共查询到20条相似文献,搜索用时 46 毫秒
1.
多重PAP及多重PAP结合ABC免疫细胞化学方法的建立、敏感性分析与应用 总被引:12,自引:0,他引:12
作者在传统的 PAP 及 ABC 染色方法的基础上,通过重复使用桥抗及 PAP 的次数或重复使用生物素化桥抗及 PAP 和 ABC 的次数,使 PAP 与 ABC 方法成功地结合,增加连接于抗原部位的酶分子数,建立起两种敏感的免疫细胞化学方法。染色结果经显微分光光度图象分析,方差分析,回归分析及染色效果的直接观察表明,重复染色可增加阳性强度,扩大阳性染色范围,提高信噪比,从而提高方法的敏感性,以生物素化桥抗取代非生物素化桥抗,将 ABC 引入到多重 PAP 方法中,可使方法的敏感性进一步提高。该方法结合单克隆抗体及多克隆抗体成功地检测出用传统双PAP 及 ABC 难以或不能检测出的常规福尔马林固定石蜡包埋的肾综合征出血热尸检组织中的病毒抗原及石蜡包埋肿瘤活检组织中的桥粒抗原。 相似文献
2.
从全国17个省市自治区收集了自病人及各种动物分离到的40株流行性出血热病毒(EHFV),用出血热病毒单克隆抗体(McAb)进行抗原分析,发现大多数省市分离的EHFV株能与MA25-1 McAb起反应,但湖北、湖南分离的EHFV不与之起反应,而该McAb对EHFVA9株抗原的滴度为1/2560。实验还发现,湖北省内长江以北地区分离的EHFV毒株Q25、J173。WP43和从江南地区分离的EHFV毒株A24和HA1018在抗原性上也有明显不同。 相似文献
3.
应用单克隆抗体免疫细胞化学法分析尸检组织中肾综合征出血热病毒G2,NP及HA结构蛋白抗原 总被引:4,自引:0,他引:4
本文应用15株分别抗肾综合征出血热(HFRS)病毒糖蛋白(Glycoprotein Ⅱ G2),核蛋白(Nuclcocapsid,NP)及血凝素(Hemagglutinin,HA)抗原的单克隆抗体免疫细胞化学方法对19例HFRS尸检病例的16种组织中的病毒抗原进行了定位和分布的研究及抗原分析。结果表明,死于早期HFRS人体组织内病毒抗原量大,分布广泛,主要以可溶性和颗粒性两种形式存在,前者存在于细胞内和细胞外,呈G2,NP及HA抗原阳性,是参与形成免疫复合物的主要抗原形式;后者是以单纯病毒NP或HA抗原阳性的病毒包涵体(IB)形式存在于细胞内,是病毒直接作用所致细胞病变的标志,IB的广泛分布但只有极个别阳性细胞发生坏死,说明该病毒具有泛嗜性感染和弱致细胞病变能力的特性。抗原分析结果显示,组织细胞中病毒抗原的表达及其抗原量受宿主细胞的种属,组织结构特点及病期的影响,也存在个体差异以及因感染病毒株或血清型不同产生差异的可能性。病毒抗原染色形态学证实,NP上具有HA抗原位点,其抗原决定簇有三类,其中的某些抗原决定簇可因病毒宿主动物或细胞的种属不同,表达也不同。HA抗原在人体组织细胞中的高表达和广泛分布也说明HFRSV对人体有很强的侵袭力。 相似文献
4.
5.
6.
一、引言环核苷酸免疫细胞化学技术自1972年Wedner等建立以来,已有不少进展。它是以Coons等显示组织内抗原定位的免疫细胞化学技术为基础,用环核苷酸抗体进行定位的方法。这种方法与亚细胞组分的环核苷酸 相似文献
7.
8.
人慢性胃炎胃粘膜内胃泌素及其mRNA的表达和意义 总被引:2,自引:1,他引:2
目的 探讨慢性胃炎胃粘膜对细胞内胃泌素 (G)及其mRNA的表达和意义。方法 标本均来自活检的胃窦部粘膜组织 ,用免疫细胞化学和原位杂交技术。结果 对照组G细胞及GmRNA阳性细胞数 ,与浅表性胃炎组比较无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,而与萎缩性胃炎组比较则有显著性差异 (P <0 0 1) ,不论对照组还是胃炎组的G细胞数量与GmRNA阳性细胞均有平行关系。结论 证明浅表性和萎缩性胃炎的胃泌素基因的转录和蛋白表达功能保存完好 ,因此检测G细胞的数量及GmRNA不仅可以帮助了解胃炎的萎缩程度 ,而且能判断临床疗效。 相似文献
9.
流行性出血热病人尸检材料中的病毒包涵体 总被引:3,自引:0,他引:3
应用抗流行性出血热病毒多克隆及单克隆抗体结合敏感的方法在尸检组织切片上进行了免疫细胞化学染色,多克隆抗体可清楚地显示出尸检组织中病毒抗原阳性的包涵体结构。依光镜下染色的形态特点不同,可将包涵体分为四个类型即小泡型、大泡型、多泡型和实心型。单克隆抗体染色进一步证实,实心型及空泡型包涵体呈“N”抗原阳性,少数组织中空泡状包涵体也呈“G2”抗原阳性。病毒包涵体的出现可作为该病毒在人体细胞内感染及复制的形态学证据。 相似文献
10.
11.
基因工程抗体研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
临床治疗中人抗鼠抗体反应的出现使鼠源性单克隆抗体的应用受到了极大的限制。为降低其免疫原性,人们利用基因工程技术对鼠源抗体进行改造,以减少其鼠源成分。简要概述了目前研究比较多的几种基因工程抗体及其临床应用。 相似文献
12.
