结合光谱法在DMIs类杀真菌剂筛选中的应用

为建立一种快捷和准确的方法用于新型杀真菌剂的筛选,以外源表达的稻瘟菌羊毛甾醇14α-去甲基化酶为靶酶,以市售烯唑醇、戊唑醇、三唑醇、三唑酮为DMIs类杀真菌剂代表,分析了靶酶活性、靶酶纯度和靶酶浓度对二者结合光谱的影响,并与生物测试结果比较分析其可靠性。结果表明靶酶的高活性、无其他P450干扰和合适的靶酶浓度是获得准确结合光谱的必要条件。烯唑醇、戊唑醇、三唑醇、三唑酮与靶酶结合常数(Kd)分别为0.143μmol/L、0.24μmol/L、0.257μmol/L、0.307μmol/L,该结果与其对稻瘟菌生长抑制能力(120h-EC50)显著相关,证明结合光谱法可作为一种简便可靠的DMIs类杀真菌剂筛选方法。     

结合光谱法在DMIs类杀真菌剂筛选中的应用

为建立一种快捷和准确的方法用于新型杀真菌剂的筛选,以外源表达的稻瘟菌羊毛甾醇14α-去甲基化酶为靶酶,以市售烯唑醇、戊唑醇、三唑醇、三唑酮为DMIs类杀真菌剂代表,分析了靶酶活性、靶酶纯度和靶酶浓度对二者结合光谱的影响,并与生物测试结果比较分析其可靠性。结果表明靶酶的高活性、无其他P450干扰和合适的靶酶浓度是获得准确结合光谱的必要条件。烯唑醇、戊唑醇、三唑醇、三唑酮与靶酶结合常数（K,/i>_d）分别为0.143μmol/L、0.24μmol/L、0.257μmol/L、0.307μmol/L,该结果与其对稻瘟菌生长抑制能力(120h-EC₅₀)显著相关,证明结合光谱法可作为一种简便可靠的DMIs类杀真菌剂筛选方法。     

南方小花蝽对不同处理菜豆及其挥发物的行为反应

利用Y型嗅觉仪研究南方小花蝽雌、雄成虫对6种不同处理菜豆以及8种挥发物标样在不同浓度下的行为反应。结果显示,不论与干净空气、健康菜豆还是机械损伤菜豆相比,南方小花蝽雌、雄成虫对西花蓟马成虫和若虫为害的菜豆均有明显的正趋性;与健康菜豆相比,外源茉莉酸与水杨酸甲酯处理的菜豆对南方小花蝽雌成虫没有明显的作用,但对雄成虫表现为明显的吸引作用。与机械损伤菜豆相比,外源茉莉酸与水杨酸甲酯处理的菜豆对南方小花蝽雌成虫有极强的吸引作用,但对雄成虫没有明显作用。在被测的8种挥发物单体不同浓度中,对南方小花蝽引诱作用最强的是浓度为10~(-1)μL/μL的乙酸叶醇酯、1-辛烯-3-醇、叶醛和浓度为10~(-3)μL/μL的1-辛烯-3-醇、叶醛,且雌成虫的选择率高于雄成虫。结果说明不同处理的菜豆叶片对南方小花蝽雌、雄成虫行为反应有明显的影响,挥发物单体的种类及相对浓度对南方小花蝽的影响也不同。     

