提高网状纤维染色质量的技术探讨

网状纤维染色在病理工作中是一种最常用的特殊染色方法,它可以用来显示病变组织网状支架的破坏情况,对于判断病变的性质、程度及其发展与转归具有重要意义.尤其在肿瘤病理诊断中,对于鉴别来源于上皮组织和间叶组织的恶性肿瘤具有重要价值.网状纤维染色方法很多,但常用的方法是Gordon-Sweet氏法.该法是一种嗜银染色法,易受多种因素的影响,在染色过程中若操作不当,极易造成染色效果不佳.本文对此法进行了改良,并对其染色机理进行了探讨,同时对染色过程中易出现的问题,分析其原因,提出了具体解决办法,使染色质量明显提高.     

基底膜染色方法比较及在胃粘膜异型增生与胃腺癌中的应用

目的探讨胃粘膜上皮基底膜有效、便捷、直观的实验方法,及基底膜、Ki67免疫组织化学、粘液多重染色在胃腺癌组织染色中的可行性。方法用过碘酸希夫(periodie acid Schiff,PAS)反应、六胺银法(methenamine silvermethod,PASM)、网状纤维染色、苦味酸-天狼猩红(Picrosirius red,SR)和IV型胶原免疫组织化学5种染色方法对多种胃粘膜异型增生及胃腺癌病理标本基底膜进行染色,并利用Friedman检验、Wilcoxon检验定量分析、比较基底膜阳性区域面积。此外,在同一张胃腺癌组织切片上进行显示基底膜、蛋白质、粘液的多重染色。结果 5种基底膜染色方法中,IV型胶原免疫反应阳性面积与SR染色阳性面积(胃粘膜中-重度异型增生标本除外)无显著性差异、PAS与PASM染色阳性面积无显著性差异、网状纤维染色阳性面积最大。多重染色实验结果显示胃腺癌Ki-67、阿尔新蓝(Alcian blue,AB)-PAS二重染色和Ki-67、AB、SR三重染色,分别显示对应结构,效果良好。结论观察基底膜,胃粘膜中-重度异型增生标本中IV型胶原免疫组织化学与SR染色要分别选用;胃粘膜轻度异型增生及胃腺癌标本中IV型与SR染色可相互替代;PAS与PASM染色法可相互替代,我们推荐较为便捷的SR和PAS染色;网状纤维染色观察比较直观,可选用。此外,SR、PAS也可分别应用于胃腺癌Ki67免疫组织化学与AB的多重染色中,效果良好。     

淋巴结组织切片HE染色的体会

目前,组织化学、免疫组织化学、电镜和ＰＣＲ等先进技术虽已用于淋巴系统疾病,尤其是淋巴系统肿瘤的诊断、鉴别诊断和研究,但是,石蜡切片ＨＥ染色仍然是临床病理诊断最常用的有效方法。由于淋巴组织结构复杂,组织处理不当时,常常难以获得理想的切片质量,给准确诊断带来许多困难,有时甚至造成误诊。影响淋巴结石蜡切片质量的因素较多,但我们认为关键应注意以下几个环节。１　淋巴结活检石蜡切片的应用淋巴结石蜡切片主要用于活检和穿刺组织的制片,为了获得准确的病理诊断、疗效判断和某些研究工作,需要高质量的ＨＥ染色切片。诊断…     

免疫组织化学技术制片的规范和质量控制

随着免疫组织化学技术的不断发展,该技术在组织学研究和病理诊断尤其是在肿瘤鉴别诊断的应用越来越广泛.     

