations have been performed in single nuclei from the regenerating liver of the rat. The results indicate an almost quantitative correlation between nuclear dry mass and amount of ³H-thymidine incorporated into DNA. In order to determine the relative amount of ³H-thymidine per single cell grain counts were done by incident light photometry. They were corrected for the coincidence of -corpuscles as well as for the influence of -self absorption. A non-linear relation between nuclear dry mass and incorporation of ³H-thymidine per nucleus seems to be most probable.

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Studie im Rahmen der Assoziation Hämatologie EURATOM-GSF.

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Wir danken Herrn Prof. Dr. W. Maurer, Inst. für Medizinische Isotopenforschung der Universität Würzburg, für die Überlassung der Unterlagen zur Berechnung von - Absorption und - Selbstabsorption.     

Verteilung und Aktivität hydrolytischer Enzyme in Hypophysenadenomen

Zusammenfassung An 17 Hypophysenadenomen [12 Chromophobe (endokrin-inaktive), 5 Mischtypadenome (endokrin-aktive)] wurde das Verhalten und die Aktivität der hydrolytischen Enzyme -Galaktosidase, -Glucuronidase, -Glykosidase und Arylsulfatase mit histochemischen Methoden geprüft.Die Mischtypadenome zeigen insgesamt eine höhere Aktivität als die Chromophoben. Dabei reagieren -Galaktosidase und -Glykosidase am stärksten, -Glucuronidase etwas schwächer, während Arylsulfatase die niedrigste Aktivität zeigt. Die Befunde werden mit anderen enzymhistochemischen Untersuchungen an Hypophysenadenomen und tierexperimentellen Ergebnissen verglichen. Daraus folgt, daß wahrscheinlich zwischen der Aktivität der untersuchten lysosomalen Enzyme und der endokrinen Aktivität ein Zusammenhang besteht.

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Summary Behaviour and activity of the hydrolytic enzymes -galactosidase, -glucuronidase, -glycosidase and arylsulphatase are tested in 17 adenomas of the hypophysis (12 chromophobic, endocrine-inactive; 5 mixed cell adenomas, endocrine-active).Mixed cell adenomas show an altogether higher activity than chromophobic adenomas. -galactosidase and -glycosidase show the highest, -glucuronidase a slightly lower, and arylsulphatase the lowest activity. The findings are compared with other enzymhistochemical methods and results from animal experiments. The results of this comparison indicate that there is a correlation between the endocrine activity of the lysosomal enzymes in question.

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Der Deutschen Forschungsgemeinschaft danken wir für ihre Unterstützung.

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Fräulein Renate Kott, Fräulein Marianne Lehnen und Fräulein Edith Klasmeier danke ich für ihre technische Unterstützung.     

Enzym-Topochemie von Frühentwicklung und Implantation des Kaninchens

Zusammenfassung Untersucht werden Frühstadien der Entwicklung des Kaninchens von der Ovulation bis zur Implantation, einschließlich Tube und Uterus. Registriert wird die Verteilung von Glykosidasen (-Galaktosidase, Neuraminidase, Glukosaminidase, -Glukuronidase, -Glukosidase), vor allem im Hinblick auf den Stoffwechsel von Mukosubstanzen. Die verwendete Methode zum Neuraminidasenachweis ist ein erster Versuch zur histochemischen Lokalisation dieses Enzyms.Ergebnisse. In Furchungsstadien sind -Glukuronidase und Glukosaminidase auffällig aktiv. Eine Funktion bei den wichtigen morphogenetischen Prozessen dieser Phase wird vermutet. Das Epithel der Tube zeigt vor allem eine Aktivität von Glukosaminidase und -Galaktosidase, die möglicherweise eine Beziehung zur Bildung der Mukoproteidschicht haben. Im Uterusepithel sind in allen Stadien -Galaktosidase und Glukosaminidase aktiv; -Glukuronidase tritt vor allem vor dem Eintritt des Keims in den Uterus und bei der Implantation hervor. Für die Auflösung der Blastozystenhüllen und für die Implantation ist wahrscheinlich die -Galaktosidase-, -Glukuronidase-und Glukosaminidaseaktivität der Trophoblastsprosse von Bedeutung. Neuraminidase ist dagegen vor allem im Uterusepithel lokalisiert.

