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相似文献
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1.
紫云英根瘤菌糖基转移酶基因exoA的克隆及序列分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
从可互补紫云奶瘤菌胞外多糖合成缺陷变种NA03和NA10的exoR‘-11上亚克隆获得2.0kb的BglI酶切片段,命名为pJB-H701,pJB-H701不仅可纠正变种NA03和NA10R的胞外多糖缺陷表型,而且使两变种诱导宿主植物结瘤固氮能力恢复到野生型水平。  相似文献   

2.
紫云英根瘤菌Exo^—变种的生理遗传及胞外多糖组分分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
从质粒pJB11-B6的8.5kb野生型DNA片段中克隆到5.8kb和2.6kb的DNA片段,其中5.8kb的片段互补紫云英根瘤菌107菌株的胞外多糖(EPS)缺陷型变种NA06和NA12,2,2.6kb的片段只能互补变种NA12。回接实验和电镜切片显示,这种个变种的根瘤与野生型显著不同,无固氮活性,根瘤内基本不含类菌体;它们的Exo^+回复子的根瘤与野生型根瘤相似,多数细胞胞含有类菌体,但仍无固  相似文献   

3.
紫云英根瘤菌菌株107经Tn5插入诱变,得到12株胞外多糖缺陷型变种,以质粒pMN2为载体,从其中7株EPS^-变种内分别构建了7个R-prime质粒(exoR)大部分变种的EPS^-表型可被exoP互补,恢复野生型表型(EPS^+)。互补表明,12株EPS^-变种可分为6个不同的互补群,其中5个在遗传上连锁,exoP酶切分析,除exoR-02,exoR-04外,其余5只的外源片段均整合于pMN2  相似文献   

4.
以PMN2作为载体质粒,应用体内克隆技术,从紫云英根瘤菌胞外多糖缺陷型变种NA-11中,分离到xeoR'质粒,该杂合质粒带有Tn5及其插入位点两侧的根瘤菌中,不仅可纠正紫云英根瘤菌Exo^-变种的胞外多糖合成缺陷,也能恢复该变种使宿主植物根部结瘤的能力。  相似文献   

5.
以PMN2作为载体质粒,应用体内克隆技术,从紫云英根瘤菌胞外多糖缺陷型变种NA-11中,分离到exoR′质粒,该杂合质粒带有Tn5及其插入位点两侧的根瘤菌DNA片段。exoR′质粒能稳定地存在于紫云英根瘤菌中,不仅可纠正紫云英根瘤菌Exo-变种(Ndv-)的胞外多糖合成缺陷,也能恢复该变种使宿生植物根部结瘤的能力。  相似文献   

6.
利用Tn5定位诱变筛选紫云英根瘤菌Exo^—变种   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用Tn5定位诱变方法,对质粒pJBB5进行Tn5插入诱变,得到10个Tn5在59kbB5外源片段上有不同插入位点的质粒TN11,TN112,TN22,TN23,TN31,TN41,TN91,TN101,TN131,TN141。将Tn11等分别转移到已经含有不相容质粒pPH1JI的紫云英根瘤菌107菌株中,使之发生同源变换。通过抗性选择及表型鉴别,筛选到3株菌落表型干燥(Muc-)的酸性胞外多糖(EPS)合成缺陷菌株(Exo-)107(TN22),107(TN101),107(TN131)。Southern杂交分析证明这3株变种的Tn5插入确实是同源交换而不是转座产生,表明经过适当改良的Tn5定位诱变法可以应用于紫云英根瘤菌Exo-变种的筛选。  相似文献   

7.
影响紫云英根瘤菌入侵和根瘤发育的exo基因的克隆及分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
紫云英根瘤菌菌株107的3个胞外多糖缺陷突变株NA-01、02、04不具备诱导宿主植物紫云英结瘤的能力。以NA-01突变位点的DNA面为探针,从可互补这3个变种的exoR’-11质粒上亚克隆到2.6kb的DNA片段。互补试验表明,2.6kb的片段不仅可纠正突变株的胞外多糖缺陷表型,而且使变种恢复诱导宿主植物形成有效根瘤的能力,2.6kb片段经Tn5定位突变后丧失这种恢复能力,表明该片段带有对应于3  相似文献   

