酿酒酵母与粟酒裂殖酵母属间原生质体融合选育降解苹果酸强的葡萄酒酵母

采用赖氨酸缺陷型酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｎｉｓｉａｅ）Ｌ１原生质与肌醇缺陷型粟酒裂殖酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ）ＰＭ－５原生质体事例选育了葡萄酒发酵性能良好且具有降解苹果酸能力的酵母菌株。对融合子菌落形态、遗传稳定性、降解苹果酸能力和葡萄酒发酵性能进行了研究。结果表明：用促融合剂「３０％聚乙二醇（ＭＷ６０００）、０．０２ｍｏｌ／Ｌ ＣａＣｌ２和１     

葡萄酒苹果酸-乳酸发酵接种时间选择的研究*

分别在佳利酿葡萄汁酒精发酵前期（第Ⅰ阶段）、中后期（第Ⅲ阶段）和结束时（第Ⅲ阶段）接种酒明串珠菌（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｏｅｎｏｓ）３１ＤＨ,进行苹果酸－乳酸发酵（ＭＬＦ）接种时间选择的研究,结果表明;不同阶段接种经ＭＬＦ后总酸降幅均为２．６ｇ／Ｌ;挥发酸含量上升且第Ⅰ阶段＞第Ⅱ阶段＞第Ⅲ阶段;挥发酯以第Ⅱ阶段含量最高,为０.３７ｇ／Ｌ,同其他两阶段含量相比较,差异显著（ａ＝０．０５）;接种时间影响着接种后菌群成活率和迟滞期的长短;接种酒明串珠菌３１ＤＨ进行 ＭＬＦ应以第ⅢＳ阶段为宜。根据     

葡萄酒苹果酸—乳酸发酵接种时间选择的研究

分别在佳利酿葡萄汁酒精发酵前期（第Ｉ阶段）、中后期（第Ⅱ阶段）和结束时（第Ⅲ阶段）接种酒明串珠菌（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｏｅｎｏｓ）３１ＤＨ,进行苹果酸－乳酸发酵（ＭＬＦ）接种时间选择的研究,结果表明：不同阶段接种经ＭＬＦ后总酸降幅均为２．６ｇ／Ｌ;挥发酸含量上升且第Ｉ阶段＞第Ⅱ阶段＞第Ⅲ阶段;挥发酯以第Ⅱ阶段含量最高,为０．３７ｇ／Ｌ,同其他两阶段含量相比较,差异显（α＝０．０５）;接种时间     

酒酒球菌(Oenococcus oeni)胁迫适应性反应机制

苹果酸-乳酸发酵有利于提高葡萄酒品质,为了获得高活性的直投式酒酒球菌发酵制剂,从生理和分子生物学的角度理解该菌种胁迫耐受性增强的机制是必要的.本文就酒酒球菌利用苹果酸-乳酸发酵和膜结合的H -F0F1-ATP酶以维持细胞内环境的稳定和能量供给;胁迫适应过程中细胞膜组分的调整;小热休克蛋白Lo18等胁迫蛋白及其相应的基因的表达和调控等方面进行了综述.胁迫适应性反应机制的研究对发酵剂菌株的筛选、发酵剂的制备及其他工程菌株的构建具有重要意义.     

22株中国优良酒酒球菌代谢生物胺的检测

葡萄酒苹果酸-乳酸菌在葡萄酒苹果酸-乳酸发酵中对氨基酸进行脱羧反应产生具有毒性作用的生物胺.利用PCR技术及HPLC检测方法对22株中国优良酒酒球菌的生物胺代谢安全性进行研究.结果表明,PCR检测结果与HPLC测定结果一致,从我国葡萄产区筛选的优良酒酒球菌均不产生组胺、酪胺和腐胺,从生物胺角度.我国筛选的22株优良酒酒球菌具有较高的生物胺代谢安全性.     

欧芹苯丙氨酸脱氨酶cDNA在乳酸乳球菌中的表达研究

将欧芹（Ｐｅｔｒｏｓｅｌｉｎｕｍｃｒｉｓｐｕｍ）苯丙氨酸脱氨酶（ＰＡＬ）ｃＤＮＡ亚克隆到组成型表达载体ｐＭＧ３６ｅ启动子Ｐ３２下游,电穿孔法转化乳酸乳球菌,获得有ＰＡＬ表达活性的乳酸乳球菌工程菌（ｐＭＧ３６ｅＰＡＬ／Ｌ．ｌａｃｔｉｓＭＧ１３６３）。通过递归ＰＣＲ合成了一段１２０ｂｐ的调控片段,用以将ｐＭＧ３６ｅ改造为分泌型表达载体ｐＸＨＳ,以翻译偶联的方式表达ＰＡＬ,可使ＰＡＬ的Ｎ末端带上ｕｓｐ４５信号肽,结果亦检测到ＰＡＬ酶活性。自行分离克隆了乳酸乳球菌热休克蛋白基因ｄｎａＪ的启动子区域,构建了热诱导表达载体ｐＸＨＪ,获得ＰＡＬ热诱导表达工程菌（ｐＸＨＪＰＡＬ／Ｌ．ｌａｃｔｉｓＩＬ１４０３）,经３０℃至３７℃热诱导,可使ＰＡＬ表达活性提高至２倍。本文还就乳酸乳球菌ＰＡＬ工程菌在经典型苯丙酮尿症防治中的应用进行了分析和讨论     