通过基因工程可以大规模地制备能与人相容的单克隆抗体或片段。其中,噬菌体抗体抗库技术可以模拟体内抗体产生和成熟过程,不经细胞杂交,甚至不经免疫制备针对任何抗原的单克隆抗体。就基因工程抗体及噬菌抗体库技术的发展与应用作一概述 。 相似文献
13.
Jacob L. Jordan Joseph W. Arndt Karl Hanf Guohui Li Janine Hall Stephen Demarest Flora Huang Xiufeng Wu Brian Miller Scott Glaser Erik J. Fernandez Deping Wang Alexey Lugovskoy 《Proteins》2009,77(4):832-841
Bispecific immunoglobulin‐like antibodies capable of engaging multiple antigens represent a promising new class of therapeutic agents. Engineering of these molecules requires optimization of the molecular properties of one of the domain components. Here, we present a detailed crystallographic and computational characterization of the stabilization patterns in the lymphotoxin‐beta receptor (LTβR) binding Fv domain of an anti‐LTβR/anti‐TNF‐related apoptosis inducing ligand receptor‐2 (TRAIL‐R2) bispecific immunoglobulin‐like antibody. We further describe a new hierarchical structure‐guided approach toward engineering of antibody‐like molecules to enhance their thermal and chemical stability. Proteins 2009. © 2009 Wiley‐Liss, Inc. 相似文献
14.
15.
Z.a Shaker M.a Kaddah S.B Hanallah M.i El-Khodary 《International journal for parasitology》1998,28(12):289-1901
This study was undertaken to develop an immunodiagnostic test of active human schistosomiasis mansoni using a monoclonal antibody which targets urinary schistosomal antigen. Polyclonal antisera raised in rabbits against the processed urine of Schistosoma mansoni-infected patients showed very high and significant reactivity with ES product of ova compared with other different S. mansoni antigens. The monoclonal antibody (4.23) was reactive with repetitive epitopes of S. mansoni soluble egg antigen and ES product of ova with molecular mass range of 65–23 kDa and 80–23 kDa, respectively. It recognised different stages of the parasite life-cycle, with no cross reaction with Fasciola or hydatid antigen. MAbs were characterised by isotyping, immunoelectrophoresis, SDS–PAGE and the enzyme-linked immunoelectrotransfer blot technique, ELISA, and their recognition of carbohydrate or protein antigenic epitopes by periodate oxidation and trichloroacetic acid treatment of the antigen. It was used for detection of circulating schistosomal antigen in an antigen capture antibody sandwich ELISA on sera and urines of 58 S. mansoni-infected patients, 17 S. haematobium-infected patients, 15 parasite-free negative healthy controls and sera from 13 schistosomiasis-free patients harbouring Fasciola or hydatid infections. The percentage sensitivity of the assay in the serum of S. mansoni-infected patients was 98.4% and in urine 94.8%. A positive correlation was found between the number of faecal S. mansoni eggs and the circulating antigen, both in serum and in urine. Antigen circulating in urine correlated with that in the sera of S. mansoni patients. These data provide a sensitive and non-invasive method almost comparable with the use of sera for immunodiagnosis of schistosomiasis and an indirect way to reflect the intensity of infection. Australian Society for Parasitology. 相似文献
16.
本文介绍用流行性出血热(EHF)病毒J10株制备单克隆抗体(McAb),以及用7个McAb免疫家兔,使其产生抗EHF病毒McAb的抗体即抗独特型 抗体(Ab2).Ab2能在体外同出血热病人恢复期血清和EHF病毒免疫的兔血清发生特异性结合。再经EHF-McAb亲和层析法分离提纯Ab2,免疫BALb/c小鼠,将所获得的免疫血清(Ab3)用荧光和ELISA分别加以测定。结果表明,抗-抗独特型抗体可在体外识别EHF病毒,而不能同病病人恢复期血清发生结合,从而支持免疫网络学说,可能为我们提供一种新型的抗原来源途径。 相似文献
17.
单克隆抗体因其与抗原结合具有高度特异性与强亲和力,已成为抗体药物研发的主要类型。但随着天然单克隆抗体的深入研究,它的诸多缺陷也浮出水面,如与抗原结合次数有限、带来非预期的抗体清除效应和抗原累积效应。人们不再局限于天然抗体的筛选,而是想通过改造提升抗体药物的药效。近年来,一类新型再循环抗体的问世,很好地解决了天然单克隆抗体发展的瓶颈。再循环抗体可以在胞外结合抗原,在细胞内与抗原解离,使抗体结合抗原次数最大化,减少抗原介导的抗体清除效应和抗体介导的抗原累积效应,并且再循环抗体可以通过进一步的Fc改造来加强与Fc受体的亲和力。文中综述了再循环抗体的研究进展,包括其特点、改造方法及展望。 相似文献
18.
19.
20.
Reed J. Harris Bruce Kabakoff Frank D. Macchi Felicity J. Shen May Kwong James D. Andya Steven J. Shire Nancy Bjork Klara Totpal Anthony B. Chen 《Journal of chromatography. B, Analytical technologies in the biomedical and life sciences》2001,752(2):2091
Seven forms of a therapeutic recombinant antibody that binds to the her2/neu gene product were resolved by cation-exchange chromatography. Structural differences were assigned by peptide mapping and HIC after papain digestion. Deamidation of light chain asparagine 30 to aspartate in one or both light chains is responsible for two acidic forms. A low potency form is due to isomerization of heavy chain aspartate 102; the Asp102 succinimide is also present in a basic peak fraction. Forms with both Asn30 deamidation and Asp102 isomerization modifications were isolated. Deamidation of heavy chain Asn55 to isoaspartate was also detected. Isoelectric focusing in a polyacrylamide gel was used to verify the assignments. All modifications were found in complementarity determining regions. 相似文献