蛋白质功能基团的改变与其生物活力的关系 Ⅱ.胰蛋白酶的必需硫硫键数目

在防止硫硫鍵交換的条件下,用亚硫酸鈉作用于胰蛋白酶的硫硫鍵,于测定硫硫鍵破坏数目的同时,以血紅蛋白、苯甲酰精氨酰胺,对甲苯磺酰精氨酰甲酯測定剩余酶活力的結果用前文提出的判断方法作图表明胰蛋白酶六个硫硫鍵中的三个是必需的。     

蛋白质功能基团的改变与其生物活力之间的定量关系

蛋白质(包括酶)分子结构与功能的关系一直是分子生物学的核心问题之一.用各种方法改变蛋白质分子中侧链基团的性质观察对其生物活力的影响是研究这一问题的主要方法.蛋白质化学修饰的研究,迄今已有约60年的历史.自20年代末到60年代初的30余年内,这一研究一直停留在定性描述阶段,大量的实验结果不能进行定量的数据处理.因为在蛋白质分子中某类侧链基团在功能上虽有必需与非必需之分,但是在与某试剂起反应上往往是相同的,即它们都能与某一试剂起反应.所以,虽然从实验上可以测得随侧链基团的被修饰导致其生物活力下降的关系,但是在所测得的被修饰的基团中,既有必需的,也有非必需的.由于长期以来人们没有找到生物活力与必需基团之间的定量关系,也就无     

别构蛋白功能基团的改变与其生物活力的关系

本文提出了一个适用于研究别构蛋白化学修饰的数学模型并据此可计算必需基团数目。并证明了邹承鲁作图法只适用于非别构蛋白,对于在化学修饰中具有协同效应的多亚基蛋白,其必需基团数目的计算不能用邹氏方法。同时对文献中报道的一些半位修饰的结果,根据本文导出的公式作图得到了较为满意的结果。     

蛋白质功能基团的改变与其生物活力的关系 Ⅲ.对硝基苯酰甲基溴对某些蛋白质活力的影响

对-硝基苯酰甲基溴(NPAB)在不太高的浓度之下对木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰凝乳蛋白酶和胰島素等的生物活力有明显的抑制作用。当NPAB与胰島素或胰疑乳蛋白酶共同保温时,随着生物活力的下降也同时发生吸收光譜的变化。对于胰凝乳蛋白酶而言,355mμ光密度的增加与其活力的下降完全平行說明NPAB仅作用于一个必需基团,再从二氫肉桂酸对这一抑制作用的?た蠢?这一基团可能是酶活性中心的一部分。NPAB对胰島素及核糖核酸酶的作用受pH影响,說明这一反应受蛋白分手中解离基团的控制,并且从它的pK值看来,这一解离基团很可能是组氨酸的咪唑基。pH影响木瓜蛋白酶和胰疑乳蛋白酶与NPAB的作用較为复杂,可能有不只一种解离基团参与控制它們与NPAB的反应。     

蛋白质功能基团的修饰与其生物活性之间的定量关系研究获1989年度陈嘉庚奖

1989年度陈嘉庚奖颁奖仪式于1990年1月5日上午在北京科学会堂举行。中共中央总书记江泽民同志到会并讲了话。著名物理学家、诺贝尔奖金获得者杨振宁教授向获奖者颁发了证书和奖金。获得1989年度陈嘉庚奖的三项有重大创新和科学价值的研究成果,分别属于医药科学、生命科学、地球科学三个领域。它们是:中国医学科学院协和医院宋鸣钊、吴葆桢、王元萼的“根治绒癌”;中国科学院生物物理研究所邹承鲁的“蛋白质功能基团的修饰与其生物活性之间的定量关系”,和中国科学院刘东生、孙鸿烈的“青藏高原隆起及其对自然环境和人类活     

猪肾酰化酶作用机制的研究——Ⅰ.金属离子与酶活力的关系

(1)大多数金属絡合剂除EDTA和迭氮化鈉外都能抑制酰化酶的活力,在可逆抑制情况下加入不同金属离子能部分或全部恢复酶活力。在固定絡合剂的浓度下酶活力的恢复程度与所加的金属离子浓度有关,每一金属离子都有一最适浓度。从以上結果推测酰化酶中的金属离子可能是Co~( )或Mn~( )离子。(2)在温和的条件下并有底物存在时,邻二氮菲和巯基乙酸对酰化酶的抑制是属于竞爭性,K_i值分別为1.28×10~(-4)M和1.74×10~(-3)M;一分子酶是与二分子抑制剂相結合。推測酰化酶可能是以二聚体形式存在。当抑制剂的浓度增大或使反应温度升高时都将引起不可逆的抑制。若酶与抑制剂預先一起保温亦得到类似的結果。(3)用电透析或在不同pH緩冲液下透析以除去酰化酶中的金属离子,都将导致酶的不可逆失活,因此酶中金属离子除起与底物結合的作用外,尚与維持蛋白貭的构型有关。     

