RNA聚合酶Ⅲ启动子的结构与功能

ＲＮＡ聚合酶Ⅲ (ｐｏｌⅢ )是真核生物催化合成ｔＲＮＡ和 5ＳｒＲＮＡ及一些核小ＲＮＡ和胞质ＲＮＡ必需的酶。ＲＮＡ聚合酶Ⅲ能够识别ｔＲＮＡ基因中一些高度保守的特征性ＤＮＡ序列而启动下游ＤＮＡ的转录 ,这些序列称为ＲＮＡ聚合酶Ⅲ启动子。ＲＮＡ聚合酶Ⅲ启动子不仅广泛存在于真核细胞中ｔＲＮＡ、Ｕ6核小ＲＮＡ(ＳＮＲ6 )等的基因中 ,也是病毒催化合成一些小片段ＲＮＡ如腺病毒ＶＡＲＮＡ所必需的。ＲＮＡ聚合酶Ⅲ启动子因其能在体内外高效快速地转录某些小片段基因 ,已被人们广泛地应用于核酶和反义ＲＮＡ技术中 ,在众多的ＲＮＡ…     

关于DNA复制的引物和DNA聚合酶

DNA复制是由DNA聚合酶催化的,反应需要四种脱氧核苷三磷酸和引物-模板;在引物的3′-羟基上,按模板的指令逐个添加脱氧核苷酸,生成碱基序列与模板互补的新DNA。复制时,DNA双链先打开,形成复制叉,随着复制叉的移动完成复制过程。双链DNA的复制是半不连续的,即先导链是连续合成滞后链则为不连续合成;后者先生成若干短片段(冈崎片段),再连在一起。 DNA复制在基因组的加倍、DNA重组以及修复DNA所受损伤等方面都对生命有决定性的作用。     

真核细胞DNA聚合酶δ的结构与功能

DNA聚合酶δ(Polδ)在真核细胞的DNA复制过程中具有核心酶的作用,同时还参与DNA的修复。Polδ是一种由多个亚基组成的复合体,目前已从哺乳动物、裂殖酵母和芽殖酵母等多种真核生物细胞中分离出,并对它们的亚基组成进行了分析,但还未得到确切一致的结果。Polδ在DNA复制中的具体作用已基本了解,它参与催化整个前导链的复制以及一些或大部分滞后链的复制。此外,Polδ还参与DNA的修复,此酶的这一功能可减少DNA的变异,但目前对其作用机理还知之较少。在Polδ活性调控方面,主要研究了一些相关蛋白因子对Polδ活性的调控作用以及转录因子对催化亚基表达的调控作用。     

DNA结构特点与高中教材的深化

195 3年 4月 2 5日 ,沃森和克里克发表一篇短文阐明了 DNA的双螺旋结构。 5 0年来 ,科学家一致认为这是分子生物学诞生的标志 ,近年更有科学家认为这也是生物学知识经济时代开端的标志。随着遗传工程的飞速发展和生物学世纪的到来 ,或简或繁的 DNA结构越来越经常地出现在报刊、电视 ,也挺立于中国硅谷的北京中关村广场。而当我国和美、英、法、日、德 5国共同完成人类基因组图谱和我国率先完成水稻基因组图谱 ,逐步破译决定人类及水稻等生老病死的天书 ,更促进全社会形成持续升温的基因热。1　 DNA结构的多态性近 2 0多年来 ,科学家已发…     

杆状病毒DNA聚合酶基因的研究概况

杆状病毒DNA聚合酶基因属于杆状病毒早期基因,是杆状病毒复制的必需基因。它编码病毒诱导的DNA聚合酶,能与其它复制因子一起与杆状病毒DNA的同源区和非同源区的顺式作用元件相互作用起始DNA复制。此基因作为杆状病毒系统发育分类的依据,较之包涵体蛋白、egt基因有更大的优势。     

