脑炎原虫豚鼠感染模型的实验研究

[目的]建立脑炎原虫感染豚鼠模型,分析白化豚鼠和花色豚鼠在脑炎原虫感染动物模型建立中的异同点。[方法]动物分四组:花色组、白化组、花色应用氢化可的松组、白化应用氢化可的松组,16只/组。发病兔粪便中收集纯化脑炎原虫虫体,灌胃法接种豚鼠,染虫后不同时间点粪便捡虫观察豚鼠染虫率。造模后30天心脏采血,测免疫球蛋白含量,HE染色观察豚鼠主要脏器病变,纯化后虫体行电镜超微结构观察。[结果]接种之后7天内,未用氢化可的松的两组均未检出原虫,用氢化可的松的两组中,白化豚鼠最先在第3天检出,于第6天全部检出,而花色豚鼠最先在第4天检出,在…     

类鼻疽病动物模型的研究进展

类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,类鼻疽菌)是一种革兰阴性短杆菌,现被美国疾病预防控制中心提升为I类致病菌严加防范。类鼻疽菌直接从环境感染人类和多种动物,且抗生素耐药严重,一旦引起败血症会有很高的死亡率。为了更好地指导类鼻疽病的临床治疗和研究类鼻疽菌的致病机制,建立类鼻疽病动物模型是必不可少的环节。笔者对现有的类鼻疽病动物模型从易感动物、感染途径、动物品系和模型评价几个方面进行总结阐述。     

类鼻疽伯克霍尔德致死因子

类鼻疽伯克霍尔德菌是一种胞内感染的革兰阴性杆菌,所导致的疾病称为类鼻疽。迄今为止,还没有针对类鼻疽的疫苗。其致死因子1(BLF1)作为类鼻疽伯克霍尔德菌的重要致病因子,能抑制宿主细胞翻译起始因子e IF4A的解旋酶活性,从而抑制蛋白质合成。BLF1作为e IF4A的抑制剂,有望成为靶向抗肿瘤药物。同时,BLF1具有很强的免疫原性,对其进行结构改造后,可成为类鼻疽疫苗的候选抗原。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌诱导SKH-1无毛小鼠菌血症模型

目的建立SKH-1无毛小鼠感染MRSA致菌血症模型的方法及其评价体系。方法 62只SPF级SKH-1无毛小鼠随机分成PBS对照组、低剂量模型组、高剂量模型组及给药组,尾静脉注射无菌PBS至对照组小鼠体内,其余各组小鼠尾静脉注射相应剂量MRSA(ST-239)菌悬液,从体重、死亡率、血常规、血液细菌浓度、主要器官荷菌量及病理改变等方面对模型进行评价,并用抗生素替考拉宁对模型进行检验。结果各组感染小鼠体重均下降明显,血常规指标改变明显;高剂量组死亡率高,血液中细菌浓度较高,肝、肾等多组织器官播散严重,皮肤可见多发性脓肿灶;使用替考拉宁能显著降低小鼠死亡率,减轻主要器官的损伤程度。结论应用MRSA菌株可成功诱导建立SKH-1无毛小鼠菌血症模型,模型具有病理特征明显及观察简便的优点,为相关药物评价研究提供了一个理想的动物模型。     

悉生豚鼠体内复方双歧杆菌制剂对福氏志贺氏菌的作用

复方双歧杆菌制剂中,双歧杆菌(Bif.bifidum),乳酸杆菌(L.acidophilus),粪链球菌(Str.faecalis)三种菌都是人和动物肠道正常菌群之一,要研究它们和肠道致病菌之间的关系,在普通动物体内是无法观察到.在国内我们首次应用悉生豚鼠进行复方双歧杆菌制剂对福氏志贺氏菌作用的研究,发现在悉生豚鼠体内复方双歧杆菌制剂对感染后的豚鼠有较明显的保护作用,保护率为75%,实验组未获得保护的豚鼠死亡时间较对照组延长6～10天,而对照组豚鼠在感染后24～48小时全部死亡,解剖后在肠道分泌物中分离出福氏志贺氏菌.本实验证明:复方双歧杆菌制剂是治疗腹泻较好的生物制剂,尤其对因菌群失调而引起的腹泻更是理想的治疗方法。     

