梅花鹿血清乳酸脱氢酶同工酶酶谱观察

在国内外,乳酸脱氢酶(LDH)同工酶已被用于家畜及野生动物品种间亲缘关系鉴定、杂交优势预测和疾病诊断等,但对于梅花鹿Cervus nippon的LDH同工酶未见报道。为此,我们进行了梅花鹿的血清LDH同工酶测定,目的在于为梅花鹿的进一步利用和疾病诊断等提供科学依据。材料及方法一、材料材料采自四川省中药材公司灌县鹿场,为8月龄至2.5岁的健康鹿,从中随机抽取♂3头、♀7头供试验。二、方法用氯化琥珀胆碱(8—10mg/kg肌注)保定动物。约10—15分钟后,鹿处于肌松状态时,从颈静脉采血10ml,待血清白然析出后分离(3000rpm,5分钟),立即按《生物化学及…     

静态负荷家兔血清生物标志酶及能量代谢的变化

目的：探讨静态负荷致骨骼肌损伤的机制。方法：观察2种不同姿势静态负荷下血清肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）和乳酸（LD）、血糖在0 h、2 h、4 h、6 h、8 h的变化。结果：血清CK、LDH、LD、血糖含量有差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论：长时间静态体位,骨骼肌损伤程度与负荷持续时间、负荷强度有关,损伤原因与能量代谢发生障碍有关。     

家兔的活体解剖观察

解剖家兔是中学动物教学中的一次重要的实验课。为了加深学生对器官机能的了解,可在死体观察之前,组织学生进行活体解剖观察。 1.麻醉动物首先称量家兔的体重,以便按体重投给麻醉药。一般用氨基甲酸乙酯(又名乌拉坦),每公斤体重给麻醉剂一克。例如家兔体重是2.5公斤,可称量氨基甲酸乙酯三克,溶于15毫升的蒸馏水中,配制成20%的氨基甲酸乙酯水溶液待用。用注射器将麻醉剂缓慢地注入家兔的耳缘静脉内,当药量已注入10毫升左右吋要特别注意观察家兔的生活状态,如看到家兔四肢松软、呼吸变慢、角膜反射迟钝时,表明家兔已被麻醉,就可以停止注射药液。 2.解剖     

凝固酶阴性葡萄球菌菌谱与药敏谱调查

目的了解中山大学附属第三医院临床分离凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）的菌种构成与耐药性。方法采用MicroScan WalkAway-40全自动微生物鉴定仪及配套阳性菌药敏复合板进行菌种鉴定与药敏试验,nitrocefin法测定β-内酰胺酶。结果表皮葡萄球菌与溶血葡萄球菌共占CNS的70．4％;甲氧西林耐药株（MRCNS）与甲氧西林敏感株（MSCNS）各占77．8％、22．2％;药敏试验结果提示MRCNS仅对万古霉素、呋喃妥因敏感,MSCNS对大多数抗生素敏感,未检出万古霉素耐药与中介株;β-内酰胺酶在MRCNS、MSCNS中的检出率分别为91．7％、78．1％。结论临床分离的CNS以表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌为主,MRCNS多重耐药现象严重,宜密切监测CNS的分离状况与耐药性,并严格限制万古霉素在临床上的应用,以避免耐万古霉素CNS的出现与流行。     

家兔实验性心肌缺血的定量酶组织化学研究

目的研究心肌缺血后琥珀酸脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACP)及线粒体腺苷三磷酸酶(mitoATPase)的情况,力求寻找一种更为理想的诊断早期心肌缺血的方法.方法结扎家兔左冠状动脉主干建立实验性心肌缺血的动物模型,常规组织学和透射电镜技术观察缺血心肌的组织学和超微结构改变,脱氢酶染色观察大体心肌的缺血情况,并分别采用硝基四氮唑蓝法、硝酸铅法和镁离子激活法研究结扎后0.5、1、2、4、8、12h左室前壁SDH、ACP以及mitoATPase水平的动态变化,显微图像分析系统测定其平均灰度值进行定量分析.结果①缺血后1h SDH活性开始降低,随着缺血时间的延长其表达水平不断下降,在1、2、4、8、12h平均灰度值分别为97.8488±8.13077、105.376±6.06887、112.584±5.18463、124.886±12.1167和144.605±13.9902(P<0.01) ②ACP活性在缺血后4h明显增强,随着缺血时间的延长其表达水平不断增强,缺血后4、8、12h平均灰度值分别为186.494±15.7005、173.158±12.6425和162.506±11.5195(P<0.01)③缺血2h后mitoATPase表达水平显著下降,其强度随着缺血时间的延长不断减低,缺血2、4、8、12h平均灰度值分别为164.153±15.6087、171.256±17.3428、183.518±18.0872和203.218±11.7952(P<0.01).结论 SDH和mitoATPase活性的不断下降及ACP活性的逐渐增强在缺血心肌细胞的演变过程中起着重要作用.     

