无细胞百日咳菌苗的纯制和特性

<正> 引言 百日咳菌苗传统的形态,由杀死的百日咳杆菌组成,亦即它是全细胞菌苗。这种菌苗包含有对促进保护性应答不需要的成份,而且这些成份可能对副反应起作用。在日本,自1973年一直从事由百日咳杆菌分离其有效因子,并尽可能多的除去不需要的成份。一些保护性抗原已在百日咳杆菌培养物的上清液中被证实,并曾尝试发展一种由一或两种这些抗原组成的菌苗。含有两种主要保护性抗原即由百日咳杆菌培养物上清液中分离出的百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA)的精制百日咳菌苗(无细胞百日咳菌苗),自1981年已应用于日本.     

表达百日咳杆菌丝状血凝素的活aroA都柏林沙门氏菌重组菌株的抗体应答

<正>一种已经证实而且并不昂贵的百日咳菌苗是我们最为期望的。特别是对不发达国家。由毒性或潜在性毒性成份诸如内毒素、皮肤坏死毒素、百日咳毒素、腺甙酸环化酶和气管细胞毒素等中分离出具有保护性但无毒性的百日咳菌抗原如象丝状血凝素(FHA),已经使得含有大量脱毒的百日咳毒素和FHA的新型亚单位菌苗有了发展。FHA是百日咳杆菌极大的一种表面蛋白质,它对小鼠鼻腔内攻击具有保护性免疫力。在最近的一次现场试验中,分别     

百日咳杆菌69KD外膜蛋白的研究进展

<正>百日咳是由百日咳杆菌引起的一种急性呼吸道传染病,严重威胁婴幼儿健康,对它的控制迄今主要依赖于菌苗预防。目前认为,百日咳杆菌有许多生活学活性成份,包括白细胞增多促进因子(LPF)[又称百日咳毒素(PT)]、丝状血凝素(FHA)、腺苷酸环化酶(AC)、外膜蛋白、脂多糖、不耐热毒素等。其中LPF、FHA、69KD外膜蛋白作为保护性抗原成份,是目前国内外学者研究的热点。     

制造化学菌苗的方法学

<正>化学菌苗是用病原微生物的保护性抗原制备的免疫制品。保护性抗原是诱导对抗病原菌某种致病作用的特异性抗体的抗原物质。保护性抗原通常具有聚合物性质,在机能上是病原菌的致病性因子,宿主在进化中产生对此类因子的特异性免疫应答力。应强调指出并非所有的致病性因子都能视为保护性抗原,虽然后者必定是一种致病性因子。用保护性抗原制造菌苗是在特异性预防传染病方面最合理和有前途的趋向之一。与颗粒化学菌苗不同,化学菌苗不含杂质,并且容易检定和控制。     

无细胞百日咳菌苗的效力试验

<正>近十年来,已研究开发了若干种无细胞百日咳菌苗,并有望取代当今使用中的全细胞菌苗。百日咳菌苗有多种抗原,如百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、菌毛混合物(Fim2+3)及69KDa外膜蛋白是无细胞菌苗之所需组分。最近在美国开展了旨在比较全细胞和13种无细胞菌苗免疫原性和反应原生力2期临床试验。这些无细胞菌苗或只含有PT,或由PT与上述的1种或1种以上的抗原组合而成,并已通过化学处理或对其菌体作遗传学修饰消除了毒注。进入2期临床试验的无细胞菌苗,不     

百日咳杆菌去内毒素及保护性抗原的纯化

内毒素(Endotoxin,简称ET)是百日咳全菌苗(Bordetellapertussis vaccine)产生副作用的主要毒素之一,且不易除去。现有的分离方法,如蔗糖密度梯度离心法,较繁琐,成本高。本文采用Sepha-cryl S-300凝胶层折法可以简便有效的去除大部分内毒素。初步毒素试验结果表明:已达到日本生物制品规格的要求。两种保护性抗原FHA和LPF-HA也得到进一步分离纯化,为今后研制高效的百日咳组分菌苗提供了实验条件。     