新型隐球菌合并鼻疽奴卡菌皮肤感染1例报道

<正>皮肤隐球菌感染在近年来逐渐受到重视,占隐球菌感染的10%~15%。长期使用糖皮质激素是皮肤隐球菌的主要病因之一[1]。但同时合并鼻疽奴卡菌感染少见。现报道1例新型隐球菌合并鼻疽奴卡菌皮肤感染的病例。经过氟康唑联合复方磺胺甲噁唑抗感染治疗,病情好转,出院后继续按医嘱巩固治疗。1资料与方法患者6个月前无明显诱因左足背起红肿结节,伴疼痛、低热38度,当地医院行脓肿切开引流术,真菌培养"阳性",口服伏立康唑治疗10d,红肿消     

紫色色杆菌感染临床特症及耐药谱分析

目的 研究紫色色杆菌感染的临床特征与病原体的生物学特性以及耐药分析,以提高临床对紫色色杆菌感染的诊断和治疗.方法 将患者的血液、浓液标本进行培养,分离并把分离获得的菌株在VITEK-32微生物鉴定仪中进行种的鉴定及药物敏感性试验,用小白鼠进行该病原体的毒力试验.结果 12种抗菌药物中舒普深、亚胺培南、特治星（派拉西林/他唑巴坦）、马斯平（头孢吡肟）及喹喏酮类抗菌药物对紫色色杆菌均有较强的抗菌作用,而氨苄西林、头孢唑啉、庆大霉素、妥布霉素、氨曲南、头孢曲松和头孢他啶等抗菌药物抗菌效果不佳.毒力试验结果表明该菌有较强毒力.结论 紫色色杆菌是一种革兰阴性杆菌,毒力强.可引起感染部位脓肿,并可侵入体内各脏器及血液引发脏器的脓肿,脓毒血症是该菌感染的临床特症,重者可引起各脏器功能衰退,中毒性休克甚至死亡.紫色色杆菌感染病情急,进展快,死亡率高,因此早发现,及早有效性治疗极为重要.     

感染华支睾吸虫大鼠肠道菌群的实验研究

目的 观察华支睾吸虫感染对大鼠肠道菌群的影响.方法 建立华支睾吸虫感染大鼠模型,分别在造模后48 h、18d和35 d,取肠内容物进行乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌和肠杆菌的培养及定量分析.结果 与对照组相比,在感染后48 h,大鼠肠道乳酸杆菌和双歧杆菌数量减少(P＜0.05),肠球菌和肠杆菌数量略有增加,但差异无统计学意义(P＞0.05);在感染后18 d(童虫期),乳酸杆菌、双歧杆菌数量进一步减少(P＜0.01),肠杆菌和肠球菌数量明显增加(P＜0.01);在感染后35 d(成虫期),四种肠道菌与童虫期的变化基本一致.结论 华支睾吸虫感染可致大鼠肠道菌群发生失调,其中益生菌减少,致病菌增多,尤以童虫期、成虫期较重.     

MRSA气溶胶诱导烫伤SKH-1无毛小鼠皮肤感染合并肺炎模型

目的探讨烫伤条件下,建立MRSA气溶胶致SKH-1无毛小鼠皮肤感染合并肺炎模型的方法及其评价指标。方法 48只SKH-1无毛小鼠,随机分成PBS对照组,单纯感染组和烫伤合并感染组。合并感染组小鼠皮肤烫伤后,MRSA（ST-239）气溶胶呼吸道感染,采用体重、血常规、菌血症率、皮肤和脏器荷菌量、病理组织学变化和分子生物学等指标对模型进行综合评价。结果与其他两组相比,合并感染组小鼠第3天体重下降明显;白细胞数显著增多;菌血症率达100%;皮肤和肺荷菌量较高,分别达108CFU/g和106CFU/g;镜下观察皮肤和肺炎症病变明显;免疫组化结果显示皮肤组织内CD138呈阳性表达;multi-PCR测定感染组织内nuc和mecA基因均为阳性。结论 SKH-1无毛小鼠烫伤再辅以MRSA气雾攻击的方式,可成功建立能够模拟临床上烧烫伤患者继发MRSA肺炎的动物模型,此模型对于抗MRSA药物药效评价研究具有重要临床应用价值。     

