植物体细胞原生质体遗传转化研究

重点介绍了植物体细胞原生质体遗传转化的方法和当前已经取得的成果,同时提出了目前原生质体遗传转化中存在的问题,展望了今后的工作重点。植物原生质体遗传转化的方法主要有：PEG介导转化法、电击穿孔转化法、脂质体介导转化法、农杆菌共培养转化法等。     

酶浸提取方法对士的宁产率的影响

目的：研究了纤维素酶在提取生物碱过程中的应用。方法：采用酶浸法和氯仿法两种不同的工艺提取马钱子生物总碱,高效液相色谱法（HPLC）测定了马钱子生物总碱中士的宁的含量。结果：酶浸法提取士的宁和氯仿法提取士的宁的含量分别为1．83％、1．32％;酶浸法和氯仿法提取马钱子生物总碱的产率分别为：2．85％、1．86％。     

例谈二氧化碳同化法的应用

结合相关例题简要介绍生态学中的一种常用技术方法——二氧化碳同化法．从而提高分析此类问题的能力,进一步提高科学思维能力。     

小麦网腥黑粉菌冬孢子总DNA提取方法比较

目的：研究提取不同时期小麦网腥黑粉菌冬孢子总DNA的最佳方法。方法：应用改良过的四种方法（CTAB法、SDS-CTAB法、SDS法和尿素法）对小麦网腥黑粉菌冬孢子总DNA进行提取。结果：提取当年小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA,纯度（OD260/OD280）：CTAB法〉SDS-CTAB法〉SDS法〉尿素法=1.876〉1.7815〉1.7789〉1.6095;产率（μg/g）：SDS-CTAB法〉SDS法〉尿素法〉CTAB法=796.25〉664〉306〉291.5。提取15年的小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA,纯度（OD260/OD280）：CTAB法〉SDS-CTAB法〉SDS法〉尿素法=1.91795〉1.8876〉1.65985〉1.55925;产率（μg/g）：尿素法〉CTAB法〉SDS法〉SDS-CTAB法=1529.25〉799〉687.25〉372.5。结论：SDS-CTAB法是提取当年小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA的最佳方法。CTAB法是提取15年的小麦网腥黑粉菌冬孢子DNA的最佳方法。     

检测HIV的蛋白印迹和ELISA检测方法学比较

为了寻找一种适合大批量标本测定且具有高敏感性、高特异性的艾滋病临床实验室检测方法。比较了艾滋病检测的蛋白印迹实验和酶联免疫吸附实验两种方法,并采用不同厂家生产的不同代酶免试剂和对已确诊为阴性和阳性的标本进行比较测定。结果科华一代、二代、三代和四代酶免试剂盒的功效率分别是83．7、92．13、97．50和85.3;万泰一代、二代、三代和四代功效率分别是83．5、95．88、97．10和84．2;蛋白印迹实验的功效率是99．5。所以酶联免疫吸附实验更适合大批量标本的检测,而第三代酶免试剂具有更高的特异性和敏感性。     

几种全长cDNA文库构建方法比较

全长cDNA文库是高效、大规模获得基因全序列信息的一条有效途径,尤其是对基因组庞大,近期内尚不能进行全基因组测序的生物来说,是一条开展功能基因组研究的重要途径。本文对几种全长cDNA文库的构建方法进行了概述,针对各种方法的原理及优缺点做了分析、比较,并结合本实验室的结果,重点介绍了Cap-trapper法在小麦全长cDNA文库中的应用及文库中全长基因比例判定方法。     

三种方法检测梅毒螺旋体抗体的比较

应用ELISA法、TRUST法和TPPA法分别检测梅毒患者血清标本中梅毒螺旋体IgG抗体,比较3种方法的敏感性和特异性,选择一种适合于梅毒螺旋体抗体检测的高敏感性和高特异性的血清学检测方法。     

