基因型和培养条件对大麦花药培养的影响

不同基因型大麦(Hordeum vulgare)的花粉愈伤组织诱导率不同。带大麦黄花叶病抗性基因的品种。品系或F1杂种的诱导率(8.83—14.21%)高于不带抗性基因的材料(1.04—6.25%)。 MS基本培养基添加草2,4—D.1 mg/L,Kt0.1 mg／L,BA0.2mg／L,生物素0.1mg, 其诱导率(平均11.09%)高于MS添加2,4—D3mg／L和Kt0.1 mg／L的诱导率(6.33%)及MS添加2,4—D1mg／L 和Kt 0.1 mg／L的诱导率(8.21%)。接种后先15℃暗培养5天,再转入25℃暗培养,其产生愈仿组织的高峰期推迟2—4天,但诱导率却从对照的5.84%提高到11.59%;25℃暗培养与25℃光 — 暗交替培养,诱导率无显著差异。     

低温预处理对水稻花药培养中花药壁褐变的结构影响

药壁褐变是影响花药离体培养效率的因素。研究了粳稻品种台中6(5OryzasatvaL.)花药培养前低温预处理对药壁褐变的影响,观察了花药褐变前后药壁各层的变化及褐变对小孢子发育的作用。结果表明:药壁褐变主要发生在表皮与药室内壁。10℃低温预处理在花药培养前期可有效延缓表皮与药室内壁膜结构的降解速度,减缓褐变发生;花药经低温处理后,药壁中层细胞膨大,绒毡层降解速度减缓,有利于花粉脱分化。药壁褐变会影响药腔内小孢子的活力和继续发育,但不是制约花粉愈伤组织形成的关键因素。     

大麦花粉在低温预处理及培养中DNA含量的显微光度测定

大麦幼穗在低温条件(7℃)下,其花粉DNA的合成并未停止,但速度大为降低。花粉处于单核中期的幼穗,在最适预处理时期(14天)内其花粉DNA含量由1C增加到2C;而单核晚期的幼穗,其花粉通常在预处理期间分裂而形成营养细胞和生殖细胞。但与正常植株上的情况不同,约有60～70％花粉的营养细胞核的DNA合成也很快启动,致使在预处理结束时相当一部分花粉的营养细胞和生殖细胞的DNA均达到2C水平。 用经低温预处理过的幼穗的花药培养时,开始3～4天内形成的多细胞花粉其细胞核的DNA值多数保持在1～2C水平。但5～7天时在部分多细胞花粉中其核的DNA水平增加到2～4C,或4～8C。由同一多细胞花粉内不同细胞核的DNA值的差异可见已出现明显的混倍情况。     

低温预处理过程中大麦花药内源激素的变化

很多文章曾报道低温预处理可以明显提高大麦花药反应频率。但对于低温预处理的机理,至今研究报道甚少。我们应用ＥＬＩＳＡ方法测定了大麦花药低温预处理过程中内源激素ＩＡＡ、ｉＰＡ和ＡＢＡ含量。根据实验结果,推测低温预处理改变了花药内源ＩＡＡ和ｉＰＡ含量,阻断了花粉原来的发育方向,使其由配子体的发育途径转向孢子体的发育途径。     

低温预处理影响籼稻花药培养效率的研究

低温预处理使籼稻花药在培养初期退化花粉百分率低于对照;多核花粉百分率明显高于对照。经过低温预处理的花药来见新的可溶性蛋白谱带出现;淀粉酶同工酶谱带少和弱于对照,过氧化物酶同工酶中碱性区活性初期弱而后期强于对照。低温处理使药壁组织衰退进程有所延缓,但未能制止衰退,也未出现如粳稻中所见的药壁细胞充实发育的现象。低温预处理只能稍微延缓籼稻药壁组织的衰退进程,有限度地促进籼稻花药培养效率。     

低温预处理影响水稻花药培养效率的机理初探

低温预处理延缓药壁中层和绒毡层的降解,促进表皮层和药室内壁层的发育,延缓花药过氧化物酶同工酶活性的增强。处理期间花药可溶性蛋白质、淀粉酶同工酶潜带发生明显变化。处理期间花药的~3H-TdR渗入和花粉的发育、分裂,表明花粉存在合成和充实活动。绒毡层和花粉间存在囊泡,表皮层和药室内壁层之间存在多泡体的穿壁运动,说明低温处理中药壁向花粉输送雄核发育所需的物质。在进入正常培养初期,经过低温处理的花药药壁仍有表皮层和药室内壁层的发育,多细胞花粉出现提早、数量增加,花粉退化延缓。而未经处理的花药药壁各层均迅速降解,花粉大量退化。     

