激光光漂恢复技术测定林蛙卵第一次卵裂前卵表面的运动

激光光漂恢复技术测定了异硫氰基荧光素标记的林蛀卵表面分子在第一次卵裂前的运动。发现固着在玻片上的剥离“细胞膜”的分子运动形式为扩散。扩散系数为(4.6±1.3)×10~(-12)cm~2/s,可动部份为15%。完整卵子上的分子运动形式为流动。细胞膜在不停地流动着。它可能起着协助细胞质运动的作用。细胞膜流动的速度随时间而异,卵裂前不久,在大多数的卵子上,出现两个流动较慢的谷,少数细胞只测到一个谷。这可能与光漂起始时间,光斑与未来分裂沟的距离,和卵子间的差异有关。也讨论了这种速度变化与表面收缩波的关系。     

细胞内分子运动与种子和花粉耐贮藏性的关系

近年来国际上一些学者采用电子顺磁共振(electron paramagnetic resonance,EPR)、饱和迁移电子顺磁共振波谱(saturation transfer electron paramagnetic resonance spectroscopy,ST-EPRS)和极性分子探针标记等技术成功地测定了种子和花粉细胞内的分子运动(molecular mobility).依据分子运动速率确定种子和花粉的最佳贮藏条件,已成为一种新的方法,这对于植物种质资源长期保存的研究具有重要的理论和实践意义.文章对近年来花粉和种子的耐贮藏性与细胞内分子运动变化的研究进展作一综述.     

红细胞膜对葡萄糖运输的快速测定

介绍了一种快速测定红细胞膜对葡萄糖运输特性的方法.实验表明,介质中红细胞的体积变化可用660nm波长处光密度值的变化来表证,由此得出葡萄糖跨膜通透过程中细胞内葡萄糖量的表达式.根据这种变化率即可计算出葡萄糖的通透特性参数K_m及I_(mdx)~(?)为提高测定精度,改装了仪器并联微机进行实时处理.     

百日草链格孢菌毒素对加拿大一枝黄花叶片伤害的生理生化研究

采用植物抗性生理和光合生理的分析测定技术,研究了分离自罹病苍耳植株上的百日草链格孢菌产生的毒素对加拿大一枝黄花叶组织细胞膜透性、丙二醛(M DA)含量、光合能力以及过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响.结果表明,百日草链格孢菌毒素使加拿大一枝黄花叶组织细胞膜透性上升,膜脂过氧化加强,M DA含量上升;叶片的POD、APX和CAT的活性均较对照降低,其光合作用明显地受到抑制.说明百日草链格孢菌毒素具有防除加拿大一枝黄花的潜力.     

AChE及M1 受体在柄袋沙蠋胚胎和 幼虫中的免疫组化定位

采用免疫组织化学S-ABC法和兔抗鼠抗体研究了乙酰胆碱酯酶(AChE)及M1受体在柄袋沙蠋(Arenicola brasiliensis)胚胎和幼虫的分布.结果表明,ACNE及M1受体在柄袋沙蠋胚胎和幼虫中分布非常广泛,从未受精卵开始,直至研究的5刚毛节幼虫均有分布,但不同发育阶段分布的情况不同.卵裂期主要分布于细胞膜...     

类脂氮氧自由基的合成及自旋标记膜

本文报道用索氏提取器代替Dean-stark肼合成了软脂酸噁唑氮氧自由基(Ⅰ)和一种至今未见报道的黄体酮噁唑氮氧自由基(Ⅱ)的方法,缩短了反应时间,提高了产率,产物经鉴定完全合格。将上述探针(Ⅰ)和(Ⅱ)分别自旋标记到脂质体膜和中国地鼠肺细胞膜(包括正常的和癌变的)以后,它们在膜中的位置和取向虽然不同,但给出的ESR波谱都能灵敏地反映介质的微观粘度、结构差异和分子运动等信息。其中我们发现低场峰的两种波谱组分[h_(a)]和[h_(1)]之间的比率有明显的规律性变化,其各向异性运动比值(M)与旋转相关时间(τ_0)有一定的线性关系。为此,我们提出了一个可反映类脂探针在膜中各向异性运动的简便经验式: M=h_(a)/h_(a) h_(1)。     

类脂氮氧自由基的合成及自旋标记膜

本文报道用索氏提取器代替Dean-stark肼合成了软脂酸噁唑氮氧自由基(Ⅰ)和一种至今未见报道的黄体酮嗯唑氮氧自由基(Ⅱ)的方法,缩短了反应时间,提高了产率,产物经鉴定完全合格。将上述探针(Ⅰ)和(Ⅱ)分别自旋标记到脂质体膜和中国地鼠肺细胞膜(包括正常的和癌变的)以后,它们在膜中的位置和取向虽然不同,但给出的ESR波谱都能灵敏地反映介质的微观粘度、结构差异和分子运动等信息。其中我们发现低场峰的两种波谱组分[h_((a))]和[h_((1))]之间的比率有明显的规律性变化,其各向异性运动比值(M)与旋转相关时间(τ_c)有一定的线性关系。为此,我们提出了一个可反映类脂探针在膜中各向异性运动的简便经验式: M=h_((a))/(h_((a)) h_((1)))。     