西花蓟马对不同处理菜豆及其挥发物的行为反应

利用Y型嗅觉仪比较了西花蓟马雌成虫对健康、机械损伤、西花蓟马若虫为害、西花蓟马成虫为害、外源茉莉酸和水杨酸甲酯诱导的6种不同处理菜豆的行为反应差异,并测定了西花蓟马对8种挥发物标样在不同浓度下的行为反应。结果表明:西花蓟马对不同处理菜豆的反应不同,与干净空气相比,外源茉莉酸与水杨酸甲酯诱导的菜豆对西花蓟马有明显的驱避作用,而其他处理的菜豆与空气之间没有明显的差异;健康菜豆和机械损伤菜豆对西花蓟马的吸引作用明显高于其他处理的菜豆;在健康菜豆和机械损伤菜豆的组合中,西花蓟马并未表现出明显的偏好性;外源茉莉酸和水杨酸甲酯诱导处理的菜豆与其他处理的菜豆相比对西花蓟马均具有显著的驱避作用,但前者对西花蓟马的驱避作用明显弱于后者;8种挥发物单体(10-1~10-5μL·μL-1,浓度以10倍递减)对西花蓟马的行为反应显示,叶醇不论在何种浓度下始终对西花蓟马有明显的引诱作用,α-蒎烯、1-辛烯-3-醇、乙酸叶醇酯和异戊醇则是分别在10-2~10-5、10-4~10-5、10-4~10-5、10-3μL·μL-1时,才具有显著的引诱作用,叶醛、环戊醇和异戊醛分别在10-1~10-3、10-1~10-4、10-4μL·μL-1浓度下对西花蓟马具有强烈的排斥作用。     

褪黑素对盐胁迫下普通菜豆芽期核酸修复的调控机制

普通菜豆(Phaseolus vulgaris)是重要的食用豆作物,然而其极易受盐胁迫危害,导致产量下降。褪黑素能提高植物耐盐能力。为探明外源褪黑素调控普通菜豆耐盐能力的机制,以普通菜豆品种奶花芸豆(GZ-YD014)为实验材料,设置水(W,对照)、盐胁迫(S)和盐胁迫+100μmol·L^–1褪黑素(M+S) 3个处理。结果发现,盐胁迫抑制了普通菜豆胚根的生长,使其长度、表面积、体积以及直径显著降低,外源褪黑素可缓解盐胁迫对普通菜豆胚根生长的抑制。外施褪黑素显著降低盐胁迫下活性氧积累和丙二醛(MDA)含量,提高保护酶(过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶以及抗坏血酸过氧化物酶)活性,增加渗透调节物质(可溶性糖和可溶性蛋白)以及生长素(IAA)、赤霉素(GA)和玉米素(ZT)的含量,降低脱落酸(ABA)含量。通过转录组分析挖掘出217个差异表达基因(DEGs),DEGs在GO富集中显著(P-value<0.05)富集到核酸相关条目上,在KEGG富集中显著(P-value<0.05)富集到核酸损伤修复(包括碱基切除修复、错配修复以及核苷酸切除修复)通路。...     

黄腐酸对水稻幼苗根系生长的影响及其与生长素的关系北大核心CSCD

该研究以水稻品种‘宁粳6号’为材料,通过外源使用黄腐酸(FA)与生长素抑制剂共同处理水稻,探究FA对水稻根系生长的影响及其与生长素之间的关系。结果表明:(1)50~800 mg·L^(-1) FA处理水稻幼苗6 d后,当FA浓度超过100 mg·L^(-1)时显著促进水稻种子根的伸长生长;FA浓度超过400 mg·L^(-1)时,与对照组相比水稻的平均侧根长和侧根密度显著增加。(2)与对照相比,低浓度FA处理对水稻幼苗根尖生长素的含量无显著影响,但400 mg·L^(-1) FA处理后显著提高了内源生长素的含量。(3)3μmol·L^(-1)生长素合成抑制剂4-联苯硼酸(BBo)、4-苯氧基苯基硼酸(PPBo)或30μmol·L^(-1)生长素信号转导抑制剂2-(对-氯苯氧)-异丁酸(PCIB)处理均可显著抑制水稻根和侧根的发生;1μmol·L^(-1)生长素极性运输抑制剂三碘苯甲酸(TIBA)可显著抑制水稻种子根的伸长生长与侧根发生,但对侧根长度无显著作用。(4)FA与BBo或PPBo共同处理可显著抑制FA对水稻根系伸长生长与侧根发生的促进作用;TIBA和PCIB分别和FA共同处理水稻,可显著抑制FA对种子根伸长生长的促进作用,且PCIB可显著抑制FA对侧根发生的促进作用,但TIBA对此没有显著影响。研究发现,外源FA可能通过调控植物内源生长素的合成、极性运输或信号转导来调控水稻根的伸长生长和侧根的发育。     

