衰老性记忆障碍与脑突触体内游离[Ca~(2 )]_i的相关性

采用行为观察和生化检测相结合的方法 ,在过去工作的基础上 ,研究了 12月龄和 18月龄小鼠学习记忆能力的变化和 18月龄小鼠四个脑区 (海马、大脑皮层、四叠体和小脑 )突触体内 [Ca2 ]i 的水平 ,同时还比较了老年记忆保持良好组与记忆障碍组小鼠的脑钙水平。结果表明 ,随着年龄的增长 ,小鼠的学习记忆能力显著下降 ,上述脑区 (除大脑皮层外 )突触内 [Ca2 ]i 均明显升高 ,其中老年记忆障碍小鼠脑钙水平升高最为显著。提示 ,小鼠衰老性记忆障碍可能与其脑突触体内 [Ca2 ]i 的超载有关。     

东莨菪碱抗吗啡依赖作用与海马细胞内钙的关系

目的:观察东莨菪碱(scopolamin,Sco)对吗啡(morphine,Mor)致小鼠依赖性作用的影响及其机制分析。方法:连续7 d腹腔内注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型;热板法测定痛阈;纳络酮(naloxone,Nal)催促实验计数小鼠跳跃次数和跳跃动物率;流式细胞术测量海马细胞内游离Ca2 ([Ca2 ]i)浓度。结果:吗啡依赖小鼠的痛阈明显下降,跳跃次数和跳跃动物率明显增加,海马[Ca2 ]i明显增加。给予东莨菪碱(4mg.kg-1×7 d)后,吗啡依赖小鼠海马[Ca2 ]i明显减少(P<0.05),痛阈提高(P<0.01),跳跃次数和跳跃动物率减少(P<0.05)。结论:东莨菪碱具有对抗吗啡依赖性的作用,其机制可能与降低脑细胞内游离Ca2 水平有关。     

血管性痴呆小鼠海马神经细胞静息态[Ca2+]i及CaMmRNA、CaMPKⅡmRNA表达的变化

目的:观察血管性痴呆小鼠海马神经细胞内静息态游离Ca2 浓度([Ca2 ]i)和钙调素(CaM)、CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMPKⅡ)mRNA表达水平的变化,探讨上述因素在血管性痴呆发病中的作用.方法:采用双侧颈总动脉线结、缺血/再灌注的方法,制备小鼠血管性痴呆模型,并设假手术组作为对照.分别于术后第29 d、第30 d进行学习、记忆成绩测试,然后快速取海马制备海马活细胞,以Fluo-3/AM为荧光探针,在激光扫描共聚焦显微镜下观察两组海马神经细胞静息态[Ca2 ]i变化,并应用RT-PCR技术检测海马神经细胞内CaMmRNA、CaMPKⅡmRNA的表达水平.结果:①模型组的学习和记忆成绩均低于假手术组(P＜0.05);②模型组神经细胞静息态[Ca2 ]i显著高于假手术组(P＜0.05);而CaMmRNA、CaMPKⅡmRNA表达水平低于假手术组,具有极其显著性差异(P＜0.01).结论:海马神经细胞静息态[Ca2 ]i增高、CaMmRNA和CaMPKⅡmRNA表达减少是导致小鼠血管性痴呆发生的机制之一.     