肾性贫血红细胞膜蛋白巯基结合位置性质的ESR研究

用四种不同链长的马来酰亚胺氮氧自由基标记物研究了慢性肾衰竭(CRF)贫血病人红细胞膜蛋白巯基结合位置的性质。从所得的ESR波谱计算了弱、强固定化成分之比(W/S)。结果表明,由M(Ⅰ)、M(Ⅱ)和M(Ⅲ)标记病人红细胞膜所得的W/S值都比标记正常人红细胞膜得到的W/S位高(P<0.05),这说明慢性肾衰竭贫血病人红细胞膜蛋白的巯基结合位置的构象发生了变化;用M(Ⅳ)标记正常人红细胞和病人红细胞所得到的ESR波谱都只含有弱固定化波谱,没有强固定化波谱。得出的这个结果将为探讨CRF贫血的发病机理提供理论证据。     

膜胆固醇对重组创伤弧菌溶细胞素活性的影响

研究膜胆固醇对重组创伤弧菌溶细胞素(recombinant Vibrio vulnificus hemolysin,rVvhA)生物学活性的影响,以进一步明确rVvhA的分子致病机制。利用甲基-β-环糊精(MβCD)可以去除细胞膜上胆固醇的能力,rVvhA作用细胞之前,细胞预先经5 mmol/L MβCD处理。测定MβCD预处理组和未处理组(即rVvhA直接作用组)细胞的存活率、细胞内钙离子浓度、培养上清中钾离子浓度及细胞凋亡与坏死情况。结果显示MβCD预处理组的细胞存活率较rVvhA直接作用组高、rVvhA引起的钙离子内流和钾离子释放受到抑制、细胞凋亡率也明显降低。结果表明,在rVvhA活性发挥中细胞膜上的胆固醇是必须存在的,胆固醇的降低会抑制rVvhA的活性。     

ABC法在膜受体流动性测量中的应用

本文首次把ABC法应用于受体流动性测量中的膜表面受体荧光标记,利用FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)技术实现了细胞内吞过程中膜受体流动性变化的测量.实验用Con A—Biotin和Avidin—FITC(ABC法)标记巨噬细胞ConA受体,测量ConA刺激不同时间细胞膜表面受体的荧光强度、扩散系数和荧光恢复率的变化.结果显示ABC标记法适合于测量细胞内吞过程中膜表面受体的流动性变化,且具有较高的灵敏度高;巨噬细胞受ConA刺激后,膜表面ConA受体的扩散系数和荧光恢复率较静息状态时明显降低.     

一种SOD的测活方法——邻苯三酚自氧化法的改进

超氧化物歧化酶(SOD)是在医疗上具有广泛应用前景的酶。它的测活方法很多,一般是根据SOD具有抑制O_2介导的反应的能力这一原理而建立的。邻苯三酚自氧化法是其中较为简便的一种,本文对这种方法做了下述改进。材料与方法 1.仪器 M750UVIS-A型微量紫外可见分光光度计和日本岛津双光束双波长自动记录分光光度计。 2.试剂 SOD(上海生化所东风试剂厂产品),其它试剂均为分析纯。 3.邻苯三酚自氧化速率的测定取4.5ml100mM缓冲液(见表1),4.2ml蒸馏水,混匀     

叉毛蓬化学成分的体外抗菌及抗氧化活性研究（英文）

从叉毛蓬全株首次分离出4-羟基苯乙酮(1)、紫丁香酸(2)、金圣草黄素(3)、香草酸(4)、4-羟基-3-甲基苯乙醇(5)、N-[2-(3,4-二羟基苯基)-2-羟基乙基]-3-(4-甲氧基苯基)丙-2-稀酰胺(6)和异鼠李素-3-O-芸香糖苷(7)7个化合物。通过MTT法测定这7个化合物的体外抗菌活性,结果表明多数化合物有较强的抗菌活性,其中化合物2对枯草芽孢杆菌,化合物5对大肠杆菌,化合物7对番茄疮痂病菌和番茄早疫病菌的抑制作用均强于阳性对照硫酸链霉素对同种菌的抑制。用DPPH和FRAP两种方法测定了化合物的抗氧化活性,结果表明在DPPH方法中化合物6的抗氧化活性最好,IC50值为0.2452 mg/m L,在FRAP方法中化合物5有最好的抗氧化活性,FRAP值为9.402 mmol/g,强于阳性对照抗坏血酸。     

