新型捞片器具在昆虫触角连续切片中的应用

【目的】透射电子显微镜技术在生物学研究中发挥着越来越深入广泛的作用,通过透射电镜技术获得生物组织连续切片,从而对其神经网络等延伸结构进行连续追踪及三维重构是非常迫切的科研诉求。但捞片方法的限制使得连续切片的获得困难重重,尤其是对于组织致密的昆虫外骨骼如昆虫触角而言,常因包埋剂浸透不够充分而导致聚合欠佳,增加了连续切片收集的难度。为解决捞取昆虫触角连续切片过程中的系列问题,获得完整、平整的触角连续切片,我们自行研制了一种适用于狭缝载网捞片的组合器具。【方法】用组合器具中的捞样器和放样台分别捞取及放置超薄切片。【结果】捞取的昆虫触角切片不会局部脱离树脂切片而产生不同程度的折叠,不会整片脱离树脂切片而滑落至树脂切片一侧,样品切片完整无破损、无皱褶,连续切片成条贴附在狭缝覆膜区。【结论】新型捞片器具为获得昆虫触角连续切片提供了有力支持。     

怎样用捞取法紧贴蜡片

恰当地使用捞取法粘贴蜡片,可使蜡片紧贴在载玻片上,在染色时少掉甚至不掉。此法具体操作过程如下: 1.用长方医用塘瓷盘(或其它器皿),例上蒸馏水,加温至低于所用石蜡熔点4—6℃。 2.当达到一定水温时,用玻棒在水底搅动,赶走水底的气泡。然后将要烫的蜡带(不必先断成小片)一次性放在水面上(主要是充分利用适宜水温),由于水温高,所以放在水面上的蜡带马上就展平了。这时停止加温,即可捞取。 3.捞片时可边选边捞。捞在玻片上的长条     

动物寄生螨类透射电镜样品制作的改进

本文根据动物寄生螨类特点,改进了常规透射电镜样品制作方法。对不同螨,采用不同的采样和固定方法。对个体较大的种类,先用针在螨体上刺1至若干小孔,以便固定液能较快地进入螨体内部,固定内部组织,以免细胞变性与自溶。同时,还提出用推取捞片法改进常规的贴取捞片法和金属环水面张力引取法,可以得到满意的,无皱折,平坦的大切片。     

一种简单实用的连续半薄切片技术

一种简单实用的连续半薄切片技术常规的半薄切片法有两种：一是干刀法，玻璃刀不装水槽，切一片，用尖头镊子夹取切片边缘，放到滴有蒸馏水的载玻片上。二是湿刀法，玻璃刀上安装水槽，切一片，待其在水中展开，用睫毛针从边缘捞起，放于载玻片的水滴中。在没有专用超薄切...     

抑丝酶家族构象与疾病

抑丝酶超家族有高度保守的空间结构，分子内反应中心环酶β－片层引起构象重排是大多数抑丝酶生物学作用的结构基础。抑丝酶分子突变或由此所致的环－片层多聚体，使抑丝酶生物学作用降低或丧失，导致抑丝酶相关性疾病产生。     

“检测生物组织中的脂肪”实验改进

教材中"检测生物组织中的脂肪"实验,要求学生通过切片技术制作花生种子临时装片,观察花生子叶细胞中的脂肪,学生很难在短时间内掌握切片技术的要领,往往因为切片太厚影响实验结果。在实践中发现通过撕片的方法制作花生子叶表皮临时装片效果更明显,操作更容易。     

一种便捷可靠的从凝胶中回收DNA片段的方法

从琼脂糖凝胶中回收 DNA片段是重组 DNA实验中经常需要进行的操作。这里介绍一种用自制的微型电泳槽电泳回收 DNA片段的方法。取 4块各长 1cm,宽 0 .5cm,厚 2 mm的聚乙烯条板 ,用氯仿将它们粘合到一块长 2 cm,宽 1cm的聚乙烯板中央 ,制成一四周密闭的小槽。在相对的两块挡板内侧底边各置一条铂金丝 ,两端用蜡固定。两条铂金丝在相对的两角都向上延伸至顶部并翻出 ,用蜡固定在挡板外侧。这样就制成了一个微型电泳槽。铂金丝外露部分可用带导线的夹子与电泳仪相联 ,通电后可进行潜水电泳。DNA样品按常规的琼脂糖凝胶电泳分离后 ,用 EB染…     

