应用协同凝集法鉴定沙门氏菌O抗原

<正>鉴定肠炎沙门氏菌菌体O抗原的玻片凝集法需要约40种吸收过的抗血清。这些抗血清的制备是困难而又麻烦的。将抗体与葡萄球菌A蛋白结合的协同凝集程序可以改进这种鉴定方法并增强抗血清活性。Edwards等报导了用协同凝集作沙门氏菌群的快速鉴定法,但试验中仅有少数异种菌株,所以并不能充分证明这些试验剂的特导性。需要进一步证明协同凝集法具有与玻片凝集有同样的特导性和敏感性。     

沙门菌常见O抗原和H抗原荧光PCR检测方法评估

目的:评估沙门菌常见A~F血清群O抗原和H抗原荧光PCR检测方法对不同血清型沙门菌的检测效果。方法:选用不同血清型沙门菌制备模板,运用沙门菌O抗原A~F群及不同H抗原荧光PCR检测试剂盒对这些菌株进行扩增检测,分别计算不同血清型检测结果的灵敏度、特异度、检测下限、假阳性率、假阴性率、Kappa值等指标并进行分析。结果:对7种不同沙门菌O抗原的检测灵敏度为85.71%~100.00%,特异度为66.67%~100.00%;对7种不同沙门菌H抗原的检测,H1,5及Hi-l的灵敏度不高,分别为35.71%及57.14%,但特异度均较高(87.50%~100.00%);经Fisher精确检验,除H1,5阳性检测的P0.05(P=0.162),其余为P0.05;C1、C2、D1、E、F血清群及H抗原1,6、1,7、g,s,t、g,m的检测结果与血清凝集结果的一致性较高(Kappa值均大于0.75),而H1,5及Hi-l的检测结果与血清凝集结果的一致性很差(Kappa值分别为0.302及0.492);试剂盒对不同O/H抗原核酸检测扩增效率较好,最低检出限为7~137608拷贝/反应。结论:除H1,5抗原外,该荧光PCR检测试剂盒对沙门菌O/H抗原不同血清型的检测效果较好,优于传统血清凝集方法,可显著提高血清型鉴定时效,有利于疾病或暴发的早期发现。     

自西安地区医院分离的118株绿脓杆菌的“O”血清分型（群）

血清分型是检测绿脓杆菌交叉感染和追踪其感染源的重要工具。本文用国内生产的绿脓杆菌诊断用12群“O”血清,对自西安市11所医院临床病人创面、呼吸道和尿路感染分离的118株绿脓杆菌进行了血清学分型鉴定。结果发现,118株绿脓杆菌中有115株能被“O”血清凝集,鉴定率为97.46%;有109株能被分型,分型率为92.37%。其中以血清Ⅵ.Ⅰ.Ⅲ三群菌多见,表明西安地区医院绿脓杆菌感染以这三个血清群为主。     

变形杆菌诊断血清试制研究 Ⅲ、血清的实际应用——325株地方性菌株的鉴定结果

普通及奇异变形杆菌诊断血清试制工作的同时,即收集了一批地方性菌株,主要目的为检验血清的特异性。其中有部份具有新的O或H抗原的菌株也经过实验而得到证实,并试制了相应的O或H血清。同时,对325株变形杆菌进行了鉴定,其结果初步总结如下: 1.标本来源 325株变形株菌有以下几个来源。     

