多重PCR方法特异性鉴定卡介苗菌株多糖核酸的初探

与结核分枝杆菌H37Rv菌株进行比较,BCG菌株可找到一个特殊的缺失片段RD1,它存在于所有有毒分枝杆菌中,而在所有的卡介苗菌株中均缺失。应用多重PCR方法检测RD1区的存在与否,可以区别BCG和其它有毒的分枝杆菌。卡介菌多糖核酸来源于卡介菌,检测成品中DNA是否含有RD1区,能特异性地鉴别该制品。结果显示牛分枝杆菌标准株和结核分枝杆菌H37Rv存在RD1区;而卡介菌多糖核酸注射液和国内皮内注射用BCG疫苗生产用菌株扩增产物一致,提示均缺失RD1区。因此,这种多重PCR方法适用于卡介菌多糖核酸注射液的特异性鉴别试验。     

呼吸训练配合卡介苗多糖核酸雾化吸入对慢阻肺患者康复的研究

目的:用深慢腹式呼吸配合阻力呼吸及吸入氧气的治疗方法,对慢阻肺缓解期患者进行呼吸训练,配合卡介苗多糖核酸注射液雾化吸入,来提高患者呼吸肌的肌力和耐力,防治慢性阻塞性肺疾病(COPD)缓解期患者急性发作,从而改善肺功能、提高生活质量.方法:将120例COPD缓解期患者分为2组,每组60例.其中治疗组进行深慢腹式阻力呼吸锻炼,同时氧气吸入(5L/min),每天2次,每次15分钟进行呼吸训练,加用卡介苗多糖核酸注射液雾化吸入治疗,每次1ml,每周2次,配合常规治疗(包括止咳、祛痰、平喘等);对照组只用常规治疗,两组疗程均为3个月.测定治疗前后肺功能、动脉血气分析、运动耐力、生活质量评估及急性发作次数.结果:治疗组治疗后肺功能、PaO2、SaO2有显著改善,同时运动耐力、生活质量评估亦有提高,而且急性发作次数明显减少;对照组治疗前后肺功能、PaO2、SaO2、运动耐力、生活质量及其急性发作次数均没有明显改善.结论:应用深慢腹式呼吸配合阻力呼吸及吸入氧气进行呼吸训练,配合卡介苗多糖核酸注射液雾化吸入治疗既能改善慢阻肺缓解期患者的肺功能、PaO2、SaO2,提高其运动耐力和生活质量.又能减少慢阻肺缓解期患者急性发作次数.     

项目推介

重组人复合干扰素α（优福金）;透皮给药微针阵列药物芯片系统项目;抗乙肝病毒人单克隆抗体靶向制剂项目;分枝杆菌多糖注射液     

卡介菌多糖核酸注射液配合流感疫苗的预防效果对比分析

选取了辖区内150名成人作为观察组,选择同一个区域里在性别比例、健康状况以及年龄等与观察组成人具有可比性的150名成人作为对照组。对观察组的成人接种流感疫苗的同时配合使用卡介菌多糖核酸注射液,对对照组的成人仅接种流感疫苗,分别进行观察其对流感的预防效果。观察组成人在接种流感疫苗和卡介菌多糖核酸注射液后3个月、6个月、9个月,与对照组注射流感疫苗的在流感样疾病的发病情况和治疗费用方面来进行分析比较,评价卡介菌多糖核酸注射液配合流感疫苗对成人的保护效果。结果观察组与对照组的成人进行对比分析,3、6、9个月内观察组发生流感样疾病的人数较少,而且由流感样疾病发生而导致的直接医疗费用以及因家人陪伴和误工而造成的间接费用也较少,观察组与对照组之间的差异均具有统计学意义(P0.05);观察组成人接种卡介菌多糖核酸注射液配合流感疫苗后,仅少数成人出现发热和局部硬结等症状,且症状轻微,均可以自行缓解。成人接种卡介菌多糖核酸注射液配合流感疫苗后,其流感样疾病发病率有明显下降、治疗费用也显著减少,且疫苗接种副反应少、症状轻微,可自行缓解。因此,卡介菌多糖核酸注射液能够提高机体的免疫力,能够抵御流感病毒。     

母牛分枝杆菌制剂对小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮水平的影响

母牛分枝杆菌制剂对小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮水平的影响李晓明,庄玉辉,李国利,张小刚（解放军结核病研究中心,北京１０００９１）王国治,赵桂芳,刘勇,沈小兵（中国药品生物制品检定所,北京１０００５０）母牛分枝杆菌（Ｍｙｃｂｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｖａｃ...     

