细菌芽孢基因表达的调控

细菌芽孢基因表达的调控范玉贞（河北省衡水师范专科学校生物系,０５３０００）在一定条件下,某些细菌生长到一定阶段,在细胞内形成一个圆形、椭圆形或圆柱形的休眠体,称为芽孢（或内生孢子）。能否形成芽孢是细菌种的遗传特征,而且现已查明具有芽孢的细菌（芽孢细菌...     

关于细菌芽孢概念的三个错误认识

关于细菌芽孢概念的三个错误认识卜祥通,刘桂兰（山东省平邑县第一中学２７３３００）芽孢,是某些细菌生长到一定阶段,在一定条件下在中胞内由原生质失水浓缩而成的圆形或椭圆形的内生孢子．芽孢的结构复杂,新陈代谢几乎停止,处于休眠状态,对热、干燥、辐射、酸、碱...     

具有ACC脱氨酶活性的海滨锦葵(Kosteletzkya pentacarpos)内生细菌对小麦耐盐性的影响

从盐生植物海滨锦葵块根中分离内生细菌43株,经形态学特征和16S r DNA序列相结合的方法鉴定,分属10个种属,其中芽孢杆菌属是优势属,其次是假单胞菌属和农杆菌属,蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)是优势种。对海滨锦葵内生细菌ACC脱氨酶活性的测定显示,其中5种菌明显具有ACC脱氨酶活性。用筛选到的5种细菌接种盐胁迫下小麦根系并测定其对于小麦耐盐性的影响。结果表明,蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、地衣芽孢杆菌四种芽孢杆菌均能显著提高盐胁迫下小麦幼苗的干物质重和叶绿素含量,并能显著提高保护酶(SOD、POD、CAT)活性,对盐胁迫的毒害有一定的缓解作用。绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)对小麦幼苗株高、根长、鲜重、干重、叶绿素含量和保护酶活性的提高也具有一定的作用。上述分析表明从海滨锦葵块根中分离出的5株具有ACC脱氨酶活性的内生细菌均能提高小麦幼苗的耐盐性。     

恒定磁场对苏云金芽孢杆菌的生长及毒力的影响

目的:研究恒定磁场对苏云金芽孢杆菌的生长和毒力的影响.方法:通过0-100 Gs的恒定磁场下对苏云金芽孢杆菌G-02、HD-1菌株的发酵,测定其生长和毒力的变化.结果:G-02、HD-1菌株分别在磁场强度43Gs和14Gs条件下发酵48h后的芽孢量和毒力达到最高,芽孢增长比分别为1.26和2.0,毒力增效比分别为1.27和1.25,苏云金芽孢杆菌G-02适宜的磁场强度为43-50Gs,HD-1菌株为7-29Gs.结论:低磁场强度对两种菌株的生长有一定的促进作用,而高强度磁场会对其生长产生抑制作用.     

地衣芽孢杆菌感受态细胞的形成及高效电转化

芽孢杆菌在营养缺乏的饥饿状态下,细胞易产生感受态因子,处于生长芽孢时期的芽孢杆菌更容易产生感受态。基于此原则利用芽孢杆菌极限营养培养基通过体外处理诱导使地衣芽孢杆菌产生感受态性能,同时调整参数,建立了感受态细胞对质粒pAPR的高效电转化方法。当质粒DNA浓度为1．5μg/ml、转化时电压为1750V的时候,可以得到261个转化子,经鉴定均为阳性克隆子。而常规电转化的最高仅为20个转化子。为以芽孢杆菌为宿主进行高效电转化提供了模型,也为建立适合工业应用的分泌型表达载体的构建打下了一定基础。     

药用芽孢杆菌对常用中草药的耐药性试验

目的 研究药用芽孢杆菌对几种常用中草药的耐药性,为药用芽孢杆菌与中草药的临床合并应用提供理论依据.方法 将中草药制成煎剂,通过琼脂扩散方法进行药敏试验.结果 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和纳豆芽孢杆菌(Bccillus natto)3种芽孢杆菌除了对黄连和黄芩有一定敏感性外,对其余8种中草药均不敏感;而地衣芽孢杆菌(Bacillus clicheniformis)则对黄连、黄芩和金银花都有一定敏感性,对其余中草药均不敏感.结论 4种药用芽孢杆菌对大部分中草药(包括有杀菌和抑菌作用的中草药)具有耐药性.     

