四川肺吸虫形态学与生活史的进一步研究

本文对四川肺吸虫进行了一系列补充观察和研究,进一步证明四川肺吸虫确是一个能使人致病的独立新种,与陈氏1960年报告的斯氏肺吸虫截然不同。科学根据概括如下: 1.虫体宽长比,轻压标本平均为1:2.8,未压标本平均为1:3.3,与斯氏1:2.2者不同。 2.卵巢分枝比卫氏及克氏者复杂,比大平及怡乐村者简单,为两者间的过渡型。 3.睾丸在自然形态上为长条状,呈“天”或“王”字形,纵行、并列,侧立于虫体后1/3处。 4.皮棘为混生型,即在虫体前部为单生,向后则丛生者渐增多,介于卫氏、克氏单生型及大平、怡乐村丛生型间的过渡型。本虫皮棘在脱囊蚴为单生,在童虫有2—3并生者,在成虫则为5—6丛生,此种演变可能与虫龄有关,值得注意。与斯氏单生型绝不相同。 5.从人工感染猫、猴和果子狸的粪便中以及大白鼠肺囊内所获得的340个虫卵来看,其大小平均为82.4×48.4微米,宽长比为1:1.71。其中两只果子狸粪便所得虫卵的大小平均值分别为84.1×50.3及82.4×47.2微米,与陈氏1960年报告的从果狸获得斯氏肺吸虫虫卵大小为71×48微米者有明显差别。 本虫开始排卵时间在家猫接种后55—64天,每虫平均排卵1,732—6,662个/天。 6.本种虫卵在28℃温水中经21—23天可孵出毛蚴。毛蚴四列纤毛板排列为6.7.3.1。 7.至此,四川肺吸虫成虫形态,第一     

原位杂交检测斯氏肺吸虫童虫半胱氨酸蛋白酶的基因表达部位

目的 从基因水平研究半胱氨酸蛋白酶基因在斯氏肺吸虫童虫的表达,并进行虫体定位。方法 利用地高辛标记原位杂交技术检测半胱氨酸蛋白酶基因在斯氏肺吸虫童虫的表达并定位。结果 在斯氏肺吸虫童虫的肠管上皮细胞中呈强阳性着色,在虫体皮层细胞中有弱阳性着色。结论 半胱氨酸蛋白酶主要在斯氏肺吸虫童虫的肠管上皮细胞中表达,在虫体皮层细胞中也有弱表达。     

斯氏肺吸虫囊蚴在溪蟹体内的分布

本文观察了斯氏肺吸虫(Paragonimus skrjabini)囊蚴在溪蟹体内的分布。其方法是随意取在斯氏肺吸虫病流行区内捕获的锯齿华溪蟹(Sinopotamon denticulatum denticulatum)20只,分螯肢、步足和蟹体三部分,按囊蚴传统的检查方法进行检查。在20只不同大小的锯齿华溪蟹中,共检获囊蚴58个。其中螯肢检获1个(占总数的1.7%),步足检获9个(占15.5%),蟹体检获48个(占82.7%)。用检获的囊蚴经腹腔注射感染家犬,定期观察。两个月后,在犬粪中发现虫卵,半年后将感染犬处死,检获成虫。经染色制片鉴定,虫体符合斯氏肺吸虫特征。斯氏肺吸虫囊蚴在溪蟹体内的分…     

酶联免疫吸附试验(双抗体法)检测实验犬斯氏肺吸虫循环抗原的研究

近年来在肺吸虫病免疫诊断方面巳建立了不少检测抗体的方法,但这些方法作为考核疗效都不理想。本文报告以家犬作为斯氏肺吸虫病实验动物模型,应用双抗体法,观察其体内循环抗原的消长规律及治疗前后的变化,旨在探索解决临床上难于判定的药物疗效问题。检测材料及方法一、兔抗肺吸虫抗体的制备:用肺吸虫成虫抗原,免疫健康家兔获得的免疫血清(效价1:12800)经硫酸铵提取,再经Sephadex—G200柱层析纯化,用自动收集仪收集,作对流免疫电泳测定各管活性,混合浓缩以凯氏定氮测定,蛋白含量为2毫克/毫升,置4℃冰箱备用。二、酶标记抗体:取辣根过氧化物…     

