细菌性多糖——蛋白质结合疫苗的免疫学

本文对细菌性表面多糖（ＣＰＳ,Ｏ－ＳＰ）的免疫原性,影响多糖免疫原性的因素、多糖－蛋白质的免疫学机理进行了综述。     

甲型肝炎病毒的提取及免疫学性质分析

目的建立甲型肝炎病毒(hepatitis A virus, HAV)的提取方法,了解和掌握HAV的免疫学性质。方法利用人胚肺二倍体细胞培养并收获HAV,用层析纯化等方法提取HAV,然后通过抗原检测、免疫电镜检查以及小鼠免疫试验对HAV的免疫学性质进行检测和分析。结果利用层析纯化等方法提取HAV,抗原回收率达84%以上,蛋白去除率达97%以上,电镜及免疫电镜检查可以观测到典型的HAV以及HAV+IgM抗原抗体免疫复合物和HAV+IgG抗原抗体免疫复合物,免疫小鼠抗体阳转率为100%。结论利用层析纯化等方法可以对HAV进行有效提取,提取的HAV具有良好的免疫反应性和免疫原性。     

《自然-免疫学》：一蛋白质抵御艾滋病病毒感染

据美国物理学家组织网1月12日报道,美国罗切斯特大学医学中心、纽约大学朗格尼医学中心和法国几家研究机构组成的一个国际研究小组最近发现,一种名为SAMHD1的蛋白质能切断病毒复制所需基本材料的供给,保护免疫细胞免受毒性最强的普通艾滋病病毒HIV-1感染。该发现提供了一种可能的新型药物标靶,能减缓疾病进程。相关论文提前发表在《自然-免疫学》网站上。     

基于物理化学性质优化的蛋白质相互作用预测研究

蛋白质相互作用预测是生物信息学研究的重要问题之一,提出了一种基于物理化学性质优化的蛋白质相互作用预测方法,与现有方法的显著不同就是,并未使用已知的氨基酸残基的物理化学性质,而是通过粒子群算法优化得到有益于相互作用预测的物理化学性质数值.对真实的数据集测试表明,优化得到的物理化学性质比现有的物理化学性质更有益于提高蛋白质相互作用的预测性能,与其它方法相比,也具有一定的优势,说明该方法是一种有效的蛋白质相互作用预测方法.     

氨基酸性质与蛋白质二级结构的相关分析

[目的]统计48种氨基酸性质之间的相关性并分析其对蛋白质二级结构的影响。[方法]用r软件对20种氨基酸性质进行分析。[结果]侧链二面角角度柔性等3种性质与P_α相关系数为0.412、0.832、0.477等,以正相关影响α-螺旋的形成,而可压缩系数与P_α相关系数为-0.293,以负相关影响其形成;疏水介热性等17种性质与P_β的相关系数为0.536、0.867等,以正相关影响β-折叠的形成,而氨基酸极性等6种性质与P_β的相关系数为-0.547等,以负相关影响其形成;均方根起伏位移与P_t、P_c的相关系数为0.742、0.73,以正相关影响β-转角和无规则卷曲的形成,而膨松度等19种性质与P_t、P_c的相关系数为-0.635、-0.626等,以负相关影响二者的形成。[结论]氨基酸本身信息对蛋白质二级结构有正或负相关的影响。     

双链聚乙二醇与超氧化物歧化酶共价结合物的理化和免疫学性质

用三聚氯氰活化单甲氧基聚乙二醇,得到了双链聚乙二醇(PEGm₂).以PEGm₂修饰牛血Cu,Zn-SOD,得到了氨基修饰率为30％,残余活力为80％的纯PEGm₂-SOD.修饰酶的荧光光谱及圆二色谱均有改变;盐酸胍变性及胃蛋白酶水解实验结果表明,修饰酶的稳定性高于天然酶;免疫学实验表明,与天然酶比较,修饰酶的免疫原性及抗原抗体反应性大为降低.     

