日本三角涡虫神经系统的组织学观察

为了给涡虫神经生物学的比较研究提供基础资料和通过RNAi技术为研究与脑部再生有关基因的功能奠定基础,本研究使用石蜡连续切片技术,经HE和Masson染色后,对日本三角涡虫Dugesia japonica的神经系统进行观察.日本三角涡虫的中枢神经系统由脑和2条纵神经索组成,脑呈马蹄形;纵神经索从头部到尾部逐渐变细;脑部神经细胞突起连接成网状,纵神经索内神经细胞突起呈纵向排列;咽壁神经组织排列成内外2个圆筒状.这些结构差异反映出日本三角涡虫在涡虫纲系统演化中处于较高级的地位.     

日本三角涡虫成体干细胞的异质性研究进展

Neoblasts是日本三角涡虫Dugesia japonica成体体内唯一具有增殖和分化能力的多能干细胞,是其损伤修复和再生的细胞基础。Neoblasts的组成是均质还是异质,长期以来一直存在争议。近年来研究表明,neoblasts具有异质性,由不同的细胞亚群组成。本文从形态、射线抗性、细胞周期及分子标志等4个方面综述了neoblasts异质性研究的最新进展,为将来探讨neoblasts不同亚群功能、相互关系及各亚群在涡虫再生过程中的作用提供借鉴。     

日本三角涡虫摄食行为的影响因素

研究了光强度、温度变化、食物种类、饥饿程度以及破坏耳突对日本三角涡虫(Dugesia japonica)涡虫摄食行为的影响。弱光和低温最利于涡虫摄食;4种人工饲料中,涡虫偏爱食熟的鸡蛋蛋黄;在一定范围内,饥饿时间长短与摄食强度呈正相关;破坏耳突后涡虫的摄食能力基本消失,“脑”对涡虫摄食是否有作用尚待进一步研究。     

河南省桐柏县两产地日本三角涡虫核型分析

利用空气干燥法对采自河南省桐柏县下虎山和盘古溪两产地日本三角涡虫(Dugesia japonica)的染色体及核型进行了研究。结果表明,日本三角涡虫下虎山种群体细胞中染色体数目以16条为主,染色体基数x=8,为2倍体,核型公式为2n=2x=16=16m;日本三角涡虫盘古溪种群体细胞中染色体数目以24条为主,染色体基数x=8,为3倍体,核型公式为2n=3x=24=24m。     

日本三角涡虫生殖系统组织结构的观察

涡虫在动物系统演化史上占有十分重要的地位,雌雄同体,具有很强的再生能力,因此,对其生殖系统组织结构进行深入研究具有重要的意义.本文用3种染色方法(H.E染色、Masson染色、Van Gieson染色)显示了日本三角涡虫(Dugesiajaponica)生殖系统的组织结构并对其进行了光镜观察.结果表明.该类涡虫生殖系统为雌雄同体.雌、雄性生殖系均由生殖腺和生殖管道构成,雌性生殖腺包括卵巢、卵黄腺和交配囊,生殖管道包括输卵管、交配囊柄;雄性生殖腺主要是精巢,生殖管道包括输精囊、输精管、球腔、射精管4部分.交配囊由单层柱状上皮构成,胞质强嗜碱性,胞核位于上皮基底面,游离面胞质呈现很多泡状结构;卵黄腺为单细胞腺,灯泡状,其核较小,位于柄部.因此,可以确定交配囊具有外分泌的功能;卵黄腺的数目存在周期性.     

日本三角涡虫神经系统的AChE组化定位

日本三角涡虫(Dugesia japonica)是探索再生机理常用的模式动物之一.本实验利用乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)组织化学定位整体日本三角涡虫神经系统,对其方法做了改进,取得理想效果.结果表明:1)日本三角涡虫的AChE阳性(DjAChE+)神经系统结构由中枢神经及其分支神经...     

日本三角涡虫自然状态下的生殖研究

作者１９９０年对六安市某水塘中的日本三角涡虫Ｋｕｇｅｓｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ（下文简称涡虫）在自然状态下的生殖进行了近一年的观察研究，并于１９９２年５－６月、１０－１１月进行了采样。每月采标本３－４次，每次１５分钟，并记录水湿。从统计数据得知涡虫每年进行２次有性生殖，分别是４－５月，水温１９－２１℃；９－１０月，水温２０－２４℃。涡虫的断裂生殖３－１１月均可发生，并在５月、１０月出现高峰，其水温分     