阿魏酸钠对人动脉平滑肌细胞和内皮细胞作用的机制研究

目的:研究阿魏酸钠(SF)对人主动脉平滑肌(HASMC)和内皮细胞(HAEC)的影响,探讨SF成为抑制支架内再狭窄药物的机制。方法:HASMC和HAEC经SF处理后(0-1000μg/ml),用CCK-8试剂和划痕愈合试验检测不同药物浓度对两种生长和细胞迁移能力的影响;采用免疫细胞化学和Western blot检测HAECs中FoxM1和VEGF的表达。结果:SF对两种细胞的作用呈剂量依赖性,SF在10-1000μg/ml浓度时,HASMC的生长活力明显降低,在0.1-100μg/mlHAECs生长活力显著增强(P0.05)。在1-1000μg/ml浓度下HASMCs迁移能力受到抑制,HAECs的迁移能力明显增加(0.1-100μg/ml)(P0.05)。同时HAECs内FoxM1和VEGF表达明显增高(P0.05),程度与SF浓度有剂量依赖关系。结论:阿魏酸钠能抑制血管平滑肌的增值和迁移;同时增加内皮细胞FoxM1和VEGF的表达,促进内皮细胞的增值和迁移,这些特征使其可能成为抑制支架内再狭窄的药物。     

三唑酮对黄瓜幼苗生长及抗寒性的影响

研究了不同浓度三唑酮浸种对黄瓜幼苗生物量及抗寒性的影响。结果表明,20～100μmol·L^-1三唑酮能显著抑制黄瓜幼苗的株高、根长,增加了根重、根冠比和叶绿素含量,30d幼苗经过3d低温胁迫后,10～50μmol·L^-1三唑酮处理能保持较高的叶绿素含量,有效地降低质膜相对透性,维持较高的SOD活性,50μmol·L^-1三唑酮处理明显减缓低温胁迫过程中MDA的累积。另外,50μmol·L^-1三唑酮处理在低温胁迫第1d促进脯氨酸的累积,在第3d脯氨酸反而低于对照。但高浓度(>100μmol·L^-1)三唑酮不利于幼苗抵御低温伤害,总的来看,三唑酮增强了黄瓜幼苗的耐寒性。     

木霉(Trichoderma spp.)对三种引起大棚蔬菜病害病原菌的影响

通过木霉属(Trichoderma) 3菌株与双鸭山蔬菜大棚中的黄瓜枯萎病菌(FusariumoxysporumSchlecht.f.cucumerinum)、黄瓜果腐病菌(PhytophthoracapsiciLeonian)、菜豆叶枯病菌(Cladosporiumsp .)的对峙培养试验,结果表明:绿色木霉1(TrichodermaviridePers.exGray 1)可作为双鸭山蔬菜大棚中的黄瓜枯萎病、黄瓜果腐病、菜豆叶枯病3种病害的生物防治拮抗菌加以利用,该拮抗菌对菜豆叶枯病菌抑制效果最好;绿色木霉2 (Tricho dermaviride 2 )对黄瓜果腐病菌抑制效果最好;而哈茨木霉(TrichodermaharzianumRifai)对以上3种病原菌都有抑制效果,对菜豆叶枯病菌抑制效果最好。从试验结果还可看出,绿色木霉2对黄瓜枯萎病菌和菜豆叶枯病菌的生长有促进作用。     

