鱼类对晶体氨基酸利用的研究进展

随着鱼粉供应的紧张和价格的上扬,有关植物蛋白源取代鱼粉的研究也逐渐增加,与鱼粉等优质动物蛋白源相比,植物蛋白源通常表现为某些必需氨基酸缺乏或不足,如赖氨酸、蛋氨酸等,因而向饲料中添加晶体氨基酸成为解决这一问题的有效途径.但是在水产饲料中添加晶体氨基酸的作用效果,目前尚无定论,研究和生产中对氨基酸的使用也存在许多模糊认识.本文就水产饲料中氨基酸的研究现状作一综述,为晶体氨基酸在生产中的合理使用提供指导,为鱼类的氨基酸营养研究提供思路.     

长吻Wei幼鱼的赖氨酸需要量

本文通过以添加结晶氨基酸的半精制饲料饲喂长吻Ｗｅｉ（ＬｅｉｏｃａｓｓｉｓｌｏｇｎｉｒｏｓｔｒｉｓＧｕｎｔｈｅｒ）幼鱼的生长试验来确定春赖氨基酸需要量,试验饲料由鱼粉,玉米蛋白,糊精,明胶等组成,通过添加游离氨基酸达饲料中分别含赖氨酸国１．６４,２．０４,２．４４,２．８４和３．２４％五个水平,结果得出：长吻Ｗｅｉ幼鱼最大生长时对饲料中的赖氨酸的需要量为２．５７％,占饲料蛋白的６．５４％。     

优质蛋白玉米02基因控制赖氨酸超量积累的分析

以３８个ＱＰＭ（或０２）和对照普通玉米为实验材料,进行０２基因控制赖氨酸超量积累的生化和遗传分析。主要实验结果如下：（１）ＱＰＭ玉米０２基因为隐性的单基因遗传,它控制着胚乳、雄穗和幼苗期叶片中赖氨酸的超量积累,一些修饰因子和遗传背景对胚乳物理性状产生影响;（２）ＱＰＭ玉米、普通玉米的胚较之胚乳,或者ＱＰＭ玉米胚乳较之普通玉米胚乳都含有较多的天门冬氮酸、甘氨酸、赖氨酸和精氨酸,含有较少的脯氨酸、谷氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸;（３）两种玉米之间,在胚乳蛋白质含量及胚乳可溶性蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白的赖氨酸含量方面没有什么不同;（４）已经育成一批ＱＰＭ或０２玉米自交系,并配制出几个强优势杂交组合。     

复方赖氨酸泡腾颗粒剂的研制

<正> 构成蛋白质的L-氨基酸是人和动物生长过程中的重要营养物质。英国学者最近提出的“理想蛋白质”概念,主要是指包含比例平衡的各种必需氨基酸的蛋白质。并特别强调这些必需氨基酸的组成应与赖氨酸成相对比例。当食物中赖氨酸含量不足时,会限制其它氨基酸的利用,而人类食物中赖氨酸又恰恰最易缺乏,故L-赖氨酸被称之为第一限制氨基酸或称最绝对必需氨基酸。婴儿及儿童对赖氨酸的需求比成人高约10—20倍。在儿童食品中强化赖氨酸以提高蛋白质利用率的研究,国内外均有许多报     

玉米赖氨酸相关基因opaque-2及其修饰基因研究进展

玉米隐性突变o2基因能通过减少醇溶蛋白的合成来显著提高赖氨酸含量,为培育高赖氨酸含量的优质蛋白玉米（quality protein maize, QPM）提供了良好的基因资源。对玉米o2基因的发现、研究现状及其修饰基因的研究进展,以及当前育种家利用这两种基因相互作用培育优质蛋白玉米的研究进展进行了综述,以期为高赖氨酸玉米育种提供参考。     

