甘蓝型油菜游离小孢子培养的胚胎发生

以生长在非控温控光下的４个冬性甘蓝型油菜（ＢｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓＬ．）品种为供体,进行游离小孢子培养。研究发现,多数品种在开花３－７天取材最为适宜。在甘蓝型油菜小孢子培养中只有单核晚期的小孢子才可能发育成胚状体,而花药培养时处于单核早期的小孢子易于发育成胚状体。在适当花期选取发育比较一致的单核晚期小孢子培养,经数小时后,部分小孢子便开始膨大,这是小孢子发育成胚的最早标志,膨大的小孢子中,有部分形成多细胞球并进一步发育成胚。用春性甘蓝型油菜为材料进行蔗糖浓度的实验结果表明：培养３天后,在１６％蔗糖培养基中存活的小孢子最多,达１６．１３％;培养３０天后,胚状体诱导频率则以１３％蔗糖浓度为最高,每花蕾可达１４４个胚状体。如果在１６％蔗糖培养基中培养３天后,添加等体积的１３％蔗糖培养基,能够大大提高胚状体的诱导频率,为仅用１３％蔗糖培养基培养的３．７倍。这一实验体系正在用于抗菌核病的诱变与筛选,并作为外源基因导入的实验体系。     

埃塞俄比亚芥与白菜型、甘蓝型和芥菜型油菜杂种子房培养技术的研究

本文研究了埃芥×白菜型油菜、埃芥×甘蓝型油菜和埃芥×芥菜型油菜杂种子房的离体培养方法。结果表明,三大种间组合授粉子房的适宜离体时间分别在５—１０、７—１２和１０—１７天之间。水解酪蛋白对杂种胚的发育没显示出有利作用,０．２ｍｇ／ＬＢＡ促进了杂种胚的形成。ＭＳ和Ｌ．Ｓ．Ｍ．基本培养基和本培养方法对于埃芥×白菜型油菜和埃芥×甘蓝型油菜杂种子房的离体培养是可行的。     

利用气孔保卫细胞周长及叶绿体数目鉴定油菜种间杂种研究

以白菜型冬油菜‘陇油7号’、‘陇油9号’(AA,2n=20),芥菜型油菜‘冬芥’(AABB,2n=36),甘蓝型油菜‘vision'(AACC,2n=38),种间杂种‘陇油7号’ב冬芥’、‘陇油9号’בvision'为试材,对其叶片气孔保卫细胞周长及叶绿体数目进行统计分析,探讨一种快速鉴定油菜种间杂种的简易方法,并用SSR标记法对气孔保卫细胞周长及叶绿体分界法可靠性进行进一步验证.结果显示:(1)油菜亲本及种间杂种气孔保卫细胞周长在不同叶片间变异程度接近,而同一叶片的气孔保卫细胞周长下部位变异程度较小.(2)不同类型油菜亲本及其种间杂种叶片气孔保卫细胞周长和叶绿体数存在明显的分界线,具体判定分界值为:周长＜58.90 μm为白菜型油菜、周长58.90～75.83 μm为种间杂种F1、周长＞75.83 μm为甘蓝型或芥菜型油菜;叶绿体数10～12个为白菜型油菜、14～16个左右为杂种F1、18～19左右为甘蓝型或芥菜型油菜.(3)随机选择经叶片气孔保卫细胞周长和叶绿体数分界特征值鉴定的油菜种间杂种单株40个,用SSR分子标记法对鉴定结果显示,有37个单株具有杂交种带型为真杂种,两种方法鉴定油菜真杂种的吻合率达97.5％.研究表明,白菜型、甘蓝型、芥菜型油菜及其种间杂种的叶片气孔保卫细胞周长及叶绿体存在特定的分界线值,据此可以方便有效地鉴定油菜种间杂种,即当植株气孔同时满足保卫细胞周长在58.90～75.83 μm、叶绿体数在14～16个左右时,则可判定其为真杂种.     