黄芪幼苗根系生长发育与GR24和IAA的关系北大核心CSCD

为探究独脚金内酯和生长素对黄芪根系生长发育的影响,该研究以膜荚黄芪和蒙古黄芪幼苗为材料,在种子萌发袋中添加不同浓度GR24和IAA(2μmol·L^(-1) GR24、5μmol·L^(-1) IAA和2μmol·L^(-1) GR24+5μmol·L^(-1) IAA),7 d后检测黄芪幼苗主根长和侧根数,并测定内源激素含量、生长素和独脚金内酯相关基因表达量的变化。结果表明:(1)GR24处理显著促进黄芪主根生长。(2)IAA处理下主根生长受到抑制,侧根数明显增加。(3)GR24+IAA处理下主根的生长同样受到抑制,膜荚黄芪侧根数较IAA处理下减少,说明GR24有抑制IAA对侧根发育的诱导作用,但不能缓解IAA对黄芪主根生长的抑制。(4)3种处理下黄芪幼苗根系内源激素含量、生长素和独脚金内酯相关基因表达量发生了显著变化,说明GR24和IAA对黄芪幼苗主根长和侧根数的影响可能与生长素和独脚金内酯相关基因表达及内源激素水平的变化有关。该研究结果初步阐明了黄芪幼苗根系生长发育与GR24和IAA之间的关系,为黄芪规范化育苗和幼苗质量控制提供理论依据,对进一步探索独脚金内酯和生长素调控黄芪根系生长发育的分子机制具有一定的意义。     

铬、硒对水稻幼苗生长和生理的影响

以单一铬(Cr6+0～200μmol·L1)及硒(Se0～200μmol·L1)、铬硒混合液(铬100μmol·L1,硒50μmol·L1)处理水稻幼苗,研究不同处理和浓度对水稻幼苗生长和生理特性影响。结果表明(1)单一铬处理,随着铬浓度增加,植株生长明显受到抑制,铬毒害表现为株高、鲜重和干重受抑制,叶片黄色、叶绿素含量下降,体内SOD、CAT活性下降,POD活性上升,膜透性增大;(2)单一硒处理,50μmol·L1促进植株生长,100μmol·L1和200μmol·L1则抑制植株生长;(3)铬硒混合处理结果反映,硒有减轻水稻铬毒害的作用,表现为:减轻铬胁迫对株高、鲜重和干重增加的抑制,提高叶绿素含量,提高SOD、CAT活性,降低POD活性和膜透性。     

脱落酸对菜豆根溢泌的调节

1×10~(-6)MABA促进经去离子水或10 mM KCl溶液预处理启再置于去离子水中的菜豆根的溢泌量,促进K~ 、Cl~-、NO~3~-、H_2PO_4~-向木质部的运输速率和这些离子在溢泌液中的浓度。但对根系的K~ 离子吸收无促进作用,也无抑制作用。 ABA处理的菜豆根20分钟之内,~(86)Rb~ 的运输速率为对照的1.4倍,溢泌速率为对照的3.5倍。6-BA抑制溢泌速率和离子向木质部的运输速率,6-BA降低ABA的促进作用。 菜豆叶片上涂布的ABA(90μg/株)可以运向根部,使根部的ABA含量增加到对照的3.6倍。菜豆植株的地上部经干热风处理后,根内的ABA含量减少到对照的大约1/3,根的溢泌速率和K~ 的运输速率也随之减少。     

三唑酮对玉米弯孢病菌超微结构和细胞化学的影响

三唑酮(triadimenfon)属于麦角甾醇类生物合成抑制剂(ergosterol biosynthesis inhibitors．EBI),具有较广的抗真菌谱,明确其对玉米弯孢菌发育的影响可为该杀菌剂的田间应用提供理论依据。利用电镜技术和细胞化学技术观察的结果表明,玉米率孢菌经三唑酮处理后,菌丝生长明显受到抑制,表现为菌落生长速度减慢、菌丝分枝增多,且不观则地肿大和缢缩,出现许多瘤状突起,处理菌丝明显畸形。透射电镜观察结果表明,三唑酮可引起菌丝细胞壁不规则增厚,特别是菌丝顶端细胞壁增厚尤为明显:菌丝细胞隔膜发育受阴而表现畸形;菌丝细胞外有大量电子染色深的外渗物质。细胞化学标记定位结果表明,真菌细胞壁主要成分β-1,3-葡聚糖和几丁质的含量在药剂处理后发生很大变化,其标记密度明显低于未处理的对照菌丝,表明病菌细胞壁的结构和功能受到明显的不利影响。论文对弯孢菌受三唑酮影响后胞壁成份变化与其它真菌不同的原因进行了讨论。     