鉴别无色素性恶性黑色素瘤方法的探讨

无色素及少色素性恶黑鉴别诊断时,（１）组织化学铁反应,褪色素和黑色素银染对证实瘤细胞中黑色素是有帮助的,但不能从无色素性恶黑中检出黑色素。因此对无黑色素恶黑的诊断和鉴别诊断帮助不大。网状纤维染色良性病均有增加,而恶黑几乎没有增加或仅极少增加。因此网状纤维染色有助于良恶性的鉴别。（２）免疫组化Ｓ－１００１８例恶黑及６例良性痣均显示阳性,这对无色素恶黑的诊断是有价值的,但对色素痣的恶变帮助不大。１６例恶黑中１４例色素性与１０例无色素性恶黑ＨＭＢ４５均显示阳性,证明两者有共同抗原,总阳性率８７．５％,６例良性痣均为阴性,证明无ＨＭＢ４５抗原。结果提示ＨＭＢ４５免疫组化检测不仅对无色素及少色素性恶黑的诊断与鉴别诊断实用性大,还可以用于对恶黑与良性痣、良性痣恶变的鉴别。（３）本组４例无色素性恶黑电镜下均找到前黑色素小体。因此在其他方法诊断困难时,应用电镜检查对确诊具有决定性作用。     

不同的抗原修复方法和染色条件对P53蛋白免疫组织化学方法结果的影响

用免疫组织化学技术检测肿瘤组织中Ｐ53 基因蛋白产物的表达 ,是探讨Ｐ53 基因与多种肿瘤的相关性研究的主要手段之一。在免疫组织化学检测中 ,不同的抗原修复方法对Ｐ53 蛋白检测结果的阳性率和染色强度有不同的影响。本文在免疫组织化学检测Ｐ53 蛋白时对不同的抗原修复方法和染色条件进行了探讨 ,摸索出能较佳地显示Ｐ53 蛋白的免疫组织化学方法条件。介绍如下 :1.材料和方法1 1材料 :经临床病理诊断为恶性肿瘤如肺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌和大肠癌等福尔马林固定、石蜡包埋的组织 ;单克隆抗体Ｐ53 ＤＯ - 7和ＬＳＡＢ试剂盒为ＤＡＫ…     

免疫组织化学技术常见问题分析及对策

免疫组织化学染色是目前常规病理诊断及鉴别诊断的重要方法和手段,但在制作免疫组织化学切片中存在着影响结果的许多因素,本文较全面地阐述了影响制片质量的常见因素,并对出现的问题进行了分析和提出了切实可行的对策。     

朗格汉斯细胞肉瘤的临床病理学观察

目的探讨朗格汉斯细胞肉瘤(Langerhans cell sarcoma,LCS)的临床病理特征,提高对LCS的认识及病理诊断水平。方法报道两例LCS,结合患者临床资料、肿瘤大体及组织学特点、免疫组织化学标记结果及患者预后,并结合国内外相关文献进行分析。结果镜检,两例瘤细胞均呈弥漫排列,瘤细胞体积大,细胞核呈圆形或椭圆形,核沟易查见,可见核仁,异型明显,核分裂象多见。其中一例肿瘤间质内尚可见少量嗜酸性粒细胞浸润。免疫组织化学染色,两例CD1α、S-100蛋白、CD68均阳性、Ki-67增殖指数40%-50%。患者临床预后差。结论朗格罕斯细胞肉瘤是一种极为罕见的恶性肿瘤,组织病理学及免疫组织化学标记结果有助于该肿瘤的诊断及鉴别诊断。     

组织保护液在NADH-TR组织化学方法中的应用

还原型辅酶 四唑氮还原酶 (NADH- TR)组织化学方法是区别肌肉 、 型纤维的重要技术 ,该酶的显示对神经肌病的病理诊断和鉴别诊断具有实用意义。传统的酶组织化学方法 ,染色前多采用 1 %甲醛 -钙液及丙酮等固定液在 4℃下对组织进行处理 ,而后冰冻制片。实际应用中发现 ,经这些方法处理的组织 ,染色后酶活性明显降低 ,且容易扩散。我们经大量实验 ,在酶显色前 ,改用自行研制的组织保护液 (Tissue Protection Solution,TPS)对组织进行前期处理 ;同时对孵育液的配方进行改良 ,收到了理想染色效果。现将此法介绍如下 :1 .材料和方法1 .1…     