8.
紫云英根瘤菌菌株107经Tn5插入诱变,得到12株胞外多糖缺陷型变种,以质粒pMN2为载体,从其中7株EPS-变种内分别构建了7个R-Prime质粒(exoR'),大部分变种的EPS-表型可被exoR'互补,恢复野生型表型(EPS+)。互补表明,12株EPS-变种可分为6个不同的互补群,其中5个在遗传上连锁。exoR'酶切分析,除exoR'-02,exoR'-04外,其余5只的外源片段均整合于PMN2的两同向重复序列IS21之间。  相似文献   

9.
假单胞菌胞外多糖发酵条件的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
研究了假单胞菌(Pseudomonassp.6)利用木糖产胞外多糖的发酵条件。实验表明KH2PO4,O2和高碳氮比对多糖合成有促进作用,在发酵后期补加木糖有助于多糖产量的提高  相似文献   

10.
用鸟枪法从3株紫云英根瘤菌107菌株的胞外多糖合成缺陷变种(Exo-)NA-05、NA-07和NA-08中克隆获得含有107菌株exo基因及Tn5的exo::Tn5片段。以pRK415为载体构建107菌株EcoRI酶切后DNA片段的部分基因库,用exo::Tn5做探针原位杂交得到一个阳性克隆。该克隆的外源片段4.2kb能恢复3个变种的多糖表型及结瘤固氮能力。酶切分析和Southern杂交表明,3株变种中Tn5插入位点相近。  相似文献   

11.
紫云英根瘤菌107菌株exo基因簇非连锁突变位点的克隆   总被引:1,自引:0,他引:1  
用鸟枪法从3株紫云英根瘤菌107菌株的胞外多糖合成缺陷变种NA-05、NA-07和NA-08中克隆获得含有107菌株exo基因及Tn5的exo:Tn5片段。以pRK415为载体构建107菌株EcoRI酶切后DNA片段的部分库,用exo:Tn5做探针原位杂交得到一个阳性克隆。该克隆的外源片段4.2kb能恢复3个变种的多糖表型及结瘤固氮能力。酶切分析和Southern杂交表明,3株变种中Tn5插入位点  相似文献   

12.
紫云英根瘤菌107菌株酸性胞外多糖的分离纯化及结构分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
用化学沉淀法和柱层析法,分离纯化了紫云英根瘤菌野生型107菌株,胞外多糖合成缺陷型变种NA02及其回复子NA02(R‘-11)产生的酸性胞外多糖(EPS)。结构组成分析表明:菌株107与NA02(R’-11)产生的EPS糖组分均由葡萄糖、半乳糖、核糖和葡萄糖醛酸构成,而变种NA02产生的EPS只含葡萄糖、半乳糖和葡萄糖醛酸,与野生型显著不同。3个菌株的EPS均有乙酰基取代,而无其它形式的取代基。E  相似文献   

13.
紫云英根瘤菌菌株107的3个胞外多糖缺陷突变株NA-01、02、04不具备诱导宿主植物紫云英结瘤的能力。以NA-01突变位点的DNA片段为探针,从可互补这3个变种的exoR′-11质粒上亚克隆到2.6kb的DNA片段。互补试验表明,2.6kb的片段不仅可纠正突变株的胞外多糖缺陷表型,而且使变种恢复诱导宿主植物形成有效根瘤的能力。2.6kb片段经Tn5定位突变后丧失这种恢复能力,表明该片段带有对应于3个变种的野生型基因。  相似文献   

14.
利用转座子Tn5对质粒pJB-B6既定位诱变,经同源交换,筛选获得一株Rhizobiumhuakuii107胞外糖合成缺陷(Exo-)变种RH983。三亲本杂交实验显示,pJB-B6及其亚克隆pJB-B601均可纠正变种RH983的胞外多糖合成缺陷。pJB-B601的2.3kbDNA片段的核苷酸顺序表明,该片段内存在一个完整的开放阅读框架(ORF)。ORF全长1170bp,编码390个氨基酸的蛋白,该蛋白与Rhi-zobiummeliloti的糖基转移酶ExoL有56.7%.的同源性,称为RhexoL。利用启动子探测质粒,构建了RhexoL-lacZ转录融合子,发现RhexoL基因5’上游有较强的启动子活性。  相似文献   