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Enzyme topochemistry of the early development and implantation in the rabbitII. Glycosidases

Summary Early stages of development and the surrounding tissues of the Fallopian tube and the uterus are studied in the rabbit from ovulation to implantation. The topochemistry of the following glycosidases is demonstrated: -galactosidase, neuraminidase, glucosaminidase, -glucuronidase, -glucosidase. The distribution given for neuraminidase is the result of preliminary attempts to develop histochemical procedures for this enzyme.Results. In cleaving eggs, the activities of -glucuronidase and glucosaminidase are dominant. The epithelium of the Fallopian tube shows an activity of glucosaminidase and -galactosidase possibly correlated to the formation of the mucoproteid layer. These enzymes are also demonstrated in the epithelium of the uterus in all stages, whereas -glucuronidase has its maximum activity before eggs enter the uterus and at implantation. In the trophoblastic knobs, these three enzymes could have a physiological role in the processes of dissolution of blastocyst coverings and implantation. Neuraminidase activity is found in the epithelium of the uterus.

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Abkürzungen EDTA Äthylendiamintetraazetat - FBB Fast Blue B Salt (Echtblausalz B) - MS Mukosubstanz, -en - NA Neuraminsäure, Salinsäuren - NAase Neuraminidase - Nitro-BT Nitro Blue Tetrazolium Chloride - nMS neutrale Mukosubstanz, -en - p.c. post coitum - h.p.c., d p.c. Studen p.c., Tage p.c. - PMS Phenazinmethosulfat - PVP Polyvinylpyrrolidon - sMS saure Mukosubstanz, -en - v/v Mischungsverhältnis zweier Volumina - w/v Gewicht pro Endvolumen     

Die Biosynthese der Poly-β-hydroxybuttersäure durch Knallgasbakterien

Zusammenfassung Ein Verfahren zur Ermittlung der ¹⁴C-Verteilung in Poly--hydroxybuttersäure wird angegeben. Man überführt Poly--hydroxybuttersäure in Crotonsäure und oxydiert diese mit Kaliumpermanganat zu Essigsäure und CO₂. Die Carboxylgruppen der Crotonsäure und der Essigsäure werden durch Schmidt-Reaktion erfaßt.

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Summary An experimental method for the determination of the ¹⁴C-distribution in poly--hydroxybutyric acid is described. Poly--hydroxybutyric acid is converted to crotonic acid and further oxidized with KMnO₄ to acetic acid and CO₂. The activity in the carboxyl-groups of crotonic acid and acetic acid was measured following Schmidt-degradation.

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Auszug aus der gleichlautenden Dissertation der mathematisch-naturwissen-schaftlichen Fakultät der Universität Göttingen 1963.     

Über den histochemischen und mikrochemischen Nachweis der β-Galactosidase mit 1-Naphthyl-β-galactopyranosid

Zusammenfassung Es wird ein simultanes Azokupplungsverfahren zur intrazellulären Darstellung der sauren (Hetero-) und neutralen -Galactosidase (Lactase) in verschiedenen Organen von Ratte, Maus und Meerschweinchen beschrieben.Das Inkubationsmedium enthält 4,5–9mg 1-Naphthyl--galactopyranosid (gelöst in 0,4ml NN-Dimethylformamid) und 0,5–0,8ml 2% Hexazonium-p-rosanilin in 9 ml 0,1 M Citrat-Puffer, pH 5 (Hetero--galactosidase) oder 5,5 (Lactase).Unter allen Organen reagiert die saure -Galactosidase am kräftigsten in den Lysosomen von Nebenhoden, Niere, Nebenniere, Schilddrüse, Glandula präputialis und inguinalis, Milz, Colon und Plexus chorioideus; die neutrale -Galactosidase kommt in mittlerer Aktivität nur im intestinalen Stäbchensaum vor.Die intralysosomale Darstellung der löslichen Hetero--galactosidase erfordert Blockfixation in Glutaraldehyd; die Lactase kann an frischen oder gefriergetrockneten Schnitten untersucht werden. Im proximalen Tubulus der Rattenniere wird die saure -Galactosidase durch Formol unabhängig von der Konzentration des Fixans verglichen mit Glutaraldehyd stärker gehemmt. Spätestens 10 min nach Beginn der Fixation hat das Enzym seine Basisaktivität erreicht. Spülen in hypertoner Zuckerlösung macht die Inhibition der Hetero--galactosidase teilweise rückgängig.Die mit dem Azokupplungs- und Indigogen-Verfahren gewonnenen Befunde sind weitgehend identisch.