斯氏狸殖吸虫肠上皮的光镜与电镜观察

斯氏狸殖吸虫(Pagumogonimus skrjabi(?),P.s)是人兽共患病的重要病原。本文报告P.s肠上皮光镜与电镜观察结果,以积累其形态生理和分类学方面的资料。 从陕西宁强县斯氏肺吸虫病流行区捕捉光泽华溪蟹(Sinopotamon dauidi)和陕西华溪蟹(S.shensicnse),分离囊蚴感染犬后100天剖检虫体。10％福尔马林固定石蜡切片,光镜观察;在解剖镜下用细针分离肠管中段,打开肠腔用小针固定在滤纸片上,滴生理盐水冲洗腔面,用含2.5％戊二醛的磷酸缓冲液予固定3小时,经磷酸缓冲液洗后入1％四氧化锻磷酸缓冲液后固定3小时,冼后逐级乙醇脱     

斯氏狸殖吸虫成虫组织化学观察

斯氏狸殖吸虫成虫实质组织及虫卵含糖原最多,其次是表皮、肌组织和生殖腺。酸性粘多糖仅见于卵黄腺。脂类以肠上皮和卵黄腺含量为多。蛋白质主要含在卵黄腺、肠上皮和肌肉内。酸性磷酸酶以肠上皮,排泄囊上皮,表皮和皮层细胞反应最强。碱性磷酸酶主要位于卵黄腺和皮层。最后讨论了各组织器官的主要组化组成及其生理意义。     

不同细菌刺激后仿刺参体腔液中免疫相关酶的应答变化

为了解不同细菌刺激后仿刺参(Apostichopus japonicus)体腔液中免疫因子的应答变化,分别用灿烂弧菌(Vibrio splendidus)、哈维氏弧菌(V.harveyi)、假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifacien)、溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)和停乳链球菌(Streptococcus dysgadysgalactiae)注射刺激仿刺参,然后分别采用对硝基苯基磷酸酯(p NPP)底物法、氯化硝基四氮唑蓝(NBT)法、溶壁微球菌粉法和多巴络合物生成法对体腔液上清中的酸性磷酸酶(ACP)与碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LYZ)和酚氧化酶(PO)的活力进行了测定。结果显示,灿烂弧菌刺激后,酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活力显著升高,而超氧化物歧化酶、溶菌酶和酚氧化酶活力显著降低;哈维氏弧菌刺激后,酸性磷酸酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶和酚氧化酶活力显著升高,碱性磷酸酶活力变化不规律;假交替单胞菌刺激后,酸性磷酸酶、溶菌酶和酚氧化酶活力显著升高,超氧化物歧化酶活力先升高后降低,碱性磷酸酶活力变化不规律;溶壁微球菌刺激后,酸性磷酸酶和酚氧化酶活力显著升高,超氧化物歧化酶活力先升高后降低,溶菌酶活力先升高后降低,而后在72 h恢复至对照水平,碱性磷酸酶活力变化不规律;停乳链球菌刺激后,除碱性磷酸酶活力在4 h有所下降外,其余免疫相关酶活力均显著升高。研究结果表明,酚氧化酶是仿刺参非特异性免疫系统中最敏感、高效的免疫因子之一;革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌之间在诱导仿刺参免疫因子应答变化上无明显规律性差异;溶壁微球菌诱导溶菌酶的应答变化与灿烂弧菌、哈维氏弧菌、假交替单胞菌和停乳链球菌存在明显差异,溶菌酶可能是仿刺参清除入侵溶壁微球菌的主要免疫因子;灿烂弧菌诱导仿刺参免疫因子应答变化显著不同于其他4株细菌,显示出本研究选取的5个免疫指标在预警灿烂弧菌病害上具有潜在应用价值;停乳链球菌在仿刺参中具有作为免疫增强剂的潜在应用价值。     