三唑磷降解菌株GS-1的分离鉴定及其降解特性的研究

从有机磷农药污水处理池污泥中分离到一株能高效降解三唑磷的菌株GS-1, 通过生理生化实验和16S rDNA序列同源性分析, 将该菌株鉴定为Diaphorobacter sp.。菌株GS-1能以三唑磷为唯一碳源生长, 能在12 h内降解100 mg/L的三唑磷至检测不出的水平。菌株GS-1降解三唑磷的过程中会产生中间代谢产物苯唑醇(1-苯基-3-羟基-1,2,4-三唑), 36 h后苯唑醇被完全转化。菌株GS-1降解三唑磷的最适pH值为8.0, 最适温度为30°C, 且对杀螟硫磷、辛硫磷、毒死蜱和甲基对硫磷     

合成的哌啶并噻吩类化合物抑制肺癌细胞生长的初步研究

为了发现新的可用于肺癌治疗的小分子药物,从实验室现有的小分子化合物库中,选取13个未见报道的新型哌啶并噻吩类化合物,对其抑制肺癌A549细胞生长的作用进行初步评价。通过体外培养A549细胞,应用WST-1法检测小分子化合物(终浓度为10μmol/L)处理后细胞存活率的变化,发现化合物11(噻吩并[2,3-c]哌啶-3-甲酰胺-2-[(3-甲氧基-萘-2-羰基)-氨基]-6-苄基-,盐酸盐)能显著抑制A549细胞的生长,抑制率可达到(71.34±0.96)%。对小分子化合物结构与活性关系的分析发现苯并结构可能是增强化合物对A549细胞生长的抑制作用的关键结构基团。随后,进一步分析了化合物11(终浓度分别为1、2.5、5、10μmol/L)对A549细胞和正常人胚肺成纤维MRC-5细胞生长的抑制作用。结果表明,随着该化合物浓度增加,对A549细胞生长的抑制率逐渐增大,用GraphPad Prism软件计算出该化合物的IC50为2.407μmol/L;而该化合物对MRC-5细胞生长的抑制率显著低于对A549细胞生长的抑制率,当作用终浓度为10μmol/L时,其对MRC-5细胞生长的抑制率也只有30.41%。这些研究结果初步显示化合物11是一种新的较为理想的治疗肺癌药物先导化合物的候选分子。     

γ射线对烟草愈伤组织生长和变异的作用

由于高等植物细胞具有全能性,研究电离辐射对高等植物离体组织的作用,有助于了解射线对植物伤害作用的原理,更重要的是希望找到辐射育种的更有效的新途径。本文报道γ射线对烟草(Nicotiana tabacum L.)愈伤组织生长和变异的作用。其主要结果如下: (1)3千伦以上的γ射线就能抑制烟草愈伤组织的生长,10千伦以上明显抑制生长,不久就变黑而死亡。比较了烟草干种子及愈伤组织的辐射敏感性,40千伦处理的愈伤组织不能存活,而同样剂量处理的干种子却能正常萌发和生长。和Bajaj用菜豆做的工作相反,证明愈伤组织比干种子更敏感。 (2)γ射线处理愈伤组织后能引起巨型细胞的产生。 (3)将照射过的愈伤组织转移到分化培养基上,8千伦以下的处理都能诱导出烟草小植株,得到了一些畸形的植株。证明愈伤组织能在较低剂量射线作用下发生变异。     