甘蓝型油菜和芥菜型油菜种间杂交研究

甘蓝型油菜与芥菜型油菜杂交研究结果表明,杂交结实力与杂交组合方式以及参与杂交的亲本材料有关,以芥菜型油菜作母本的杂交结实力高于以甘蓝型作母本的组合：芥×甘杂交组合的平均结实数／花为 ２．６４ 粒,而甘×芥杂交组合的平均结实数／花为 ０．１０ 粒。芥甘杂种一代形态特征和生育期介于双亲之间,甘芥杂种一代不表现整齐的中间类型,株间差异明显;总体来看,芥甘杂种一代与双亲回交的结实力（０．４０,０．２１）低于甘芥杂种一代与双亲回交的结实力（３．３０,１．７４）,无论是芥甘杂种一代还是甘芥杂种一代,用甘蓝型油菜作父本回交的结实力高于用芥菜型油菜作父本回交的结实力,但也有个别回交组合出现例外,不表现上述规律。 Ｂ Ｃ１ 代种子当年播种出苗率低（１８．５％ ）,群体株间性状差异明显,生育期极不一致。芥甘杂种一代与甘蓝型油菜亲本第二次回交,其平均结实数／花较回交一代提高 １．０８ 粒, Ｂ Ｃ２ 代种子当年播种出苗率仍较低,但较对应的 Ｂ Ｃ１ 代稍有提高,群体中出现趋回交父本性状但雄性育性彻底退化的植株。芥甘杂种一代自由授粉所得 Ｆ２ 群体是一个变异极为丰富的遗传群体。     

甘蓝型油菜与诸葛菜属间杂种无性系的变异研究

从形态及细胞学两方面对甘蓝型油菜与诸葛菜属间杂种无性系的变异进行了研究。经过长期继代培养后,杂种在形态上越来越偏向母本甘蓝型油菜,而表现出较少的父本诸葛菜性状,但表现出对等双分枝的新性状。经细胞学观察表明,杂种体内杂种细胞比例下降,而甘蓝型油菜细胞比例大幅度上升并远高于核质杂种细胞（具有油菜细胞质与诸葛菜细胞核）的比例,以至较多的甘蓝型油菜染色体组被遗传下去。在该杂种继代培养中还观察到杂种细胞内的染色体消除及体细胞配对现象。     

白菜型油菜与蓝花子杂交的初步研究

通过胚胎培养,成功地获得了白菜型油菜（Ｂｒａｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ）与蓝花子（ＲａｐｈａｎｕｓｓａｔｉｖｕｓＬｖａｒｒａｐｈａｎｉｓｔｒｏｉｄｅｓＭａｋｉｎｏ）的属间杂种。该杂种具有两种类型;一种为大花类型,一种为小花类型。对它们进行花粉母细胞减数分裂的观察结果表明：小花类型为未加倍的杂种ＭＩ,存在１９个未配对染色体,大花类型为加倍或部分加倍杂种,加倍类型ＭＩ,１９个二价体排列在赤道板上;部分加倍类型ＡＩ,具有１０－１０－９的染色体组分割现象。大花类型具有可育性;它能够产生很多ｎ＝１９及ｎ＝９、ｎ＝１０的正常配子。染色体组分割能够产生倍半二倍体,它能用来研究染色体的功能和开展染色体工程。     

红菜薹与甘蓝型油菜杂交子房培养研究初报

对甘蓝型油菜和红菜薹种间杂种进行胚胎挽救研究,实验结果表明,采用MS＋（1．0～2．0）mg·L^-1 6-BA＋0．05mg·L^-1 NAA＋0．5％活性炭＋30g·L^-1蔗糖＋7．5g·L^-1琼脂培养基对甘蓝型油菜和红菜薹杂交子房培养效果较为理想;相对于培养基和激素,活性炭对子房培养的影响更加显著。通过对取材时间的研究发现,取授粉后18d子房培养的结籽率最高,15d的次之。而通过对杂种萌发率的研究则表明,授粉后15d的子房培养获得的杂种萌发率最高,为57．03％,18d的最差,仅为38．49％。     

芥菜型油菜和白菜型油菜种间杂种遗传分析

种间杂交是一种拓宽栽培作物遗传基础和转移优良性状的重要手段,已经广泛地用于作物品质的改良。本研究通过芥菜型油菜（Brassica juncea L.）和白菜型油菜（Brassica rapa L.）种间杂交,将芥菜型油菜的有利性状转移到白菜型油菜中,创造新型白菜型油菜,以改良白菜型油菜的农艺性状、提高抗逆性和拓宽其遗传基础。研究结果表明：以芥菜型油菜作母本、白菜型油菜作父本的杂交组合较易获得杂交种子,杂种F1植株营养生长具有较明显的杂种优势,但花粉完全不育;以白菜型油菜回交获得的BC1植株间表型差异明显,平均花粉可染率为34.8%,介于 0~84%之间,群体自交不亲和;BC1F1和BC2群体变异广泛,出现自交亲和植株和黄籽植株,平均花粉可染率分别为79.7%和79.1%。     