牛分支杆菌与肺结核分支杆菌基因组的比较

通过比较基因组学的方法研究发现,牛分支杆菌与肺结核杆菌基因组的同源性为99．95％,但在牛分枝杆菌基因组中有11个缺失区,大小从1kb到12．7kb,遗传信息的缺失引起牛分枝杆菌的基因组减小;牛分枝杆菌与肺结核分枝杆菌H37Rv间存在着2437个单核苷酸多态性（SNPs）,与肺结核分枝杆菌CDC1551间存在着2423个单核苷酸多态性（SNPs）,牛分支杆菌与肺结核分枝杆菌在编码细胞壁和分泌蛋白上变异程度也是巨大的。研究结果揭示了牛分支杆菌与肺结核分枝杆菌的遗传关系,为研究分支杆菌疫苗和诊断试剂提供理论依据,对牛肺结核病的防治有着非常重要的意义。     

母牛分枝杆菌制剂在结核病免疫治疗与预防应用的研究进展

母牛分枝杆菌制剂在结核病免疫治疗与预防应用的研究进展庄玉辉,李国利（解放军三○九医院,北京１０００９１）王国治（中国药品生物制品检定所,北京１０００５０）１９６４年,Ｂｏｎｌｃｋｅ等￣［１］首次报道从牛乳腺分离出母牛分枝杆菌,１９６８年,Ｔｓｕｋａｍ...     

母牛分枝杆菌制剂对T淋巴细胞增殖反应影响的研究

以氚标记胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法检测每分钟脉冲数(CPM),比较母牛分枝杆菌活菌悬液、辐射杀死菌悬液及高温杀死菌悬液对健康人外周血T淋巴细胞增殖反应的影响.以此作为评价治疗以细胞介导免疫为主的结核病免疫功能障碍免疫制剂效力的一个重要参数.在加入单一刺激因子实验中,对照组CPM为448±131;加入BCG、母牛分枝杆菌活菌悬液、辐射杀灭菌悬液以及高温杀死菌悬液的CPM分别为1037±194,2299±140,1819±528,994±186.这4种制剂的刺激指数均在2.0以上,尤其是母牛分枝杆菌活菌悬液、辐射杀死菌悬液分别为5.13,4.06.结果表明,母牛分枝杆菌3种制剂与BCG基本相似,在体外对T淋巴细胞增殖反应有明显的促进作用,其中以活菌悬液和辐射杀死菌悬液更为显著.另一试验中,以重组白细胞介素-2(rIL-2)作对照,BCG、母牛分枝杆菌悬液、辐射杀死菌悬液及高温杀死菌悬液分别加入rIL-2,目的在于观察菌体抗原加淋巴因子对T淋巴细胞增殖反应有无协同刺激作用.对照组的CPM为3721±1336,BCG加rIL-2组CPM为6904±1218;母牛分枝杆菌3种制剂的CPM分别为9544±172…     

母牛分枝杆菌联合沙丁胺醇治疗支气管哮喘患者的临床研究

目的:评价母牛分枝杆菌(微卡)辅助治疗支气管哮喘的有效性与安全性.方法:选取门诊哮喘患者30例,均在初诊时及治疗4周后详细记录其哮喘发作次数、临床症状体征积分、FEV1、FEVI%、PEF,雾化吸入沙丁胺醇控制哮喘急性发作,评价母牛分支杆菌疗效.结果:治疗前后相比,患者哮喘发作次数有显著性差异(P<0.01),临床评分有显著性差异(P<0.01).治疗前后肺通气功能比较,FVC治疗前后无显著性差异(P>0.05)、FEV1治疗前后无显著性差异(P>0.05)、FEV1%治疗前后无显著性差异(P>0.05),而PEF有显著性差异(P<0.01).受试者中1例发热,余无不良事件发生.结论:母牛分枝杆菌菌苗联合沙丁胺醇对哮喘患者有较好的疗效,且安全性良好.     