尖吻蝮(Agkistrodon acutus)蛇毒的分离及其生物活性的研究

用二乙氨乙基纤维素柱层析法将尖吻蝮蛇毒分成15个组分,并对粗蛇毒及各分离组分进行了各种生物活力的测定,结果表明:1.粗蛇毒中存在有精氨酸酯酶,蛋白水解酶、碱性磷酸酶,磷酸二酯酶,5′—磷酸二酯酶,5′—核苷酸酶,ADP酶、ATP酶,L—氨基酸氧化酶及磷酸酯酶A等10种酶活力;但不存在胆碱酯酶及核糖核酸酶的活力;2.蛋白水解酶,5′—核苷酸酶及ADP酶普遍存在于粗蛇毒经分离后的各组分中;3.精氨酸酯酶存在于组分6—13中,以第8组分的活性最高;4.第1及5—13组分显示有较高的凝血活性,第1—2组分及9—15组分显示有出血毒,第12(小鼠死亡率2/5)及第13组分(小鼠死亡率3/5)显示有较高的毒性;第1—2,9—15组分显示有纤溶活性。     

云南省威信县24例肺吸虫病病原追踪调查

目的对云南省威信县肺吸虫病病原进行疫点追踪调查。方法收集2008～2011年确诊的来自威信县的肺吸虫病患者24例,根据病例追踪,自当地疫点采集溪蟹,带回实验室检查并殖吸虫囊蚴,鉴定虫种。结果 24例患者中游走性包块11例,占45.83%,胸腔积液型11例,占45.83%,脑型1例,占4.16%,睾丸鞘膜积液1例,占4.16%。患者主要来自扎西镇、长安乡和双河乡。检查溪蟹278只,斯氏并殖吸虫囊蚴感染率为34.17%(95/278),其中扎西镇溪蟹囊蚴感染率为33.08%(43/130),平均感染度11.63(500/43),长安村溪蟹囊蚴感染率为35.14%(52/148),平均感染度8.98(467/52)。结论云南威信县是肺吸虫病疫源地,第二中间宿主为锯齿华溪蟹,致病虫种为斯氏并殖吸虫,应加强当地肺吸虫病防治。     

斯氏并殖吸虫的扫描电镜观察

斯氏并殖吸虫是我国肺吸虫病的致病虫种之一,通常不能在人体内发育成熟,故患者的痰或粪中一般无虫卵,常以游走性皮下包块为主要临床症状。它的分布区广泛,从我国青海向东至山东的一条直线以南地区曾被看作是斯氏并殖吸虫的分布范围(陈心陶,1964)。虽然在这一分布区内所检获的斯氏并殖吸虫成虫体形和卵巢分枝的特征大多相似,但对体棘的描述尚有争议。目前,已知应用扫描电镜观察肺吸虫体棘的构造细节是一     

蚕豆叶肉原生质体电融合的研究

本文研究了蚕豆叶肉原生质体经透明质酸酶、核糖核酸酶、神经氨酸酶、碱性磷酸酶、胰蛋白酶、脂肪酶六种水解酶和SDS、Triton X-100、CTMAB三种表面活性剂以及秋水仙素、细胞松驰素B处理后的电融合过程。结果表明:胰蛋白酶处理后的原生质体融合率明显下降;碱性磷酸酶、脂肪酶以及核糖核酸酶、透明质酸酶、神经氨酸酶处理的原生质体电融合率均有不同程度的上升。Triton X-100和CTMAB促进原生质体的电融合,但较高浓度(0.01%)的SDS起抑制作用。秋水仙素和细胞松驰素B处理的原生质体其电融合率有较大幅度的增高。     