牛源致病性蜡样芽孢杆菌溶血素BL亚基的原核表达及其生物学活性分析

蜡样芽孢杆菌属于革兰氏阳性菌,分布广泛,具有一定的致病性。不同的蜡样芽孢杆菌携带有不同的毒力因子,这直接决定了蜡样芽孢杆菌株致病性的差异。研究和探讨毒力因子分布以及具体毒素的生物活性有助于对蜡样芽孢杆菌病采取更科学的防控。本研究通过原核表达系统将溶血素BL三亚基重组表达,并对表达蛋白进行了纯化和部分生物学活性的检测。研究结果表明,牛源致病性蜡样芽孢杆菌溶血素BL可以在原核表达系统中成功表达和纯化,牛源致病性蜡样芽孢杆菌溶血素BL拥有溶血性、细胞毒性、很好的免疫原性以及对小鼠具有一定的免疫保护性。本研究表达了溶血素BL三亚基,并探究了牛源致病性蜡样芽孢杆溶血素BL的生物学活性。本研究为进一步揭示蜡样芽孢杆菌溶血素BL的致病作用机制和建立针对牛源致病性蜡样芽孢杆菌病的检测方法奠定了理论基础。     

枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及质粒转化方法研究

为便于枯草芽孢杆菌工业化生产应用,对Spizizen创立的枯草芽孢杆菌DNA转化方法进行改进.用GMI和GMII溶液处理枯草芽孢杆菌野生型菌株BS501a、营养缺陷型突变株DBl342和非营养缺陷型突变株WB800,用改进的方法制备感受态细胞,用7.5kb质粒pSBPTQ进行转化,并研究RNA、酵母粉、水解酪蛋白、培养方法对枯草芽孢杆菌质粒转化的影响.结果表明,该方法适用于不同基因型枯草芽孢杆菌的质粒转化,营养缺陷型突变株DBl342的转化率为750 CFU/μg/DNA,非营养缺陷型突变株WB800转化率为1 070 CFU/xg DNA,野生型菌株BS501a转化率为270 CFU/μg/DNA.根据影响转化效率的因素,推测在该方法中,枯草芽孢杆菌质粒转化原理:一定生物量的枯草芽孢杆菌在外界营养条件和钙、镁离子作用下,细胞壁和细胞膜形成缺陷,使外源DNA转入枯草芽孢杆菌细胞内.     

同步辐射软X射线对枯草杆菌的诱变效应

采用同步辐射软X射线对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)1831菌株进行辐照处理,研究了不同剂量下3．1nm的软X射线对其芽孢的失活和诱变作用。结果表明：同步辐射软X射线对枯草杆菌芽孢的剂量存活曲线表现为典型的“肩型”,对芽孢的失活作用属于“单靶多击”方式,失活击中数等于3。根据脱脂牛奶平板上蛋白酶活力大小的测量统计,以变异系数作为诱变效应指标,软X射线对芽孢具有一定的诱变作用。     

细菌的芽孢

细菌的芽孢对不良环境因素(热、干燥、射线、化学药剂等)具有高度的抗性,这与人类的生活、生产有一定的利害关系。细菌的芽孢是细菌营养细胞的休眠体,并且具有回复到营养体阶段的性能。芽孢不是     

枯草芽孢杆菌水剂防治黄瓜枯萎病田间防效研究

通过35亿活芽孢/ml枯草芽孢杆菌水剂以浸种、灌根并用的方式防治黄瓜枯萎病,田间试验结果表明：枯草芽孢杆菌水剂10倍液、50倍液、100倍液对黄瓜枯萎病具有明显的防治效果,同时对黄瓜秧苗正常生长无任何不良影响。此外,枯草芽孢杆菌水剂还对黄瓜植株具有一定的促进生长作用。     

谷氨酸对苏云金杆菌的芽孢和伴孢晶体的影响

研究了不同浓度的谷氨酸对苏云金芽孢杆菌形态、菌体浓度及芽孢和件孢晶体的影响.研究表明,一定浓度的谷氨酸有利于菌体的生长并能够提高菌体的增殖速度,对芽孢和伴孢晶体的形态没有明显的影响,但对芽孢的裂解有明显地抑制作用.     

两株植物内生巨大芽孢杆菌的生物学特性比较

分别从爬山虎和金银花的茎中分离和鉴定获得了两株植物内生巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),并对其形态特征、生理生化特征、培养及生理特征进行研究和比较。结果显示,在菌体的大小、耐盐能力、利用柠檬酸盐和在10°C下生长情况、D-木糖的代谢和产卵黄磷脂酶情况等方面,不同植物的内生巨大芽孢杆菌间以及植物内生菌与外源菌间都存在较大差异。结果表明,表型分类法在植物内生菌的鉴定中存在一定局限。     

蛋白酶对解淀粉芽孢杆菌α—淀粉酶活力的影响

目前工业生产α－淀粉酶的主要菌种是解淀粉芽孢杆菌,该菌在培养条件下不但产生α－淀粉酶,同时也产生一定比例的蛋白酶。本文研究了不同来源的蛋白酶对解淀粉芽孢杆菌ＢＦ７６５８和８６３１５α－淀粉酶活性的影响。结果表明发现中性蛋白酶对两种α－淀粉酶活性无显著影响,而２７０９碱性蛋白酶能使α－淀粉酶活性丧失６０％以上。     