乳杆菌阴道分离株16S rDNA鉴定及优势菌株产H_2O_2和自凝集能力分析

目的从阴道分泌物标本分离鉴定乳杆菌,分析与健康相关优势菌种产过氧化氢(H2O2)和自凝集能力,揭示菌株特异性的潜在益生特性。方法利用MRS固体培养基从41例阴道分泌物标本中分离单菌落,纯培养后提取细菌基因组DNA,PCR扩增16S rDNA序列,依据序列一致性确定细菌种属。利用TMB-HRP-MRS培养基测定优势乳杆菌菌株产H2O2能力,并测定其自凝集能力。结果获得155个细菌分离株,分属乳杆菌属104株(67.1%)、肠球菌属21株(13.5%)、链球菌属28株(18.1%)、葡萄球菌属1株(0.6%)和双歧杆菌属1株(0.6%)。各菌属在无或有妇科临床症状患者标本中的构成比例差异有统计学意义(χ2=7.4918,P=0.0236),乳杆菌在前者检出率为83.3%,显著高于其在后者47.1%的检出率(χ2=4.4879,P=0.0341)。乳杆菌中卷曲乳杆菌分离株所占比例最高(67.3%,70/104)。来自不同标本的22株卷曲乳杆菌中77.3%菌株产H2O2,且这些菌株具有强弱不同的自凝集能力(27.5%~97.3%)。结论乳杆菌属特别是卷曲乳杆菌种是健康阴道环境中优势菌属,其产H2O2和自凝集能力存在明显菌株特异性,有2株卷曲乳杆菌此两特性均很强可供进一步研发。     

绿脓杆菌新血清型菌株

在进行绿脓杆菌血清型的研究中,分离到一株与绿脓杆菌11个分型血清不发生交叉凝集的绿脓杆菌菌株。通过鉴定证明是一株新血清型菌株。现报道如下。     

金黄色葡萄球菌荚膜分型血清研制及初步应用

为了解中国金葡菌荚膜流行型,用5型和8型国际标准菌株的菌悬液免疫家兔,吸收除去交叉凝集素研制出金葡菌5型和8型荚膜分型血清,并应用于333株临床菌株荚膜分型。该血清效价为1：1280和1：640,与本菌及其它同型菌株玻片凝集反应呈强凝集,与其它型菌株不凝集,且与美国标准血清同时对333株临床分离菌株进行分型比较的符合率为100％。333株金葡地方菌株荚膜分型结果显示,8型菌株占绝对优势,所占百分率为70．9％;5型占6．3％,5型和8型菌株共占77．2％。这与国外金葡菌荚膜5型和8型占70％-80％的报道相似。试验为金葡菌疫苗株选择提供了流行病学依据。     

变形杆菌诊断血清试制研究——Ⅰ、单价血清及多价血清的试制

为了满足医疗,预防、食品检验,细菌学教学,科研等部门鉴定普通及奇异变形杆菌的需要,在有关的专业会议上分工由我所进行普通及奇异变形杆菌分型血清的试制工作。经过数年的试制,作出了绝大部份的O血清及H血清。现将其试制过程,存在问题,试应用的情况,新发现的O抗原及H抗原等分别总结,以供各兄弟所及有关医疗,预防部门参考。     

霍乱病与其它弧菌有关的腹泻(续二)

<正> A 非OI群霍乱弧菌 a 临床特微 这些细菌同胃肠疾病的暴发和散发有关,但临床上没有什么确切的特征。就散发病例来讲,从一个病例的分离的菌株不能确定它经常引起同种疾病。报导的各次暴发其其临床特征各异,可能反映出各个致病菌株的不同特性。一般病人有腹泻、恶心和呕吐,有些人有发烧或腹部痉挛,少数病人大便中有血和粘液。通常这种疾病持续不超过3天。 在孟加拉进行的广泛研究中,从病人分离的菌株如能产生类霍乱毒素肠毒素,该病人症状较重,分离出无毒性菌株的病人症状较轻。在这两类病人身上都证实了对同型菌株血清凝集效价明显升高,而且分离出毒性菌株的病人抗毒素效价也明显升高。 曾有报告说虚弱或免疫抑制的人胃肠外     

细菌O抗原基因簇的研究进展

O抗原是革兰阴性菌外膜的重要组分。它是由多糖的重复单位和一系列寡糖重复单位所组成,即O抗原基本单位,一般包括2～6个糖基。因为多糖中糖的性质不同,连接次序,连接位点都有差异,因而O抗原变异很大。染色体中有关O抗原合成的基因丛集成簇。这些基因簇的变异很大,也反映了O抗原结构的多样性。O抗原的表达受到各种因素的调节。     

2006-2008年深圳市食源性病例和外环境的副溶血性弧菌分离株分型特征比较

[目的]比较深圳市食源性病例和外环境中分离的副溶血性弧菌在血清分布、毒力基因携带情况和分子分型方面的特征.[方法]血清凝集法检测菌株血清型,多重PCR检测毒力基因tdh和trh基因携带情况,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析基因分型特征.[结果]98株食源性病例分离株的主要血清型为O3∶K6(40.8%)、O1∶KUT(7...     