高耐酸酒酒球菌常压室温等离子体诱变选育及其苹果酸-乳酸发酵研究

【目的】为选育出高度耐酸性酒酒球菌（Oenococcus oeni）突变菌株,研究其胁迫耐受性能及苹果酸-乳酸发酵（malolactic fermentation,MLF）能力。【方法】以酒酒球菌SD-2a为出发菌株,通过常压室温等离子体（atmospheric and room temperature plasma,ARTP）诱变技术,筛选高耐酸性酒酒球菌突变菌株,并探究其乙醇耐受性及在模拟酒和葡萄酒条件下的MLF能力。【结果】经过ARTP诱变处理后,利用pH 3.0的胁迫传代培养和分离纯化等,获得了5株β-葡萄糖苷酶活性较好的耐酸突变菌株,且在高乙醇浓度下表现出了较好的耐乙醇性。其中突变菌株ARTP-2在模拟酒中的β-葡萄糖苷酶活性和l-苹果酸累积降解量最高,且其在葡萄酒中l-苹果酸降解速率快于出发菌株,在第18天完成MLF,发酵后的葡萄酒香气成分的含量显著高于接种SD-2a的酒样。【结论】突变菌株ARTP-2具有良好的胁迫耐受性和MLF能力,对葡萄酒的香气起到积极的作用,为进一步开发优质的MLF商业发酵剂奠定基础。     

葡萄酒生境对乳酸菌代谢的影响

在葡萄酒酿造中,为了提高其稳定性及质量,经常利用乳酸菌进行苹果酸.乳酸发酵.苹果酸一乳酸发酵一般自发进行,也可以接种乳酸菌.本文从酿酒酵母与乳酸菌的交互作用及酚类物质和酿酒工艺对乳酸菌的作用等方面进行了综述,讨论了葡萄酒生态环境对乳酸菌代谢的影响,为苹果酸一乳酸发酵的有效控制提供一些参考.     

玉米苹果酸脱氢酶基因的分离与结构分析

以一个玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）杂种一代超亲表达的ｃＤＮＡ片段为探针,从玉米幼苗期ｃＤＮＡ文库中筛选到一个全长１２８７ｂｐ的ｃＤＮＡ克隆。序列分析表明,该ｃＤＮＡ编码细胞质苹果酸脱氢酶,推导的氨基酸序列与龙须海棠（Ｍｅｓｅｍｂｒｙａｎｔｈｅｍｕｍ　ｃｒｙｓｔａｌｌｉｕｍ　Ｌ．）及拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ｔｈａｌｉａｎａ（Ｌ．）Ｈｅｙｎｈ．）同一编码基因的氨基酸序列同源性分别为９０％和８４％。这是禾谷类作物中首次克隆的编码细胞质苹果酸脱氢酶的完整基因。     

乳酸乳酸球菌基因表达调控研究进展

乳酸乳酸球菌基因表达调控研究进展还连栋（中国科学院微生物研究所,北京１０００８０）乳酸球菌属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）包括５个种,其中乳酸乳酸球菌（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓｌａｃｔｉｓ）是最典型的一个种。乳酸乳酸球菌以前被称之为乳酸菌或Ｎ群链球菌（Ｓｔ...     

乳酸菌在苹果酒酿造中的应用

乳酸菌用于苹果酒酿造中 ,可以触发苹果酸 乳酸发酵 ,通过分解苹果酸 ,产生乳酸 ,并引起其他有机酸的变化而使苹果酒的口感质量得以改善。供试的 3个乳酸菌种中 ,L3由于具有较高的苹果酸分解速率 ,发酵的苹果酒感官质量优良而成为苹果酒苹果酸 乳酸发酵的优良菌种。pH、温度、二氧化硫、酒度通过影响乳酸菌的活动而对苹果酸 乳酸发酵产生一定的影响     

中国白菜RAPD分子遗传图谱的构建

以芜菁（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ Ｌ．ｓｓｐ．ｒａｐｉｆｅｒａ Ｍｅｔｚｇ）和结球白菜（Ｂ．ｃａｒｎｐｅｓｔｒｉｓ Ｌ．ｓｓｐ ．Ｐｌｋｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌｏｕｒ．）Ｏｉｓｓｏｎ）杂交的Ｆ２群体为试材,采用ＲＡＰＤ标记,用８４个１０核苷酸随机引物构建了白菜的ＲＡＰＤ遗传图谱。该图谱覆盖基因组的１６３２．４ｃＭ（ｃｅｒｔｉ Ｍｏｒｇａｎ）标记间的平均间隔为１６．５ｃＭ。其中最长的连锁群为     

