对AIDS病毒抗体测定试剂盒的评价

<正> 日本的获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者,至1986年9月达21名(血友病患者11名,男性同性恋者10名),迄今尚未见到由输血引起AIDS患者发生的报告。日赤 血液中心发表了对供血者90万份检品进行筛选的结果,有6名为AIDS病毒抗体阳性。这意味着日本也可因输血引起AIDS病毒的感染,当务之急是紧急采取预防措施。     

大鼠仙台病毒ELISA、间接免疫荧光和免疫印迹三种检测方法比较

目的比较ELISA（enzyme-linked immunosorbent assay）、IFA（immuno-fluorescence assay）和WB（Western blot）三种方法在大鼠仙台病毒血清学检测中的差异。方法仙台病毒蛋白抗原经凝胶电泳分离转移后用于血清学检测的WB方法;使用IFA、ELISA方法对20份无菌大鼠、227份SPF大鼠以及63份清洁级大鼠送检血清样品进行检测,阳性及可疑样品用WB方法进行了验证。结果 20份无菌大鼠血清样品被3种方法检测为仙台病毒抗体阴性;SPF级大鼠样品被IFA方法判定为阴性,1.32%（3/227）被ELISA方法判定为阳性,其中有2/3被WB确认为阳性;ELISA、IFA和WB在清洁级大鼠样品中检出仙台病毒的阳性率分别为为18.12%、11.34%和15.87%。结论三种检测方法灵敏度从高到低依次为ELISA、WB和IFA。WB方法可作为IFA和ELISA难以确定结果的替代方法。     

日本对所有献血者血液进行AIDS、ATL的抗体检查

在日本每年有850万以上的人参加献血,从1986年11月1日起,对全体献血者献血时的血液进行ATL(成人T细胞白血病)和AIDS(获得性免疫缺乏综合症,艾滋病)筛选检查,1986年度国库支付了3.3亿日元。目前正在实施的情况表明,1987年国库将需支出约8亿日元。     

日本血友病患者对药害相继提出诉讼

日本感染艾滋病的血友病患者1989年5月8日向大阪地方法院提出全国第一起追究国家和制药公司法律责任的诉讼。估计继这起之后,6月份将有第二批诉讼。另外,在东京也正在酝酿这类由血液制剂引起艾滋病感染的“新的药害诉讼。” 5月8日向大阪地方法院提起诉讼的是两名分别居住在爱媛县今治市的男性(42岁)和京都府的男性(42岁)。他们说,“因使用血液制剂而感染到艾滋病,是由于国家和制药     

补充肺表面活性剂治疗婴儿呼吸窘迫综合症

日本东京田边制药公司对未熟儿(译者按:指出生时体重小于2500克的婴儿)中常见的婴儿呼吸窘迫综合症(IRDS),用肺表面活性剂补充疗法的临床试验,已于1986年上半年结束,11月份向厚生省提出申请作治疗药。1987年3～4月开调查会,如果进行顺利,预计在1987年内被批准。用这种治疗药,就可以用短时间的低压的人工呼吸来代替现在通行的使用     

猴B病毒抗体ELISA检测试剂盒的制备及准确性评价

目的:以金标准试剂盒为参照,对新研制的猴B病毒抗体ELISA检测试剂盒进行准确性评价,以期为我国实验灵长类动物产业提供优质廉价的检测试剂。方法:利用3个批次共表达猴B病毒gD和g B蛋白的细胞上清分别制备ELISA检测试剂盒,与金标准试剂盒(VRL的ELISA试剂盒)同时对667只食蟹猴血清进行检测,考察新研制剂盒的准确性;然后,挑选强阳性、弱阳性、阴性样品,用另外2个批次ELISA试剂盒检测,考察不同批次试剂盒检测结果的稳定性。结果:金标准试剂盒对667只食蟹猴血清抗体检测结果为阳性280份、阴性387份,而新研制的ELISA试剂盒结果为阳性282份、阴性385份;与金标准相比,阳性样品的符合率为98.93%(277/280),阴性样品的符合率为98.97%(383/387),总体符合率为98.95%(660/667)。对100份强阳性样品、70份弱阳性样品、108份阴性样品及7份差异样品的重复检测表明,除1份弱阳性(金标准为阴性)检测为阴性外,其余样品与前期一致。结论:与金标准相比,新研制的试剂盒具有较高的准确性,可用于猴B病毒抗体的检测。     