甘蓝型油菜与紫罗兰属间杂交的植物遗传学研究

为探索属间杂种的遗传特点以及改良甘蓝型油菜油分品质,进行了甘蓝型油菜和紫罗兰的属间杂交。杂交母本为甘蓝型油菜奥罗（Brassica napusL.cv.oro)。父本为紫罗兰（Motthiola incana(L.)R.Br.)。将授粉7d后的油菜子房切下,消毒后,培养了添加适当植物激素的MS培养基。从750个离体培养的油菜授粉子房中,获得了2粒成熟胚胎,其结籽率为0.26%。将胚胎取出,转接于MS培养基（添加2.0mg/L6-BA和0.1mg/LNAA）,获得了丛生芽,将丛生芽分割为许多单芽,转接到新鲜培养基中,长成了22株小苗,杂种一代植株呈中间性,它的许多性状介于两个亲本之间,一些性状倾向母本,少数性状表现显著的超亲杂种优势,植株结实性差。杂种后代（F2）植株表现多样性,多数植株的性状倾向母本,能育。部分植株表现中间性,育性差,少数植株发育不良,不育,染色体研究表明,杂种一代植株为混倍体。在杂种体细胞中,许多细胞的染色体数为2n=26。为两个亲本的配子染色体数之和。杂种后代（F2）中,倾母植株的染色体数为2n=38。矮小植株的许多细胞具非整倍染色体数。如2n-1=37,2n 1=39。从杂种后代中获得了种子油分品质较好的植株,有可能用于油菜的品质育种。     

芥菜型和甘蓝型油菜及其杂种后代种子硫甙组成差异的研究

用高效液相色谱技术分析了芥菜型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｊｕｎｃｅａ）和甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）种间杂种后代及共亲本的硫甙组成。结果表明,与亲本农艺性状相似的后代,那么其硫甙组成与亲本亦相似。各后代中硫甙组成与亲本相比,虽发生了不同管理的变化,但都有倾向母体的趋势。芥菜型油菜烯丙基硫甙含量,２－羟基－３－丁烯基硫甙含量低,而甘蓝型油菜２－羟基３－丁烯基硫甙含量高,烯丙基硫甙含量最低     

Plant regeneration from peduncle segments of oil seed Brassica species: Influence of silver nitrate and silver thiosulfate

Cultured peduncle segments of B. juncea, B. campestris, B. napus, B. nigra and B. carinata produced shoot buds on Murashige and Skoog medium supplemented with benzyladenine and 1-naphthalene acetic acid. Supplementation of the media with 30 μm silver nitrate or silver thiosulfate enhanced the frequency of shoot regeneration. The regenerated shoots could be rooted at a frequency of 95% and transferred to soil where 75% survived and set seed. This revised version was published online in June 2006 with corrections to the Cover Date.     

大白菜幼苗初生维管系统的解剖学研究

大白菜是子叶出土幼苗,子叶节区下部具木质部中部凹缢的中始式二原型单中柱,特称芸苔型。作者在白菜幼苗子叶节区中部也发现了属于管状中柱范畴的疏隙中柱阶段,从而进一步证明管状中柱和疏隙中柱在种子植物体内并非毛莨科某些属所特有,至少在十字花科的芸苔属也存在。     

Characterization of seedling proteomes and development of markers to distinguish the Brassica A and C genomes

The diploid species Brassica rapa(genome AA)and B.oleracea(genome CC)were compared by fuU-seale proteome analyses of seedling.A total of 28.2% of the proteins was common to both species,indicating the existence of a basal or ubiquitous proteome.How-ever,a number of discriminating proteins(32.0%)and specific proteins(39.8%)of the Brassica A and C genomes,respectively,were identified,which could represent potentially species-specific functions.Based on these A or C genome-specific proteins,a number of PCR-based markers to distinguish B.rapa and B.oleracea species were also developed.     