百日咳毒素的生物学活性

<正> 1.前言1947年Greenberg和Fleming与1948年Parfentjer和Goodline的观察研究,标志着百日咳菌苗生物学活性研究的开始。Green-berg和Fleming发现,百日咳菌苗能增强抗原产生抗体;而Parfentjer和Goodline报导百日咳菌苗处理过的小鼠对组织胺的敏感性增强。不久,又发现菌苗可增进小鼠对过敏症、五羟色胺、组织胺和五羟色胺的结合物、内毒素以及许多其它休克增强因子的敏     

百日咳杆菌外膜蛋白的血清抗体反应

<正>寻找一种有效的去菌体百日咳菌苗的研究焦点已集中到百日咳杆菌各种抗原组份的分离和提纯,并进一步在动物模型中作保护力试验。最常用的是小鼠自动保护力试验(AMP)。 总的说来,研究的最深入的抗原物质是外膜蛋白(OMPs),特别是丝状血凝素(FHA)和白细胞增生促进因子(LPF)。尽管AMP试验报告中抗原的活性各有不同,但这些抗原在小鼠的免疫原性方面的资料在不断积累。某些外膜蛋白制剂有显著的保护性已有报告,如FHA在AMP试验中具有保护活性,关于这一点Munoz等仍有怀疑。据报导自然状态的精制LPF对小鼠有很大毒性,且在AMP试验中无保护力,但     

用合成肽标定百日咳杆菌毒素S_1亚单位的抗原位置

<正>最近已报道了百日咳毒素基因的整个序列及氨基末端序列,一级结构的明确使合或携带自然毒素抗原决定簇的肽链成为可能。短肽的抗体与天然蛋白常常结合得很好,因为这种蛋白提供的短肽序列是暴露在分子表面的。百日咳毒素由5个不同的亚单位组成,S_1—S_5。我们和其它学者已经发现,具有酶活性的亚单位S_1是免疫显性的。本研究用接种过全细胞百日咳菌苗或只含百日咳毒素菌苗的人和动物血清,对包含S_1亚单位抗原决定簇的5种多肽序列的鉴定及合成作了阐述。     

新无细胞百日咳菌苗的展望

<正>发展一种与目前使用的全菌体百日咳菌苗有根本区别的改进的新百日咳菌苗,临床试验要证明待选的菌苗必须是安全和有效的。由于我们对百日咳感染或百日咳菌苗接种后产生的保护性免疫基础尚不知道,所以,不可能用特异的抗体应答作为直接检测免疫力的指标。但是,我们不能不证明待选菌苗必须保护易感人群免得疾病。肯定的     

脑膜炎球菌和淋球菌的现状

<正>1881年,Pasteur使用二种有效的菌苗防止鸡霍乱和炭疽。随后的一个世纪,已经发展了大量的用于人类细菌性疾病的菌苗;而且有一些如白喉和破伤风类毒素以及百日咳菌苗特别成功。这并不否认一种更为安全的百日咳菌苗是极其需要的。总之,当我们考虑解决细菌性菌苗发展中的重大问题时,还必须承认有大量的遗留问题需解决。     

日本百日咳免疫接种进展

<正>日本是成功地采用无细胞百日咳菌苗进行基础和加强免疫的唯一国家。那里的百日咳发病数已经明显下降。本文报道采用无细胞百日咳菌苗前后的百日咳流行病学,接种全细胞或无细胞百日咳菌苗后的临床病徵及今后日本百日咳免疫接种的方针。     

鲍特氏百日咳杆菌纯组分在测试百日咳菌苗毒性的体重增加试验中的作用

<正>大多数通用的百日咳菌苗是灭活的全细胞制剂,这种制剂中的百日咳杆菌已通过加热或用适当的化学试剂处理过。所以这些菌苗含有许多百日咳杆菌的组分,如百日咳毒素(PT)、脂多糖(LPS)和丝状血凝素(FHA)。百日咳毒素是一种具有广泛生物活性的物质,它曾被命以不同的名称:淋巴细胞增多促进因子、胰岛激活蛋白、组氨敏感因子、百日咳原及百日咳毒素。     

美国卫生研究院食品药品管理署生物制品局细菌部主任罗宾斯教授在京学术讲座综述(续一)

<正>百日咳菌苗 百日咳菌苗是第二次世界大战后发展起来的一种用福马林杀菌的全菌体菌苗。在美国使用实践中,用小鼠作保护力试验,用凝集反应测定免疫小孩中的凝集抗体;但是菌苗如何产生保护?百日咳又是如何致病?免疫成分是什么?如何说明人得到免疫?人体免疫情况是血清抗体还是分泌抗体?是否是细胞免疫?我们都不太清楚、百日咳菌相的变化有3～4种,第一相菌也是在变动的,在培养基上有时变为3或4相。现在谈几个     

