云南省彝、白、傣、哈尼族人红细胞乙二醛酶Ⅰ的分型调查及其频率研究

采用淀粉/琼脂糖电泳技术对云南省彝族、白族、傣族、哈尼族四个少数民族人群红细胞乙二醛酶1(GLO Ⅰ)进行分型调查,结果:GLO~1彝族0.1163、白族0.1468、傣族0.1205、哈尼族0.2070。比较上述四个少数民族之间及其与我国汉族和其它少数民族之间,以及与国外不同人种、不同地区人群之间比较,表明GLO Ⅰ基因在中华民族大群体中具有一定的分布特征;但在我国各民族之间仍然存在着程度不同的差异,而这种民族间差异却明显小于种族间差异。通过对生活在不同地域的同一民族间比较,表明GLO Ⅰ基因频率的分布无显著性的地域差异。     

武汉地区人群红细胞乙二醛酶I(GLO)遗传多态现象的检测

本文介绍了采用琼脂糖-淀粉凝胶电泳技术及电染色法对203例武汉地区鲜血员红细胞乙二醛酶I (GLO)的多态现象进行的检测,结果表明,武汉地区人群中GLO’的频率为0.1429,且GLO的表型与基因频率符合Hardy-Weinbeig平衡规律。     

武汉地区人群红细胞乙二醛酶Ⅰ(GLO)遗传多态现象的检测

本文介绍了采用琼脂糖-淀粉凝胶电泳技术及碘染色法对203例武汉地区献血员红细胞乙二醛酶I(GLO)的多态现象进行的检测,结果表明,武汉地区人群中GLO′的频率为0.1429,且GLO的表型基因频率符合Hardy-Weinbeig平衡规律。     

云南省15个民族红细胞PGM1亚型分布调查

采用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电永地,对云南省汉族、彝族、白族、苦聪人、哈尼族、傣族、瑶族、基诺族、布郎族、瓦族、拉祜族、回、傈僳族、纳西族和普米族等１５个民族红细胞ＰＧＭ１亚型分布进行了调查。计算出上述１５个民族的ＰＧＭ１亚型分布的基因频率及ＤＰ值,经统计学检验表明：ＰＧＭ１亚型的分布上述１５个民族中存在着明显的民族间差异,但在北京、辽宁、西安、云南４个不同地区的汉族人群中ＰＧＭ１型分布却无显     

香蕉乙二醛酶基因增强酿酒酵母对非生物胁迫抵抗能力的研究

从香蕉cDNA文库中克隆到了一个香蕉(Musa acuminata AAA subgroup)乙二醛酶(glyoxalase,GLO)基因(MaGLO14)。构建了带有MaGLO14的酵母表达载体PYES2-MaGLO14,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)尿嘧啶营养缺陷型菌株INVSC1,挑取转化子进行PCR和酶切鉴定,证实获得了转基因菌株。通过比较转基因菌株和非转基因菌株在NaCl、高温、低温、干旱、UV胁迫下的生长状况,证明转基因菌株在以上非生物胁迫条件下的存活菌落数均高于非转基因菌株。利用酿酒酵母初步证明MaGLO14具有增强酵母菌对非生物胁迫抵抗力的功能。     

云南省元江县白族人红细胞EsD和PGM_1分型的调查

采用淀粉/琼脂糖混合凝胶同步电泳法,对云南省元江县126例白族人红细胞EsD和PGM_1作了分型调查,计算出这两种红细胞同乙酶的基因频率及识别能力,结果表明云南省元江县白族与上述两地居民(汉族)的红细胞EsD和PGM_1表型分布无显著性差异。     