能大量决定HLA的DNA型的简便系统的开发

日本红十字会中央血液中心研究一课主任德永胜士、中心所长十字猛夫等和涌永制药小组使用微量效价平皿开发了与利用抗体检查的血清学分类同等水平DNA就能判断人白细胞抗原(HLA)的DR型的系统。开发的系统利用了聚合酶链反应(PCR)。使用微量效价的简便系统,每天每人能检测80～100个样品,也可以用于常规检查。 德永等在使用16种探针的基础上,实现了与血清学分类相同水平的判断。DR基因的DRB1,用比血清学还精确的水平进行测定获得成功。使用16种探针的Generic Typing可分为适应血清学分类的基因型组。分组样品有20多种,在各种样品中进一步结合探针,几乎可区别存在于日本人中的基因型。其成果在     

样品预处理对HCV-cAg酶联免疫吸附试验特异性的影响

目的:探讨血液样品预处理后对控制酶联免疫吸附试验中假阳性的效果.方法:向稀释血清样品中加入适量的C2H6OS和IgM抗体后,以HCV-cAg酶联免疫方法检测60份血清样品中丙型肝炎病毒核心抗原的阳性情况;与常规样品处理方法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测结果为标准进行比较分析.结果:60份血清样品,采用常规的样品处理方法检测出的阳性例数为34例,假阳性率迭25%;采用改良法检测出的阳性例数为23例,假阳性率达6.7%,二者相比差别具有统计学意义(P(≦) 0.05).结论:改良法血清样品预处理可提高ELISA法检出丙型肝炎病的特异性.     

上海地区小鼠诺瓦克病毒的检测分析及病毒分离

目的了解上海地区实验小鼠自然感染小鼠诺瓦克病毒(murine norovirus,MNV)的状况,并分离毒株。方法抽取委托检测单位送检的SPF小鼠319只,分别采集盲肠内容物及血液样本,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增小鼠盲肠内容物样本中MNV的特异性基因片段来检测MNV的感染情况,同时采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)与核酸检测方法进行对比。将RT-PCR扩增结果为阳性的盲肠内容物样本稀释并经0.22μm滤膜过滤,接种到小鼠巨噬细胞系RAW 264.7细胞,盲传后采用RT-PCR方法鉴定。结果 RT-PCR检测的319份小鼠盲肠内容物样本中,阳性样本95份,阳性率为29.78%。对180份经RTPCR检测的小鼠血清进行ELISA检测,阳性样本70份,阳性率为38.89%。RAW 264.7细胞盲传5代后在72 h内出现细胞病变,经RT-PCR鉴定,显示187 bp的目的条带。结论通过核酸检测方法和血清学方法证实上海地区实验小鼠存在MNV自然感染,且感染率较高,应加强实验小鼠的饲养管理。     

丙型肝炎病毒分片段抗体检测蛋白质芯片的制备及临床评价

为了制备丙型肝炎病毒分片段抗体检测蛋白质芯片,并对其临床应用价值进行评价,将基因工程表达的丙型肝炎病毒分片段抗原,点至经特殊处理的玻片上,制成蛋白质芯片.收集来自三家临床单位用于临床验证的905份血清标本.分别用丙肝病毒分片段抗体检测蛋白质芯片、ELISA丙肝病毒抗体检测试剂进行检测.部分样本同时采用进口RIBA抗体检测试剂进行了检测,分别比较蛋白质芯片法与ELISA法以及RIBA试剂的符合率.结果表明：a.905份血清标本,ELISA法检出阳性294份,阴性611份.阳性标本用蛋白质芯片法检测,融合抗原292份显示阳性结果、2份阴性结果,根据蛋白质芯片的核心抗原,以及NS3, NS4,NS5分片段抗原综合判断确定阳性样本288份阳性,阴性样本2份,4份样本结果不确定.ELISA法检出的611份阴性标本用两种蛋白质芯片法检测,检出阴性均为611份.两种蛋白质芯片法与ELISA法的阳性符合率分别为99.3%和98.9%,与ELISA法的阴性符合率均为100%.用RIBA 试剂检测6份ELISA法为阳性,蛋白质芯片法为非阳性的样本,结果均为非阳性.b.290份经 RIBA试剂确认的阳性标本104份,单片段阳性标本66份,阴性标本120份,用蛋白质芯片法检测,检出阳性标本103份,单片段阳性标本61份,阴性标本126份,二者具有很高的符合率（P＞0.01）.丙型肝炎病毒分片段抗体检测蛋白质芯片,检测灵敏度和特异性高于ELISA法,对血清样本的确认程度与进口的RIBA试剂高度一致,具有操作简便,费用低廉的特点,是一种新型、高效的体外诊断试剂.     