不同预处理方法对大麦花药－花粉培养的影响

研究了甘露醇预处理的适应性以及ｐＨ值对甘露醇预处理效果的影响;并首次将山梨醇预处理应用到大麦花药培养中,获得理想的实验结果。第一,采用甘露醇预处理,１７种材料平均愈伤组织诱导率为２０．６７块／花药,绿苗产量为２．４６株／花药。第二,甘露醇预处理溶液的ｐＨ值不同,其预处理的效果也不同。其中,愈伤组织诱导率和绿苗产量均以ｐＨ５．６最高。第三,不同浓度（０．１—０．５ｍｏｌ／Ｌ）的山梨醇预处理３天绿苗产量差异不显著;但同一浓度（０．３ｍｏｌ／Ｌ）山梨醇预处理不同天数（１—７天）绿苗产量差异极显著,以３天处理效果最好,绿苗产量是对照的５１．２倍。     

BA对大麦花药培养中药壁的衰退和植株再生频率的影响

用含20ppm 6-BA的0.1％吐温-80溶液喷施花粉为单核前期的大麦上部叶片和穗部,明显影响大麦花药培养效率。实验结果表明:1)BA处理可明显延缓培养花药的药壁衰退进程。2)BA处理后的花药,在培养期间,其死亡的花粉数比对照大大减少,相反其双核或多核的花粉数比对照明显增加。3)BA处理虽然没有促进大麦花粉愈伤组织的诱导率,但显著地促进愈伤组织的生长。提高愈伤组织成长率,增加可转入分化培养的愈伤组织块数。4)BA处理促进愈伤组织的再分化,尤其是绿苗的分化。     

基因型和培养条件对大麦花药培养的影响

不同基因型大麦(Hordeum vulgare)的花粉愈伤组织诱导率不同。带大麦黄花叶病抗性基因的品种、品系或F_1杂种的诱导率(8.83—14.21％)高于不带抗性基因的材料(1.04～6.25％)。MS基本培养基舔加2,4-D,1 mg/l,Kt0.1 mg/l,BA0.2 mg/l,生物素0.1 mg,其诱导率(平均11.0995)高于MS添加2,4-D3 mg/l和Kt0.1 mg/l的诱导率(6.33％)及MS添加2,4-D 1 mg/l和Kt0.1 mg/l的诱导率(8.21％)。接种后先15℃暗培养5天,再转入25℃暗培养,其产生愈伤组织的高峰期推迟2—4天,但诱导率却从对照的5.84％提高到11.59％;25℃暗培养与25℃光-暗交替培养,诱导率无显著差异。     

不同预处理方法对大麦花药-花粉培养的影响

研究了甘露醇预处理的适应性以及pH值对甘露醇预处理效果的影响;并首次将山梨醇预处理应用到大麦花药培养中,获得理想的实验结果。第一,采用甘露醇预处理, 17种材料平均愈伤组织诱导率为20.67块/花药,绿苗产量为2.46株/花药。第二,甘露醇预处理溶液的pH值不同,其预处理的效果也不同。其中,愈伤组织诱导率和绿苗产量均以pH5.6最高。第三,不同浓度(0.1-0.5mol/L)的山梨醇预处理3天绿苗产量差异不显著;但同一浓度(0.3mol/L)山梨醇预处理不同天数(1-7天)绿苗产量差异极显著,以3天处理效果最好,绿苗产量是对照的51.2倍。     

不同预处理对大麦花药3种内源激素含量和过氧化物酶活性的影响

研究了大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ Ｌ．）花药－花粉培养中不同预处理对花药内源激素（ＡＢＡ,ＩＡＡ,ＩＰＡ）含量和过氧化物酶活性的影响。结果表明：１． 经甘露醇预处理不同天数,同一种基因型的３种内源激素的变化和不同基因型的同一种内源激素的变化规律十分相似,均是在预处理初期含量急剧增加,最高值在０．５或１ ｄ 处。以后开始逐渐下降;最后,保持在一定的水平上。２． 在甘露醇预处理过程中,两种基因型花药过氧化物酶活性的变化规律也十分相似。在预处理前期（从开始到第３天）活性呈直线上升,第３天达到最大值。从第３天到第５天活性减弱。最后,活性又开始增强。３． 在低温预处理过程的初期（２～５ ｄ） 两种基因型花药过氧化物酶活性都出现第一个小峰。在第１４天（“Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎ”）或第２１天（“Ｉｇｒｉ”）又出现第二个峰值,但后者较高。在预处理的后期（从第２８天到第３５天）两种基因型花药过氧化物酶的活性又呈现上升的趋势。同甘露醇预处理后期变化一致     