水稻谷氨酰胺合成酶同工酶免疫学性质比较研究

用纯化的水后（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）根部存在的两种谷氨酰胺合成酶（ＧＳ）同工酶ＧＳｒａ和ＣＳｒｂ分别免疫兔子,得到相应的抗体。免疫扩散和免疫印迹实验表明,ＣＳｒａ、ＧＳｒｂ的抗体对ＧＳ及其同工酶是的。免疫沉淀试验表明,ＧＳｒａ、ＧＳｒｂ不仅识别它的相应的抗原,而且也能很好地识别彼此的抗原。这两种抗体也能较好地识别水稻叶片胞液型的ＧＳＴ,但对水稻叶片和菠菜（Ｓｐｉｎａｃｉａ ｏｌｅｒａｃｅ     

免疫学和免疫学防治

一、什么是免疫据古书记载,人们早就发现了在传染病流行的过程中,受到传染得病而幸免于死亡的人,以后对这种传染病就有抵抗力,当该病再流行     

布菌Omp31-BLS融合肽抗血清的免疫学性质研究

目的:检测Omp31-BLS融合肽抗血清的质量。方法:利用间接酶联免疫吸附实验、免疫双扩散实验以及凝集实验检测Omp31-BLS融合肽制备的抗血清的质量。结果:Omp31-BLS融合肽抗血清可以较好地识别Omp31-BLS融合肽蛋白质,而且,当抗体被稀释4 000倍的时候,酶联免疫吸附实验测定的OD值为1.2,明显高于其他3个对照组。在免疫双扩散实验中,抗血清被稀释64倍的时候,仍然能够出现明显的免疫沉淀线。此外,凝集实验也反映出Omp31-BLS融合肽抗血清可以与Omp31-BLS融合肽抗原发生强烈的凝集作用。结论:Omp31-BLS融合肽抗血清可以较好地识别对应的蛋白质抗原,二者之间存在明显的抗原-抗体反应,为利用Omp31-BLS融合肽进行布鲁氏菌病的血清学诊断提供了理论基础和技术支持。     

A组轮状病毒NSP6蛋白表达及免疫学性质研究

轮状病毒(RV）NSP6与NSP5由同一基因片段编码,至今对NSP6 性质了解很少。用基因重组表达和免疫学方法,重组表达了A组人RV NSP6蛋白,进行了NSP6的动物免疫及其抗原反应性、免疫原性研究以及RV感染细胞中NSP6的合成及亚细胞分布研究。研究结果表明,NSP6可在原核系统中高效表达,表达蛋白占菌体总蛋白的34.2%;NSP6免疫豚鼠血清抗体可特异性识别菌体细胞中表达的NSP6和SA11及Wa病毒感染的MA104细胞中合成的NSP6蛋白;病毒感染细胞中合成的NSP6在感染后3h就可检测到,12h表达量达到最高;NSP6在病毒感染细胞质中呈弥散状分布,并主要积聚在细胞核的周围,未观察到毒质体样结构。研究结果对深入了解RV NSP6的结构与功能具有重要的意义,具有重要的潜在应用价值。     

A组轮状病毒NSP1基因克隆表达及免疫学性质研究

轮状病毒（rotavirus, RV）非结构蛋白1（non structural protein 1, NSP1）在病毒与宿主的相互作用中发挥着重要的功能。运用基因克隆和表达技术在大肠杆菌中表达了TB-Chen株RV NSP1蛋白,进行了NSP1的免疫学性质和RV感染细胞中NSP1蛋白的合成与分布以及NSP1的系统进化和基因分型研究。结果表明,大肠杆菌BL21(DE3)能高效表达重组NSP1蛋白（rNSP1）,rNSP1表达量约占菌体总蛋白的34.4%。rNSP1能诱导免疫豚鼠产生特异性血清抗体。Western blot及免疫荧光检测结果表明,抗rNSP1血清抗体能特异性识别自身蛋白,对SA11、Wa株的NSP1蛋白有交叉反应性;免疫荧光结果还表明,SA11感染的MA104细胞中合成的NSP1蛋白在细胞质中区域化聚集形成辐射状排列的颗粒状结构,而Wa株的NSP1不能形成此样结构。至今发现的A组RV至少可以分为16个不同的NSP1基因型,TB-Chen株NSP1为A2型。不同基因型有独特的敏感宿主范围,同一基因型可能感染不同种动物,同一种动物也可能感染不同基因型。基因型A4型和A16型仅在鸟类病毒株中出现;而且鸟类中只有A4型和A16型。研究结果为进一步研究NSP1蛋白质的结构功能及其应用开发奠定了很好的基础。     

一株苏云金杆菌噬菌体的形态结构及其蛋白质性质

从武汉微生物药厂苏云金杆菌发酵裂解液中分离到1株具有独特形态结构的苏云金杆菌噬菌体GP-1。电镜观察发现,这株噬菌体的头部呈长六棱柱状,具一短直尾和一“衣领”状结构,并首次发现了“衣领”状结构是由8～10个颗粒亚单位组成。该株噬菌体所具有的这8～10个颗粒亚单位对于噬菌体牢固地吸附于宿主表面应具有很强的促进作用,对于进一步研究噬菌体与宿主之间的关系提供一个结构上的证据。该株噬菌体的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定,呈现一条主带,分子量为58892 D,一条次主带和七条次带,表明该株噬菌体的蛋白是由9种蛋白质构成。     