细胞块的制备方法

随着免疫组织化学技术的发展和针对各种特异性抗原抗体的出现，免疫组织化学方法为肿瘤的病理诊断提供了客观依据，大大提高了诊断的准确率，免疫组织化学用于细胞学诊断也日益受到人们的重视，它能为细胞学诊断和鉴别诊断提供一个新的手段，从而进一步提高细胞学诊断水平。但是用于细胞学染色的细胞涂片，常因收集的细胞太少而致癌细胞检查假阴性；有时由于细胞分布不均匀，有重迭而使免疫组织化学显色时，阳性物质在细胞内的定位不清楚，背景不清晰。为了克服这些缺点，我们把针吸物制成细胞块，这样就可以多次切片，弥补了常规细胞涂片制…     

SATB2是成骨细胞分化的敏感但不特异的标记

目的探讨SATB2免疫组织化学表达在原发性骨肿瘤病理鉴别诊断中的意义。方法收集65例骨肉瘤、9例骨母细胞瘤、39例软骨肉瘤、10例内生软骨瘤、9例软骨母细胞瘤、9例软骨黏液样纤维瘤、10例纤维结构不良、9例骨性纤维结构不良、8例动脉瘤样骨囊肿、12例骨巨细胞瘤、9例脊索瘤、7例未分化多形性肉瘤、3例纤维肉瘤,采用EnVision两步法进行免疫组织化学染色检测SATB2在这些肿瘤中表达的情况。结果 100%的骨肉瘤、骨母细胞瘤、骨巨细胞瘤、动脉瘤样骨囊肿、纤维结构不良、骨性纤维结构不良表达STAB2;软骨肉瘤阳性比为15/39,软骨母细胞瘤阳性比为1/3,未分化多形性肉瘤阳性比为5/8;其余肿瘤均不表达STAB2。结论 SATB2是成骨细胞敏感但不特异的标记,对原发性骨肿瘤中成骨性肉瘤与非成骨性肉瘤的鉴别诊断意义有限。     

免疫组织化学中抗原修复的研究进展

组织中抗原性的妥善保存和抗原修复技术与免疫组织化学染色的成败有着十分密切的关系 ,因此如何妥善保存抗原以达到最大限度保留组织的抗原性及如何对抗原加以修复成为做好免疫组化染色的重要步骤。免疫组织化学 (ｉｍｍｕｎｏ ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ) ,简称免疫组化 ,是免疫学与分子生物学技术和形态学相结合的一门学科 ,是用已知抗体 (或抗原 )检测组织细胞中的未知抗原 (或抗体 )的技术 ,具有操作简单、敏感性高、特异性强等优点 ,已广泛用于病理诊断、鉴别诊断及胚胎发育、神经解剖等相关学科的研究。大量实践证明组织中抗原性的…     

Holzer氏神经胶质纤维染色方法的改良

Ｈｏｌｚｅｒ氏神经胶质纤维染色方法的改良北京军区总医院病理科田玉旺,丁华野北京卫戍区２９２医院病理科李景仁在神经系统疾病的诊断中,观察神经胶质纤维的变化是鉴别诊断神经胶质细胞瘤和其它肿瘤的可靠依据。其中Ｈｏｌｚｅｒ氏磷钼酸结晶紫染色是常用的方法,但在...     

网状纤维染色技术改进

目的探讨改进网状纤维染色氨银液配制方法与改进染色方法的可行性。方法改进网状纤维染色中氨银液的配制方法和染色方法,与传统染色方法比较其染色效果与脱片率。结果改进网状纤维染色方法切片背景清洁度、网状纤维清晰度、网状纤维与胶原纤维对比度3项指标的得分均显著高于传统方法;改进网状纤维染色方法切片脱片率低于传统方法。结论改进网状纤维染色氨银液配制方法、改进网状纤维染色方法,可提高氨银液配制的成功率,延长氨银液有效期,提高网状纤维的染色质量,减少网状纤维染色的脱片率。     

