人轮状病毒的细胞培养分离

用CV-1细胞从急性腹泻病儿7份粪便标本中直接分离出4株人轮状病毒(HRV),并适应传代14代。感染细胞出现特征性细胞病变,经电镜、ELISA、免疫荧光染色及病毒RNA电泳等试验证实HRV毒株在CV-1细胞中的繁殖及抗原特异性。病毒滴度为10~(6.0)TCID_(60)。分离的4株HRV毒株均为RNA电泳型长型,经CV-1细胞传7～14代后,RNA图型与原粪样相比未见变异。     

用细胞培养分离人轮状病毒

<正>过去许多人试图用细胞培养繁殖高效价的轮状病毒都告失败了。最近,Wyatt等曾将人工适应2型人轮状病毒(Wa株)经既定菌丛的新生小猪传11代后,在非洲绿猴原代细胞培养中得到相当高的效价。本研究中用MA104细胞(一种恒河猴胚肾的细胞系)分离培养,得到三株人轮状病毒。     

ELISA及IF测定细胞培养物中人轮状病毒

人轮状病毒是全世界婴幼儿急性胃肠炎的重要病原,近年来由于成功地使用了能够增强人轮状病毒对细胞感染性的胰蛋白酶,因而使人轮状病毒能在细胞中不断繁殖,并引起一定的细胞病变,与此同时,也建立和发展了敏感性及特异性较好     

不同代次牛肾原代细胞培养轮状病毒的比较研究

口服轮状病毒活疫苗(LLR株)生产用细胞基质为新生小牛肾原代细胞。原始的初代细胞(P0)产量小,一对牛肾平均生产7瓶细胞。将原始的初代细胞传代可使细胞产量显著增加,传代后(P2代)细胞产量可由7瓶增加为96~112瓶,细胞核型检查传至P5代的细胞染色体数目与初代细胞一致。细胞培养物均一性提高。P0代与P2代细胞病毒培养物滴度分别在6.2±1.5和6.5±0.5lgCCID50/ml,使用P2代细胞培养病毒,产量增加10~15倍。提高了疫苗生产的可控性和质量,生产规模显著放大,经济效益明显。     

四、轮状病毒的电镜检查

<正>电子显微镜检查法在腹泻病的研究中一直起着很重要的作用,人轮状病毒最早就是在电镜观察中发现的,后来根据它的形状命名为轮状病毒。其它与腹泻有关的病毒如星状病毒,萼状病毒等也都有其独特的形态学特征,电镜为我们识别区分这些病毒提供了有利的武器,特别对于那些难于进行组织培养的病毒。因此病毒的形态和大小等特征已成为分类学和实验室诊断的重要依据。     

白豆杉细胞培养

紫杉醇是从短叶红豆杉〔Ｔａｘｕｓｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ(Ｃｈｅｎｇ)Ｃｈｅｎｇ〕树皮中分离出来的二萜类生物碱[1],现已成为知名抗癌药物。紫杉醇主要来源于红豆杉属植物。白豆杉〔Ｐｓｅｕｄｏｔａｘｕｓｃｈｉｅｎｉｉ(Ｃｈｅｎｇ)Ｃｈｅｎｇ〕属红豆杉科白豆杉属,为...     

细胞培养的新进展——基质在细胞培养中的应用

基质生物学的研究使传统的细胞培养技术有重大进展,这种改革包括无血清培养,为每种细胞补充一定的激素和利用组织特异的细胞外基质作为培养底物。这种培养方法能促进细胞附着、克隆生长和细胞分化,尤其适合于上皮细胞的生长。用于细胞培养的基质有胶元、细胞外基质(ECM)粗提物、生物基质、重建基底膜基质、羊膜粗提取物等,分别介绍了大概的提制方法和应用情况。     

栀子的细胞培养研究

茜草科植物栀子(Gardenia jasminoides)是野生常绿灌木。栀子果实中含有京尼平甙。(?)栀子甙等环烯醚萜苷类及藏花素素类胡萝卜素系列的色素,其中藏花索用作黄色的天然食品色素已被开发利用。从栀子成熟果实中提出来的黄色素是一种安全无毒的天然色素,而且对真菌、金黄色葡萄球菌、双球菌等有抑制作用,因而栀子黄色素不仅广泛用于果汁、酒类等饮料中,而且在烹调菜肴、腌制酱菜中以及中西糕点中都成为人们所喜爱的一种天然食用色素,具有很大的开发利用价值,目前国际市场需要量急剧增加,仅仅靠从野生栀子的果实中     