母牛分支杆菌菌苗治疗糖尿病合并初治肺结核的临床分析

目的 探讨母牛分支杆菌菌苗（简称微卡）治疗糖尿病合并肺结核的疗效。方法 同期选取40例糖尿病合并肺结核初治患者,随机分为A、B组。A组以常规抗痨治疗（2HRZE／4HR）,B组在常规抗痨治疗的基础上加用微卡治疗2月。结果 B组结核病灶消散吸收、空洞完全或部分闭合、痰结核菌阴转速度均明显快于A组（P〈0．05）,且不良反应少见。结论 微卡可用作糖尿病合并肺结核的免疫治疗。     

重组分枝杆菌噬菌体检测分枝杆菌的发光研究

采用生物发光方法检测重组的分支杆菌噬菌体对不同细菌的发光反应,并比较了仅在特定的温度范围内才能繁殖的温敏噬菌体Phage 88和正常噬菌体Phage 40对分枝杆菌感染活力测定时发光强度的差异,以建立用不同类型重组噬菌体检测结核分枝杆菌耐药性的方法和条件.结果显示两种噬菌体对各种分枝杆菌作用后均有发光,对非分枝杆菌发光值很低,两者差异有显著性;不同的分枝杆菌发光值有差异：卡介苗的发光值最高,结核分枝杆菌的发光值最低;温敏噬菌体Phage 88的检测灵敏度大于正常噬菌体Phage 40,差异显著.因此可认为两株噬菌体均可特异地检测结核分枝杆菌,但Phage 88的效果优于Phage 40.     

《Molecular Plant》文章中文摘要

题目：植物细胞壁基质（matrix）多糖的生物合成（综述） 摘要：伸长中的植物细胞的细胞壁主要由纤维素微纤丝和基质多糖（半纤维素和果胶）以及少量结构蛋白和酶蛋白组成。基质多糖在高尔基体中合成,通过胞吐作用输送到细胞壁,并与纤维素微纤丝相嵌。纤维素微纤丝在细胞膜上合成并直接沉积到细胞壁。已知在生长素诱导的伸长细胞中,高尔基体中存在多糖链合成,然而直到最近才鉴定出合成多糖链酶的相关基因。在基因鉴定研究中,     

灵孢多糖辅助治疗抑郁症的作用及机制

目的：建立大鼠抑郁模型,研究和探讨灵孢多糖注射液辅助治疗抑郁症的作用及机制。方法：将48只SD大鼠随机分为正常组、抑郁组、生理盐水组及灵孢多糖（低剂量、中剂量、高剂量）治疗组各8只。应用慢性应激刺激的方法诱导抑郁组、生理盐水组、灵孢多糖治疗组大鼠抑郁,通过行为学指标评估建模是否成功。建模成功后,在生理盐水组中注射生理盐水;在灵孢多糖治疗组中分别注射低、中、高剂量灵孢多糖注射液,比较各组间的疗效差异。采用免疫组化的方法测定大鼠脑内多巴胺、去甲肾上腺素、5-羟色胺、酪氨酸羟化酶等单胺类神经递质含量的表达情况。结果：成功的建立了大鼠抑郁模型,抑郁组中大鼠各项行为学指标与正常组相比均明显减少,差异有统计学意义（P〈0．05）;灵孢多糖治疗组大鼠脑内的多巴胺、去甲肾上腺素、5一羟色胺、酪氨酸羟化酶与抑郁组、生理盐水组大鼠脑内的含量均明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：灵孢多糖注射液对改善抑郁症状有良好的疗效,具有辅助治疗抑郁症的作用。     

胞壁表达HSP65-IL-2融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌的构建和鉴定

目的：获得胞壁表达结核分枝杆菌热激蛋白65（HSP65）和人白细胞介素2（IL-2）融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌。方法：将HSP65和IL-2融合基因克隆入大肠杆菌-卡介苗（E．coli-BCG）穿梭质粒pCW,构建成重组质粒HSP65-IL-2-pCW,电穿入耻垢分枝杆菌,经潮霉素抗性筛选和PCR方法选取阳性克隆;用间接免疫荧光法对重组耻垢分枝杆菌进行表型鉴定;用重组耻垢分枝杆菌免疫BALB／c小鼠,检测其诱导的抗体水平。结果：筛选获得的重组耻垢分枝杆菌增殖特性与普通耻垢分枝杆菌无明显区别;与抗人的IL-2抗体和HSP65抗体均可形成免疫印迹条带;间接荧光染色后,可见细菌表面有极强的绿色荧光;重组耻垢分枝杆菌免疫BALB／c小鼠2周后,小鼠血清中HSP65抗体平均滴度为1：4000,而生理盐水组的抗体几乎为阴性。结论：结核分枝杆菌HSP65和人IL-2融合基因在耻垢分枝杆菌胞壁获得表达,有望为结核病的预防提供有效的疫苗。     