慢性根尖周炎的细菌学研究

本文对14例慢性根尖周炎患者16个感染根管细菌培养检查的结果发现:以厌氧菌为优势的混合菌感染是慢性根尖周炎感染根管细菌学的主要特点。穿髓根管由于敞开的髓腔,同一根管内4—9种细菌混合感染者占87.5％;未穿髓的感染根管2—3种细菌混合感染的占62.5％,4种以上细菌混合感染的占37.5％。优势的感染菌包括产黑色素类杆菌、口腔类杆菌、口类杆菌、具核梭杆菌、干酪乳杆菌、内氏放线菌等6种厌氧菌;血液链球菌、变链球菌和酿脓链球菌为最常见的兼性厌氧菌。本文指出口腔正常菌群是感染根管的机会病原菌。     

诃子水提物对泛耐药鲍曼不动杆菌的抑菌作用

摘要：目的 研究诃子水提物对泛耐药鲍曼不动杆菌（PDR-Ab）的抑菌作用。方法 采用二倍稀释法测定诃子水提物对临床分离的泛耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。小鼠腹腔注射上述PDR-Ab,建立急性肺炎模型。于造模前4天至造模后2天对小鼠连续灌胃给药,考察小鼠的死亡率、血液白细胞计数及肺组织病理变化。结果 体外实验表明诃子水提物能抑制PDR-Ab在液体培养基中的生长,MIC和MBC分别为0.75 mg/mL和12 mg/mL。体内实验表明,剂量为150 mg/kg诃子水提物灌胃给药能明显降低PDR-Ab感染性急性肺炎小鼠的死亡率,使血液白细胞计数较快恢复,肺组织病理改善明显。结论 诃子水提物对PDR-Ab在体内外均具有明显的抑菌作用,有望用于PDR-Ab感染性疾病的治疗。     

甲硝哒唑与庆大霉素联合治疗厌氧菌与兼性菌混合感染的动物实验研究

厌氧菌与兼性菌的混合感染及其治疗是目前临床上感染性疾病和抗生素治疗研究领域内的重要问题之一,本文对小鼠混合感染的动物模型甲硝哒唑与庆大霉素治疗结果显示:当脆弱类杆菌10~9CFU/ml大肠杆菌10~8CFU/ml混合感染小鼠6h后,单用甲硝哒唑治疗死亡率为9/10,脓肿率为1/10;单用庆大霉素组死亡率2/10,脓肿率为10/10;两药联用死亡率为2/10,无脓肿发生。两药联用的治疗比较:即时组基本同6h组,而12h开始治疗组死亡率达6/10。脓肿率4/6。提示应及早联合用药以阻断细菌的协同致病作用,控制感染。     

伪结核棒状杆菌pld基因无痕缺失株构建及其生物学特性及致病性研究

伪结核棒状杆菌是一种可以感染多种动物和人的兼性胞内寄生病原,主要引起被感染动物慢性化脓性炎症反应。[目的]为进一步评价磷脂酶D基因(pld)在伪结核棒状杆菌感染致病中的作用。[方法]本研究采用同源重组技术,在不引入外源基因情况下,构建伪结核棒状杆菌pld无痕缺失株。通过比较pld缺失株和野生株的菌落形态及生长曲线、体外对巨噬细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放及其在胞内的繁殖情况以及体内感染小鼠致死率及促炎细胞因子分泌水平,研究pld与该病原感染致病之间的关系。[结果]无痕缺失pld对伪结核棒状杆菌的菌落形态及生长无明显影响。与野生株ATCC 19410和XH02相比,ATCC 19410Δpld和XH02Δpld失去了与马红球菌ATCC 6939的协同溶血功能,所感染巨噬细胞的LDH释放水平显著下降,胞内细菌数量显著降低;体内试验发现ATCC 19410Δpld对小鼠的致死率、肝脏和脾脏载菌量以及腹水及脏器促炎细胞因子水平均低于ATCC 19410。[结论]成功构建了伪结核棒状杆菌pld无痕缺失株。证实pld在该病原体外感染引发巨噬细胞死亡以及体内感染小鼠致病中具有重要作用。     