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On the histochemical and microchemical demonstration of -galactosidase by means of 1-naphthyl--galactopyranoside

Summary A simultaneous azo coupling method for the intracellular demonstration of acid (hetero-) and neutral -galactosidase (lactase) in various organs of rats, mice and guinea-pigs is described.The recommended incubation medium consists of 4.5–9 mg 1-naphthyl--galactopyranoside (dissolved in 0.4 ml NN-dimethylformamide) and 0.5–0.8 ml 2% hexazonium-p-rosaniline in 9 ml 0.1 M citrate buffer, pH 5.0 (hetero--galactosidase) or 5.5 (lactase).Among all organs investigated the strongest acid -galactosidase reaction regularly occurs in the lysosomes of the epididymis, kidney, adrenal, thyroid, preputial and inguinal gland, spleen, colon and chorioid plexus; the neutral -galactosidase can only be detected in the intestinal brush border exhibiting a moderate activity.Because hetero--galactosidase is a highly soluble enzyme bloc-fixation using glutaraldehyde becomes necessary to achieve a precise intralysosomal localization; for the demonstration of lactase fresh or freeze-dried cryostat sections are suitable. —In the proximal tubule of the rat kidney independent of their concentration the inhibition of acid -galactosidase following treatment with formol surpasses that of glutaraldehyde. Within the first ten minutes of fixation the enzyme reaches its basis activity. The recovery rate of renal hetero--galactosidase considerably increases in the course of washing in hypertonic sugar solution.In comparison with the indigogenic technique nearly identical results can be obtained with the azo coupling procedure.

     

Ein fluoreszenzmikroskopischer Nachweis von β-Glucosidase in Wurzeln vonCicer arietinum (L.)

Zusammenfassung Die Lokalisierung von -Glucosidasen in Wurzeln der Kichererbse [Cicer arietinum (L.)] wurde in einem einstufigen fluoreszenz-optischen Verfahren mit 4-Methyl-umbelliferyl-D-glucosid untersucht. Am Beispiel der Kichererbse wird gezeigt, daß in polyphenolhaltigen Pflanzen herkömmliche Azokupplungsverfahren zur Glucosidaselokalisierung nicht anwendbar sind. Die mit der neuen Methode erhaltenen Ergebnisse decken sich im wesentlichen mit denen aus vergleichbaren Untersuchungen und zeigen, daß -Glucosidasen nicht vorhanden sind. Aryl--Glucosidasen wurden vorwiegend im äußeren Cortexbereich gefunden und nehmen mengenmäßig zur Wurzelspitze hin zu.

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Localization of -glucosidase in roots ofCicer arietinum (L.) by a fluorescence technique

Summary The localization of -glucosidases in roots of garbanzo beans [Cicer arietinum (L.)] has been investigated by a one-step fluorescence optical procedure using 4-methylumbelliferyl--D-glucoside. It is shown that the well known azo-coupling test for the localization of glucosidases cannot be applied in polyphenol containing plants. The results obtained with the new method are comparable with those described in other investigations and further show that -glucosidases are absent from the root tissues investigated. The aryl--glucosidases were mainly detected in the outer region of the cortex and quantitatively increase towards the root tip.

     

Die sog. Asphalt-Flecke der kultivierten Herzmuskelzellen — eine im Phasenkontrastmikroskop sichtbare Formation des Glykogens

Zusammenfassung Bei einer korrespondierenden Betrachtung dreier Asphaltflecke von lebenden Herzmuskelzellen in der Kultur und den identischen Stellen im Elektronenmikroskop erweist sich der Fleckeninhalt als eine Anhäufung locker beieinanderliegender -Teilchen des Glykogens.Präparate für die elektronenmikroskopische Untersuchung konnten hergestellt werden, nachdem der schweren Fixierbarkeit des Fleckeninhaltes mit der Verwendung des Glutaraldehyds in Kakodylatpuffer und der Spülung mit 50%igem Alkohol nach der Reynold'schen Kontrastierung Rechnung getragen war.Mit dieser Diagnose ist zugleich bewiesen, daß Glykogen im Phasenkontrastbild der lebenden Zelle sichtbar werden kann.

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The asphalt coloured spots of living heart muscle cells — glycogen formations visible under phase contrast

Summary The contents of three asphalt coloured spots previously examined in the living heart muscle cells in a culture by a phase contrast microscope and subsequently identified in the electron microscope by the method of Gross and Riedel proved to be accumulations of -particles of glycogen loosely lying together.Suitable sections could be manufactured for electron microscope after complying with the difficulty of the spot contents to be fixated — revealed during the histochemical investigations. One had to use glutaraldehyde in cacodylate buffer as the first fixative and 50% alcohol instead of distilled water for rinsing after the Reynold's staining.By this diagnosis at the same time, it is proven that certain glycogen formations in living cells are visible under phase contrast.

Mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft.     

Zentrale versus periphere Kontrolle des Gesanges von Grillen (Gryllus campestris)

Zusammenfassung Bei Gryllus campestris werden Singbewegung und Aktivität einiger mesothorakaler Singmuskeln untersucht. Aus operativen Eingriffen in das Bewegungssystem, die Muskeln und ihre Nerven sowie in die Konnektive des thorakalen Bauchmarks wird gefolgert: Die Gesänge der Grillen sind überwiegend zentral programmiert; eine periphere Kontrolle verändert sie nur in engen Grenzen. Lautmuster und zugeordnete Muskelaktivität werden kaum geändert, nachdem die Tegmina oder die Mittelbeine einseitig oder beidseitig amputiert sind, ebenso wenig nach Belasten der Vorderflügel mit Gewichten bis zu 120 mg. Grillen mit kurzen Vorderflügeln forme néoténique und mit langen Hinterflügeln forme makroptère zeigen ebenfalls ein normales Aktivitätsmuster der Muskeln. Tegmina, die in der Ruhelage festgelegt sind, beeinflussen lediglich die Entladungshäufigkeit der fast-Einheiten im Subalar- und 2. Basalarmuskel, und zwar links mehr als rechts. Es wird nach solchen Eingriffen eine Asymmetrie im motorischen System der Grillen aufgedeckt. Auch eine Belastung der Tegmina, nicht aber die Amputation, erhöht die Muskelaktivität, allerdings nur in Pleuralmuskeln der linken Seite.Muskeln, deren ventrale Ansatzstellen am Sekelet durchtrennt sind, degenerieren nicht, solange Sauerstoffversorgung und Innervation gewährleistet sind. Im Gesang, der auch noch nach solchen Eingriffen auftritt, arbeiten sie wie beim normalen Tier. Grillen können noch zirpen, wenn die Pro- und Remotoren und die Subalar- und Basalarmuskeln an einer Ansatzstelle abgelöst sind; ja selbst nach Denervierung dieser Muskeln kann man von den Einheiten der intakt gebliebenen dorsalen Längsmuskeln die gesangsspezifische Aktivität ableiten.Nur nach der Durchtrennung des linken Konnektivs zwischen dem 1. und 2. Brustganglion findet man eine Assymmetrie in der Muskelaktivität, wobei nur die linke Seite betroffen ist. Dabei können Subalar- und 2. Basalarmuskel ihre Entladung erhöhen, ggf. tonisch feuern.

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Central versus peripheral control in cricket stridulation

Summary Behavioural studies and recordings from single fast motor units of several mesothoracic muscles of Gryllus campestris before and after operations at the stridulatory apparatus, the corresponding muscles, the motor nerves, and the thoracic connectives gave strong evidence that song patterns in crickets mainly depend upon centrally programmed phasing mechanisms with very limited modulation by peripheral control.Muscular activity during sound production is not significantly changed after the removal of tegmina or middle legs from one or both sides or after loading the tegmina with weights up to 120 mg. No differences occur in the modifications forme néoténique and forme makroptère. Tegmina fixed at resting position do not cause a change in discharge patterns of pro- and remotor-muscles. However, the activity of the fast motor units of the 2nd basalar and the subalar muscle shows a slight increase due to repetitive firing. This increase is more pronounced on the left than on the right side and demonstrates an asymmetry within the cricket's neuronal system not known before. Tegmina loaded give rise to a slight increase in activity but only in units of the left subalar muscle, whereas amputation does not affect the motor activity at all. Muscles cut close to one point of their insertion at the skeleton do not degenerate, as long as oxygen supply and innervation remain intact. They act during sound production as do those in intact males and several crickets have been observed singing normally after the pro- and remotor as well as the subalar and 2nd basalar muscles have been cut. Even males which have the motor nerves to these muscles severed do stridulate, as is shown by recordings from units of the dorsal longitudinal muscles; however the tegmina are only slightly moved.After severing only the left connective between the pro- and mesothoracic ganglion, an asymmetry in the muscular activity can be demonstrated. This leads to an increase in firing activity of only the left pleural muscles (M 98,99); cutting the right connective does not give a similar effect.

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Mit dankenswerter Unterstützung durch die Stiftung Volkswagenwerk.     