真藓科（Musci：Bryaceae）芽孢形态特征及其分类学意义

在光学显微镜（LM）和扫描电子显微镜（SEM）下对6属15种真藓科（Bryaceae）植物的芽孢进行了形态特征观察。结果显示,真藓科芽孢形态多样,可以作为该科种间分类鉴定的重要标准。芽孢在不同发育时期,形态特征差异较大。无性芽孢在环境条件许可的情况下才会产生,产生芽孢的植株一般不易发生有性生殖。     

家蝇幼虫血淋巴粗提物抑菌活性初步研究

以4种细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌)为供试菌,测定了家蝇幼虫血淋巴粗提物的抑菌活性。结果显示,家蝇幼虫血淋巴各浓度粗提物对4种供试细菌均有一定的抑菌活性,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌率最大,其他依次为大肠杆菌>枯草芽胞杆菌>巨大芽孢杆菌,在0.8mg/mL时的抑菌率分别为51.09%、48.66%、43.27%和40.62%;在各浓度下不同菌种之间的抑菌率差异不显著,抑菌活性随着血淋巴粗提物浓度的增加而增强。在0.8mg/mL时对各细菌的抑菌圈直径分别为12.00mm、12.22mm、9.11mm和10.33mm,均显著大于对照,但低于头孢霉素。     

一种含血浆沉淀物的新型培养基及其应用

本文以枯草芽孢杆菌为例,应用一种含血浆沉淀物的新型培养基PSM-1培养基和常规培养基(Luria-Bertani培养基,下简称LB培养基),在相同条件下,培养枯草芽孢杆菌进行液体发酵;并分别用PSM-1培养基和LB培养基培养的枯草芽孢杆菌菌液进行几种常见植物病原菌的抑菌实验。结果表明,(1)PSM-1培养基即减少了酵母粉、蛋白胨等昂贵营养物的使用量,实现了废弃物的循环利用,为工业化生产降低了约70%的生产成本;(2)用PSM-1培养基发酵芽孢类细菌时,芽孢率≥90%,而用LB培养基时,芽孢率约为80%,所以用PSM-1培养基发酵芽孢类细菌芽孢率提高了12.5%;(3)通过枯草芽孢杆菌的抑菌实验观察,PSM-1培养基培养出的枯草芽孢杆菌菌液抑菌性能优于LB培养基培养的枯草芽孢杆菌菌液的抑菌性能。50 L及2 t发酵罐生产性实验结果表明,此种含血浆沉淀物的新型培养基(PSM-1)性能可靠,可以用于芽孢类细菌的培养。     

细胞型朊蛋白抑菌活性的初步探索

目的:研究细胞型朊蛋白(PrP~c)有无抑菌活性。方法:把Pr Pc分别与金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、大肠杆菌等5种菌孵育一定时间,然后用碘化丙锭对上述5种样品染色后采用流式细胞仪检测各样品的荧光信号。结果:通过对流式细胞仪的荧光信号进行分析,发现PrP~c对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有明显的抑制活性,而另外3种菌的样品没有检测到荧光信号的增强,亦即PrP~c对这3种菌无抑菌活性。结论:细胞型朊蛋白有一定的抑菌活性,有望成为一种新型的抗菌肽。     

凝结芽孢杆菌GBI-30,6086的安全性探讨

对凝结芽孢杆菌GBI-30,6086的食用安全性进行探讨。根据凝结芽孢杆菌GBI-30,6086的毒理学、耐药性和产毒能力、食用和使用情况等数据,考虑其推荐使用量和我国人群的消费水平,对其食用健康风险进行安全性评估。已有研究未观察到凝结芽孢杆菌GBI-30,6086具有毒性、耐药性和产毒能力,临床实验未见不良临床反应报告。将中国2002年居民的食物摄入量转换为食物摄取份数(25.38份),凝结芽孢杆菌GBI-30,6086在其推荐剂量下,预估摄入量为5.1×1010CFU/d,小于每日可接受摄入量(ADI)值(8.0×1010CFU/d)。在其推荐剂量下,凝结芽孢杆菌GBI-30,6086对健康产生潜在影响的风险较低。     

抗生素类作为防腐剂对苏云金杆菌芽孢及伴胞晶体的影响*

报道了 1 4种抗生素作为防腐剂对苏云金杆菌CH菌株芽孢萌发的抑制作用和对伴胞晶体的影响。结果表明 ,红霉素、盐酸环丙沙星对CH菌株芽孢萌发有较强的抑制作用 ,在 0 5μg/mL低剂量下可抑制芽孢的萌发 ;氧氟沙星和麦迪霉素抑制作用稍差 ,在 5μg/mL的剂量下抑制作用随时间延长而减弱 ,96h后基本丧失抑制作用。其它几种抗生素对苏云金杆菌芽孢萌发的抑制终浓度均在 30 μg/mL以上 ;SDS -PAGE分析和生物测定表明 ,红霉素、盐酸环丙沙、氧氟沙星和麦迪霉素对伴胞晶体均无明显损伤作用 ,其中氧