米诺环素对临床几种常见假丝酵母菌体外药敏的初步探究

探究米诺环素在体外对常见酵母菌的药敏特点。采用Rosco纸片扩散法对168株常见的几种假丝酵母菌进行米诺环素的药敏试验。米诺环素有抑菌环的比率:白假丝酵母菌41%,光滑假丝酵母菌1.2%,热带假丝酵母菌和克柔假丝酵母菌没有抑菌环。在常见几种酵母菌中,米诺环素几乎只对白假丝酵母菌在体外有抗菌活性。     

一种简便快速的超薄切片裸面载网法

电镜生物样品制作的质量,直接影响到对标本的观察及结果分析与判断。要获得既整洁,平坦又结构清晰的优质超薄切片,除标本的固定、包埋等一系列步骤必须严格操作外,超薄切片制作完成后的捞片载网也是一个十分重要的问题。为此,我们从实际工作中摸索出了一种超薄切片裸面铜网捞片法,将超薄切片直接载至经过特定处理的裸面铜网上。其处理的步骤是:首先将市售未经过处理的300目铜网(北京创业电镜铜网工艺社产品)入小称量瓶中,以双蒸馏水清洗2次,每次1～2分钟;继入用重铬酸钾配制的硫酸清洗液(取洗液1伤;水1份,释稀为1∶1)浸洗5—10秒钟,充分震荡直至铜网沉降在清洗液底部,迅速倾去清洗液。再用双蒸水洗3～5次,每次1分钟,彻底洗净清洗液用沪纸吸于水份,再浸入无水乙醇     

肺组织切片的取材和固定新方法

应用在体气管灌注固定法固定肺组织,探索肺组织切片制作的新方法。在体气管灌注固定法操作简便实用,灌注量容易掌握,固定效果好,切片完整连续,组织结构无人为假象。     

热印片法检查脏器中流行性出血热相关抗原的效果观察

应用冰冻切片技术制备理想的啮齿动物脏器组织细胞抗原片,是检出脏器组织细胞内 HFRS 相关抗原的基础。但冰冻切片制备抗原片往往在 HHRS 爆发流行现场不易做到。本文采用热印片法作了制片改进,利用60℃水浴锅预热载玻片进行印片,经荧光抗体法证实,此法经济简便,快速易行,且检出率与冰冻切片法相符合,特别适合应用于疫区现场的实验研究工作。     

介绍一种半薄切片定位样品的办法

介绍了一种半薄切片定位样品的方法。此法与前人的方法不同之处在于位于载玻片之上被重新包埋于塑料环内的切片与载玻片的分离方法。具体操作步骤是：切片被包埋聚合好后,立即从60～65 ℃温箱内被转入冰箱冷冻室中(-18 ℃)放置5～10分钟。然后,将载玻片从冷冻室中取出,轻推塑料环,即可使包埋在塑料环内的切片与载玻片分离。这一方法成功地解决了样品中靶细胞的发育时期确定和样品丢失问题,而且还有简单、易操作和成功率高等优点。     

介绍一种半薄切片定位样品的方法

介绍了一种半薄切片定位样品的方法。此法与前人的方法不同之处在于位于载玻片之上被重新包埋于塑料环内的切片与载玻片的分离真人处步骤是“切片被包埋聚合好后,立即从６０￣６５℃温箱内被转入冰箱冷冻室中（－１８℃）放置５￣１０分钟。然后,将载玻征从冷冻室中取出,轻推塑料环,即可使包埋在塑料环内的切片与载玻片分离。这一方法成功地解决了样品中靶细胞的发育时期确定和样品丢失问题。而且还有简单、易操作和成功率高等优     

石蜡切片的无胶贴片法

在石蜡切片制作中,为了防止切片脱落,一般采用梅氏(Mayer)蛋白、0.5％的明胶或白乳胶水溶液等作贴附剂来贴附切片,但贴附剂中的有机物在染色过程中会或多或少地吸附染料而着色,使背底和切片周围出现色斑,影响切片的质量。笔者探索了行之有效的无胶贴片法,现简介如下。以四孔恒温水浴锅作为石蜡切片伸展器,用5毫米厚的玻璃板取代铝片,将水浴锅盖严使水蒸汽无法外溢,将水温调至60—70℃,以切片展开后石蜡不熔化为度。贴附时,将干净的干燥载玻片放于水浴锅上的玻璃     