引入西藏高原家兔的血清生化指标测定

目的了解和掌握引入西藏高原家兔的生理生化指标,以便为实践教学、临床诊疗和科学研究提供参数。方法采用朗道全自动生化分析仪对引入西藏高原20年的加利福尼亚兔(Californian rabbit)和中国白兔(Chinese white rabbit)的12项血清生化指标进行了测定。结果加利福尼亚兔在品种内比较发现TP、ALB、A/G、CRE、CHOL、LDH指标表现极强的雄兔特征(P0.01),而ALT、GLU测定值雌兔明显高于雄兔(P0.05);中国白兔在品种内比较发现CRE、LDH指标显示差异有显著性(P0.01),CRE指标是雄兔高于雌兔,LDH参数是雌兔高于雄兔。加利福尼亚雄兔与中国白雄兔的参数比较中发现AST、TP、ALB、GLO、A/G、GLU、CRE、LDH指标显示差异有显著性(P0.01),而TG、BUN指标显示差异有显著性(P0.05);加尼福利亚母兔与中国白母兔的参数比较中发现ALT、GLO、CRE、TG指标显示差异有显著性(P0.05),AST、TP、BUN、LDH指标显示差异有显著性(P0.01)。结论实验结果将为西藏高原的教学、临床诊疗和科学研究提供生理数据参考。     

明胶酶谱实验方法的优化

目的:优化明胶酶谱实验方法,并检测不同浓度凝血酶刺激人皮肤成纤维细胞分泌的明胶酶B(MMP-9)活性的变化。方法:用含明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分开上清中各蛋白条带,经2.5%Triton X-100洗脱、明胶酶缓冲液孵育、考马斯亮蓝染色液染色及脱色液脱色后,经光密度扫描记录,应用ImageJ软件进行密度计量分析。结果:凝血酶刺激人皮肤成纤维细胞分泌MMP-9具有浓度依赖性。结论:利用优化的明胶酶谱实验方法可做出高质量的明胶酶谱图片,对检测明胶酶活性有重要意义。     

黑木耳菌株酯酶同工酶酶谱多样性研究

目的：为了探索黑木耳菌株之间的遗传距离,构建出供试菌株酯酶同工酶鉴别图。方法：采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对21个黑木耳菌株酯酶同工酶的酶谱多样性进行了研究。结果：酯酶同工酶电泳各个菌株分别具有2~7条酶带,其中在Rf值为0.344处,21个菌株都有谱带出现。21个菌株之间的遗传相似系数在0.167-1.000之间,应用NTSYS软件进行聚类分析,当相似水平为0.73时,可将供试的21个黑木耳菌株分为6个不同的类群。结论：酯酶同工酶可以有效快捷的对黑木耳菌株进行菌种鉴定,是黑木耳菌株遗传多样性研究的理想手段。     

临床分离凝固酶阴性葡萄球菌细菌谱

目的了解玉溪市人民医院临床分离凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）的菌种构成和耐药特征。方法对该院近6年来临床分离的808株CNS作回顾性分析。结果808株CNS共有16种;表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和溶血葡萄球菌占CNS的77.2%;甲氧西林耐药（MRCNS）和甲氧西林敏感（MSCNS）各占63.3%和36.7%;β-内酰胺酶阳性检出率为84.5%,且MRCNS显著高于MSCNS（χ^2=50.88,P〈0.01）;药敏结果：MRCNS除万古霉素、呋喃妥因和利福平外,青霉素、氨苄西林等12种临床常用抗菌药物的耐药率在50.6%-100%,显示了高度的耐药性和多重耐药。结论CNS在临床标本中的检出范围广、种类多,以表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和溶血葡萄球菌为主,MRCNS的高度耐药和多重耐药形势严重,加强CNS的细菌学监测非常必要。     