睾酮对去睾丸家兔骨密度及血清钙磷的影响

目的:观察去睾丸和睾酮补充对雄兔骨密度和血清钙、镁、磷的影响.方法:周龄相同的雄性新西兰白兔随机分成对照组、去睾丸组和睾酮补充组(去睾丸后肌注十一酸睾酮).同等条件下饲养20周后测量各组兔全身骨密度、腰椎骨密度、股骨颈骨密度,并检测血清总睾酮(TT)、雌二醇(E2),脱氢表雄酮(DHEA)水平以及血清钙(Ca2 )、游离钙([Ca2 ]i)镁(Mg2 )、磷(P)和碱性磷酸酶(AKP)浓度.结果:去睾丸组血清TT水平明显下降(P<0.01),睾酮补充组血清TT水平升高接近对照组(P>0.05).去睾丸组血清E2和E2/TT比明显高于对照组(P<0.01),睾酮补充组血清E2和E2/TT下降,接近对照组水平(P均>0.05).与对照组相比,去睾丸组血清Ca2 、[Ca2 ]i、Mg2 以及AKP浓度明显升高(P均<0.01),睾酮补充组血清Ca2 、[Ca2 ]i、Mg2 以及AKP浓度较去睾丸组低,接近对照组水平(P>0.05).股骨颈骨密度在去睾丸组明显低于对照组和睾酮补充组(P<0.01),而后两组无差别(P>0.05).结论:去睾丸后雄兔血清TT明显下降,E2和E2/TT比以及Ca2 、[Ca2 ]i、Mg2 和AKP浓度明显升高,骨密度显著下降,睾酮补充使上述异常明显改善.     

东茛菪碱抗吗啡依赖作用与海马细胞内钙的关系

目的观察东莨菪碱(scopolamin,Sco)对吗啡(morphine,Mor)致小鼠依赖性作用的影响及其机制分析.方法连续7 d腹腔内注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型;热板法测定痛阈;纳络酮(naloxone,Nal)催促实验计数小鼠跳跃次数和跳跃动物率;流式细胞术测量海马细胞内游离Ca2+([Ca2+]i)浓度.结果吗啡依赖小鼠的痛阈明显下降,跳跃次数和跳跃动物率明显增加,海马[Ca2+]i明显增加.给予东莨菪碱(4mg·kg-1×7 d)后,吗啡依赖小鼠海马[Ca2+]i明显减少(P＜0.05),痛阈提高(P＜0.01),跳跃次数和跳跃动物率减少(P＜0.05).结论东莨菪碱具有对抗吗啡依赖性的作用,其机制可能与降低脑细胞内游离Ca2+水平有关.     

脱氢紫堇碱对正常和低氧豚鼠心肌细胞内钙的影响

目的 :探讨脱氢紫堇碱 (dehydeocorydaline,DHC)及维拉帕米 (verapamil,Ver)对豚鼠心肌细胞内游离钙浓度([Ca2 + ] i)变化的影响。方法 :采用离体豚鼠心脏Langendorff法灌注 ,用荧光指示剂方法 (Fure 2 /AM)标记心肌([Ca2 + ] i)变化。观察低氧后心肌 [Ca2 + ] i 的变化。结果 :①正常氧状态心肌 [Ca2 + ] i 均值为 (1 2 0 .5± 8.3)nmol/L(n =2 0 ) ;②正常氧条件下 ,DHC、Ver均使心肌 [Ca2 + ] i 明显下降。 (3)低氧状态下 ,心肌 [Ca2 + ] i 增加与缺氧时间(程度 )直线相关 (r=0 .98)。④DHC对低氧后心肌 [Ca2 + ] i 增加明显减缓。结论 :DHC在正常氧、低氧条件下阻止心肌细胞内钙超载 ,我们认为DHC可能提高心肌细胞的自我保护作用     

pH改变对心肌细胞内Ca~(2 )浓度和细胞长度的影响

目的 :探讨细胞内 pH(pHi)改变对心肌细胞内Ca2 浓度 ([Ca2 ]i)和细胞长度的影响。方法 :心肌细胞内分别灌注 2 0mmol/L丙酸钠和 15mmol/LNH4Cl,建立细胞内酸碱中毒模型。荧光指示剂indo 1和SNARF 1载入大鼠心肌细胞内 ,用荧光显微镜同时测定心肌 [Ca2 ]i、pHi 和细胞长度。结果 :细胞内酸中毒早期 ,收缩期和舒张期[Ca2 ]i 轻度增加 ,细胞缩短 (CS)降低 ,细胞长度增加 ,心肌纤维对Ca2 的敏感性和CS/ [Ca2 ]i 降低 (P <0 .0 1) ;碱中毒时 ,收缩期和舒张期 [Ca2 ]i 均较对照组降低 ,CS增加 ,细胞长度变短 ,心肌纤维对Ca2 的敏感性和CS/[Ca2 ]i 增加 (P <0 .0 1)。结论 :酸中毒早期 [Ca2 ]i 和细胞长度增加 ,碱中毒时 [Ca2 ]i和细胞长度降低。酸、碱中毒对Ca2 敏感性的影响并非线性关系 ,即单位 pHi变化时酸中毒对敏感性的影响较碱中毒小     