杏黄兜兰菌根研究与应用

采用根组织切片法从杏黄兜兰根内分离到13株真菌,镰刀菌和组丝核菌为优势菌。将组丝核菌JF74、JF75、JF80制成菌剂,施入杏黄兜兰根部,对杏黄兜兰产生了一定的促进生长的效果。     

常规石蜡制片的几点改进

常规石蜡切片质量对病理诊断和科研教学有直接影响,尽快制出优质切片能提高病理诊断水平,为临床治疗争取时间,为科研教学提供理想的材料。下面介绍几点我科经多年摸索出的能提高切片质量和速度方面的方法改进。１　载玻片、盖玻片的快速清洁法１１　两者经铬酸、９５％乙醇处理后充分水洗,用蒸馏水洗两次,可将载玻片置于内有蒸馏水的广口容器内备用;将盖玻片在内有蒸馏水的广口容器内对齐盖片四边并挤紧排列整齐,用纱布包好,放烤箱内烘干备用;１２　载玻片、盖玻片经处理、蒸馏水洗后,捞玻片于ＹＷＹ７８１Ｂ型医用微波仪内,…     

一种用于DAPI染色的方法Steedman＇s wax包埋切片法

以植物的胚珠和子房为实验材料,介绍一种用Steedrnan‘s wax包埋对组织切片中的细胞核进行DAPI染色的方法。Steedrnan‘s wax作为一种低熔点多酯蜡,具有与石蜡相似的性质,切片方法同常规石蜡切片,适合于切成厚度大于5μm的连续切片。Steedrnan‘s wax包埋的切片能成功地进行DAPI染色。与用压片法和Technovit 7100或GMA包埋切片法进行的DAPI染色相比,用Steedrnan‘s wax包埋切片法进行的DAPI染色具有廉价、操作简便、可进行连续切片、图象清晰等优点,特别在植物细胞程序化死亡(PCD)的研究中及细胞核DNA含量测定方面,有着较大的应用价值和潜能。     

双面刀片压切法制作临时装片

长期以来,中学植物实验中,用显微镜观察植物叶子结构时,总是采用徒手切片法制作临时装片。去年,我们采用了比较成功的双面刀片压切法,代替徒手切片法,用显微镜观察植物结构各部分时,如蚕豆叶片横切、黄豆芽下胚轴横切等,极为清晰,效果良好。     

形态学实验教学中正常与病理混合标本对照法的应用

石蜡切片是形态学实验教学微观部分的主要手段,传统的石蜡切片是在每块载玻片上仅有一个组织切片。为了更好地实现形态学实验课程的融合,不断更新实验内容,我们创新实验课内容,采用混合切片对照法,即在同一载玻片上放置同种组织器官的正常和异常组织混合切片标本块,其中一张为正常组织切片作为对照,其它一张或若干张标本则为同一器官相对应的异常组织切片。混合切片标本在实验教学的优势是,同一张载玻片上观察多个标本,既可节省实验操作时间和操作环节,还可以锻炼学生动手操作和熟练使用显微镜的技能。     

金属网捞子的制作

蚊虫化蛹时我们常用捞子捞蛹。用铁丝、棉纱布或尼龙布制作的捞子提出水面时滴水,扰动了水面使蛹迅速潜入水下,捞上1个蛹时必需等待蚊蛹浮出水面,因而用这种捞子捞蛹效率较低。笔者用钢网或不锈钢网和铁丝制作的蚊捞子,捞蛹时滤水迅速,捞子提出水面时不滴水可以连续捞蛹因而效率大大提高。这种捞子的外观比以前的捞子美观,制作也比较方便。下面以直径为5cm铜网捞子为例来介绍这种捞子的制作。（1）材料：38cm铁丝1根,直径7cm60目铜网圆片1个,粘胶剂家必备1支,约1．2cm×2．4cm塑料地板胶1片。（2）制作：将铁丝制成上部为长约11cm…