皮屑蛋白粉中氨基酸组成与评价

测定了用皮革工业下脚一皮屑蛋白粉中氨基酸含量,与常用动物蛋白源比较发现,皮屑蛋白是一种不完全蛋白质,其氨基酸组成很不平衡,但其限制性氨基酸,赖氨酸和蛋氨酸的含量与其他几种动物蛋白源具有互补性,使用时宜同其他动、植物蛋白源或单体氨基酸相配合,以提高其生物价。     

高必需氨基酸玉米突变体的筛选

谷物是世界上多数人的主食,但在谷物的营养成分中却缺少人类和非反刍动物所必需的氨基酸:赖氨酸、苏氨酸、色氨酸等。而氨基酸是按一定比例合成蛋白质的,缺少其中任何一种,都会限制其他氨基酸的利用。所以谷物中最缺少的赖氨酸又称为第一限制性氨基酸,水稻和小麦的第二限制性氨基酸是苏氨酸,玉米的第二限制性氨基酸是色氨酸。因此,提高这些氨基酸的含量将大大改善氨基酸平衡,改良谷     

高赖氨酸的高单系列玉米种子蛋白分析

对含有opaque—2和flour—2基因型的高单系列玉米进行了赖氨酸含量和种子蛋白分析。高单3号的赖氨酸含量比当地品种高出105％,产量高6％。高单系列玉米种子内含赖氨酸高的盐溶和水溶蛋白含量提高了1.6～2.0倍,不含赖氨酸的醇溶蛋白在opaque—2基因型的品种中都减少了一半以上。     

以更有营养的玉米为目标的基因工程

培养玉米细胞的能力是进行遗传选择的基础。选择遗传变异体的方法参照了微生物学家研究细菌所常用的方法,尽管在细节上是不一样的。 格林与他的同事发现,在培养中加入赖氨酸与苏氨酸,就会抑制玉米细胞的生长。加入某些部分代谢小径是共同的其它氨基酸(如蛋氨酸),或它们的代谢前体就可以解     

马槟榔甜味蛋白的研究Ⅱ．甜蛋白Ⅱ和甜蛋白Ⅰ的比较

从马槟榔（Capparis masaikai Levl．）种子分离鉴定了二种甜蛋白：甜蛋白I（mabinlinⅠ或MaⅠ）分子量MWll600,等电点PⅠll.8;甜蛋白Ⅱ（mabinlinⅡ或MaⅡ）MW 10400,PⅠll.3。另一组分mabinlinⅡ MW10200,pl 11.8,可能是提取过程产物。MaⅡ有84个氨基酸残基,比MaⅠ少15个。它们有80个氨基酸残基是共同的,都是缺丝氨酸和蛋氨酸的单一多肽链。MaⅠ还缺赖氨酸和酪氨酸。测不出有自由SH基。在8 M尿素中用巯基乙醇还原处理,两种甜蛋白分子都可转变为二聚体而失去甜味。     

马铃薯转化酶抑制子St-inh cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达和功能测定

用RT-PCR结合5’RACE方法从马铃薯(Solarium tuberosum L．)栽培种JH块茎中克隆了转化酶抑制子St-inh全长cDNA。序列分析表明,St-inh基因编码区全长663bp,编码221个氨基酸。将含St-inh基因cDNA的DNA片段克隆到pET28a( )上,转化大肠杆菌BL21(DE3)后成功实现了表达。基因表达产物与马铃薯栽培品种(系)E1、JH试管块茎以及番茄果实的转化酶提取物共孵育结果显示,转化酶活性分别下降了34．3％、21％和33．8％,说明St-inh的翻译产物具有转化酶抑制子功能。BLAST基因序列分析表明,St-inh与Kunitz-type C类基因序列同源性达95％以上,T-COFFEE氨基酸序列对比分析显示,该基因编码的蛋白质具有典型的Kunitz-type结构域[L,I,V,M]-X-D-X-[E,D,N,T,Y]-[D,G]-[R,K,H,D,E,N,Q]-X-[L,I,V,M]-X(5)-Y-X-[L,I,V,M],因此,St-inh基因可能为Kunitz-type家族成员。     