细胞融合原理

问：我在讲动物细胞融合时,谈到动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性。有些老师则说,原理不是细胞膜的流动性,而是膜分子的重构。对此我无法认同,流动性不正是由膜分子运动来体现的吗？分子重构难道不依赖于流动性？     

血管活性肠肽可调节胆碱能神经的传递

Lundberg 等首先发现猫下颌腺副交感神经的节后纤维兴奋时,血管活性肠肽(VIP)和乙酰胆碱(ACh)共同释放。VIP 影响唾液腺突触后细胞膜的兴奋性,可使主递质ACh 和胆碱M 受体的亲合力激增10~5倍。在突触水平可能存在两种反馈调节:(1)由突触前胆碱M 受体介导的抑制性回路,控制ACh 和VIP 释放。(2)ACh 和VIP 作用于突触前及突触后胆碱M 受体,降低ACh 的周转率。切断ACh 代谢的中枢性调     

国产膜片钳仪研制成功

膜片钳(patch clamp)仪是从电压钳发展而来的新一代细胞电生理仪器。在直径约1μm的细胞膜片上,用膜片钳仪可以同时进行电压钳位和检测单个离子通道(ion channel)的电流(1 pA,10 kHz),这是迄今人们实现的最灵敏的仪器之一。1976年Neher & Sakmann首次实现单通道记录,Hamill等人(1981)对膜片钳的改进使之得以在世界推广,Sigworth(1983)和Rae & Levis(1984)对膜片钳仪的电子设计进行了深入的分析。从1988年起,我们根据Yale MK-V膜片钳仪电路图开始研制该仪器。     

对《微生物生态学原理与应用》一书的评价

1981年美国Addison-Wesley出版公司出版了一本《微生物生态学原理与应用》(Microbial Ecology:Fundamentals aud Applications)全书560页。约80万字。作者是美国肯塔基州路易斯维尔(Louisville)大学的R. M. 阿特拉斯(Ronaild M. Atlas)教授及美国新泽西州鲁特杰尔斯(Bu(?)gers)大学的R.巴尔塔(Richard Bartha)教授。他们针对美国许多大学开设的生物生态学课,但又缺乏教材的情况而写了这本教科书。全     

测定酶活性的电化学方法及其影响因素

作者曾用固定化细胞技术分离了人红细胞膜表面蛋白质。为了能快速、准确、自动连续地测定固定化红细胞膜中乙酰胆碱酯酶(AchE)等各酶的活性,设计组装了一架酶活性电化学测定装置。本文报道试用该装置作测定胆碱酯酶(ChE)纯品的实验结果。早在1962年,Kramer等人就报道了一种半微量测定AchE,ChE,以及各种硫代胆碱酯的电化学方法。以后又将该仪器应用于测定高毒性有机磷化物,葡萄糖氧化酶、黄嘌呤氧化酶,以及过氧化物酶与过氧化氢酶类。并设计了能酶反应连续分析的装置。在此基     

伴刀豆球蛋白A与巨噬细胞膜受体结合引起膜蛋白和膜脂分子运动及电荷的变化

本文利用荧光漂白恢复,顺磁共振和细胞电泳等技术研究外源性配体伴刀豆球蛋白A与巨噬细胞膜受体结合后膜蛋白及膜脂分子运动以及细胞表面电荷变化,结果表明,细胞膜表面蛋白分子侧向扩散速度减慢;膜脂分子流动性减慢,烃链有序性增强;细胞电泳速度加快。此等对阐明伴刀豆球蛋白A作为外源信息导致细胞膜分子动力学变化以及电荷改变有重要的生物学意义。     

FPR 实验结果的计算机分析

自1976年 Axelrod 等人首先建立了荧光漂白恢复(简称 FPR)理论以来,该理论已被广泛用于研究细胞膜中脂类和蛋白质的侧向运动。我们实验室于1980年建立了 FPR 实验装置,并测定了鼻咽癌细胞膜表面受体的扩散系数,和研究了林蛙卵表面受体的运动方式。在数据处理过程中,感到漂白后的初始荧光强度 F_k(0)、漂白后荧光恢复的渐近值 F_k(∞)以及漂白参量K 的不确定性均会增加实验结果计算的误差。Yguerabide 首先注意到了这一问题,提出了减小计     

荧光漂白恢复技术在细胞生物学中的应用

荧光漂白恢复(FPR)技术已发展成为定量测定细胞膜分子的流动性的方法之一。本文着重介绍了FPR技术应用于测定细胞膜中和细胞质内分子的运动,这些测定将有助于研究活细胞中膜分子的运动方式、功能及其相互关系。