芥菜型多室油菜与甘蓝型油菜的种间远缘杂交

通过对芥菜型多室油菜与甘蓝型油菜种间杂交 以下简写为芥×甘或甘×芥 的结实性、交配性以及不同甘蓝型油菜对交配性的影响等研究发现:芥、甘正反交形成的饱满种子数较少,其形成种子的能力弱,但是芥×甘与甘×芥杂交相比,芥×甘形成饱满种子的能力较强,受精能力以及杂种胚胎的发育能力也强,在授粉后的子房发育上二者无显著差异.所以,芥菜型多室油菜与甘蓝型油菜种间杂交创建新资源时宜采用芥×甘杂交方式;不同甘蓝型油菜品种与芥菜型多室油菜正反交的结角率、受精指数、结籽指数和可交配指数均不相同,但可交配指数的变异系数最大.因此,筛选可交配性强的甘蓝型基因型应着眼于可交配指数高的甘蓝型油菜亲本材料,根据本试验结果,芥菜型多室油菜与甘蓝型油菜93-221-1杂交形成的杂种胚具有较强的可发育性.     

Loss of C-genome-specific markers during transgene introgression from Brassica napus to wild Brassica juncea

Transgene flow from engineered Brassica napus to wild weed relatives could potentially have an environmental effect. To evaluate the introgression of transgenic B. napus into wild Brassica juncea, the hybrid F₁ and backcross progenies derived from B. juncea (genome constitution AABB) and transgenic B. napus (AACC) crosses were investigated. C-genome-specific simple sequence repeat (SSR) markers corresponding to linkage groups N11–N19 in B. napus were screened and used to estimate the marker frequency in hybrid F₁ and backcross progenies. C-genome-specific markers could be stably detected in hybrid F₁ and backcross BC₁ plants, but were only rarely found in the BC₂–BC₅ generations. For example, a specific SSR marker for linkage group N12 segregated in BC₂ generation but were completely lost in BC₃–BC₅, while a specific SSR marker of linkage group N15 segregated in BC₁, BC₂ and BC₃ generations and was absent in more advanced backcrossed generations (BC₄ and BC₅). The results indicate that a certain gene regions in Brassica napus plants are transmitted at a relatively lower frequency to wild relatives, and more rapidly disappeared in subsequent backcross generations. We propose that a foreign gene or transgene that is integrated in the C-chromosome of Brassica napus could reduce the risk of introgression in nature.     

芸苔属（Brassica）植物中microRNAs的生物信息学预测与分析

MicroRNA (miRNA) 是一类调控基因转录后表达的非编码的小分子RNA．它在生物的发育、细胞增殖、凋亡以及胁迫响应等生物过程中发挥着重要的调控作用．目前,分离和鉴定miRNA的方法主要包括实验方法（遗传筛选、直接克隆）和生物信息学方法．MiRNA存在表达丰度低,表达组织特异性,以及受特殊诱导等问题,用传统的实验法常难发现和鉴定miRNA．通过生物信息学方法在已有的各种基因库中寻找未知miRNA,大大提高了人们发现miRNA及其靶基因的效率．芸苔属（Brassica）的成员包括油菜、芜青、甘蓝等,是世界各国主要油料和食用作物．目前,油菜的miRNA的分离和鉴定工作已有文献报道,而其它的尚属空白．本文将拟南芥、水稻等植物已知的miRNA分别与芜青、甘蓝、野芥菜、黑芥菜、埃塞俄比亚芥的GSS和EST数据库进行比对搜索,采用一系列标准进行筛选,最后分别在芜青和甘蓝中预测到67个和95个miRNA．再把这些预测得到的miRNA分别与芜青和甘蓝的mRNA数据库进行比对搜索,分别找到120个和111个靶基因,除去未知功能及功能不详的,各有62个和48个靶基因．分析结果表明,上述大多数靶基因编码的产物为转录因子及重要代谢酶类,涉及植物的生长发育调控,信号转导及胁迫响应等方面．     

Characterization of seedling proteomes and development of markers to distinguish the Brassica A and C genomes

The diploid species Brassica rapa(genome AA)and B.oleracea(genome CC)were compared by full-scale proteome analyses of seedling.A total of 28.2% of the proteins was common to both species,indicating the existence of a basal or ubiquitous proteome.However,a number of discriminating proteins(32.0%)and specific proteins(39.8%)of the Brassica A and C genomes,respectively,were identified,which could represent potentially species-specific functions.Based on these A or C genome-specific proteins,a number of PCR-bas...