家兔过敏性休克时脑电图变化的观察

神经系统、特别是其高级部分在病理过程的发生发展上具有重要的意义。过敏性休克时神经系统的变化虽然已经有过一些研究,但中枢神经系统、尤其是大脑皮层电位活动的变化则研究的较少。本文报告我们在15只家兔上观察到的过敏性休克时脑电图的变化。     

活体家兔肺脏强度的实验观察

本研究是用向家兔肺内充气的方法观察30只活体家兔呼吸器官的压—容特性及肺损伤的程度。实验中用压力传感器测量气管内压力,用全身体积描记法测量肺—胸容积。实验结果表明,家兔呼吸器官的充放气曲线有三种类型,这与肺损伤的程度有关。充气压—容曲线呈S形,肺破裂时形成钝峰。充气压为750～800mmH_2O时,多数肺有重度肺气肿及广泛性出血,甚至肺破裂使家兔死亡,故确定此值为兔肺破裂强度值。充气压为650～700mmH_2O时,无一例肺破裂,只有小灶性出血及轻度肺气肿,故确定此值为兔肺生理耐限值。     

家兔腹泻生态疗法的实验观察

根据动物微生态学理论,将3株正常菌：嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌、粪链球菌研制成复方生态制剂,对家免细菌性腹泻进行治疗试验。共治疗75例,治愈率为96．00％,比痢特灵对照组治愈率提高16．00％。该制剂价格低廉,无毒、副作用,使用安全可靠,是一种防治家免细菌性腹泻的较理想制剂。     

蛇毒纤溶酶对家兔实验性肺栓塞的溶栓效应

目的研究蛇毒纤溶酶对家兔实验性肺部血栓的溶解作用.方法采用Nowok氏改良法建立家兔肺部血栓动物模型,给药组注射蛇毒纤溶酶(60u/kg),对照组注射等量的生理盐水,分别测定两组动物血栓的变化.结果给药组与对照组的血栓均减小,但给药组血栓减少量比对照组更加明显,两者差异显著(P＜0.05).结论家兔本身对血栓有一定自溶功能,蛇毒纤溶酶可加速血栓在体内的溶解.     

实验性糖尿病小鼠的血清氨基酸代谢谱

目的通过测定2型糖尿病小鼠血清氨基酸代谢谱的变化,探讨代谢轮廓分析结合模式识别技术在糖尿病动物模型中的应用。方法 SPF级雄KM小鼠高脂饲料喂养4周后,腹腔注射链脲菌素(streptozotocin,STZ)建立2型糖尿病模型,动态监测空腹血糖(FBG)变化,分别于造模后第4周处死,收集小鼠血清,检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平。采用高效液相色谱(HPLC)柱前衍生方法检测小鼠血清中氨基酸代谢谱的变化。结果 2型糖尿病小鼠FBG、TG、TC明显升高,差异均有显著性。利用代谢轮廓分析可以对模型组大鼠代谢谱与对照组完全区分。结论小鼠成模后体内氨基酸发生了明显变化。从差异变量中鉴定出4个氨基酸对组间贡献较大(精氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、牛磺酸)。氨基酸的代谢轮廓分析结合模式识别技术可以在一定程度上反映2型糖尿病小鼠的代谢变化。     

血清胆碱酯酶同工酶的分离及其同工酶谱

 本文建立了分离SChE同工酶的聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法,较其他方法简便,分辩力高且结果更清晰。本文对ChE抑制剂,血液抗凝剂和血清貯存时间对SChE同工酶谱的影响进行了研究,同时分离检测了39例正常人和38例肝损害者的SChE同工酶谱及其各带的相对百分活性。正常人均可分出9条同工酶带,部分人有10条(46.2％)和11条(15.4％),说明中国人存在SChE群体变异。肝损害患者的SChE带2—5的活性明显减弱甚至消失,可用于临床诊断。     