在日本隔离栽培重组番茄“FLAVR SAVR”获得批准

麒麟啤酒公司宣布,引进重组番茄“FLAVR SAVR”,从明年春季着手在日本进行野外栽培试验。“FLAVR SAVR”是世界首批商品化的重组农产品。从94年5月起由美国Calgene公司(加利福尼亚州Davis)在美国销售,以此项成绩为基础,麒麟啤酒公司在日本进行从隔离试验田的栽培试验到安全性确认的实验。如95年在隔离试验田确认栽培植物体的安全性,96年就能销售“FLAVR SAVR的种子。厚生省在今年底制订出摄食重组体(含重组农产品)的食品指导方针。如一切顺利的话,96年就可在     

恒河猴B病毒相关抗体检测方法的比较

以NT方法为基础比较了ELISA和FIA方法,共检测84份猴B病毒相关抗体的敏感性,结果ELISA和EIA阳性各50份(59.5％),NT阳性45份(53.6％)。三种方法相符者71份,符合率84.5％。ELISA和FIA均较NT敏感,而且快速,简便,经济,可应用于大批标本的检查。     

鼠疫菌F1抗体/抗原酶联免疫诊断试剂盒的应用评价

目的对兰州生物制品研究所有限责任公司研制的鼠疫菌F1抗体酶联免疫诊断试剂盒和鼠疫菌F1抗原酶联免疫诊断试剂盒进行临床应用评价。方法采用双抗原/抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接血球凝集试验(IHA)、胶体金免疫层析试验(GICA)3种方法的诊断试剂对比检测云南省地方病防治所中心实验室保藏的和现场采集的血清样品和脏器样品,对血清样品做鼠疫菌F1抗体检测,对脏器样品做鼠疫菌F1抗原检测。结果在358份血清样品中,ELISA试剂检出F1抗体阳性52份(14.52%),IHA试剂检出阳性37份(10.34%),GICA试剂检出阳性45份(12.57%)。ELISA与IHA试剂的符合率为95.23%,与GICA试剂的符合率为96.92%。经统计学χ2检验,ELISA试剂检出F1抗体阳性率高于IHA试剂(χ2=11.53,P=0.000 7),与GICA试剂检出的差异无统计学意义(χ2=3.27,P=0.070 4)。进一步分析滴度差值频数,ELISA试剂检测人血清的敏感性高于IHA试剂的样品占87.5%。在117份脏器样品中,3种试剂均检出F1抗原阳性15份(12.82%),符合率100%。滴度差值频数比较,ELISA试剂检测敏感性高于反向间接血球凝集试验(RIHA)试剂的样品为78.57%。结论兰州生物制品研究所有限责任公司研制的鼠疫菌F1抗体酶联免疫诊断试剂盒和鼠疫菌F1抗原酶联免疫诊断试剂盒性质特异,其敏感性优于IHA试剂盒和GICA试剂条,值得在鼠疫的监测和快速诊断中推广应用。     

用PCR法检测献血员单个核细胞中的CMV—DNA

107份自愿献血新鲜血标本和22份库存血标本分别用PCR检测单个核细胞中巨细胞病毒DNA（CMV－DNA）和用ELISA检测其血浆中CMV－IgG。结果CMV－DNA阳性率达80．4％和77．3％,CMV－IgC阳性纺为65．9％。其中CMV－IgG阳性者,基本上都携带CMV－DNA;CMV－IgG阴性者,亦有部分携带CMV－DNA。因此认为献血员血液中CMV高带毒率应引起临床有关部门的高度重视;PCR是筛选无传播CMV危险性血液制品的最可靠方法。     

应用套式RT-PCR检测SARS患者血液样品中SARS冠状病毒

建立了套式RT-PCR方法检测SARS患血液样品中SARS冠状病毒的方法,并检测血液样品257份。同时将RT-PCR与ELISA检测IgG、IgM的方法进行了比较。结果RT-PCR方法的总检出率为72％,IgG总检出率为68％,IgM总检出率为43％。     