动物细胞DNA聚合酶的研究新进展

本文主要介绍动物细胞中四种依赖于DNA的DNA聚合酶(简称DNA聚合酶)的结构、功能及其在DNA复制和修复作用中的研究现状。     

Taq DNA聚合酶结构改造与功能改进及其在医药领域的应用前景

TaqDNA聚合酶（ThermusaquaticusDNApolymerase）是重要的生物技术工具酶,广泛应用于疾病诊断与治疗、传染病检测、药物作用机理等医药领域。TaqDNA聚合酶在结构上由三部分构成：DNA聚合酶区、3’核酸外切酶区和5’核酸外切酶区。由于3’核酸外切酶区的氨基酸序列的变化而使其失去了3’-5＇的外切校读功能,因此TaqDNA聚合酶有错误复制倾向。利用特定位点的突变、与其他酶互换功能区和删除N末端的5’核酸外切酶区等方式可以改进TaqDNA聚合酶的性能,使它的忠实性、热稳定性和聚合性能得到提高。本文介绍了TaqDNA聚合酶的结构与功能改造的研究现状,并展望了TaqDNA聚合酶在医药领域的应用前景。     

线粒体DNA聚合酶的起源与演化

随着新的DNA聚合酶A家族成员的加入,家族内部的系统发育关系需要重新检查,来自大肠杆菌DNA聚合酶I(DNA Pol I)和它的细菌、噬菌体和真核细胞同源物被用来重建这个家族的系统发育史.分析显示:在真核生物演化的不同阶段,线粒体DNA聚合酶基因可能通过水平基因转移方式起源于不同类群的生物.原始真核生物线粒体DNA聚合酶基因可能来源于细菌,植物线粒体DNA聚合酶基因可能从质粒获得,而真菌和动物线粒体DNA聚合酶基因可能起源于T3/T7相关噬菌体.     

E.coli DNA抗肿瘤免疫的动态实验研究

５５只Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,５只作为正常对照组,其余５０只荷瘤后随机分为１０组, ５组为 ＴＥＳ对照组, ５组为Ｅ． ｃｏｌｉＤＮＡ治疗组。荷瘤第４ｄ起,分别于治疗组和对照组小鼠皮下注射 ＤＮＡ（１００ｍｇ／Ｌ）或 ＴＥＳ（０． １ｍｏｌ／Ｌ）,０．３ｍｌ／只,隔日１次,共５次。于荷瘤第５,９,１３,１７,２１ｄ处置对照组和治疗组各一组小鼠,进行Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ抗肿瘤免疫的动态研究。结果表明, Ｅ． ｃｏｌｉ ＤＮＡ体内抑瘤作用出现早、强且持久,主要是通过诱导肿瘤组织坏死所致,它可迅速持久地激活免疫系统,防止出现免疫低下或紊乱;对照组小鼠荷瘤早期可出现暂时的免疫功能增强,随荷瘤时间延长,逐渐降低至较低水平,并出现免疫紊乱。     

DNA聚合酶x家族的系统发育分析

随着DNA聚合酶x家族成员数量的增加,家族内部的系统发育需要重新检查,来自病毒和细胞的DNA聚合酶x家族成员顺序第一次被汇编在一起,进行系统发育分析。分析显示：真核生物DNA聚合酶beta(polβ)可能起源于病毒基因的水平转移;DNA聚合酶mu(polμ)基因仅存在于哺乳动物基因中,是脱氧核苷酸末端转移酶（TdT）的重复基因;DNA聚合酶lambda(polλ)可能是polμ和TdT的祖先基因,但在某些物种的进化过程中发生了基因丢失。     

跨损伤合成的DNA聚合酶——一类新的DNA聚合酶

细胞虽然拥有多种修复途径,但有些DNA损伤仍不可避免地会逃避修复而在基因组上保留下来,细胞跨损伤DNA合成的分子机制一直是DNA修复中主要的未解决问题之一.最近通过对一类结构相关性UmuC/DinB蛋白质超家族成员的研究发现它们具有DNA聚合酶功能.这类新发现的DNA聚合酶不同于经典的复制性DNA聚合酶,它们能以易误/突变(error-prone/mutagenic)或无误(error-free)方式进行跨损伤(translesion)DNA合成,并且从细菌到人在进化上功能保守.     