蛋白质结构与抗原性的关系 Ⅰ.N-溴代琥珀酰亚胺对牛血清清蛋白理化性质及抗原性的影响

(1)牛血清清蛋白在pH=4.1—4.2的醋酸-脲缓冲液中经15moles/mole BSA的NBS处理后,色氨酸肽键处断裂,出现新N-末端氨基酸,用叔戊醇及1.6M磷酸系统双相层析证实分别为丝氨酸及甘氨酸。(2)NBS处理后之BSA分子量由正常65,000增加到110,000。特性粘度由正常0.041上升至0.076,说明分子有部分聚合现象,在电泳图谱上出现一个新的峰。(3)BSA经NBS处理后此旋光度无变化,说明螺旋程度未发生明显的改变。(4)琼脂扩散及免疫定量实验结果显示NBS处理后BSA的抗原性减弱。     

肌肉蛋白的免疫化学研究——Ⅰ.软骨鱼系原肌球蛋白的免疫化学特性与其结构的关系

近年来在肌肉蛋白的研究中,免疫化学方法起着越来越大的作用。例如对各种肌肉蛋白之间的相互关系、胚胎演发和种属演化中肌肉蛋白的变化、肌肉蛋白的粗織定位等等问题,免疫化学方法都有其特殊的贡献。此中研究最多的是肌球蛋白。至于原肌球蛋白和“不溶性”原肌球蛋白(即副肌球蛋白)的免疫化学研究工作则为数不     

胰岛素结构与功能关系的研究——Ⅳ.B_(22)-精氨酸的改变对胰岛素生物活性的影响

本文叙述了一系列B_(22)-精氨酸改变的B_(23)-D-Ala去B链羧端六肽胰岛素类似物的半合成。半合成途径是胰岛素六甲酯(INS-OMe)经胰蛋白酶和羧肽酶B作用得到去B链羧端九肽胰岛素五甲酯OMe-(DNIOH),A_1和B_1的α-氨基用Boc-基保护后与X-D-Ala·PheOMe(X=Gly,D-Arg,Val,Arg,Boc-Lys和OTB-Asp)缩合,三氟乙酸和皂化去除所有的保护基。这些类似物的生物活力表明;B_(22)-Arg并非不能改变,它用Lys甚至Asp代替后,不影响活力,活力水平约为天然胰岛素的20%。当B_(22)-Arg用Val代替后活力降低一半,而用Gly或D-Arg代替后,活力很低。文中对B_(22)-Arg在维持胰岛素构象和对胰岛素生物活力的影响以及豚鼠胰岛素活力低的原因等问题进行了讨论。     

生物膜组分对膜功能和膜脂相变的调控——Ⅰ.吐温表面活性剂对玉米根端线粒体ATP酶活力的影响

膜脂流动性和膜结合酶的关系极为密切,同时膜脂组分也明显地制约着膜的流动性。本试验选用了三种不同脂肪酸碳链的吐温表面活性剂(Tween 20,Tween40,Tween 80)作为线粒体的添加物,观察对玉米根端线粒体ATP 酶活力的调节作用。结果看到玉米根端线粒体ATP酶在8～32℃范围内活化能在15.5℃处出现了一个折点。添加吐温20、40、80后在8～32℃范围内都出现了二个活化能的折点,分别为26.5℃和12.3℃;25.4℃和15.3℃;22.8℃和12.8℃。清洗吐温后ATP 酶活化能的转折点温度与添加吐温时没有明显差异,表明吐温的脂肪酸链可能与线粒体膜相结合,因而改变了线粒体ATP 酶的活化能的折点温度。     

浙江蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)蛇毒中舒缓激肽增强肽的研究——Ⅱ.舒缓激肽增强肽组分Ⅰ结构与功能的关系

1.浙江蝮蛇毒冻干粉的70%甲醇提取液,经Sephadex G-15层析柱,可分离出三个舒缓激肽增强肽的组分。对其中BPP_1的结构进行了测定,其氨基酸顺序为: (?)GIu·Gly·Arg·Pro·Pro·Gly·Pro·Pro·Ile·Pro·Pro 2.研究了BPP_1结构与功能的关系。当用焦谷氨肽酶移去BPP_1 N末端的焦谷氨酸残基时,对舒缓激肽的增强效应反而升高一倍左右;此后随着逐步进行Edman降解,活力也随之下降,但降解至C末端三肽时,生物活力仍保留约90%,至C末端二肽时,活力就骤然丧失。对BPP_1C末端用羧肽酶Y水解时,一小时后活力降低二分之一。这些部说明,BPP_1 C末端结构的完整,是其生物活力所必需的。