促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤临床病理分析并文献复习

目的探讨促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤(desmoplastic small round cell tumor,DSRCT)的临床病理特征、免疫组织化学特征、鉴别诊断、治疗及预后。方法运用组织学与免疫组织化学分析1例穿刺标本中DSRCT的组织学形态及免疫组织化学表型特征,并复习相关文献。结果患者男性,29岁,无明显诱因右腹部出现一包块,肿瘤标记物示NSE升高。腹腔肿块穿刺组织,镜下见纤维结缔组织中小圆形细胞巢。细胞核深染圆形、卵圆形,核仁不明显,核分裂象易见,胞质少,界限不清,瘤细胞间为增生的致密结缔组织,并可见血管增生。免疫组化:肿瘤细胞CD117阳性,desmin、PCK、vimentin、EMA核旁散点灶阳性,WT-1,LCA、NSE、Cg A、DOG1、SMA、CD34、Bcl-2、myoglobin、myogenin、Myo D1、S-100、CD99、BCL-2均阴性。结论 DSRCT是一种罕见的高度恶性软组织小细胞肿瘤,预后较差,小的活检标本中可能不会出现典型的特征,增加诊断的困难,免疫组织化学可辅助诊断。     

人工智能在乳腺癌组织病理诊断领域的研究进展

人工智能可应用于乳腺癌原发肿瘤的良恶性判别、病理分级以及有丝分裂和肿瘤相关间质的鉴别.同时,它也在淋巴结转移诊断上达到病理学家的水平.在分子病理诊断上,人工智能不仅可用于ER、HER2免疫组织化学染色结果的判读,还可以用于推测PAM50分型及预后评分.目前,此类研究主要局限于技术领域,以准确率为主要的研究目标,缺乏对固...     

脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色的影响

目的:探讨脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色影响.方法:用不同脱钙液处理小鼠颅骨标本,组织切片后进行苏木素一伊红染色、甲苯胺蓝染色、醛品红染色以及免疫组织化学染色.结果:经过不同脱钙液处理后的颅骨组织切片组织结构保存完好,肥大细胞的组织化学染色(甲苯胺蓝和醛品红染色),及肥大细胞中胰蛋白酶的免疫组织化学染色清晰.结论:不同脱钙液(8%盐酸脱钙液、EDTA脱钙液、混合酸脱钙液)处理不影响鼻腔粘膜中肥大细胞的组织化学和免疫组织化学染色.     

超声快速石蜡病理切片免疫组织化学染色的分析讨论

超声快速石蜡病理制片方法简便快捷,切片质量好,组织染色清晰,与常规制片无明显差别,是目前国内手术中快速制片常用方法之一。手术中快速病理检查常常因为肿瘤组织较小而全部做成快速石蜡切片,在临床没有后续标本送检的情况下,使得赖以诊断的免疫组织化学就必须在快速石蜡切片上进行。因此,超声快速石蜡切片对免疫组化染色的影响是一个值得探讨的问题。     

首发症状为食管隆起的甲状腺乳头状癌的临床病理观察

目的 探讨以食管累犯为首发症状的甲状腺乳头状癌的临床表现、病理学特征、免疫表型、鉴别诊断、治疗及预后。方法 报道一例甲状腺乳头状癌转移至食管,并首先以食管部位为首发临床症状的病例进行组织学形态、免疫表型分析,并文献复习。结果 患者女性,44岁。因颈部不适,外院电子胃镜提示食管隆起病变,活检:镜下见上皮细胞成乳头状增生,可见明显纤维血管轴心,细胞围绕纤维血管轴心生长,较小,核稍深染,部分区域可见明显核仁。免疫组织化学示甲状腺肿瘤标记物:TPO、Tg、TTF-1、Galectin-3均为阳性,我院会诊考虑为甲状腺乳头状癌转移。随后入我院就诊,行甲状腺检查发现甲状腺结节,手术切除甲状腺组织后病理检查为甲状腺乳头状癌。结论 甲状腺乳头状癌较常见,但首先以食管部位临床表现为首发症状的较少,因此,应注意根据组织形态学、免疫组织化学及临床相关资料,鉴别诊断食管异位甲状腺癌变及原发甲状腺癌侵犯食管,避免误诊。