一例正常献血员Am家系

正常献血员张××起初定血型为O型。但他的红细胞与O型血清发生凝集,与抗A血清在37℃离心观察不显凝集,而在18℃放15分钟离心显微镜下观察有极弱凝集,与抗B血清不凝集。因此初步考虑是A亚型。对他的家系进一步检查分析如下:     

R和S系列白细胞抗原的HLA相应命名

HLA系统是人群一种具有高度多态性的遗传结构,在不同人种间有明显差异。某一人种中常见的HLA抗原,在其它人种中可能少见或甚至完全缺失。在试验与血清供者同一人种时被认为是使用单价的(operationally monospecific)HLA分型血清,在其它人种中可能出现额外反应。因此鉴定HLA抗原最好是采自同一人种的抗血清。上海市白细胞分型协作组曾用上海地区经产妇细胞毒血清检出11个白细胞抗原。这些抗原分属于两个分离子系列(segregant series),由于当时缺乏参考血清,被临时命名为R系列和S系列。R系列包括7个抗原:R1、R2.2、R3、R4、R7、R8和R11.2。S系列包括4个抗原:S5、S6、S10和S12。本文报道将R和S系列抗原的分型血清与法、英、日等国实验室提供的HLA分型血清作平行试验,通过血清聚类分析(clustering analysis)和群体抗原相关分析(correlation analysis)确定R和S系列5个抗原的HLA相应命名。     

副溶血性弧菌肠细菌基因间共有重复序列-PCR分子分型和耐药性、血清型研究

目的对副溶血性弧菌进行ERIC-PCR分子分型、耐药性和血清型相关性研究。方法肠细菌基因间共有重复序列（ERIC）为引物,对40株菌株基因组DNA进行扩增,得到DNA指纹图谱,并利用SPSS13.0统计软件对DNA扩增图谱进行分析,做出聚类图从而分型,并与菌株血清型、耐药性比较分析。结果40株菌用ERIC-PCR分为5个型,分辨力指数为（DI）为0.5;血清分型分为4个型;对8种抗生素中的萘啶酸、头孢噻亏、头孢西丁出现了不同程度的耐药。耐药菌株均出现在ERIC-PCR方法分型A型和血清分型O3型中。结论研究显示ERIC-PCR方法可以用于该菌分型分析,具有较好的分型能力。血清分型与ERIC-PCR方法分型一致。通过ERIC-PCR分型的树状图和血清分型结果推断,血清型O3群菌株很可能起源于血清型O1群菌株,血清型O3群和O1群密切相关。     

一株有争议的志贺氏菌的抗原分析与血清型检定

对中国医学细菌保藏管理中心所存,1935年国外分离,国内检定结果不一的一株志贺氏菌51331进行了详细的抗原分析,确定为福氏志贺氏菌X变种。 该菌能与国内外出品的福氏3型特异血清发生交叉凝集的原因,主要是由于上述诊断用血清中交叉反应性抗体尚未吸收纯净,至少没用类似51331这样的菌株参与成品血清检定的缘故。因此,建议在生产福氏3型特异血清时,应用本菌种参与检定以提高制品质量。本菌种作为诊断血清检定时用的菌种是十分有价值的。     

广西地区空肠弯曲菌的血清型

本文以加拿大Lior博士提供的标准抗血清,采用快速玻片凝集法对广西地区人、畜、禽所携带的38株空肠/结肠弯曲菌进行血清学分型鉴定,结果(见表1)是人源菌2株均为血清第8型;鸡源菌16株分别为血清第1、4、8、11、17、21型,不能分型3株;鸭源菌11株,分别为血清第5、8、20、21、46、53型,不能分型2株;豚鼠源菌7株,分别为血清第4、6、7,8、21型;鸽子源菌2株分别为血清第5型和21型,各源菌株中,与人源血清型相同(第8型)的鸡源株占25％;鸭源株占18.2％;豚鼠源株占42.8％,以上研究说明这些动物与人感染空肠/结肠弯曲菌有密切关系,家禽是人感染的重要贮存宿主之一。     