Zur Histochemie von Hydrolasen im Hoden des Hundes und der Katze

Zusammenfassung Wir untersuchten das Verteilungsmuster von unspezifischer Esterase, alkalischer Phosphatase, Adenosintriphosphatase, 5-Nucleotidase und -D-Glucuronidase im Hoden von Hund und Katze. Besonders hervorzuheben sind eine starke Aktivität der unspezifischen Esterase in den Sertolizellen der Katze, der Reichtum der Membrana propria aller Hodentubuli an alkalischer Phosphatase und Adenosintriphosphatase sowie die kräftige Reaktion auf -D-Glucuronidase in den Leydigzellen beider Tierarten.Die Befunde werden diskutiert.

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Summary The localization of unspecific esterase, alkaline phosphatase, adenosine triphosphatase, 5-nucleotidase, and -D-glucuronidase in the testes of cat and dog was demonstrated by histochemical means. We observed a strong esterase activity in the Sertoli cells of the cat and high amounts of alkaline phosphatase and adenosine triphosphatase in the membrana propria of all seminiferous tubules. In both species the principal site of -D-glucuronidase was in the Leydig cells. Our findings obtained being discussed.

     

Peptide des β-Alanins als Ersatz für die freie Aminosäure bei pantothensäurebedürftigen Hefezellen und ihr Verhalten gegenüber dem β-Alanin-Antagonisten Asparagin

Zusammenfassung Pantothensäurebedürftige Hefezellen können ihren Bedarf an diesem Vitamin nicht allein aus -Alanin decken, sondern auch aus Benzoyl--Alanin, -Alanyl-d,l-Norleucin und -Alanyl-l-Histidin. Der Antagonist Asparagin hemmt die Verwertung dieser Peptide genauso wie diejenige der freien Aminosäure. Durch höhere Konzentrationen an -Alanin oder -Alanyl-d,l-Norleucin läßt sich die Hemmwirkung nicht allein kompensieren, es kommt sogar zu einer Förderung des Hefewachstums. Der Antagonist wird dann zum Synergisten.

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Summary The -alanine containing peptides benzoyl--alanine, -alanyl-d,l-norleucine and -alanyl-l-histidine can substitute for the amino acid -alanine in a pantothenic acid requiring yeast. Asparagine, an antagonist of -alanine, affects these peptides in a similar manner. In combination with an overdose of -alanine or -alanyl-d,l-norleucine, asparagine is no longer an antagonist but becomes a synergist.

     

Fermenttopochemische Untersuchungen an der Nebennierenrinde des Meerschweinchens nach Abschluss einer langfristigen Cortisonvorbehandlung

Zusammenfassung Das histotopochemische Verhalten verschiedener Fermente wurde an der Nebenniere von 28 Tage lang mit Cortison vorbehandelten Meerschweinchen untersucht.Es findet sich bei allen beobachteten Fermenten mit Ausnahme der DPN-Diaphorase zum Zeitpunkt des Absetzens der Vorbehandlung ein Aktivitätsabfall in der Zona Fasciculata. In der Zona Glomerulosa war nur bei den sauren Phosphatasen, der Glucose-6-phosphatdehydrogenase und der 3-ol-Steroiddehydrogenase eine Verminderung der Aktivität festzustellen.Die Normalaktivität wurde von den einzelnen Fermenten nach verschieden langen Zeiträumen wieder erreicht. Bei 3-ol-Steroiddehydrogenase, Glucose-6-phosphatdehydrogenase und den alkalischen Phosphatasen tritt dabei ein rebound auf.Zwischen den gefundenen Fermentveränderungen und dem Verhalten der Kernvolumina und der 17-OHCS-Ausscheidungskurve in der Restitutionsphase bestehen Zusammenhänge, die diskutiert werden.

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Summary The histotopochemical distribution of various enzymes is studied in the adrenal cortex of Guinea-pigs after a 28 days administration of cortisone.All the enzymes investigated show a decrease of enzymatic activity in the zona fasciculata directly after the administration of cortisone has ceased. In the zona glomerulosa only acid phosphatases, glucose-6-phosphatedehydrogenase and 3-ol-steroiddehydrogenase show a decrease of activity. The enzymes concerned reached normal activity after different periods. A rebound was noted with 3-ol-steroiddehydrogenase, glucose-6-phosphatedehydrogenase and alkaline phosphatases.The relations between the changes in the enzymatic activity, the reaction of the nuclear volumes and the 17-OHCS-excretion curve in the restoration period are discussed.

