生物技术在农作物育种上的应用

生物技术在农作物育种上的应用赵乃思（黑龙江省农业科学院,哈尔滨）现代生物技术是七十年代初在重组ＤＮＡ技术、细胞培养技术、以及生物反应技术等深入发展的基础上发展起来的一门新兴学科。生物技术包括细胞工程、基因工程、酶工程和发酵工程四个方面。植物组织与细胞...     

日本对农业重组DNA生物的管理

日本对农业重组ＤＮＡ生物的管理雷茂良（农业部科技司北京１０００２６）引言日本的重组ＤＮＡ生物（即转基因生物）研究和应用开始较早,并从一开始就非常重视其安全管理。政府制订了一系列的法规以保证研究和应用重组ＤＮＡ生物的安全性,并促进农业产业的全面健康发展...     

DNA重组技术和海洋生物

ＤＮＡ重组技术和海洋生物徐洵（国家海洋局第三海洋研究所厦门３６１００５）ＤＮＡ重组技术是将遗传物质──ＤＮＡ按人们设定的方案重新组合,并在受体细胞中进行复制和表达的技术。ＤＮＡ重组技术也可理解为基因工程。自１９５３年ＤＮＡ双螺旋结构的提出,生物学进入了分子生物学时代。     

基因靶位操作的原理与策略

基因靶位操作（ｇｅｎｅｔａｒｇｅｔｉｎｇ）是８０年代发展起来的一项重要分子生物学技术,是通过外源ＤＮＡ与染色体ＤＮＡ间的同源重组,定点修饰、改造基因组特定位点的技术。１同源重组同源重组是基因靶位操作技术的分子生物学基础。ＤＮＡ同源重组在基因转化和遗传...     

农业部关于进一步加强农业生物基因工程安全管理的通知(摘要)

农业部关于进一步加强农业生物基因工程安全管理的通知（摘要）为加强农业生物基因工程安全管理工作,根据国家科委颁布的《基因工程安全管理办法》,农业部于１９９６年以农业部令第７号颁布了《农业生物基因工程安全管理实施办法》（以下简称《实施办法》）,并于１９９...     

编码天麻抗真菌蛋白cDNA的分子克隆

用重组ＤＮＡ 技术研究了编码天麻抗真菌蛋白（ＧＡＦＰ）的基因,从天麻（Ｇａｓｔｒｏｄｉａ ｅｌａｔａＢｌ．）块茎中提取Ｐｏｌｙ（Ａ） ｍ ＲＮＡ 后合成ｃＤＮＡ,构建成表达型ｃＤＮＡ 文库,用纯化的蛋白质探针通过免疫筛选找出对应的ｃＤＮＡ 克隆。在进一步证明所选用的ｃＤＮＡ 克隆含有重组的λ－ｐｈａｇｅ ＤＮＡ 后,提取和纯化含有插入片段重组子的ＤＮＡ,用Ｅｃｏ ＲＩ酶切分析可见插入片段。已分离出编码天麻抗真菌蛋白的基因     

基因诊断

基因诊断王庆忠（山东省潍坊教育学院生物学系青州２６２５００）基因诊断又称ＤＮＡ诊断或遗传诊断,它利用重组ＤＮＡ技术作为工具,直接从基因水平检测致病微生物的存在和种类,人类遗传病的基因缺陷等,从而成为临床诊断领域中病原体检查、遗传病诊断、癌基因和抗癌基...     

自连载体DNA的选择性线性化——提高重组体筛选效率的新途径

自连载体ＤＮＡ的选择性线性化──提高重组体筛选效率的新途径陆建荣，金振华（中国科学院发育生物学研究所，北京１０００８０）关键词选择性线性化，重组体ＤＮＡ平端ＤＮＡ片段可用Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，这在基因重组、克隆及重组体筛选等操作中具有广泛用途。实际应...     

位点专一性蛋白酶——基因工程的新工具

位点专一性蛋白酶——基因工程的新工具廉德君（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词位点专一性蛋白酶基因工程随着基因工程技术的发展,通过重组ＤＮＡ技术获得目的蛋白已成为一种常规的实验室操作。将目的蛋白基因和层析“手臂”蛋白或多肽基因融合...     

基因克隆的策略

基因克隆的策略沈岩,吴冠芸（中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京１００００５）前言从孟德尔发现生物遗传性状由细胞物质控制,至今已有一百多年了。现在我们都知道控制生物遗传性状的基本单位是基因。最近２０年来,随着ＤＮＡ重组体技术的...     

面向21世纪,尽快开设基因工程高等教育课

基因工程一般认为是指体外将核酸分子（目的基因）插入或重组到病毒、细菌质粒或其它载体中,形成ＤＮＡ重组体,然后再设法导入新的宿主系统内,使目的基因在新宿主内呈现稳定复制和高效表达。这项生物高技术从它诞生那天起,就展现了无比强大的生命力。如今基因工程的发...     