碱性磷酸酶钙-钴法染色的不同包埋方法比较

目的探讨石蜡切片、冰冻切片及碳蜡(聚乙二醇)包埋切片在碱性磷酸酶染色中的应用,综合分析几种组织处理方法的优缺点,以便在病理诊断及科研工作中能找到更适合的碱性磷酸酶染色方法。方法取新鲜乳腺组织及肝组织,每份标本各取3块组织,根据包埋方法的不同,分为3组:石蜡切片碱性磷酸酶染色、冰冻切片碱性磷酸酶染色、碳蜡包埋切片碱性磷酸酶染色。结果 3组切片均可见黑色碱性磷酸酶的存在,其中肝组织内显示碱性磷酸酶呈黑色,沿胆小管分布;乳腺组织内显示碱性磷酸酶呈黑色沉淀弥漫分布于乳腺间质中。结论碳蜡包埋切片在碱性磷酸酶染色中,具有冰冻切片和石蜡切片的优点,并弥补了常规冰冻切片和石蜡切片染色的缺点和局限性,在病理诊断及科研工作中具有一定的应用价值。     

日本血吸虫卵形成的生理

本文应用组织学及组织化学方法研究了日本血吸虫卵形成的过程,并进行了硫脲化合物对虫卵形成影响的实验。 日本血吸虫雌虫生殖系统是由发生卵细胞的卵巢和发生卵黄细胞的卵黄腺这两个腺体及其连接管道所组成。连接管道包括输卵管、卵黄管和卵-卵黄会合管,分别将卵细胞和卵黄细胞运送至卵形成部位——卵模及其周围的梅氏腺,在其中形成一个完整的虫卵,再通过子官将此新形成的虫卵送经生殖孔而排出。 一个完整的虫卵系由一个受精卵细胞,及约20个卵黄细胞以及包在它们外面的一种硬化蛋白质的卵壳所构成。卵细胞含有丰富的核糖核酸、去氧核糖核酸、芳香族氨基酸、磷酸酶和若干糖原。卵黄细胞含有许多脂类物质,其细胞质中的卵黄颗粒球是制造卵壳的原料,含有蛋白质、酚类物质和酸酶,它们是卵壳的前身物。卵壳形成的化学性质可能是酚类物质受酚酶的氧化作用变成醌,再与邻近的蛋白质结合成醌鞣蛋白,而成为一种硬化的卵壳物质。 日本血吸虫卵形成部位系在雌虫体中段的卵模及梅氏腺区域。卵模腔内壁由单层上皮细胞所构成,它是一种顶浆分泌腺细胞,含有丰富的碱性磷酸酶和芳香族氨基酸蛋白质。在形态上可分为静止相和分泌相,它的分泌机能呈现周期性并似与卵模腔内卵壳的形成有节奏地相配合。在卵模周围分布着一种单细     

马尾松毛虫蛋白质、核酸酶和羧酸酯酶与耐药性的关系

马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus Walker)幼虫蛋白质含量、羧酸酯酶和多酚氧化酶活力与虫龄大小成正相关;氰戊菊酯处理后,兴奋期的蛋白质含量和羧酸酯酶活力上升,到抑制期均降低到正常虫体的水平,而多酚氧化酶的变动不大。正常虫体中脱氧核糖核酸酶(DNase)和核糖核酸酶(RNase)的活力存在差异:DNase从3—5龄幼虫随虫体增大而上升,到6龄时明显降低;RNase与虫龄大小成负相关;氰戊菊酯处理后,DNase便开始下降并低于正常虫体的水平,而RNase在兴奋期上升,到抑制期下降亦低于正常虫体水平。结果说明,除多酚氧化酶外,蛋白质、核酸酶和羧酸酯酶均与耐药性存在一定的相关性,研制酶的抑制剂具有实用意义。根据毒力测定结果,马尾松毛虫幼虫随虫龄增大而耐药力增加,氰戊菊醋对5龄幼虫是3龄的2.8倍,6龄是4龄的2.3倍。因此,掌握在4龄前进行药物防治是合理的。     

唑来膦酸注射液联合经皮椎体成形术治疗脊柱多发性骨髓瘤的临床疗效

目的:观察脊柱多发性骨髓瘤行唑来膦酸注射液与经皮椎体成形术联合治疗的临床疗效。方法:2010年8月至2017年3月,16例行多发性骨髓瘤患者接受经皮椎体成形术与唑来膦酸注射液联合治疗,评定疗效、疼痛缓解及治疗前后血碱性磷酸酶、血清钙、生活质量,记录不良反应。结果:(1)疗效:完全缓解1例,部分缓解12例,微小缓解1例,疾病进展1例,无变化1例,总有效率为87.5%(14/16)。(2)疼痛缓解:显效9例,有效6例,无效1例。总有效率93.75%(15/16)。(3)血碱性磷酸酶、血清钙、生活质量:治疗后优于治疗前(P0.05)。(4)研究期间不良反应轻微。结论:脊柱多发性骨髓瘤行唑来膦酸注射液与经皮椎体成形术联合治疗有助于缓解疼痛和改善生活质量。     