肾移植术后体表微生物群的变化与感染的监测

本文对肾移植术后病人体表微生物群的变化进行了连续动态的观察。正常人体表微生物群主要为革兰阳性球菌、阴性球菌和阳性杆菌,感染发生前这些微生物群发生了不同程度的变化。24个病例中有22人发生了体表革兰阴性杆菌定植,其中有19人在革兰阴性杆菌定植后的2天～3周后并发了不同程度的泌尿道、肺部、伤口、血液和其它体液的同种细菌感染,并发严重感染的7例病人中有6例表现为全身性革兰阴性杆菌定植。绿脓杆菌、大肠杆菌、不动杆菌和沙雷氏菌是常在体表定植的致病菌。作者认为:皮肤正常菌群的改变和病原性革兰阴性杆菌定植是监测肾移植术后感染,尤其是严重感染的有效手段。病人的口咽部和腹股沟等处是引起感染的革兰阴性杆菌持续稳定的贮菌所,全身性同种革兰阴性杆菌定植是严重感染的征象。     

奶犊牛直肠主要正常菌群的检测及其定植规律

采用稀释滴种法,对奶犊牛直肠内容物8种主要正常菌群（双歧杆菌、乳杆菌、真杆菌、类杆菌、大肠杆菌、消化球菌、梭菌、肠球菌）进行定性和定量分析,将所得结果进行统计学处理,得到奶犊牛直肠八种主要正常菌群的对数均值。犊牛出生6h后可检测到大肠菌、类杆菌和梭菌;12h后,8种菌群全部检测出来,并以大肠杆菌、类杆菌和梭菌为优势菌。随着厌氧菌大量增殖,需氧菌和兼性厌菌逐渐下降,1周后形成以乳杆菌、双歧杆菌为优势菌群的微生态区系。8种细菌的数量随饲草采食量增加呈下降趋势。断奶后1个月完成定植,此时直肠的优势菌是双枝杆菌、真杆菌,为7－8（logCFU/g),然后依次为乳杆菌、梭菌7(logCFU/g),类杆菌、大肠杆菌、消化球菌6(logCFU/g) ,肠球菌5（logCFU/g)。     

双歧三联活菌胶囊对结直肠癌术后炎症反应及 肠道微生态的影响

目的探讨围手术期补充双歧三联活菌胶囊对结直肠癌术后炎症反应及肠道微生态的影响。方法选取拟行结直肠癌根治术的患者70例,随机分为观察组和对照组。两组患者均予以根治性结直肠癌术,对照组术前予以常规禁食、传统肠道准备,术后予以围手术期常规治疗,并予以等氮量等热量的营养支持。观察组在对照组基础上术前5d加用双歧三联活菌胶囊630mg/次,3次/d,温水口服,替代术前肠道抗生素的使用,术后24h继续使用双歧三联活菌胶囊至术后1周,剂量和方法同术前。评估两组患者入院时及术后1周肠道菌群(双歧杆菌、乳杆菌、大肠埃希菌和粪肠球菌)数量和血清炎症因子[超敏C反应蛋白(hs-CRP)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平的变化,并比较感染并发症的发生率。结果术后1周,观察组双歧杆菌、乳杆菌和肠球菌数量较入院时均有不同程度的上升(P0.05),大肠埃希菌数量变化不明显(P0.05);对照组双歧杆菌、乳杆菌和肠球菌数量较入院时均有不同程度的下降(P0.05),大肠埃希菌数量较入院时有不同程度上升(P0.05)。术后1周,观察组双歧杆菌、乳杆菌和肠球菌数量较对照组更多,大肠埃希菌数量较对照组更少(P0.05)。同时两组血清hs-CRP和TNF-α水平均较入院时均有不同程度的上升(P0.05或P0.01),其上升幅度观察组低于对照组(P0.05)。在感染并发症发生率上观察组较对照组更低(χ~2=4.20,P0.05)。结论围手术期补充双歧三联活菌胶囊不仅能纠正结直肠癌患者术后肠道微生态失调,提高肠道内乳杆菌和双歧杆菌的数量,重建肠道菌群平衡,还能有效减轻患者术后炎症反应,减少术后感染并发症的发生。     