一种新的DNA 片段扩增法— 聚合酶链式反应法

随着分子生物学的发展,对特定核若酸片段进行 分离、纯化及扩增已成为基因分子生物学研究的中心 问题。自从197,年Southern转移技术建立以来,这 一领域已经取得很大进展。但已建立的方法在特异性 和灵敏度等方面尚未达到令人满意的水平：同时操作 复杂,这已成为提高研究速度的主要限制因素。用常 规方法对特定DNA片段进行分离,提纯和扩增,不仅 费时费力,并且对微量样品中的单拷贝片段的分离和 扩增尤其显得困难。由Mullis等％L23建立的聚合酶 链式反应法（polymerase chain reaction,简称PCR）有 效地解决了这一问题。运用PCR技术可以使1微微 克样品DNA中存在的仅有一个拷贝的特定核营酸片 段得到大量扩增。与常规方法相比,运用PCR技术 可大大地缩短操作时间及减小劳动强度,因为不再需 要次级克隆及分离、纯化等繁杂的步骤,而只要合成两 个起始引物,将基因组DNA与这两个引物及DNA聚 合酶等所组成的反应体系在三个不同温度的水浴中机 械地操作之后,就可得到两个引物5‘末端之间的大量 的DNA片段。并且不需要进一步纯化,其纯度就足 以满足有关核昔酸片段的分析研究。现在国外一些公 司已推出一种装置,可使PCR反应完全自动地进行。 从PCR技术的出现（Mullis"], Saikit'23, Saikiti41）到 现在只一年多的时间,但这技术已广泛地应用于分子 生物学研究的各个方面。可以预期,PCR技术将极 大地促进基因分子生物学的研究。     

四种提取芸芥基因组DNA方法的比较

以芸芥为材料 ,分别用CTAB法、SDS法、尿素法、NaOH法四种方法对芸芥基因组DNA进行了提取 ;并用紫外光分光光度计法、琼脂糖电泳法和RAPD分析法对所提取的DNA进行检测 ,将它们在DNA的产量、质量和耗时、耗费等方面的优缺点进行比较 ,以便在实际工作中根据不同的试验条件选取最合适的提取方法。通过四种方法的比较 ,研究认为尿素法是芸芥基因组DNA的最佳提取方法。     

鉴别差异表达基因的新方法──抑制消减杂交法(SSH)

抑制消减杂交法（SuppressicSubtractiveHybridization,SSH）是最近（1996）报道的能有效鉴别两个不同细胞群差异表达基因的新方法［1,2］。该方法是以抑制PCR和消减杂交法为基础,在一轮反应中实现mRNA的均等化和消减步骤。本文对SSH法的原理、优缺点作了介绍,并与其它检测差异表达基因的方法,如mRNA差别显示法（DDRT－PCR）、代表性序列差异分析（RDA）比较,认为SSH方法具有高效快速、高敏感性和假阳性低等优点。同时,625个克隆中有很大一部分是转录物丰度很低的基因,40％的克隆可能为新的基因。因此,SSH可作为鉴别差异表达基因和克隆新基因的有效方法。     

分子系统发育树构建的简易方法

以系统发育树构建的原有距离方法为基础,吸取了NJ法和FM法中的部分理论,提出了以节点引入为手段的新的简易方法,通过该方法构建了分子系统发育树,结果表明这种方法更加快捷,而且所得结果与FM法完全一致。     

三种不同原位PCR方法的比较研究

原位 PCR技术是 80年代末开始发展起来的一项新技术 ,它结合了 PCR技术的高效扩增和原位杂交技术细胞定位的优点 ,敏感性高 ,可以进行靶核苷酸的定位。目前 ,主要应用的原位 PCR方法有直接法、间接法 ,但各有其优缺点 ,为此我们应用标记引物的原位 PCR方法检测了肝细胞癌组织中 HBV,尖锐湿疣组织中 HPV及鼻咽癌组织中的EBV的分布 ,并与前两种方法进行了比较。材料和方法1　标本　外科手术切除肝癌标本 2 0例 ,鼻咽癌活检标本 2 0例 ,尖锐湿疣活检标本 2 0例 ,1 0 %中性福尔马林固定 ,石蜡包埋 ,5μm连续切片 ,病理诊断证实。2　试…     

花生DNA提取方法比较

目的:旨在筛选优化花生DNA提取方法。方法:采用SDS法、改进SDS法;CTAB法、改进CTAB法四种方法对花生叶DNA进行提取,并从电泳结果、纯度、得率、等方面对其进行比较研究,从而确定花生DNA提取适用流程;结果:CTAB法DNA平均得率为55.0μg/g.Fw,略小于SDS的60.3,但其A260/A280平均值为1.81,比SDS的1.55更接近标准要求。结论:综合考虑CTAB法是提取花生DNA的最佳方法,可提取到较高质量的DNA,符合分子检测要求;虽然改良CTAB法也相对好于SDS法,但由于步骤增加反而加剧DNA降解。     