蛋白质二硫键异构酶相关蛋白A的表达及性质的研究

克隆了Aspergillus niger T21中的蛋白质二硫键异构酶相关蛋白A（PRPA）基因,并将它插入pET23b表达载体。在E. coli中表达时,PRPA占菌体总蛋白的34%。经过超声破细胞、硫酸铵分级沉淀和离子交换层析获得了纯度大于90%的重组蛋白。PRPA有二硫键异构酶活性。在PRPA存在下,变性和还原的溶菌酶复性率和复性速度降低,电泳结果表明溶菌酶聚集增多。荧光结果表明PRPA表面有较多的疏水基团。     

幽门螺旋杆菌重组尿素酶B亚基的纯化及其免疫学性质的研究

目的:幽门螺旋杆菌(Hp)尿素酶是Hp重要的定制因子和致病因子,Hp尿素酶活性位点位于Hp尿素酶B亚基(UreB),研发基于UreB的Hp疫苗是一种很有前景的防治Hp感染的策略。方法:主要利用基因克隆技术从幽门螺旋杆菌标准菌株SS1(Hp SS1)获得Hp尿素酶B亚基基因,并构建含有重组Hp尿素酶B亚基(rUreB)基因的重组表达载体pET-rUreB及其重组菌株;重组菌株经蛋白表达和优化后,利用Ni-NTP镍离子亲和层析和DEAE Sepharose FF阴离子交换层析纯化重组尿素酶B亚基(rUreB),并进一步通过腹腔注射免疫BALB/c小鼠,研究rUreB的免疫学性质。结果:通过基因克隆技术成功获得了Hp尿素酶B亚基基因,并成功构建了重组表达载体pET-rUreB及其重组菌株BL21(DE3)/pET-rUreB,经蛋白表达优化及纯化,可获得高纯度(96.5%)的重组蛋白rUreB。重组蛋白rUreB辅以弗氏佐剂腹腔注射免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA鉴定小鼠能够产生针对天然Hp尿素酶和UreB的高滴度特异性抗体,且能够显著性抑制Hp尿素酶的活性。结论:重组Hp尿素酶B亚基能够在大肠杆菌表达系统中获得较高水平的表达,具有较高的免疫学特异性,其抗体能够有效抑制Hp尿素酶活性。为研究基于尿素酶的防治Hp感染的Hp疫苗奠定了一定的实验基础。     

豆薯种子中两种蛋白质的分离纯化及其性质研究

豆薯（Ｐａｃｈｙｒｒｈｉｚｕｓｅｒｏｓｕｓ）种子经磷酸盐缓冲液抽提,Ｓ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ柱,ＤＥ－５２纤维素柱和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５柱层析,提取出两种高纯度的蛋白成分,命名为ＰａｃｈｙｒｉｎＩ和ＩＩ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其分子量分别为３３ｋＤ和１４．５ｋＤ,但ＨＰＬＣ分子筛的结果显示ＰａｃｈｙｒｉｎⅡ的分子量为２８ｋＤ,无论在还原条件下,还是在非还原条件下,ＰａｃｈｙｒｉｎＩ     

豆薯种子中两种蛋白质的分离纯化及其性质研究

豆薯（Ｐａｃｈｙｒｒｈｉｚｕｓｅｒｏｓｕｓ）种子经磷酸盐缓冲液抽提,Ｓ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ柱,ＤＥ－５２纤维素柱和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５柱层析,提取出两种高纯度的蛋白成分,命名为ＰａｃｈｙｒｉｎⅠ和Ⅱ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其分子量分别为３３ｋＤ和１４．５ｋＤ,但ＨＰＬＣ分子筛的结果显示ＰａｃｈｙｒｉｎⅡ的分子量为２８ｋＤ,无论在还原条件下,还是在非还原条件下,ＰａｃｈｙｒｉｎⅡ电泳的结果都完全相同,表明该蛋白的亚基不是以二硫键相连。两种蛋白的等电点分别为４．５和６．５．用酸解法测定了它们的氨基酸组成。在无细胞体系中,它们对蛋白合成有较弱的抑制活性,显示它们可能是核糖体失活蛋白（ＲＩＰｓ）家族中的新成员。