伏立康唑在马尔尼菲篮状菌感染中的应用进展

<正>马尔尼菲篮状菌感染是最常见的艾滋病相关机会性感染之一,是东南亚国家及我国南部省份艾滋病相关死亡的主要原因,若不及时诊治,其死亡率高达100%^[1]。目前对于马尔尼菲篮状菌感染的治疗首选为两性霉素B^[2],但其副作用大、不良反应多,导致许多患者都难以耐受,伏立康唑已成为其替代治疗的首选。本文对伏立康唑在马尔尼菲篮状菌感染中的应用进行综述。     

蜡样芽胞杆菌在双歧杆菌四联活菌片治疗小鼠腹泻中的作用研究

目的研究双歧杆菌四联活菌片中的蜡样芽胞杆菌对小鼠腹泻治疗作用的影响。方法将SPF小鼠采用抗生素联合伤寒沙门菌和志贺菌诱导建立腹泻模型,取112只造模成功后的小鼠随机分为7组,其中三组分别喂养3种不同剂量的四联活菌片,三组分别喂养3种不同剂量的不含蜡样芽胞杆菌的三联活菌片,余下一组为对照组灌胃生理盐水。比较各组小鼠腹泻的治愈时间,测定粪便菌群、结肠组织耗氧能力及氧化还原电势、肠内sIgA含量及脾脏指数变化。结果相同剂量条件下,含蜡样芽胞杆菌的四联活菌片治愈腹泻时间比三联活菌片缩短48~72h。治疗48h后,四联活菌片组肠内sIgA水平明显增加,与三联活菌片组相比差异有统计学意义(t=5.5783,P=0.0002);治疗结束后,四联活菌片组的脾脏指数也显著高于三联活菌片组(t=18.8648,P=0.0001)。结论含蜡样芽胞杆菌的四联活菌片对小鼠腹泻的治疗及肠道菌群的恢复作用比三联活菌片效果更佳,能显著促进腹泻小鼠肠黏膜局部免疫力的提高。     

流式细胞术检测胞内重组耻垢分枝杆菌的活力研究

目的建立一种快速检测胞内分枝杆菌活力的方法。方法将一定量培养至对数生长期的含pMV-eis的重组耻垢分枝杆菌感染U937巨噬细胞,以含空质粒的耻垢分枝杆菌为对照,吞噬作用2 h后洗去胞外细菌,再分别培养4、12、24和48 h后收集细胞并裂解之。获得的胞内细菌用FDA荧光染料染色后用流式细胞仪检测死亡率,并与平板菌落计数法进行比较。结果流式细胞仪检测出感染12 h后重组耻垢分枝杆菌胞内死亡率较对照组均有显著下降（P〈0.05）,流式细胞仪检测法与平板菌落计数法相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论流式细胞术与传统的平板计数法相比具有快速、敏感、方便的特点,可用于分枝杆菌活菌快速检测。     

SARS动物模型的研究

利用分离的SARS CoV毒株BJ 0 1,经滴鼻等途径感染大鼠、豚鼠、黑线仓鼠、白化仓鼠和雏鸡等 5个种属的动物 ,筛选对SARS易感的小动物。在此基础上 ,选择食蟹猴和恒河猴进行SARS的人工感染实验 ,评价其作为SARS动物模型的可能性。结果表明 ,大鼠、豚鼠、黑线仓鼠、白化仓鼠和雏鸡等动物对SARS均不易感 ,感染后未观察到任何的临床及病理学改变 ,不过从感染 2周后的大鼠和豚鼠的肺和咽等组织样本中检测到了的特异的核酸 ,提示SARS CoV能够在这两种动物的体内复制。从感染猴子的分泌物和脏器中分离出了病毒 ,证明SARS CoV也能够在猴子体内复制。临床和病理组织学检查结果显示 ,SARS病毒接种食蟹猴和恒河猴后 ,可以引起所有实验猴发生间质性肺炎 ,其病理学改变与人类感染SARS病毒后肺部病变近似 ,但病变的严重程度比较人类的轻得多 ,除此之外无任何其它的明显的临床表现及组织病理学改变 ,按照动物模型的指标判断食蟹猴和恒河猴并不是SARS的理想动物模型 ,不过在目前尚没有更理想的动物模型情况下 ,以间质性肺炎为病理学检查指标 ,恒河猴和食蟹猴可以作为评价抗SARS药物和疫苗的模型动物