付伤寒丙及变形杆菌OX_K两种诊断菌液的自家凝集问题

付伤寒丙及变形杆菌OX_K诊断菌液常易发生自家凝集现象,严重时可造成停产。为解决这两种菌液的质量问题,曾向兄弟所索取生产菌株,连同我所保存的菌株及部份地方性猪霍乱沙门氏菌株一并进行检查,希望能找出较好的菌株用于生产。并对杀菌剂浓度、杀菌剂种类与发生自凝现象的关系等问题进行了初步观察。     

辽宁省食源性副溶血性弧菌PFGE分子分型及血清型、耐药谱

目的分析辽宁省副溶血性弧菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)型别及血清型、耐药谱,探讨辽宁省副溶血性弧菌污染的同源性,为食源性疾病溯源和预警提供基础。方法对50株从辽宁省2015年食源性疾病和食品中分离的副溶血性弧菌进行PFGE分子分型、血清学分型、药物敏感试验,采用BioNumerics version 6.6软件进行分析,比较同源性。结果 50株副溶血性弧菌共分为19个血清型,食源性疾病分离株分为5个血清群,主要的血清型为O3群,其次为O1群;食品分离株分为9个血清群,主要的血清型为O3群,其次为O1和O4群。50株副溶血性弧菌对15种抗生素的耐药试验,对头孢唑啉耐药率最高达72%。50株副溶血性弧菌共分为4种PFGE优势带型,相似度为90.8%~100.0%。结论辽宁省食源性副溶血性弧的血清型以O3群和O1群为主,致病菌流行株血清型为O3:K6;食品中分离菌株血清型和PFGE带型非常分散,提示这些多为遗传不相关菌株。PFGE图谱可看出,绝大部分相同血清型菌株的PFGE带型相似度很高,O3与O1血清型菌株有高度同源性密切相关,耐药菌株间PFGE带型相似度很高,均具有高度同源性。相比2014年的耐药情况,对头孢唑啉耐药率显著增高。另外,少数菌株出现多重耐药,耐药情况不容乐观。     

非O1群、非O139群霍乱弧菌致败血症1例报道

对襄阳市中心医院分离的2株疑似霍乱弧菌进行鉴定及药物敏感性试验。利用MicroScan WalkAway 40鉴定仪进行生化鉴定及药物敏感性试验,玻片凝集法确定血清型别,PCR扩增16SrRNA保守区基因并将产物进行测序分析。此2株疑似霍乱菌株O1群及O139群霍乱弧菌诊断血清均不凝集,16SrRNA扩增产物测序Blast比对分析与数据库中霍乱弧菌相似性达100％,药敏结果显示对氨苄西林、庆大霉素、环丙沙星、阿米卡星、氯霉素、复方新诺明（SXT）、四环素均敏感。该病例为非O1、非O139群霍乱弧菌导致的败血症,可能经胃肠道途径传播。     

牦牛肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定和某些生物学特性的研究

从西藏地区腹泻死亡牦牛中分离出 1株肠毒素型大肠杆菌并对其某些生物学特性进行了研究。结果表明 ,该菌在形态特征、培养特性和生化特性方面与大肠杆菌基本一致。血清学试验表明 ,该菌株O抗原属O14 8,K88,K99,987P单因子血清均不能凝集本菌 ;该菌不产生溶血素 ;对绵羊、豚鼠、马、鸡的红细胞表现强凝集 ,而K88,K99,987P抗血清均不能抑制其对绵羊、豚鼠、马、鸡红细胞的凝集 ;该菌株在营养肉汤中经 37℃ ,4 8h培养表达菌毛 ;肌肉接种兔、腹腔接种小白鼠均具有高致病性 ;乳鼠胃内投服试验和兔回肠结扎试验证明 ,该菌能产生热稳定肠毒素和热敏性肠毒素 ;分离菌株对恩诺沙星、环丙沙星、阿莫西林、羧苄青霉素等高度敏感 ,而对链霉素、四环素、土霉素等表现耐药性。