过氧化氢对镉胁迫下水稻种子萌发的缓解效应

为了探讨外源H_2O_2对镉胁迫下水稻种子萌发受抑的缓解作用,以水稻品种‘中优169’为材料,通过培养皿滤纸发芽法,研究不同浓度H_2O_2对200μmol·L~(-1)镉胁迫下水稻种子萌发、幼苗生长及相关生理指标的影响。结果表明,在200μmol·L~(-1)镉胁迫下,水稻种子的萌发和幼苗生长表现出明显的抑制现象,发芽势、发芽指数、活力指数及幼苗的根长、芽长和可溶性蛋白含量均显著降低,MDA含量显著增加,POD活性上升,SOD、APX及CAT的活性显著受到抑制。较低浓度(≤10μmol·L~(-1))H_2O_2处理能不同程度地增加幼苗的根长、芽长、根鲜重和芽鲜重,提高镉胁迫下水稻种子的发芽指数和活力指数,增强SOD、POD和APX活性并降低MDA含量,从而缓解镉的毒害效应。其中5μmol·L~(-1) H_2O_2浸种处理对镉胁迫下水稻种子萌发和幼苗生长的缓解作用最好。高H_2O_2浓度对镉胁迫的缓解作用逐渐减弱,当H_2O_2浓度达到50μmol·L~(-1)时,会加重镉胁迫的毒性。表明适宜浓度的H_2O_2可以提高水稻幼苗抗氧化能力,缓解镉胁迫伤害。     

5-Aza-CdR对人胃癌细胞株生物学行为及RASSFlA mRNA表达的影响

观察不同浓度的5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901、MKN-28生长及RASSF1A mRNA表达的影响。方法:分别以0．4μmol/L、1．6μmol/L、6．4μmol/L、25．6μmol/L、102．4μmol/L浓度的5-Aza-CdR处理人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901、MKN-28,MTT比色法测定72h时间段的吸光度值、计算抑制率,流式细胞仪检测5-Aza-CdR对胃癌细胞株生长周期及凋亡的影响,RT-PCR检测5-Aza-CdR处理前、后抑癌基因RASSF1A mRNA的表达。结果:5-Aza-CdR抑制体外培养人胃癌细胞株BGC-823、SGC-7901、MKN-28生长,呈浓度依赖性;5-Aza-CdR能有效诱导BGC-823、SGC-7901、MKN-28细胞凋亡;RT-PCR检测人胃癌细胞株SGC-7901、MKN-28无RASSF1A mRNA表达,经5-Aza-CdR处理后基因重新表达, BGC-823处理前后RASSF1A mRNA均有表达。结论:新型抑癌基因RASSF1A与胃癌的发生相关,5-Aza-CdR能抑制胃癌细胞株的增殖,并促进凋亡,其机制可能与RASSF1A基因的重新表达有关。     

猴头菌液体培养下的生理特性观察

以猴头(Hericium erinaceus)菌株He-1为供试株,探讨猴头菌生理特性。实验表明,钾、镁、磷为猴头菌生长所必需。1-2PPm的三十烷醇、1-3ppsn的α一蔡乙酸和叫噪乙酸、100-1000μg/1的硫胺素、40μg/1的生物素分别具促进菌丝生长作用。其生长pH的生长范围广,最适PH4-5,并在不适PH下具自身生理调节机制。最适生长温度25-3090,40 C抑制生长但不致死。前期定期振荡虽能促进菌丝生长,但在整个培养期定期振荡不能增加菌丝生物量。     

胡桃醌对小麦种子萌发及幼苗生长的化感效应

以小麦种子为试验材料,采用培养皿药膜法、生化分析法研究了胡桃醌对小麦种子萌发和幼苗生长的化感效应。结果显示:(1)与对照相比,低浓度胡桃醌(4和20μmol.L-1)处理能促进小麦种子萌发和幼苗生长,种子α-淀粉酶活性增大,幼苗中可溶性蛋白含量升高,丙二醛(MDA)含量减少,超氧化物歧化酶(SOD)活性无显著变化。(2)当胡桃醌浓度大于100μmol.L-1时,对小麦种子萌发和幼苗生长开始呈现抑制作用,种子α-淀粉酶活力降低,幼苗相对含水量、可溶性蛋白含量降低,MDA含量升高,SOD活性先增大后减小。(3)在最大浓度胡桃醌(1 250μmol.L-1)处理下,小麦幼根的细胞形状不规则,排列混乱,层次不分明,维管束模糊不清,幼苗细胞质壁分离,叶绿体萎缩坏死,细胞核变形。研究表明,高浓度胡桃醌通过抑制受体小麦保护酶活性,加重膜脂过氧化程度,导致幼根、幼苗细胞结构的破坏,从而产生化感效应,且化感效应随浓度的增加不断增强。