白念珠菌临床分离调查及基因分型研究

目的 了解白念珠菌临床分离情况,并探讨其药敏结果与基因分型的相关性.方法 回顾性分析本院2011年3～11月间临床分离白念珠菌分布及耐药性;随机选取232株,采用PCR方法扩增白念珠菌25S rDNA基因内含子区进行基因分型研究;采用ATB真菌药敏试剂条进行药敏分析;统计分析药敏结果与基因分型的相关性.结果 期间共检出酵母样真菌973例,占病原菌阳性样本数比率为15.7％ (973/6196);其中分离白念珠菌562株,占58％ (562/973),主要分布科室为呼吸科(39.1％)、老年科(13.2％)、ICU(7.7％)、神经内科(7.5％)、免疫科(6.0％)以及其他科室(26.5％);标本类型以下呼吸道为主(81.7％),其次为尿路(9.4％)、血液(1.8％)等.对氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑及伏立康唑的耐药率分别为0.9％、0％、1.4％、1.6％和1.1％.随机选取的232株白念珠菌经PCR方法可分为3型:A型125株,B型96株,C型11株.各型在5种药物的耐药性上并无差异.结论 临床分离酵母样真菌以白念珠菌为主,感染部位以下呼吸道为主;临床分离株对5种抗真菌药物敏感度较高,主要基因型为A和B型,不同基因分型间药敏结果并无统计学差异.     

云南苗族人红细胞EsD、PGM1和GLOI分布的调查

采用EsD-PGM1-GLOI同步电泳分型法,对云南省屏边苗族自治县138例苗族人红细胞EsD、PGM1和GLOI作了分型调查,计算出这3种红细胞同功酶的基因频率是:EsD1 0.6014、PGM11 0.6304(PGM61 0.0109),GLO1 0.1123;根据这3种同功酶的表型频率计算出DP值分别为EsD 0.6206 ,PGM1 0.6315,GLOI 0.3377,累积DP值0.9074。     

中国人红细胞磷酸葡萄糖变位酶的电泳分型及其频率研究

磷酸葡萄糖变位酶(Phosphoglucomutase) 是人体组织中广泛存在的一组重要的酶类。它 可以催化葡萄糖一1一磷酸盐和葡萄糖-6-磷酸盐 相互转化,在糖代谢中起着重要的作用11,810 电泳分型表明这种酶存在着多种形式,决 定他们结构的基因座位至少有3个,即PGM PGM PGM,。它们彼此并不连锁,分别定位在 1,4. ,6号染色体上。每一座位分别决定一组特 异的葡萄糖磷酸变位酶的同工酶。酶的总活力 有80-95务是来自PGM,,而其余的主要由 PG喊提供。但在红细胞中PGM;和PGM,大 约各占50外。在所有的组织中PGM,的总活 力比例很少,在红细胞中则检不出来［u.}0 1964年Spencer等人继Hopkinson及Harris 之后证明了红细胞PGM,多态性的存在。他们 利用淀粉凝胶电泳法将其分成3个普通型 PGM, 1-1, PGM, 2-2, PGM, 2-1。这种多态 性是由两种普通的常染色体等位基因（PGM}, PG川）决定的。当PGM;或PG域与不同的 基因座位的一系列罕见等位基因中的某一个等 位基因杂合时,又形成若千稀有型11,5,8]。近年 来,Bark和K{ihnl等人分别采用等电聚焦电 泳技术将PGM,又分成10种遗传表型,并发现 了稀有型及PGM,01710 PGM,的基因频率在不同的群体中各不相 同。应用淀粉凝胶电泳法在英国人群体中检出 58%的PGM, 1一1、36%的PGM,2-1和6 0%o的 PGM, 2-211'。本文报道用醋酸纤维素膜电泳的 方法对中国人群体中红细胞中的PGM：检测结 果,并对血痕进行了分型。PGM,酶型是继 EAP（红细胞酸性磷酸酶）、EsD（醋酶D）之 后用此法检验的第3个酶型。在人类群体遗传 学、法医学的个体识别以及临床医学的基因标 志的研究中有着和上面两种酶同样重要的意 义。     

白念珠菌基因分型的相关研究

白色念珠菌定植于大多数人群的口腔中,在一定条件下可成为优势菌种而导致感染。基因分型是近年来白念分子生物学研究中的一个热点,随着医学科学技术的发展,由于深部真菌感染比例不断增加,分子生物学方法已经越来越广泛的应用于临床真菌病的研究中,从而为控制白念感染及为早期诊断、治疗提供基础。本文综述了限制性片段长度多态性、随机扩增多态性DNA分析、ITS区域序列分析等分子生物学技术在白念珠菌基因分型方面的相关研究,比较了它们的优缺点,并且讨论了将基因分型研究应用于临床诊断、治疗及开发新型抗真菌药物的发展趋势和广阔前景。认为目前更倾向于多种分型方法联合应用,并借助计算机软件进行分析,但是仍需进一步探索。     