贵州省赤水县肺吸虫病的调查研究

1984—1986年,作者对赤水县肺吸虫病作了调查。皮试儿童399人,阳性93人(23.31％)。查拟钉螺618只,阳性5只(0.81％)。查溪蟹6种954只,5种98只检出囊蚴共计367个。捕剖嚯乳性野生动物11种44只,4种14只检获成虫164条。试验家猫3只,获成虫29条。致病虫种为斯氏肺吸虫。     

两栖类心脏起搏点观察实验中剪断法与传统结扎法的比较

斯氏结扎法是两栖类心脏起搏点观察的经典方法,但成功率较低。将斯氏结扎法改为剪断法,并从成功率、心率恢复时间及恢复后心率等方面对2种方法进行比较。结果表明,斯氏第一扎成功率为47.6%,心率恢复时间为21.0 min,而剪断法的窦-房分割成功率为83.3%,心率恢复时间仅3.8 min。此外,在孵育液中添加肝素和通氧均可显著延长心搏维持时间。剪断法具有操作简单、成功率高、恢复时间短等诸多优点,可代替结扎法用于起搏点观察实验。     

绞股蓝内生真菌抗大肠杆菌抗菌机制的研究

【目的】药用植物内生真菌是一种新型抗生素的微生物资源,研究绞股蓝内生真菌JY25的抗菌机制对内生真菌的研发具有重要意义。【方法】以二倍稀释法测定发酵液的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);以MIC测定发酵液对大肠杆菌生长的抑制作用;扫描电镜观察发酵液作用下的大肠杆菌形态变化;同时,以β-半乳糖酶、碱性磷酸酶和电导率测定发酵液对细胞膜和细胞壁的损伤效果;采用考马斯亮蓝法检测发酵液对蛋白质合成的影响。【结果】JY25发酵液对大肠杆菌MIC为7 g/L、MBC为14 g/L;MIC浓度的发酵液使细菌对数生长期延迟12 h,菌体形态发生严重的畸形和破损;随着抑菌作用时间的延长,β-半乳糖酶含量增加、电导率增加,同时,实验发现大肠杆菌蛋白质合成异常,未检测到碱性磷酸酶。【结论】绞股蓝内生真菌JY25主要以破坏细菌的细胞膜及影响细菌蛋白质合成而抑制细菌生长。     

鄂西土家族苗族自治州肺吸虫第二中间宿主淡水蟹类及其携带囊蚴的调查

本文报告了湖北省鄂西土家族苗族自治州肺吸虫第二中间宿主淡水蟹的感染及分布概况。调查结果表明自治州所属六县两市有8种淡水蟹为肺吸虫第二中间宿主,流行区的致病虫种为斯氏狸殖吸虫或四川并殖吸虫。查明了3科3属8种(其中2个亚种)淡水蟹携带肺吸虫囊蚴情况,在调查的8种淡水蟹中,圆顶华溪蟹方肢亚种、锯齿华溪蟹叉肢亚种在国内首次发现为肺吸虫第二中间宿主。     

弗氏2a志贺菌2457T株碱性蛋白质组图谱的建立

目的:建立弗氏2a志贺菌2457T株的碱性蛋白质组图谱。方法:首先采用双向电泳技术对弗氏2a志贺菌2457T株表达的全部碱性菌体蛋白及碱性膜蛋白进行分离,再通过基质辅助激光解析/电离串联飞行时间质谱进行鉴定。结果:共鉴定到46个蛋白点,对应于38种蛋白质。结论:首次完成了弗氏2a志贺菌2457T株的碱性蛋白质组图谱。