细胞培养的支原体污染

<正>运用细胞培养进行病毒繁殖时,支原体污染是经常遇到的而且是非常严重的问题之一。这些污染对培养细胞产生各种各样的恶果:改变各种代谢活动致使不能进行培养细胞的正常生化研究;细胞生长速度减缓,迫使二倍体细胞系过早衰老,染色体发生畸变,并引起细胞形态的永久改变。事实表明:支原体污染虽会降低细胞培养中病毒的合成,但有时也能促进病毒的繁殖,这可能是支原体对干扰素产生的抑制。     

红豆杉细胞培养的研究

从红豆杉（Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｐｉｌｇ）Ｒｅｈｄ）的嫩茎及针叶诱导的出愈伤组织,对愈伤组织培养及细胞悬浮培养进行了研究,利用ＨＰＬＣ方法测定它们合成紫杉醇的能力,发现了能够提高培养细胞生长速率及紫杉醇含量的一些因子,红豆杉愈伤组织及悬浮培养细胞的生长速率已分别达到０．２５ｇ／Ｌ．ｄ和０．２８ｇ／Ｌ．ｄ。而他们的紫杉醇含量分别是０．００２６％和０．０１２％。     

杂交瘤细胞培养的优化

根据杂交瘤细胞培养中单克隆抗体生产的动力学原理,采用灌注培养方式、添加醋酸钾和丰富营养物培养的途径,对反应器放大培养过程进行了优化。每天灌注l／2反应器工作体积,与分批培养相比,细胞密度由4 5×10⁵／ml提高到l1×10⁵／ml,单抗浓度由19mg／L提高到28mg/L;添加1g／L醋酸钾,细胞密度基本保持不变．但单抗浓度增加到38μg／ml;用丰富营养物培养后,细胞密度和单抗浓度分别进一步提高到42×10⁵／ml和94mg/L。抗B型红细胞单抗的血凝滴度,由分批培养的1：32．最终提高到l：256     

饲养层细胞培养

饲养层细胞在胚胎干细胞培养过程中起重要作用。以原代小鼠成纤维细胞为例,介绍了饲养层细胞的分离培养和制备过程,并就饲养层细胞如何通过分泌LIF(leukemia inhibitory factor,白血病抑制因子)和BMP(bone morphogenetic proteins,骨形成蛋白家族)等细胞因子,维持胚胎干细胞的自我复制和未分化状态的分子机制作出概述。     

细胞培养及单克隆抗体

920147培并细胞制备人造器官〔英〕/Van,Brunt.J一2 Bio/Teehnology一1901,9(2)一136~137〔译自DBA,1991,10(9),91一09229〕 以人造皮肤为例说明如何制备人造器官。从器官发生的角度考虑,活真皮替代物(LDE)和活表皮替代物(LSE)应分别由真皮和表皮细胞组成。最初需培养人新生儿的包皮真皮成纤维细胞(生成LDE),也可以将这种细胞与表皮细胞(生成LSE)共同培养。胶原蛋白作为组织形成的基质,加钙形成片层结构。这种人造皮肤可用于治疗烧伤,也可作为皮肤学研究和检测时测定细胞活力和生化反应性的体外模型。Marrow一Tec五公司的DermaGra…     

大规模细胞培养技术

本文的目的在于从应用、存在问题和潜力等方面论述了大规模细胞培养的现状。由于大多数大规模细胞培养方法具有商业和专利权性质,除提到某些重大的成果外,本文不想详细叙述许多科学成果。本文主要涉及那些现有的商业生产方法,但也注意到那些具有潜在应用价值的革新。本文虽提到植物细胞培养,但主要侧重于哺乳动物细胞。     

水生无脊椎动物细胞培养

目前水生无脊椎动物的细胞培养研究远远落后于哺乳动物和昆虫的培养研究,其培养方法基本仍是套用哺乳动物或昆虫的细胞培养模式。尽管在几十年中进行了一些探索,而且原代培养也取得了一些进展,但到目前为止除了淡水蜗牛胚胎BGE细胞系外,其他动物都还没有成功的建立长时间持续传代的细胞系。现对水生无脊椎动物细胞培养的研究进行综述,并对所面临的主要困难进行了总结,对水生无脊椎动物细胞培养的前景提出了一些看法。     

细胞培养与产业革命

作为一名以制造产品为目的的工程师（产品制造细胞工程师），笔者在此就能对利用细胞的产业做出贡献的未来技术谈一些看法。有一种叫做Vale tudo（无限制格斗）的格斗技术。Vale tudo在葡萄牙语中的意思是“任何事情都会发生”，这种格斗技术是绝对不讲规则、也不讲门派和传统的、满足实战要求的综合格斗技术。为了在格斗中取胜，必须精通各种武艺，而且还要研究制胜的战术理论。