百日咳菌苗规程——总论

<正>已对百日咳(全细胞)菌苗规程的制定及其制定的缘由作了阐述。百日咳菌苗已广泛使用了近三十年,有足够保护力的菌苗在适当程序中被正确使用后,百日咳发病率已明显下降。 但是,有两个因素已引起公共卫生当局的关注,即菌苗的毒性和部分菌苗的无效。全细胞菌苗     

经口免疫毒素源性大肠杆菌的家兔抗肠内攻击做为改进的RITARD模型

<正> 有效的抗毒素源性大肠杆菌口服菌苗的 进展,有赖于识别适应的保护性抗原,这种     

日本三十年来百日咳流行病学和预防接种的经验

<正> 百日咳是儿童中最普遍的一种传染病,发病可达儿童人口的60％。与欧洲和北美的大部份国家一样,日本在过去30年中百日咳的发病率经历了很大的变化。在这一段时间期内为了预防百日咳进行了广泛的预防接种,对菌苗质量和接种方法也作了改进。由于这种原因以及其它医疗与社会经济上的原因,百日咳的病例以一种“升-降”的形式下降,由1947年的152,072例降低到1974年的393例,没有一例死亡(见表Ⅰ)。在这样一种流行病学状况下,由于百日咳菌苗引起的神经毒素反应(如脑损伤)与注射剂量增加有关,从而导致了无休止的关于菌苗使用利弊的讨论,并由医学问题而演变为社会问     

百日咳全细胞菌苗的肾上腺素不应性低血糖活性的测定

<正>发展了一种新的检测方法,用于定量估计百日咳菌苗对肾上腺素诱导的小鼠高血糖的抑制作用。检验的统计学分析,是根据血糖水平的对数转换值估计的。这个方法极为敏感,能检测出0.004ml商品百喉—破伤风—百日咳全细胞菌苗的活性。计算的公共方差能小至0.0034,同时方法具有高度的重复性。在商品菌苗中,其活性具有显著性差异。原百日咳菌苗的活性,用5mM戊二醛于37℃30分钟可灭活,但对40mM甲醛于37℃处理5天却有抵抗力。化学试剂的灭活程度,采用平行线检验法与未处理的对照百日咳菌苗的活性作了计算。     

不同I相百日咳菌株抗原构造的研究

一、不同I相百日咳菌株与不同I相百日咳血清的凝集力有所不同,且具有不同疑集力的I相菌的抗原构造亦不同,惟抗原相同的I相菌的凝集力与吸收能也有不同者。 二、I相菌的L抗原至少有a、b、c三种,a抗原是I相菌共同的抗原。B及c抗原在不同I相菌株内有不同。用B及C因子血清可将我国、苏联、美国、英国、日本不同来源的16株I相百日咳菌分为合有L抗原ac…、ab…、abe…。三大类。 三、不同抗原构造的I相菌株I司同其他I相菌的特性一致。用同一菌株(18323)进行攻击时,对小鼠的免疫力无差别。 四、对文献上认为凝集力不同的I相菌的抗原构造是否一致;用I相血清来制定I相菌的可靠性;菌株间不同的特异抗原在免疫方面的作用与制造百日咳菌苗用的菌种的抗原构造的问题;以及不同及相同抗原构造的I相菌株在流行病学方面的意义等方面进行了讨论。     

炭疽杆菌的致病因子与炭疽的防治

炭疽为一种人、兽共患急性传染病,部分国家将炭疽杆菌作为生物威胁因子进行研究和生产。该菌毒性与质粒PXOl、PXO2有关,PXOl产物包括水肿因子、保护性抗原和致死因子。PXO2是另一编码致病因子,产物荚膜抑制细胞的吞噬,有助病菌繁殖、扩散和建立感染。抗生素与抗炭疽血清联合应用,突变保护性抗原、水肿因子、致死因子联合注射,Al(OH)3佐剂PA疫苗,减毒口服菌苗,PA基因重组活菌苗均可抵抗炭疽杆菌致死性攻击。