胆囊结石患者血清microRNA表达谱及其意义

目的:建立胆囊结石患者与健康人的血清microRNA(miRNA)表达谱,并分析其差异miRNA功能。方法:收集解放军总医院诊治的胆囊结石患者的血清(试验组)及健康人的血清(对照组),采用miRNA测序技术,建立胆囊结石患者的miRNA表达谱,并通过qPCR技术验证其差异miRNA,利用生物信息学技术预测其差异miRNA的生物功能。定量资料以x±s描述,两组数据间比较采用t检验。结果:试验组与对照组miRNA表达谱序列分别为14 899 245和11 783 121个,miRNA种类分别为686和633个,其差异表达miRNA为16个,均为下调。GO分析显示差异miRNA的靶基因在细胞过程上富集于细胞转化、生物调节和代谢过程等,在细胞组成上富集于细胞成分和细胞器成分等,在分子功能上富集于结合和活性催化等;KEGG功能分析显示差异miRNA的靶基因主要参与环腺苷酸、催产素、生物节律等代谢通路。利用qPCR方法验证miR-1228、miR-1249、miR-3614和miR-766在2组间差异趋势与测序结果基本一致,其中miR-1228、miR-3614和miR-766在2组间存在统计学差异,而miR-1249无统计学差异。结论:血清中的差异miRNA在胆囊结石的形成中可能发挥重要作用,其对胆囊结石疾病的防治具有重要意义。     

蕲蛇酶对大白鼠和家兔实验性脑血栓的溶栓作用

采用血小板聚集诱导剂二磷酸腺苷（ＡＤＰ）加肾上腺素（Ａｄ）从家兔颈内动脉或大白鼠颈总动脉注入,以形成脑血栓,２ｈ后各组动物分别从静脉给予不同剂量蕲蛇酶（１５０、３００和６００ｍｇ／ｋｇ）,阳性对照药潘生丁（１０ｍｇ／ｋｇ）及空白对照生理盐水（１ｍｌ／ｋｇ）。以脑组织对伊文思蓝通透性改变及脑组织切片计算血栓数目为指标,判断蕲蛇酶对血栓的影响。结果不同剂量蕲蛇酶组对大鼠或家兔的实验性脑血栓均比生理盐水组血栓消褪加快,形成的血栓数目减少,脑组织伊文思蓝含量亦明显减少;潘生丁组亦显示促血栓消褪的效果     

灵芝栽培菌株酯酶同工酶的酶谱多样性

采用酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法,对灵芝属(GanodermaKarst.)9株灵芝进行品系间鉴定,并采用非加权组平均法(UPGMA)进行聚类分析。试验结果表明:在9个菌株(16 d)中共检测到40条酶带,各个菌株分别具有3至6条酶带,9个菌株共有4种酶谱类型。在相异系数为0.62时所有供试菌株归为1个群,在相异系数为0.81时,把9个菌株分为5个群。酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定方法可有效应用于灵芝属真菌品种鉴定及亲缘关系分析。     

蝮蛇抗栓酶对家兔慢性胆囊炎防治的实验研究

作者用家兔４２只随机分成造型组（Ａ）,预防组（Ｂ）及治疗组（Ｃ）。各组又分处理组（Ａ１、Ｂ１、Ｃ１）和对照组（Ａ２、Ｂ２、Ｃ２）两个亚组。Ａ２组仅喂基本饲料,其余５组喂基本饲料加造型剂。Ａ组没用任何治疗。Ｂ１组慢性胆囊炎形成前,Ｃ１组慢性胆囊炎形成后分别用蝮蛇抗栓酶（０．２Ｕ／ｋｇ／日３０天）,Ｂ２和Ｃ２组仅给等量生理盐水。Ａ２及治疗后的Ｂ１、Ｃ１组血清胆固醇含量均明显低于Ａ１、Ｂ２、Ｃ２组（Ｐ＜０．０５）。胆囊的病理变化,Ｂ２和Ｃ２组改变明显,表面呈暗褐色,与周围组织粘连,粘膜面粗糙,胆囊壁增厚,体积增加,胆汁潴留,镜下粘膜增生呈乳头状,部分粘膜脱落,粘膜下及肌层水肿,炎细胞浸润。结果表明,蝮蛇抗栓酶对慢性胆囊炎既有预防作用又有治疗作用。