生产用重组哺乳动物细胞株的克隆筛选方法

克隆筛选是重组细胞株构建过程中的关键步骤。除了早期的克隆环,有限稀释法、半固体培养法、流式细胞术和细胞分选是目前生物制药行业运用最为广泛的克隆筛选方法。该文综述了克隆筛选方法的原理、特点,介绍了促进方法发展的其他技术如单细胞成像和自动化,比较了不同克隆筛选方法的优缺点。针对如何选择合适的克隆筛选方法提出了建议,为从事相关研究与生产领域的科研人员提供帮助。     

介绍衣藻的几种培养方法

一、藻种的采集每年的早春或晚秋常有纯群的衣藻生在有机质比较丰富的水坑、池塘等处,特别是在温室中的积水缸里常可采到比较纯的衣藻。采集前先用野外工作的显微镜对水中藻类进行检查鉴定、确为较纯的衣藻而且浓度很高,就直接用吸管将绿色水样吸入到300—500毫升的玻瓶中,以装至容积的2/5—1/2为宜,保证水中有足够的氧气。     

华北几个地点的上新世哺乳动物化石

本文记述1959年和1960年中苏古生物考察队在内蒙和甘肃采集的上新世哺乳动物化石,并对各地点化石组合性质和各动物群所代表的时代进行了分析。化石包括窑沟原貂Proputorius yaogouensis)、化德无角犀(Aceratherium huadeensis)和化德上新鹿(Cervocerushuadeensis)三个新种。     

哺乳动物胚胎神经细胞的原代分离性单层培养及其应用

本文综合介绍了哺乳动物胚胎神经细胞的体外原代分离性单层培养(primary dissociated monolayer cultures,简称原代单层细胞培养)的特点与方法及其在体外正常形态、生化与生理等方面的分化发育。对近年来国内外神经及小儿神经科学研究中关于这种培养方法的应用情况也进行了概述并指出其优点及实用中存在的问题。     

哺乳动物细胞大规模培养的又一方法

这里介绍的是用于制备单克隆抗体或其它细胞产物的大规模培养哺乳动物细胞的又一方法。Monoclonal Production Inter-national(MPI)公司和堪萨斯州立大学正在研制一种培养哺乳动物细胞的方法,即在母牛子宫中发育胚胎周围的羊水里进行细胞培养。该公司希望近期能就它所研制的一种仪器颁布一项专利,这种仪器可以把细胞引入子宫羊水中,也可以从中取样或收取羊水。这一方法的目的是扩大活细胞,如产生单克隆抗体的杂种瘤的培养规模。以前不论是小规模还是大规模单克隆抗体的制备,常常是将杂种瘤细胞培养在老鼠体腔内。应用大型动物效率会更高。堪萨斯州立大学的W. Fortner说,最初的结果表明,从一个母牛子宫可获得5     

哺乳动物克隆及其应用前景

细胞核移植一词最早出现于Ｓｐｅｍａｎｎ(1938)所著《胚胎发育与诱导》一书中,他建议把发育后期的细胞核移植到去核的卵中,以研究细胞核的发育能力,但由于当时实验条件的限制而未能够实施。直到1952年,Ｂｒｉｇｇｓ和Ｋｉｎｇ才第一次报道了蛙的胚胎细胞核移植成功。Ｇｕｒｄｏｎ(1962)将爪蟾蝌蚪期肠上皮细胞核移植到去核的卵母细胞中,重构胚胎发育成正常的个体;而将成体爪蟾的肠上皮细胞核移入去核卵母细胞中时....     

三门峡地区含哺乳动物化石的几个第四纪剖面

黄河三门峡地区的晚新生代哺乳动物化石包括了上新世至晚更新世各个层位,其中以早更新世的材料较多,有七种与泥河湾动物群是相同种;有4种与山西榆社、临猗和西侯度等地点的早更新世动物群是相同种。这说明三门峡地区早更新世动物群相当于维拉方晚期或中晚期。三门系属河湖沉积,但比黄河发育的历史为早,而黄河的沉积系贾福海等划分的第5层。为此,黄河形成的时间恐怕是早更新世之末或中更新世之初。     

siRNA及其在哺乳动物中的应用

RNA干扰现象已经在多种生物中发现,但是在多数哺乳动物中尚未发现自然存在RNA干扰的证据。因此最初RNA干扰技术在哺乳动物细胞中的应用受到很大的限制。直到对RNA干扰作用机制有了较深入的了解以后,主要是小干扰RNA的发现使RNA干扰技术在哺乳动物中的应用得以推广。本文介绍了RNA干扰,重点描述了小干扰RNA的发现、特点、现有制备方法以及应用。     

介绍几个新的氨基酸沉淀剂

氨基酸沉淀剂在蛋白质化学组成的研究及氨基酸的分离和制备方面,发挥过重要的作用。直到本世纪五十年代,它仍然是分离和制备氨基酸的最常使用的基本方法。1951年Moor 和 Stein 用离子交换树脂系统,分离出蛋白质水解产物的报导发表之后,氨基酸沉淀剂法在许多场合逐渐被离子交换法所代替。但是,用离子交换剂分离和制备氨基酸时,技术要求高,进行大规模的生产时亦比较困难,不能满足迅速增长的大量氨基酸生产发展的需要。七十年代以来,国外文献又陆续报导了不少具有强选择性和沉淀效能很高的、新的氨基     

哺乳动物防御素的研究进展及其应用前景

防御素是生物界广泛存在的一类具微生物抗性的低分子短肽,其中哺乳动物防御素的抗性谱最为广泛,具有很高的应用潜力.概述了哺乳动物防御素的组成分布、立体结构、基因表达调控、抗菌谱等的国内外研究进展,并展望了其在医学和植物抗病基因工程中的应用前景.     