多菌种混合发酵无醇饮料的研究

以大麦芽、大麦和大米为主料,优质红茶为辅料,依据微生物生理代谢与生态的基本原理,选择了三个菌种混合发酵,开发了一种新型发酵无醇饮料。采用的三个菌种是：酵母菌（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｉｖｉｓｉａｅ）,嗜酸乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）,弱氧化醋酸单胞菌（Ａｃｅｔｏｍｏｎａｓｓｕｂｏｘｙｄａｎｓ）。将上述菌种按一定比例（１：１：２）接种,接种总量为发酵基质的１０％,控制发酵温度２０－２５℃,发酵时间５天,即可制成风格独特、口味纯正的新型发酵无醇饮料（含醇量＜１％）。     

寄生植物和接种物对丛枝菌根菌接种势的影响

在盆栽条件下研究了丛枝菌根菌（ａｒｂｕｓｃｕｌａｒ ｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌ ｆｕｎｇｉ,ＡＭＦ）单孢、多孢和菌根根段接种物及其寄主植物烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）、苏丹草（Ｓｏｒｇｈｕｍ ｓｕｄａｎｅｎｓｅ（Ｐｉｐｅｒ）Ｓｔａｐｆ）和三叶草（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｒｅｐｅｎｓ Ｌ．）对ＡＭＦ Ｇｌｏｍｎｓ ｍａｃｒｏｃａｒｐｕｍ Ｔｕｌ、Ｇｌｏｍｕｓ ｍｏｓｓｅａｅ（Ｎｉｃｏｌ＆     

氧化诱导K_(562)细胞凋亡机制的初步探讨

以过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导人慢性髓细胞白血病（Ｋ５６２）细胞为凋亡模型,采用流式细胞仪（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ）和激光共聚焦扫描显微镜（ｌａｓｅｒｃｏｎｆｏｃａｌｓｃａｎｎｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ,ＬＣＳＭ）研究细胞凋亡,形态观察出现核固缩,核碎裂及凋亡小体等典型凋亡特征．ＤＮＡ电泳图谱出现“Ｌａｄｄｅｒ”．ＦＣＭ检测在Ｇ０／Ｇ１峰前出现一低ＤＮＡ含量的凋亡峰．ＬＣＳＭ显示凋亡细胞ｃ－Ｆｏｓ．ｃ－Ｊｕｎ和ＮＦκＢ表达量均有不同程度的增加．该结果提示上述三种转录因子可能参与氧化诱导凋亡过程中基因的调控作用．     

多菌种混合发酵无醇饮料的研究*

以大麦芽、大麦和大米为主料,优质红茶为辅料,依据微生物生理代谢与生态的基本原理,选择了三个菌种混合发酵,开发了一种新型发酵无醇饮料。采用的三个菌种是：酵母菌（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｉｖｉｓｉａｅ）,嗜酸乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）,弱氧化醋酸单胞菌（Ａｃｅｔｏｍｏｎａｓｓｕｂｏｘｙｄａｎｓ）。将上述菌种按一定比例（１：１：２）接种,接种总量为发酵基质的１０％,控制发酵温度２０－２５℃,发酵时间５天,即可制成风格独特、口味纯正     

用细菌噬菌体抑制葡萄酒中的细菌生长和苹果酸、乳酸发酵

存在于葡萄酒中的细菌噬菌体能侵染细菌起子培养物(starter culture)并抑制苹果酸、乳酸发酵。起子培养物的裂解是由于噬菌体侵染的结果,这一可能性通过向市售干红葡萄酒(pH3.23)中接种已增殖的起子培养物菌株得     

L-山梨糖脱氢酶的纯化及性质的研究

从５Ｌ罐发酵Ｌ－山梨糖的Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒ　ＳＣＢ３２９和Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ　ＳＣＢ９３３混合菌株中差速离心收集ＳＣＢ３２９菌体,破碎,离心获得无细胞抽提液,硫酸铵分级沉淀蛋白后依次经ＤＥＡＥＣｅｌｌｕｌｏｓｅ ５２和Ｑ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ柱层析分离得到了Ｌ－山梨糖脱氢酶（ＳＤＨ）,它能将Ｌ－山梨糖脱氢氧化为Ｌ－山梨酮,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳测得分子量约为６０ＫＤ。动力学性研究表明它为一个典型的Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｅｎ氏酶,对Ｌ－山     

苹果酸降解相关基因在酿酒酵母中的表达

微生物降酸是现代葡萄酒酿造重要工艺。将裂殖酵母苹果酸通透酶基因(mae1)和苹果酸酶基因(mae2)克隆到酿酒酵母中,构建了苹果酸酒精酵母;将mae1基因和乳酸乳球菌的苹果酸乳酸酶基因(mleS)克隆到酿酒酵母中,构建了苹果酸乳酸酵母。构建的酵母重组子能够有效地分解发酵基质中的苹果酸。     

苹果酸-乳酸发酵相关基因克隆及其在酵母中的表达

苹果酸乳酸发酵是不同葡萄酒酿造过程中至关重要的降酸步骤。近20年来,围绕苹果酸乳酸发酵相关基因的克隆以及在酿酒酵母中表达的研究取得了一些进展,就该研究进展和存在的问题进行了综述。此外,也论及了苹果酸-乙醇发酵相关基因的研究,这对于一些不适合苹果酸-乳酸发酵的葡萄酒具有重要意义 。