新型布尼亚病毒抗体检测方法的建立及初步应用简

目的：建立新型布尼亚病毒IgG抗体ELISA检测方法。方法：用基因工程重组表达的新型布尼亚病毒NP抗原包被酶联板,建立间接ELISA法检测新型布尼亚病毒IgG抗体,并进行特异性和灵敏度评价,健康人群中检测结果计算临界值（均值＋3标准差）。检测70例发热伴血小板减少综合征患者恢复血清和69份健康人血清样品。结果：在70份患者血清样品中,检测出新型布尼亚病毒IgG抗体阳性51例,阳性率为72．14％（51/70）;69份健康人血清样品中,检测出1份阳性,特异性为98．6％（1/69）。结论：建立的新型布尼亚病毒IgG抗体ELISA检测方法特异性强、灵敏度高,可用于新型布尼亚病毒感染的检测及流行病学调查。     

新型布尼亚病毒抗体检测方法的建立及初步应用

目的:建立新型布尼亚病毒IgG抗体ELISA检测方法。方法:用基因工程重组表达的新型布尼亚病毒NP抗原包被酶联板,建立间接ELISA法检测新型布尼亚病毒IgG抗体,并进行特异性和灵敏度评价,健康人群中检测结果计算临界值(均值+3标准差)。检测70例发热伴血小板减少综合征患者恢复血清和69份健康人血清样品。结果:在70份患者血清样品中,检测出新型布尼亚病毒IgG抗体阳性51例,阳性率为72.14%(51/70);69份健康人血清样品中,检测出1份阳性,特异性为98.6%(1/69)。结论:建立的新型布尼亚病毒IgG抗体ELISA检测方法特异性强、灵敏度高,可用于新型布尼亚病毒感染的检测及流行病学调查。     

美国国家卫生研究院报道对于爱滋病的血液筛选检测法是成功的

从美国本国用于输血的血源中筛选出染上爱滋病(AIDS)的血液的检测法已获成功。上个春季被认可的这种方法,对筛选出被爱滋病病毒污染的血液非常有价值。据美国食品与药物管理局(FDA)的一位官员说,用该法基本上可检测出每种潜在传染的受污染血的部分。通过对一百多万份血液进行爱滋病检测的结果,引起对于这些检测法的重视。所检测的这些血是在美国的131个中心从4月22日到6月16日收集的,它大约相当于那些中心所收集血的70％。尽管官员们做了看来是成功的努力,说服人们避免冒险从献血者那里染上这种病,但一     

中国HIV阳性参比品库的建立以及HIV不同生物标志物的意义

为建立HIV阳性样品库并分析HIV不同生物标志物的意义,从我国不同地区以及不同人群中收集HIV感染者或可疑感染者血浆,对其进行HIV抗体、抗原、核酸以及基因型的检测,并用WB试剂对其进行抗体的确认检测。结果显示,该样品库共有样品190份,均为HIV阳性,含有我国流行的主要基因型,即B′、BC、AE和B亚型;HIV抗体S/CO值小于10者占11.1%,在10~15之间者占63.2%,大于15的占25.8%;病毒载量在50~103copies/mL者占7.9%,在103~105copies/mL者占82.2%,大于105copies/mL者占10.0%。而且抗体S/CO值大于10者,均为HIV抗体确认阳性,小于10者仅有61.9%为抗体确认阳性,但核酸均大于50copies/mL,而且抗体不确定样品的病毒载量均大于105copies/mL,但抗体不确定的8份样品中仅有4份样品为P24抗原阳性。结果提示该样品库样品来自于HIV感染的不同时期,可用于对HIV的不同试剂进行评价;而且核酸的检测可有助于对HIV早期感染的明确诊断。     

用20升培养物生产5克降钙素

三得利公司确立了一种基因重组法,可大量生产酰胺化的人降钙素(hCT),结果在4月东京召开的日本农艺化学会上发表.使用基因重组生产的α酰胺化酶作用于用基因重组大量生产的目的蛋白,获得活性蛋白.用20升培养物能制造4～5克酰胺化活性型hCT.用这项技术还能大量生产由于酰胺化而产生活性的其它蛋白.三得利公司最近打算向厚生省申请批准生产hCT. hCT的生产程序如下:首先用基因重组大肠杆菌生产与融合有β半乳糖苷酶片段的蛋白,然后用蛋白酶V8切出hCTGKKR(hCT-Gly-Lys-Lys-Arg),用羧肽酶B将其变换成