蛇胆质量控制方法的研究

本文详细论述了蛇胆的性状及理化鉴别方法,并利用干燥法和比重瓶法测定蛇胆的总固体和比重,用分光光度法测定胆酸的含量。研究结果表明,本方法科学性强,具有广泛的实用性,可作为控制,判断蛇胆质量的重要手段和方法。     

粪便中大肠埃希菌分离方法的筛选

比较了滤膜法、涂布法和纸片法对粪便中大肠埃希菌的分离效果。通过对分离粪便大肠埃希菌的数量可知,纸片法与m—TEC培养基上滤膜法分离的大肠埃希菌数量结果基本一致。m—TEC培养基滤膜法分离的大肠埃希菌平均数量分别是伊红美蓝培养基涂布法分离大肠埃希菌平均数量的1．4倍、伊红美蓝培养基滤膜法分离大肠埃希菌平均数量的2．8倍、m—TEC培养基涂布法分离大肠埃希菌平均数量的2．25倍。分离粪便样品中大肠埃希菌选择滤膜法用m—TEC培齐基进行分离为最佳分离方法。     

观察比较贝母类生物碱分布的3种切片方法

目的:建立一种能更清楚有效地观察贝母鳞茎中生物碱沉淀分布及含量的切片方法。方法:以新疆贝母为供试材料,利用石蜡切片法、徒手切片法及改良切片法制备植物鳞茎组织切片;切片经改良碘化铋钾处理,并通过Mikroskop Primo Star X2005显微镜观察和比较3种不同切片中生物碱沉淀分布。结果:改良切片法处理的切片中生物碱沉淀分布观察清晰,可用于定性及定量分析,并且实验过程中试剂对生物碱的影响较小,操作方法简便、快速、有效。结论:贝母鳞茎生物碱的观测适合采用改良切片法制片。     

细胞友好的新型基因导入法

基因导入，是现代生命科学研究中的基础性技术。正因为如此，以病毒载体法为首，粒递送法以及电穿孔法等已经确立的有很多方法。BIOBANK（日本东京都港区）公司正在销售一种新型基因导入装置“共振激发式基因导入装置”，与原有的那些方法相比，它能够高效地导入基因。公司正在大力宣传其优点，努力打入基础研究的过程中。     

转基因动物技术研究综述

较全面介绍了转基因动物的制作方法如显微注射法、精子载体法、YAC载体法、核移植法等,并对研究中出现的制作效率低、外源基因表达不理想、对宿主和环境产生不利影响等问题作了探讨。     

妇科炎症感染中几种微生物检验方法观察

文章对妇科炎症感染中几种微生物检验方法的检验效果进行观察。随机选择2020年11月—2021年11月我院接收的150名妇科炎症感染患者作为研究对象，随机分成A组、B组、C组，每组各50例。其中，A组采用培养法开展微生物检验，B组采用凝聚法开展微生物检验，C组采用镜检法开展微生物检验，观察和比较各组的检验效果。发现在150例妇科炎症感染患者中，141例有外阴瘙痒症状，占比为94.0%;143例有外阴异味，占比为95.3%;135例有尿频症状，占比为90.0%;114例有尿急症状，占比为76.0%;138例存在阴道分泌物异常的情况，占比为92.0%。A组患者的阳性检出率为84.0%,B组患者的阳性检出率为88.0%,C组患者的阳性检出率为82.0%，三组数据不具备统计学差异（P>0.05）。A组检验满意度为96.0%,B组检验满意度为96.0%,C组检验满意度为98.0%，三组数据不具备统计学差异（P>0.05）。在妇科炎症感染中，多采用培养法、凝聚法、镜检法等方法开展微生物检验，都能获得较高的阳性检出率，临床上可通过联用多种微生物检验方法，来提升临床检验结果的准确性，为临床诊...     

大青杨叶片总RNA的快速提取方法

目的:寻求快速提取大青杨叶片总RNA的方法。方法:分别用改良CTAB法、改良SDS法、改良TRIzol法及某公司总RNA提取试剂盒提取大青杨叶片总RNA,并用紫外光谱分析、凝胶电泳方法对提取的总RNA进行鉴定。结果:用改良CTAB法和改良TRIzol法能有效地去除蛋白及多糖,提取到的总RNA纯度高,D260nm/D280nm分别为2.05和1.78,RNA的完整程度优于试剂盒法。结论:改良CTAB法为大青杨叶片总RNA的最佳提取方法。