云南“本人”的红细胞血型分布及其与契丹人血缘关系的探讨

调查了云南省施甸县木老元乡哈寨村１０４名“本人”的４个细胞血型系统分布。结果表明,“本人”的ＡＢＯ血型系统分布特点是,基因频率ｐ（０．３０６９）〉基因频率ｑ（０．１７３９）;在ＭＮＳｓ血型系统中,基因频率ｍ（０．６５３８）〉基因频率ｎ（０．３４６２）;在Ｐ血型系统中,基因频率Ｐ１（０．１７９８）较低。这些均与我国南方少数民族的分布特点基本相符。与我国大部分地区一样。Ｒｈ因型系统的单倍型频率中最高的     

中国人eNOS基因VNTR多态性的基因型与等位基因频率

一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）催化L－精氨酸的氧化反应生成L－瓜氨酸和一氧化氮（nitric oxide,NO）。NO可通过cGMP依赖的信号传导途径介导平滑肌细胞舒张,是调节血管张力的重要信使分子。NO尚可抑制血小板凝集,对血栓形成起重要调节作用。目前在哺乳动物中已发现细胞来源、表达方式和活性调节不同的3种NOS同工酶,分别为神经元型NOS（neuronal NOS,nNOS）、诱导型NOS（inducible NOS,iNOS）和内皮细胞型NOS(endothelial NOS,eNOS）。人的eNOS基因位于第7号染色体长臂（7q36）,全长约21kb,含有26个外显子和25个内含子。eNOS基因存在多个与心脑血管疾病相关的基因多态性位点。其中位于第4内含子的一个以27bp为核心的数目可变性串联重复序列（variable number of tandem repeat,VNTR）多态性位点,已被证实与原发性高血压、心肌梗死和静脉血栓形成有关。目前在我国尚缺乏NOS基因多态性在正常人群中基因型及等位基因频率分布的统计资料。为此,我们从316名健康中国人的基因组DNA检测了eNOS基因第4内含子VNTR多态性的基因型和等位基因,鉴定出重复6次、5次和4次的3种等位基因,以及6／5杂合、5／5纯合、5／4杂合和4／4纯合的4种基因型。同时我们将正常中国人eNOS基因VNTR多态性的基因型和等位基因频率与其他种族的相关资料进行了统计对比。结果表明,中国人eNOS基因VNTR的各种基因型和等位基因频率与日本人相似,4／4纯合基因型频率与高加索人差异显著,各种基因型和等位基因频率与非裔美国人均存在显著差异。     

鄂温克人红细胞ESD和PGM、表型分布及基因频率的研究

人类红细胞醋酶D(ESD）和葡萄糖磷酸变 位酶-1(PGM,）的多态性及其基因足位已被阐 明〔1,4.5,6]。由于它们按孟德尔定律进行遗传,现 已成为群体遗传学、法医学等方面重要的基因 标志。用来进行个体识别,亲权鉴定及探讨族 源、民族融合、迁移都具有重要价值。在我区自 然科学基金资助下,我们对鄂温克族人红细胞 ESI）和PGM,分型进行了调查。     

多聚酶链反应技术及其在乙型肝炎病毒研究中的应用进展

随着多聚酶链反应技术的广泛应用,本文据ＰＣＲ在乙型肝炎病毒研究中的一些具体特点,对其在技术方面及其应用所得得的进展作一综述,重点包括ＰＣＲ技术在ＨＢＶ研究中的一些实际应用问题,以ＰＣＲ技术对ＨＢＶ所得到的新认识,ＨＢＶ感染性评价,ＨＢＶ基因分型和变异株的研究,ＨＢＶ的复制和表达机理,传播方式,及与肝细胞肝癌关系的有关进展。     