应用SSP-PCR/SSO方法进行中国辽宁汉族人HLA-DRB1基因的遗传多态性研究

对１５９名中国辽宁汉族个体的基因组ＤＮＡ进行分析,共检出４２种等位基因,其中以ＤＲＢ１０９０１２（１２．８％）、０７０１（１０．７％）、１５０１（１０．４％）最为常见,其次为ＤＲＢ１１２０１（７９％）、１２０２（７５％）、１１０１（６６％）、０３０１（５．０％）。并发现辽宁汉族人ＤＲＢ１等位基因频率与白种人间存在明显差异,揭示不同人种有其自己的主要等位基因。同时对本技术在ＨＬＡ－ＤＲＢ１分型应用中的优点进行了讨论     

利用基因重组技术培育抗病毒甘薯

日本《农业技术》,１９９９年５４卷４期第７Ｎ～１１Ｎ页报道：甘薯带状粗皮病严重危害甘薯,向甘薯导入ＳＰＦＭＶ－Ｓ病毒外壳蛋白质基因,可以培育带状粗皮病抗性甘薯。向植物导入基因的方法,一是利用农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）,在质粒上对夹于２５ｂｐ的Ｔ－ＤＮＡ两末端序列的目的基因编入植物染色体;二是使用电激、聚乙二醇（Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）、粒子枪等直接导入。对于甘薯基因重组的研究情况概要如下。１　向甘薯导入ＳＰＦＭＶ－Ｓ外壳蛋白质基因１．１　甘薯基因重组方法。一是Ａｇｒｏｂａ…     

Cre/lox系统介导的位点特异性重组技术及其应用

Ｃｒｅ／ｌｏｘ系统是源于Ｐ１噬菌体的一个ＤＮＡ重组体系,它能导致在特定的ＤＮＡ序列（ｌｏｘＰ位点）处发生定点重组。该系统以将外源基因定点整合到染色体上或将特定ＤＮＡ片段删除;这种定位重组系统在遗传操作中发挥了重要的作用。     

霍乱弧菌染色体基因文库的构建

利用限制性内切酶Ｓａｎ３Ａ将霍乱弧菌１７８（埃尔托生物型,小川血清型）染色体ＤＮＡ进行部分酶切后,分离２０～５０ｋｂ的ＤＮＡ片断,与经过ＢａｍＨＩ酶切的柯斯质粒ｐＨＣ７９连接重组,通过体外包装系统形成噬菌体颗粒,感染受体菌Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１,构建成霍乱弧菌１７８染色体基因文库。为霍乱弧菌中未知基因的克隆及其它研究打下了基础。     

哺乳动物人工染色体MAC-基因治疗的新载体

哺乳动物人工染色体ＭＡＣ－基因治疗的新载体康毅滨,吴晓晖,魏勇,柴建华（复旦大学遗传学研究所上海２００４３３）基因治疗的目的是将ＤＮＡ分子有效地导人一定数量的缺陷细胞,并使其能够长期地产生一定时序和水平上的正确表达产物。导人外源基因的机制有两类：即整合和不整合。整合路线一般是利用病毒粒子携带着重组ＤＮＡ进入宿主细胞。另一种路线是使携带治疗基因的重组ＤＮＡ游离于染色体外。     

转基因植物与食用疫苗

转基因植物与食用疫苗宋长征,韩金祥,王美玲（山东省医学科学院生物技术中心,济南）转基因植物技术是随着ＤＮＡＩ组、基因的遗传转化、植物的组织培养、目的基因的整合与表达的检测等技术手段的建立而发展起来的生物技术。利用转基因植物作为生物反应器,把外源基因引...     

中国人肥胖基因克隆及其原核表达载体的构建

为了探讨人肥胖基因的生理和病理意义,利用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,从中国汉族成人腹膜后脂肪组织总ＲＮＡ中扩增出肥胖基因编码区序列（ＣＤＮＡ）,定向亚克隆至ＰＵＣ１９质粒,克隆的ＯＢＣＤＮＡ不含信号肽序列并加入了亲折起始密友子ＡＴＧ〈序列分析表明,与日本报道的人ＯＢＣＤＮＡ相比,多出一个谷氨酸密码子ＣＡＧ,将ＯＢＣＤＮＡ定向克隆至原功体ＰＢＶ２２０,构建了重组ＯＢ基因表达质粒ＰＢＶ     

DNA操作技术领域里的两种新工具酶

ＤＮＡ操作技术领域里的两种新工具酶张显亮（中国科学院国家基因研究中心，上海２００２３３）关键词Ⅰ－内切酶超多位点内切酶（ｈｙｐｅｒｆｒｅｑｕｅｎｔｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ）序列专一的ＤＮＡ双链内切酶是ＤＮＡ重组领域必不可少的工具之一。应用最普遍的是来...     

肿瘤易感性标志物研究进展

肿瘤易感性标志物研究进展齐红伟,李中骞（首都医科大学宣武医院,北京１０００５３）（中国医学科学院肿瘤研究所,北京１０００２１）关键词　代谢酶,ＤＮＡ修复能力,遗传性基因缺陷,致癌基因生物标志物（ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ）是反映生物体或生物样品中某种事件的...