DNA聚合酶X家族系统发育树的重建

随着DNA聚合酶X家族成员数量的增加,特别是两个昆虫痘病毒(entomopoxvirus,EPV)成员的加入,家族内部的系统发育关系需要重新检查。总共37个来自不同物种的DNA聚合酶x家族成员的核心结构域序列被分析。结果显示：系统发育树呈现的家族内部系统发育关系基本上与家族成员的物种分布状态相吻合,其中,病毒成员与真核生物DNA聚合酶beta(polβ)亚群构成姐妹群,提示病毒成员可能起源于真核细胞的相应基因。亚群的歧异时间、基因结构比较和同线基因保守性分析显示,哺乳动物DNA聚合酶基因(Pol M)可能起源于脱氧核苷酸末端转移酶基因(TdT)最近发生的基因重复。     

DNA聚合酶Polι的研究进展

Y家族DNA聚合酶是一种跨损伤复制酶,即能以损伤的DNA为模板进行复制。Y家族DNA聚合酶广泛分布生物界,人类细胞中Y家族DNA聚合酶至少包括Rev1、Polκ、Polι、Polη四种,Polι在以DNA为模板进行复制时错配率很高而不同于其他跨损伤DNA聚合酶,Polι是目前发现的所有DNA聚合酶中保真性最低的DNA聚合酶。很高的错配率导致很高的突变率,最后基因的突变导致癌症的发生,因此Polι在各个国家被广泛的研究,并且对Polι的各个不同的特性进行了研究,取得了一系列成果,现对Polι的研究进展予以综述,并展望了未来的研究趋势。     

DNA聚合酶Polι的研究进展

Y家族DNA聚合酶是一种跨损伤复制酶,即能以损伤的DNA为模板进行复制。Y家族DNA聚合酶广泛分布生物界,人类细胞中Y家族DNA聚合酶至少包括Rev1、Polκ、Polι、Polη四种,Polι在以DNA为模板进行复制时错配率很高而不同于其他跨损伤DNA聚合酶,Polι是目前发现的所有DNA聚合酶中保真性最低的DNA聚合酶。很高的错配率导致很高的突变率,最后基因的突变导致癌症的发生,因此Polι在各个国家被广泛的研究,并且对Polι的各个不同的特性进行了研究,取得了一系列成果,现对Polι的研究进展予以综述,并展望了未来的研究趋势。     

Taq DNA耐热聚合酶在大肠杆菌中的克隆和高表达

从水生栖热菌(Thermus aquaticus)YT-1中分离得到的Taq DNA 聚合酶是一种广泛应用于PCR的耐热DNA聚合酶。由于天然菌株酶产量较低,培养条件要求严格,酶的纯化过程极为繁琐而使产品成本较高,因而促使人们构建适合于大规模生产的基因工程菌株。已有人分别通过不同的途径,使用不同的载体,成功地在大肠杆菌菌株中表达了Taq 耐热DNA聚合酶基因。我们通过与前人不同的途径,把这一基因克隆到大肠杆菌的载体质粒pJLA503上并使其得以高表达,为降低生产成本和进一步研究该酶的各种特性提供了有利条件。     

DNA聚合酶I的发现与意义

DNA聚合酶I是在DNA双螺旋结构模型提出后被发现的，阿瑟·科恩伯格在研究过程中起到至关重要的作用。在其研究成果的推动下，大肠杆菌DNA聚合酶I得到进一步揭示，并催生了PCR技术的问世，同时也促进了其他DNA聚合酶的发现。     

序列依赖的DNA局域结构和DNA弯曲

单晶Ｘ射线衍射技术分析表明,ＤＮＡ双螺旋并不是理想的均匀螺旋,而是存在明显的局部偏差。一般认为ＤＮＡ双螺旋携带着两种遗传信息：其一,遗传信息本身,以三联体密码写成,用来确定蛋白质顺序;其二,选择性表达指令,诸如转录调控过程中基本因子,活化子等识别有特定碱基顺序的ＤＮＡ区。后者或许就是靠ＤＮＡ螺旋结构的局部偏差和弯曲。理解这种偏差和弯曲的根源,并提出从ＤＮＡ序列预测其局域结构和弯曲的模型已成为人们关注的重点。１ＤＮＡ的局域结构１．１ＤＮＡ局域结构参数的定义Ｄｉｃｋｅｒｓｏｎ［１］等按照１９８８年在…     

DNA聚合酶X家族的起源与进化分析

随着DNA聚合酶X家族成员数量的增加,家族内部的系统发育需要重新检查。来自病毒和细胞的DNA聚合酶X家族成员序列第一次被汇编在一起,进行系统发育分析。分析显示：真核生物DNA聚合酶bcta(polβ)是这个家族的祖先基因,可能与昆虫痘病毒(EPv)之间发生过基因的水平转移;DNA聚合酶mu(polμ)基因仅存在于哺乳动物基因组中,是脱氧核苦酸末端转移酶(TdT)的重复基因;这个家族在低等真核生物的种系进化过程中发生了基因丢失。