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Mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft.

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Ausgeführt unter Leitung von Priv.-Doz. Dr. M. Herrmann.     

Darstellung und Charakterisierung eines Lipoproteins mit Antigenwirksamkeit im Lp-System

Zusammenfassung Unter Anwendung verfeinerter Trennverfahren wurde das -Lp(a+)-Lipoprotein des menschlichen Serums in immunologisch und elektrophoretisch reiner Form dargestellt. Es wurde hinsichtlich seiner Lipidzusammensetzung analysiert und mit ebenfalls immunologisch und elektrophoretisch rein erhaltenen -Lp(a-)- und ₁-Lipoproteinen verglichen.

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Separation and characterization of a lipoprotein with antigenic activity in the Lp-system

Summary Through application of refined separation techniques the -Lp(a+)-lipoprotein of human serum was characterized in an immunologically and electrophoretically pure form. It was analyzed with regard to its lipid-composition and compared to likewise electrophoretically and immunologically pure -Lp(a-)- and ₁-lipoproteins.

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Untersuchung mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft     

Beobachtungen zum Antagonismus zwischen Asparagin und β-Alanin

Zusammenfassung Hefezellen können aus dem Nährmedium soviel -Alanin aufnehmen, daß sie damit auch nach Übertragung in ein davon freies Substrat beträchtlich wachsen können. Diese Aufnahme von -Alanin ist auch in Abwesenheit einer Stickstoffquelle und nach Verarmung an Stickstoff möglich. Asparagin hemmt als Antagonist des -Alanins dessen Verwertung nur dann, wenn beide Verbindungen gleichzeitig geboten werden. Es kann, wenn es vor der Inkubation mit -Alanin geboten wird, dessen spätere Aufnahme nicht behindern, und es kann, nachträglich geboten, die Exosmose nicht steigern. Aus diesen Beobachtungen wird geschlossen, daß -Alanin nicht nur bis zum Konzentrationsausgleich in die Zelle eindringt, sondern teilweise in höhermolekulare Verbindungen (Pantothensäure, Coenzym A) eingebaut und damit festgelegt wird. Der Vermutung anderer Autoren, wonach antagonistisch wirkende Aminosäuren lediglich den Aufnahmevorgang behindern sollen, wird entgegengehalten, daß im Falle des Antagonismus zwischen -Alanin und Asparagin viel eher mit einer Behinderung der Weiterverarbeitung zu rechnen ist.     

Functional significance of the alarm pheromone composition in various morphs of the green peach aphid, Myzus persicae

Three isomers of farnesene occur in the siphon excretions of at least four aphid species: the siphon excretions of Myzus persicae contain (E)--farnesene, as well as (Z,E)--farnesene. The significance of (E)--farnesene as an alarm pheromone was evaluated by the investigation of the ratios and quantities of the above-mentioned farnesene isomers in various morphs of Myzus persicae (Sulz.). It is suggested that a relationship exists between the production of farnesene isomers and the occurrence of morphs.

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Zusammenfassung Es ist bekannt, dass drei Isomere des Farnesens in der Siphonensekret von wenigstens vier Blattläusmorphen vorkommen. So enthielt zum Beispiel das Siphonensekret bei Myzus persicae (E)--, (Z,E)-- und (E,E)--Farnesen. Um die Bedeutung des (E)--Farnesens zu ermitteln, haben wir die Mengen und Verhältnisse der Farnesenisomere in verschiedenen Morphen von Myzus persicae bestimmt. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass eine Beziehung zwischen der Produktion von Farnesenisomeren und der Bildung der Morphe in dieser Blattläus besteht.

     

Gene frequencies of soluble glutamic-pyruvic-transaminase in a northern German population (Hamburg)

Summary Different LDH isoenzyme patterns are present in oocytes or unfertilized egg cells of different mammals. While in species of the orders Rodentia and Lagomorpha only LDH1 (-subunits) has been found, species of the order Carnivora and Artiodactyla show further LDH isoenzymes, indicating the participation of -subunits.

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Zusammenfassung In Oocyten oder unbefruchteten Eizellen verschiedener Säuger finden sich verschiedene LDH-Isoenzymmuster. Während bei Species der Ordnungen Rodentia und Lagomorpha stets nur LDH1 (-Untereinheiten) gefunden wurden, zeigten Arten der Ordnungen Carnivora und Artiodactyla weitere LDH-Isoenzyme, die auf Beteiligung von -Untereinheiten schließen lassen.

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Supported by the Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB 46).