马铃薯转化酶抑制子St-inh cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达和功能测定

用RT-PCR结合5’RACE方法从马铃薯(Solanum tuberosum L.)栽培种JH块茎中克隆了转化酶抑制子St-inh 全长cDNA。序列分析表明,St-inh 基因编码区全长663bp,编码221个氨基酸。将含St-inh 基因cDNA 的DNA 片段克隆到pET28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)后成功实现了表达。基因表达产物与马铃薯栽培品种(系)E1、JH 试管块茎以及番茄果实的转化酶提取物共孵育结果显示,转化酶活性分别下降了34.3%、21%和33.8%,说明St-inh 的翻译产物具有转化酶抑制子功能。BLAST 基因序列分析表明,St-inh 与Kunitz-type C 类基因序列同源性达95%以上,T-COF-FEE 氨基酸序列对比分析显示,该基因编码的蛋白质具有典型的Kunitz-type 结构域[L,I,V,M]-X-D-X-[E,D,N,T,Y]-[D,G]-[R,K,H,D,E,N,Q]-X-[L,I,V,M]-X(5)-Y-X-[L,I,V,M],因此,Sit-inh 基因可能为Kunitz-type 家族成员。     

烟草ovate同源基因的全长cDNA克隆与序列分析

根据番茄中控制果实形状的主效数量性状基因ovate的序列,用生物信息学方法从茄科植物烟草中获得直系同源ovate基因(NTovate)的特异片段,经鉴定,此基因在烟草中至少有2个拷贝。在此基础上用cDNA末端快速扩增(RACE)方法,获得其中1个拷贝的1059bpNTovate全长cDNA序列。序列分析表明,NTovate cDNA序列编码352个氨基酸,其蛋白序列与番茄ovate蛋白序列和拟南芥ovate蛋白家族AtOFP7蛋白分别为70%和36%的序列一致率,而与此家族中其他蛋白以及水稻ovate蛋白仅在保守的ovate结构域有较低的同源性。此基因已在GenBank中登录(EU043369)。     

Characterization of a cDNA encoding 5-aminolevulinic acid dehydratase in tomato (Lycopersicon esculentum Mill.)

Summary A full-length cDNA clone encoding tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) 5-aminolevulinic acid dehydratase (ALAD) was isolated and characterized. The primary structure predicts a 430-amino acid precursor which comprises a 41.7 kDa, 388-amino acid mature protein and a 47-amino acid transit sequence. The tomato primary sequence shows extensive homology to those of pea and spinach. Southern analysis indicated that 1 to 2 copies of the ALAD gene are present in the tomato genome. Northern blot analysis shows differential expression in various tomato organs, and constitutive developmental expression in tomato fruits.Abbreviations ALA 5-aminolevulinic acid - ALAD 5-aminolevulinic acid dehydratase (EC 4.2.1.24)     

The expression of human tumor necrosis factor in E. coli

cDNA of human natural TNF (n-TNF) obtained by stimulating human leukemic B cell line (Ball-1) with Sendai virus was cloned. Valine-started-TNF (V-TNF) gene was constructed from the cDNA and expressed in E.coli HB101 under the control of a trp promoter by the induction of 3-indoleacrylic acid. The expression level of V-TNF clone was about 10% of the total E.coli protein. On the other hand, the expression level of glutamine started-TNF (Q-TNF) gene having the same SD-ATG sequence which was constructed from V-TNF gene was as low as about 1/20 of that of V-TNF. The nucleotide sequence around ATG (-4 approximately +12) of Q-TNF gene was randomly changed without modifying the coded amino acid sequence, resulting to obtain high expression clones as similar TNF protein yield as that of V-TNF. These clones possessed A residue rich sequence around the initiation codon ATG. These results show that some correlation might exist between the high expression rate and A residue rich sequence around the initiation codon.