一种全细胞百日咳菌苗效力试验替代方法的建立

<正>全细胞百日咳菌苗的效力通过小鼠保护试验(AMPT)来判定。此法是用不同稀释度的百日咳国际参考苗(ZSPV)和待检菌苗免疫小鼠,14天后脑腔攻击Bordetella百日咳菌18323(100-1000LD50)。 从1951年到1959年,由医学研究委员会进行的现场研究表明,能使小鼠抵抗脑腔攻击的百日咳菌苗也可保护儿童。尽管在AMPT的结果和接种的个体产生的保护力之间有高度的相关性,此试验仍有许多操作上的困难:(i)需要大量可对百日咳菌苗的免疫产生应答的小鼠。这些动物须在适宜的环境中喂养一个月,费用很高;(ii)脑腔注射需要毒株;(iii)实验室间和实验室内的结果有很大的     

无细胞百日咳菌苗质量控制指标的探讨

本文介绍了美国、日本关于无细胞菌苗质量控制的检定项目,并就两国不同的质量控制体系进行分析和比较。特别对无细胞百日咳菌苗的效力测定和毒性试验存在的问题提出看法。同时对国内如何加强对无细胞菌苗的质量控制提出建议,以进一步开展研究工作,从而制定出中国国内无细胞百日咳菌苗质量控制的合适指标。     

全细胞百日咳菌苗与含凝集原的无细胞菌苗的第二期现场试验

<正>由英国“应用微生物学及研究中心”研制的无细胞百日咳菌苗,含有凝集原2及3,百日咳毒素和丝状血凝素。188名婴儿进入一项随机的双盲试验,以联合白喉及破伤风类毒素的无细胞或全细胞菌苗按3、5及8～10个月的间隔进行接种。两组的局部反应相以,但在接种无细胞菌苗后,具有全身反应的婴儿显著地少于全细胞菌苗。对无细胞菌苗凝集原和毒素组分的抗体平均对致滴度高于全细胞菌苗。接种第三剂菌苗后一年,无细胞组抗体的持久性亦较好。     

无细胞百日咳菌苗纯度和生物学特性研究

本文对无细胞百日咳菌苗的纯度、免疫力和毒性进行了研究。实验证明菌苗中不仅含有百日咳毒素（ＰＴ）和丝状血凝素（ＦＨＡ）,而且还含有百日咳凝集素和百日咳粘着素。菌苗的纯度为５０％－９５．７％,菌苗中ＰＴ和ＦＨＡ的比例为１：１－１：１８。     

不同减毒方法对无细胞百日咳菌苗减毒效果的比较研究

采用５种不同的化学减毒方法对无细胞百日咳菌苗的ＰＴ组分减毒效果进行了比较研究,选择出对菌苗的抗原性破坏小、减毒效果确切、减毒时不产生变性蛋白凝块的改进的甲醛减毒方法。     

吸附精制百日咳菌苗质量控制的研究

本文就吸附精制百日咳菌苗制检过程中使用的菌株、有效组分ＬＰＦ和ＦＨＡ提纯工艺以及毒性,效力等检定方法阳相应的质量控制指标等进行了研究。结果表明,中国Ｃ、Ｓ菌株产毒优于日本Ｔｏｈａｍａ株。ＬＰＦ和ＦＨＡ─ＥＬＩＳＡ用作菌苗工艺各步骤中质控有效组分的产量,是一种快速、敏感和特异的方法。根据５年中菌苗批量生产每ｍｌ培养基ＬＰＦ和ＦＨＡ产量逐年上升趋势,说明生产工艺不断改进完善和操作技术的熟练是提高菌苗产量和质量的关键。制检规程中用作毒性和效力试验的方法,是菌苗安全有效质控的有效实用方法。     

无细胞百日咳菌苗的纯制和特性

<正> 引言 百日咳菌苗传统的形态,由杀死的百日咳杆菌组成,亦即它是全细胞菌苗。这种菌苗包含有对促进保护性应答不需要的成份,而且这些成份可能对副反应起作用。在日本,自1973年一直从事由百日咳杆菌分离其有效因子,并尽可能多的除去不需要的成份。一些保护性抗原已在百日咳杆菌培养物的上清液中被证实,并曾尝试发展一种由一或两种这些抗原组成的菌苗。含有两种主要保护性抗原即由百日咳杆菌培养物上清液中分离出的百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA)的精制百日咳菌苗(无细胞百日咳菌苗),自1981年已应用于日本.     

无细胞百日咳菌苗毒性试验参考苗制备条件的探讨

将不同灭活条件下制备的无细胞百日咳毒性试验参考苗进行了检测。结果表明,以浓度０．１％Ｆｏｒｍａｌｉｎ溶液２５℃灭活９６－１２０小时制备的无细胞百日咳菌苗毒性试验参考苗,凝集效价仍可达到百日咳Ⅰ相血清原效价;不耐热毒素试验呈阴性;毒性试验ＢＷＤＵ／ｍｌ为７５．９－１２８．４;ＬＰＵ／ｍｌ为２．１－６．０;ＨＳＵ／ｍｌ为３．９－５．７;稳定性良好。该苗可标化作为无细胞百日咳菌苗毒性试验的参考标准     