结核活疫苗的研究进展

近年研究较多的结核活疫苗主要有重组卡介苗、减毒牛分枝杆菌和减毒结核分枝杆菌,另外对田鼠分枝杆菌和猿分枝杆菌也有所研究。大多数结核活疫苗在动物模型中的免疫效果低于或相当于卡介苗,只有极少数的免疫效果优于卡介苗。     

虫草多糖的分离、纯化和初步药效活性研究

以虫草发酵菌丝体为原料提取虫草多糖并对多糖进行结构鉴定和初步药效活性研究。采用水提醇沉和离子交换纤维素进行分离得到两种虫草多糖,HPLC测定相对分子质量,紫外光谱、红外光谱、部分酸水解、甲基化分析和高效液相色谱等方法研究单糖组成及连接方式,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）检测虫草多糖的活性。经分离得到中性（CPSl）、酸性（CPS2）两种成分,相对分子质量分别为2．56×10^4,9．91×10^;单糖组成：CPSln,（葡萄糖）：n（甘露糖）：n（半乳糖）：n（阿拉伯糖）=46：36：18：l;CPS2／n,（葡萄糖）：n,（甘露糖）：n（半乳糖）：n（半乳糖酸）：n（木糖）：n（阿拉伯糖）：n（鼠李糖）=30：25：14：4：3：3：1。红外谱揭示均含-a-键。CPSl主链含（1→6）糖苷键的高度分支的葡甘露半乳聚糖,另有少量葡萄糖分支点在2,3,4位。CPS2主链含葡萄糖（Glc）、甘露糖（Man）、半乳糖（Gal）,分支点主要在3位,侧链含多种单糖。CPSl和CPS2都对顺铂（CDDP）损伤的vero细胞有一定保护作用。     

应用PCR-SSCP快速鉴定结核分枝杆菌复合群

通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）技术分析结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌临床株的１６ＳｒＤＮＡ基因。６０例临床标本中,２０例为阳性,与传统方法比较无差异。其中分型：１８例为结核分枝杆菌,２例为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌双重感染。２０例阴性标本中,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ又检查出５例阳性。２０例对照标本中,３种传统方法与ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法均检测为阴性。全部试验３ｄ报告结果。结核分枝杆菌复合群和卡介苗的图形相同以外,其它分枝杆菌的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ电泳图谱均有差异。所以,应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术快速     

国内外卡介苗治疗膀胱癌的经验与展望

1976年,美国首次报道,用卡介苗经膀胱灌注,治疗膀胱癌有良好疗效;次年,我国亦作了同样的介绍。实验证明,卡介苗可增强和提高患者的局部和全身免疫,术后治疗的复发率;国外资料为32.91%（化疗组40.61%,未治疗组为87.67%）;我国资料为17.32%（化疗组为34.01%,未治疗组为60.90%）,副反应主要为尿痛、尿频、轻度血尿、低热等一过性反应;很少见全身性副反应。国内所见副反应率低于国外资料。目前,用于治疗膀胱癌的卡介苗,已获本国批准的有5个以上制品;我国同类产品已完成临床Ⅱ期试验,正在申报审核中。本品治疗膀胱癌是一种安全、效好的首选药品。     

酚、超声处理珊瑚色奴卡放线菌制剂对小鼠免疫功能的影响

山村雄一、东市郎、Zbar 等用卡介苗(BCG)及奴卡放线菌分别制成相应的细胞壁骨架(BCG—CWS、N—CWS),并在动物实验的基础上用于临床。在与常规手术、“化疗”、“放疗”并用的情况下,对肺癌、白血病、黑色素瘤等收到了延长生存期、阻止癌转移及导致癌     

治疗用卡介苗的研制

高浓度卡介苗临床用于膀胱癌术后化疗已有数十年。经临床使用其抑制浅表型膀胱癌术后复发效果显著。为满足临床患者的使用,需研制一种适合的治疗用卡介苗制剂。本文报道了三批治疗用卡介苗的研制过程及本所质管处,中检所的检定结果。样品现已通过检定,正申请试生产文号