低温处理对玉米花药培养的影响

温度对作物花药培养具有很大影响。薛欣昀、贾旭等报道了温度对玉米花药的影响。本文研究了几种低温处理对玉米花培的影响,以及不同基因型玉米对低温处理的反应。本实验所使用材料为自交系A_2及改良京早8号等杂交种。1.低温预处理,取小孢子     

大麦花药培养中海藻酸钠作用的初步探讨

本试验以普通大麦（Hordeum vulgare L.）品种单核晚期的花药为材料,研究了他们在液体培养过程中海藻酸钠的作用。结果表明：在供试的4个海藻酸钠浓度（1、2、3、6%）中,以浓度为2-3%的效果最佳。当他们代替20-30%的Ficoll时,无论是用BAC3培养基,还是用MS培养基,培养基中加NAA,还是家2,4-D,都能诱导出愈伤组织,但以每升培养基加2mg NAA和1 mg 6-BA的效果最佳,在含这种激素的培养基上,一些基因型的出愈率相当高,供试基因型都在100%以上,而且有些花粉粒能直接发育成能正常发芽出苗的胚状体。Barley anthers at the late uninucleate stage were cultured in order to study the use of sodium alginate in liquidmedium.The results showed that, the effect of 2-3% (W/V) sodium alginate was best in 4 concentration studied (1%,2%,3%and 6%). When the 2-3% sodium alginate was substituted for 20-30% ficoll, the calli could be induced from anthers of all genotypes whether on BAC3 medium or MS medium and whether adding NAA or 2,4-Din medium.2mg/L NAA+1mg/L 6-BA added to medium could give better results and on the medium with these hormones the callus rate of all genotypes were above 100%. Some pollens could grow into embryoids directly.     

热激对低温预处理粳稻花药培养的影响

植物名称:粳稻(Oryza Sativa var. japonica),品种为滕系140。材料类别:取已预冷过(10士2℃,处理5天)、小孢子处于单核靠边期的花药。培养条件:诱导培养基为N_6附加2,4-D2.0mg/L(单位下同) 6-BA0.5 NAA0.25;分化培     

盐胁迫预处理对大麦根尖分生区细胞超微结构的影响

盐胁迫吸胀后的大麦种子转入正常条件下萌发,其发芽势严重降低,发芽率则和对照差异不大。电镜观察表明,萌发３天的大麦根尖分生区细胞膜系统已修复完善,内质网和高尔基体丰富,变形质体和变形线粒体大量出现,表明短时盐胁迫对种萌发的抑制作用是可逆的,而且一旦抑制作用被解除,植物细胞内的大生代谢活动会更加活跃,这一现象称为“抑制效应的补偿作用”。由于盐胁迫吸胀后代谢加强总伴随着变形质体和变形线粒体的大量出现。因     

日照长短和脯氨酸处理对光敏核不育水稻花药培养的影响

本试验对粳型光敏核不育系Ｎ５０４７Ｓ、７００１Ｓ、Ｎ５０８８Ｓ和ＨＰ１３Ｓ、常规粳稻品种渐农大４０和０２４２８及由它们所配制的Ｆ１杂种进行花药培养,主要结果如下：不同光敏核不育系及其杂种Ｆ１出愈率、绿苗率和培养力存在明显差异;光敏核不育系的花培效率并不一定比非光敏核不育系低;无论光敏不育系还是非光敏核不育系,长日都比短日处理具更高的愈伤组织诱导率,光敏核不育系长日下生长取样接种,脱分化培养基中添加     

大麦籽粒及花药愈伤组织的游离氨基酸含量分析

对同一基因型大麦花药愈伤组织与籽粒中的游离氨基酸含量尤其是赖氨酸含量之间的关系进行分析,结果表明,对同一基因型而言,愈伤组织及籽粒中的同一氨基酸含量高低具有相同趋势。同时着重分析了愈伤组织中游离脯氨酸的含量与绿苗分化的关系,结果表明游离脯氨酸含量高的愈伤组织,其绿苗分化率较高,说明脯氨酸对绿苗分化具有重要作用。966259的花药愈伤组织及籽粒中的游离氨基酸总含量及游离赖氨酸含量均最高。     

大麦花药离体诱导的基因型稳定性和培养基的环境指数分析

本研究以湖北啤酒大麦优良新品种（系）为材料,分析了基因型的稳定性、培养基的环境指数以及基因型与培养基的互作效应.各基因型花药愈伤组织诱导率的稳定性分析表明,E2具有较强的普遍适应性,但稳定性好的材料愈伤组织诱导率并不一定最高,各种配方培养基的环境指数值大小不同,方向也有正有负,基因型效应以及基因型和培养基的互作效应均达极显著水平。