纤维蛋白原、神经氨酸酶对红细胞与内皮细胞粘附的影响

采用流室系统,研究了不同切应力作用,纤维蛋白原（Ｆｇ）、神经氨酸酶对红细胞（ＲＢＣ）与内皮细胞（ＥＣ）粘附的影响。结果表明：Ｆｇ可以增加ＲＢＣ与ＥＣ的粘附且存在明显的剂量依赖关系;加入Ｆｇ后,随切应力增大,ＲＢＣ与ＥＣ相对粘附数按指数曲线减少并且趋于一大于零的值,而对照组却趋于零。提示这种由Ｆｇ介质的粘附可能存在于体内正常生理切应力范围内,并与对照组的粘附有着本质的不同。实验还表明：在０．１Ｐａ和     

建立携带左旋天门冬酰胺酶的红细胞特异性表达系统

目的:建立基因修饰红细胞输送左旋天门冬酰胺酶(L-ASNase)的体系。方法:采用2A联体技术将L-ASNase和红色单体荧光蛋白基因分别置于红细胞特异性基因调控元件或非组织特异性短延长因子1α启动子控制下,构建慢病毒载体,分别包装成组织特异性重组慢病毒或非组织特异性重组慢病毒,测定病毒滴度,并分别感染靶细胞,用六氧苄基鸟嘌呤/卡莫司汀联合筛选以富集感染的小鼠红白血病阳性细胞;用六亚甲基二乙酰胺诱导富集的阳性细胞向红细胞分化,流式细胞术检测红色单体荧光蛋白报告基因的表达,荧光显微术观察基因表达产物在细胞中的定位,免疫印迹分析L-ASNase的表达水平,评估在红细胞分化过程中组织特异性重组慢病毒的表达优势。结果:经限制性内切酶谱分析和序列测定,构建的重组慢病毒载体结构正确;免疫荧光结果显示在非组织特异性慢病毒感染的HeLa细胞中,L-ASNase主要表达在细胞质,单体红色荧光蛋白主要表达在细胞核内,提示2A序列通过自裂解使同一读框中的2个基因获得了表达;用50μmol/L六氧苄基鸟嘌呤-50μmol/L卡莫司汀联合筛选,可有效富集感染的小鼠红白血病阳性细胞;经六亚甲基二乙酰胺诱导,第7 d的MEL细胞中表达的重组L-ASNase浓度达0.3 U/mg总蛋白。结论:红细胞特异性慢病毒载体可以在小鼠红白血病细胞向红细胞分化过程中使携带基因的表达逐步增高,优于非组织特异性慢病毒载体。本研究为基因修饰造血干细胞、并通过体外细胞分化的方法大量产生携带L-ASNase的红细胞治疗恶性血液病奠定了临床前的实验基础。     

基诺族、布朗族和拉祜族的4种红细胞血型分布

调查了云南基诺族、布朗族和拉祜族各100人的 ABO、Rh、MN和 P血型系统。结果表明 ,ABO血型系统中 p基因频率拉祜族最高 (0 .2420 ) ,基诺族最低 (0 .0779) ,布朗族居中(0 .2144 )。 r基因频率是基诺族最高 (0 .6971) ,拉祜族最低 (0 .5288) ,布朗族居中 (0 .5964)。Rh血型系统中 ,基诺族和拉祜族都是以 CCDee和 Cc DE-为常见类型 ,而且都是 CCDee最高 ,Cc DE-次之。拉祜族和基诺族的 CDe频率分别为 0 .7433和 0 .6950 ;c DE频率分别为 0 .1 871和0 .2517;基因频率 d为零。MN血型系统中 ,这 3个民族都是基因频率 m>n。P血型系统中 ,本次调查的 3个民族的p1基因频率在全国已调查过的汉族和少数民族中均是最高值 (拉祜族0 .50 99,布朗族 0 .4690 ,基诺族 0 .4359)。     

酶解转变的人红细胞输注大鼠的实验研究

目的：利用大鼠评价酶解转变的人红细胞的安全性。方法：人红细胞与大鼠血清进行常规配血,检测二者之间的相容性;将人B型红细胞酶解后输注大鼠,流式细胞术检测人红细胞在大鼠体内的存活率。结果：人红细胞与大鼠血清不凝集,但人红细胞输注大鼠体内很快被排斥,1h下降至50％以下,18h被完全排斥。结论：仅依靠红细胞配血实验来选择人红细胞输血动物模型是不全面的,大鼠不适合作为酶解转变的人红细胞安全性评价的动物模型。