酿酒酵母的同步培养方法及其应用

同步培养是指通过一定的化学或物理方法使培养的微生物或动植物细胞处于比较一致的生理状态,生长发育在同一阶段的培养方法。它不同于分批培养,在分批培养中,细胞处于不同的生长阶段,生理状态与代谢活动都不一样。显然,分批培养中的群体表现行为不能代表单个细胞的生理生化特性。而利用同步化技术,可以使同步生长群体与个体行为基本一致,这样就能用研究群体行为的方法来研究细胞水平的问题。需要指出,细胞的同步化既可以在自然条件下发生,又可以经人为处理得到。前者称为自然同步化,后者称为人工同步化,本文主要讨论人工同步化的…     

培养衣藻的几个关键因素

衣藻是中学生物学实验课必须用到的材料之一.为提高实验效果,需要培养出个体大、密度高的衣藻种群.经过多年的实验,发现影响衣藻生长、繁殖的主要有五个关键因素.     

介绍我省几个主栽食用菌品种

食用菌栽培业在我省发展很快,特别是近儿年,已作为众多人从事的一种产业。食用菌因含芳香油而口味鲜美,含多种氨基酸而营养价值高,又具较高的药用价值,已成为群众喜爱的大众化蔬菜品种。目前,食用菌栽培业的发展已成为农民脱贫致富     

介绍中学动物学课外活动几个实验

实验一蚯蚓一、材料用具 10%酒精溶液、5%福尔马林溶液、放大镜、小洋镐或锄头、长镊子、滴管、吸水纸、烧杯、标本缸、解剖针、纱布、瓷盘、刀片、沙土、黑壤土、长号玻璃筒、蜡笔,常见蚯蚓检索表. 二、方法步骤 1、采集:利用课余或节假日期间,组织兴趣小组(5-7人)进行,到果园、菜园     

介绍蚯蚓学习行为的几个实验

常见的粪肥中的爱胜属(Eisenia)或花园里的异唇属(Allolobophora)蚯蚓,都是适用于动物行为实验的蚯蚓种。 1.蚯蚓习惯化行为的实验习惯化是学习的一种简单形式。习惯化形成后,动物对再现的特定刺激的反应逐渐减弱,以至最后完全不起反应。但习惯化和肌肉疲劳或感觉适应不同,尽管肌肉疲劳或感觉适应也能引起反应的降低或完全停止。实验的准备。在两个培养皿中各放入一条蚯蚓,盖上盖,一条作为试验,另一条作为对照观察。将蚯蚓放入培养皿以前,一定要保持其     

哺乳动物猪牛羊淋巴细胞的培养方法和染色体组型

随着工农业生产的飞跃发展,我国对家畜育种、家畜疾病、家畜饲养等各方面都开展了很多有意义的研究。例如以石油酵母作饲料,饲养猪、鸭、鸡等家畜家禽的研究已取得良好的效果。在这些研究中,为了确定家畜品种在遗传结构上的变异情况,对作为遗传物质的基础染色体进行观察和分析,需要有简便易行的制备染色体的方法和熟悉正常动物的染色体组型。     

哺乳动物卵母细胞的冷冻保存方法

卵母细胞的冷冻保存与精子和胚胎的冷冻保存一样,具有许多潜在的应用价值。八十年代以后,卵母细胞体外成熟、体外受精、核移植,基因转移等相继研究成功。把优良品种动物废弃卵巢中的大量卵母细胞冷冻保存,可为这些生物技术提供充足的材料。卵母细胞的冷冻保存也为稀有动物,濒危动物和其它有价值的雌性个体(如基因工程个体)的遗传资源的长距离国际间运输及长期保存提供了可能。在人,卵母细胞冷冻保存可以克服胚胎冷冻保存所引起的一系列伦理道德及法律问题。     

介绍一种培养螺旋菌的方法

在中学生物课要接触细菌三形的装片,在基础微生物实验中观察细菌的形态时,也要选螺旋菌作材料。我们在兰州炼油厂沉淀池的水样中发现一种螺旋菌(2.25×8—12微米)数量较多,把水样放在广口瓶内不加盖,在实验室常温下放置一年多后,检查样品,仍有少量的螺旋菌,我们将煮麦粒的水加入瓶内,并加1—2滴牛奶增殖培养,一周后螺旋菌数量显著增加,在显