吸附精制百日咳菌苗稳定性的研究

本文对新一代吸附精制百日咳菌苗保存于不同温度条件下的安全和效力稳定性进行了实验,结果表明,９批吸附精制百日咳菌苗经贮存于４～８℃条件下半年、１年、２年和３年后,贮存于常温（１８～２２℃）半年后和贮放于３７℃４０天后,其贮存前后的ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ和ＨＳＵ／ｍｌ间的数值变化,均在制检规程要求的标准数值内,无显著性差异（Ｐ＞０．０５）,说明菌苗的毒性无逆转、菌苗的安全性良好。３批吸附精制百日咳菌苗经贮存于４～８℃条件下７个月和２年后、其贮存前后的效力单位间的数值变化,均在制检规程要求的标准数值内,无显著性差异（Ｐ＞０．０５）,说明菌苗的效力无下降,菌苗的质量稳定。     

无细胞百日咳疫苗的质量控制及其标准化

无细胞百日咳疫苗在全世界范围内已逐渐用于婴幼儿的计划免疫和加强注射中,但到目前为止没有完全令人满意的效力试验方法。小鼠保护试验不适合对无细胞百日咳疫苗进行效力评估,免疫原性试验在衡量制品一致性方面是有用的,但与临床保护之间缺乏相关性,最近建立的气雾攻击主动保护试验为功能性效力试验开创了美好的前景。用生物学结合物理化学方法对疫苗抗原含量,纯度,安全性和免疫原性的研究,对新开发的尚无有效效力试验方法的同类疫苗质量控制及标准化问题提供了指导。     

百日咳全细胞菌苗的肾上腺素不应性低血糖活性的测定

<正>发展了一种新的检测方法,用于定量估计百日咳菌苗对肾上腺素诱导的小鼠高血糖的抑制作用。检验的统计学分析,是根据血糖水平的对数转换值估计的。这个方法极为敏感,能检测出0.004ml商品百喉—破伤风—百日咳全细胞菌苗的活性。计算的公共方差能小至0.0034,同时方法具有高度的重复性。在商品菌苗中,其活性具有显著性差异。原百日咳菌苗的活性,用5mM戊二醛于37℃30分钟可灭活,但对40mM甲醛于37℃处理5天却有抵抗力。化学试剂的灭活程度,采用平行线检验法与未处理的对照百日咳菌苗的活性作了计算。     

无细胞百日咳疫苗全球孕期接种的现状

近年来百日咳(pertussis)再现引起了广泛关注,其中婴幼儿是主要的高风险群体,感染后可导致严重后果。孕期接种无细胞百日咳疫苗被认为是预防婴幼儿感染百日咳最经济有效的办法,其安全性已得到充分认可。有些国家已将其纳入免疫规划,但在中国目前仍未实施。迄今为止无细胞百日咳疫苗的最佳孕期接种时间及孕期接种是否会影响婴儿主动免疫应答仍需进一步研究并加以明确。现就无细胞百日咳疫苗(acellular pertussis vaccine, aPV)全球孕期接种的现状作一概述。     

无细胞百日咳工艺中PO4^3—影响DTaP免疫效力分析

用0.02mol/L磷酸盐缓冲液和不用磷酸盐缓冲液透析生产无细胞百日咳（aP）,按《2000年版生物制品规程》制备和检定氢氧化铝吸附无细胞百日咳、白喉、破伤风联合疫苗（DTaP）。发现用磷酸盐缓冲液和不用磷酸盐缓冲液透析生产aP组成DTaP免疫效力差异非常显著,后者100％（10／10）合格,前者合格率只有27％（3／11）,用钼兰法测定DTaP中PO4^3-离子浓度。结果表明后者的PO4^3-浓度只是前者的1／10,PO4^3-依次影响白喉、破伤风、百日咳免疫效价。     

白喉、破伤风、百日咳及其联合菌苗规程

本文是世界卫生组织发布的第8号及第10号生物制品规程中的二篇,其它各篇待下期陆续刊出。     

吸附无细胞百日咳菌苗,白喉,破伤风类毒素混合制剂Ⅲ期临 …

吸附无细胞百、白、破混合制剂于１９９５年６月至１９９７年９月在广东省４个市和陕西省大荔县进行了Ⅲ期临床人体接种反应和血清学效果观察,全程基础免疫婴幼儿６４９６１例,加强注射３８８６０例,总计为１０３８２１例,接种反应轻微,未发现有严重异常反应者。     

吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂稳定性的研究

将连续生产并已申报人体接种反应观察的三批吸附精制百日咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂,分别于４～８℃、１８～２２℃、３７℃贮存半年、１年、１年半和３０天,然后以小鼠法或豚鼠法对该制剂进行安全稳定性、效力稳定性以及毒性逆转等测试。其毒力安全稳定性试验表明,三批混合制剂中的精制百日咳菌苗在４～８℃贮半年、１年、１年半后、它们的ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ、ＨＳＵ／ｍｌ均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;白喉及破伤风类毒素在４～８℃贮存半年,１年、１年半以及１８～２２℃贮存半年和３７℃贮存３０天后,三批测试组的豚鼠均健存且体重增加。在效力稳定性试验中,４～８℃贮存１年和１年半后精制百日咳菌苗的效力与贮存前（分别为２６．７３ＩＵ／ｍｌ、２１．０２ＩＵ／ｍｌ、１９．１７ＩＵ／ｍｌ）无显著性差异（ｔ＝０．１１４;Ｐ＞０．０５）;白喉及破伤风类毒素４～８℃贮存长达１年半后,效力仍在２～３．２ＩＵ／ｍｌ,动物保护率仍可达８０～１００％。三批混合制剂在３７℃贮存３０天后,通过Ｓｃｈｉｃｋ毒性试验及测定ＢＷＤＵ／ｍｌ、ＬＰＵ／ｍｌ、ＨＳＵ／ｍｌ各指标显示,精制百日咳菌苗、白喉和破伤风类毒素无毒性逆转。说明该吸附精制百、白、破混合