用Fura-2/AM测定肺炎链球菌粘附A549细胞后胞浆游离钙离子浓度

目的 :通过体外实验 ,研究肺炎链球菌 (Streotococcus pneumoniae,S.pn)是否可触发肺 型上皮细胞 (A5 49)胞浆 [Ca2 +] i 浓度的改变。方法 :用 F ura-2 /AM荧光探针负载 A5 49细胞后测定 S.pn粘附A5 49细胞 3 0、60、90 min的胞内 [Ca2 +] i 浓度。结果 :S.pn粘附 A5 49细胞 3 0、60、90 min后的胞内 [Ca2 +] i均高于对照 [(187.4± 17.3 ) nmol/L ] ,并达到饱和 ,分别为 (4 87.5± 3 8.1)、(5 48.2± 3 5 .6)、(5 5 7.2± 47.5 )nmol/L。结论 :上述结果提示 S.pn粘附 A5 49细胞可增加胞浆内 [Ca2 +] i 浓度     

牛磺酸对血管紧张素Ⅱ改变培养心肌细胞内游离Ca2+浓度作用的影响

目的和方法 :用Fura 2 /AM .荧光显示测定细胞内游离Ca2 浓度 ([Ca2 ]i)的方法 ,我们研究了牛磺酸 (Tau)对血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )引起的培养心肌细胞 [Ca2 ]i变化的影响。结果 :在有Ca2 和无Ca2 的缓冲液中 ,AngⅡ (1 ,1 0 ,1 0 0 ,1 0 0 0nmol/L)能浓度依赖性地引起 [Ca2 ]i升高。在含Ca2 的缓冲液中 ,Tau(1 0 ,2 0mol/L)可依浓度地抑制AngⅡ (1 0 0nmol/L)引起的 [Ca2 ]i升高 ;但在无Ca2 的缓冲液中 ,牛磺酸无此作用。用ryanodine(Rya ,1 μmol/L)预先耗竭细胞内贮存的Ca2 后 ,AngⅡ (1 0 0nmol/L)仍能引起 [Ca2 ]i进一步升高 :AngⅡ的这一作用能被Tau(2 0mmol/L)显著抑制。结论 :在培养的乳鼠心肌细胞 ,Tau能够通过抑制AngⅡ引起的Ca2 内流而拮抗AngⅡ升高 [Ca2 ]i的作用。     

柴胡皂甙(I)对胰腺腺泡的拟膜受体激动剂作用

应用检测淀粉酶分泌和单细胞[Ca2 ]i 的技术 ,研究了Bt2-cGMP和GDP对柴胡皂甙(I)[SA(I)]和CCK -8促大鼠胰腺腺泡酶分泌和增加[Ca2 ]i 的抑制作用。Bt2-cGMP对SA(I)和CCK -8促酶分泌的抑制有相似的剂量依赖性。Bt2 -cGMP对SA(I)刺激的酶分泌动力学的抑制较对CCK -8滞后并持续。SA(I)诱发的胰腺腺泡单细胞[Ca2 ]i 的变化与CCK -8的作用有所不同 :[Ca2 ]i 峰值上升较慢且持续较长 ,并在峰后[Ca2 ]i 再次升高。GDP亦抑制SA(I)刺激的酶分泌和[Ca2 ]i 增加的峰植。结果表明 ,SA(I)可激活胰腺腺泡细胞膜受体从而升高[Ca2 ]i 和促酶分泌。