15.
用化学沉淀法和柱层析法,分高纯化了紫云英根瘤菌野生型107菌株、胞外多糖合成缺陷型变种NA02及其回复子NA02(R'-11)产生的酸性胞外多糖(EPS)。结构组成分析表明:菌株107与NA02(R'-11)产生的EPS糖组分均由葡萄糖、半乳糖、核糖和葡萄糖醛酸构成;而变种NA02产生的EPS只含葡萄糖、半乳糖和葡萄糖醛酸,与野生型显著不同。3个菌株的EPS均有乙酰基取代,而无其它形式的取代基。EPS的酸性来自葡萄糖醛酸。1H-NMR分析表明,野生型菌株107和回复子NA02(R'-11)的EPS糖残基通过α和β糖苷键方式连接,而变种NA02EPS的糖链中均为α连接方式。  相似文献   

16.
研究了经完全消除苏云金芽胞杆菌野生菌株YBT-1463的内生质粒对该菌部分形态、遗传及生理生化特性的影响。结果表明,消除内生质粒后的无质粒突变株不形成伴胞晶体,但电转化4种供体质粒,即pBMB121、pBMB304-1Ab、pBMBLC和pBMB9748的效率显著提高,转化频率最高比出发菌株提高6.8×10倍,而无质粒突变株对红霉素等10种抗生素的敏感性、对葡萄糖等19种碳源和谷氨酸等12种氮源的利用能力及生长性能与出发菌株无明显差异。  相似文献   

17.
RHEOLOGICALOBSERVATIONONCEREBRO-SPINALFLUIDRHEOLOGICALOBSERVATIONONCEREBRO-SPINALFLUID¥LiHongmin;HanFugang;WangLiqing;ZhangJi...  相似文献   

18.
中国蓼属新分类群   总被引:1,自引:0,他引:1  
李安仁 《植物研究》1995,15(4):413-418
本文发表了蓼属的几个新种,即:华南蓼PolygnumhuananenseA.J.Li,sp.nov.;湿地蓼PolygonumparalinicolaA.J.Li.sp.nov.;珠芽支柱蓼PolygonumsuffultoidesA.J.Li,Sp.nov.;紫脉蓼PolygonumpurpureonerrosumA.J.Li,sp.nov.;华蓼PolygonumcathayanumA.J.Li,sp.nov.;一个变种,即园基长鬃蓼PolygonumlongisetumDeBr.var.rotundatumA.J.Li,var.nov.  相似文献   

19.
通过逆转录病毒载体将野生型p53基因、TNFa基因单独或与IL-6基因连接(TNFIL-6)分别导入膀胱癌细胞株EJ和BIU-87.裸鼠致瘤试验和体外生长实验显示:p53基因转染组细胞接种裸鼠后9周无肿瘤生长,体外生长速率明显降低,Northern杂交显示H-ras基因表达明显低于非转染组细胞,TNPa基因和TN刊IL-6基因转染组裸鼠瘤体积明显小于对照组,体外生长速率与对照组无显著差别,两种细胞因子对H-ras基因表达无影响。  相似文献   

20.
一个高效表达,快速纯化大肠杆菌精氨酰—tRNA合成酶的 …   总被引:1,自引:0,他引:1  
编码大肠杆菌精氨酸-tRNA合成酶的基因argS被克隆到pMFT7-5载体上。将此质粒转化的大肠 力JM109(DE3)中,该转化子粗抽液的比活是宿主菌的2500倍。通过DEAE-Sepharose CL-6B FastFlow和BlueSepharose CL-6B两步柱层析在一天内即可将精氨酰-tRNA合成酶纯化至电泳一条带,比活为36000u/mg,总收率可达69%。  相似文献   

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