日本三角涡虫hsp70 cDNA克隆及原核表达

热休克蛋白70 是热休克蛋白家族中的重要成员, 它在保护生物体免受各种胁迫中发挥重要作用。由于其惊人的再生能力, 淡水涡虫作为研究再生和发育的模式动物受到研究者关注。但是, 有关涡虫抗逆性的分子机制却少有报道。研究采用 RACE (Rapid amplification of cDNA end) 技术首次从日本三角涡虫中克隆出hsp70 (Djhsp70)全长cDNA 序列。Djhsp70 cDNA 全长2066 bp, 含有1947 bp 的开放阅读框, 编码648 个氨基酸, 分子量71.18 kD, GenBank 登录号EU380241。DjHSP70 的氨基酸含有真核生物HSP70 家族蛋白的三个标签序列(9–16 位的IDLGTTYS、199—206 位的 DLGGGTFD、334–339 位的IVLVGG)和末端高度保守序列EEVD。经BLAST 检索分析, Djhsp70 的核苷酸序列和推定的氨基酸序列与目前已知HSP70 家族成员高度同源。有趣的是, HSP70 亲缘关系分析表明: 涡虫更靠近脊椎动物, 而与无脊椎动物果蝇和线虫相距较远。为了制备抗体研究DjHSP70 的组织学定位, 实验还成功构建了DjHSP70 表达载体, 在IPTG 诱导下表达出约76 kD 的融合蛋白。Djhsp70 cDNA 的克隆与表达载体的构建为下一步工作奠定了基础。       

日本三角涡虫无性繁殖系Dugesia ZB-1的建立

目的建立来源于我国的日本三角涡虫无性繁殖纯品系。方法野外采集日本三角涡虫,之后在实验室进行切割损伤再生,通过不断地切割培养,建立日本三角涡虫无性繁殖纯品系。结果经过10年上万次实验,将来源于山东淄博地区的日本三角涡虫培养成为一个实验室可控条件下稳定生长的单切无性繁殖纯品系Dugesia ZB-1。结论 Dugesia ZB-1的建立,为开展后续相关实验,推动我国涡虫研究的进程及参与国际涡虫研究的竞争奠定了坚实的基础。     

日本三角涡虫的耗氧率和窒息点

应用静水呼吸室法,测定10℃、14℃、18℃、22℃、26℃和32℃温度下日本三角涡虫（Dugesiaj aponica）的耗氧率和窒息点,并测定涡虫耗氧率是否与温度和昼夜节律有关。结果表明,10℃和14℃涡虫耗氧率很低;18℃、26℃和32℃耗氧率较高;22℃涡虫耗氧率低于18℃、26℃和32℃条件下的耗氧率（P〈0,05）高于10℃和14℃条件下的耗氧率（P〈0．05）。18℃时窒息点最高,22℃窒息点最低。10℃、14℃、18℃、22℃、26℃和32℃温度下涡虫的窒息时间分别为125h,120h,55h,42h,37．5h和18．5h。18℃、22℃和26℃3个温度下涡虫耗氧率都呈昼夜节律性变化,白天耗氧率低,晚上耗氧率高（P〉0．05）。同一时间段比较,22℃耗氧率也最低。     

中国淡水三角涡虫的核型分析

用空气干燥法对安徽肥东龙泉山、安徽滁州琅?山、云南昆明海源寺龙潭和湖北恩施龙洞河4产地淡水三角涡虫的染色体组进行研究。结果表明:云南昆明海源寺龙潭的涡虫细胞中染色体数目有16条,24条和32条共3种类型,核型公式分别为2x=2n=16=16m,2x=3n=24=24m和2x=4n=32=32m。安徽肥东龙泉山、安徽滁州琅?山和湖北恩施龙洞河的涡虫细胞中染色体数目有16条和24条两种类型,核型公式分别为2x=2n=16=16m和2x=3n=24=24m。染色体组型分析初步鉴定上述4产地淡水三角涡虫均为日本三角涡虫(Dugesia japonica)。另外本文还对淡水三角涡虫的混倍体现象进行了探讨。     

云南省日本三角涡虫不同地理种群mtDNA CO I基因序列分析及其系统发育

对采自中国云南省的日本三角涡虫(Dugesia japonica)13个地理种群的细胞色素C氧化酶I亚基基因(CO I)的部分片段进行PCR扩增、克隆和测序,以采自河南省的日本三角涡虫Luoyang种群为外群,用Clustal X 1.80、MEGA 4.0、PAUP*4.0、MrBayes 3.1.1等程序对其进行序列分析和系统树构建.结果表明:13种群的CO I基因片段A+T的含量差异很小,稳定在67.1%～68.8%之间,明显高于G+C的含量.序列间的成对遗传距离介于0.000～0.199之间,其中Yuxi、Dali2、Lincang1 3个种群间的遗传距离最小,为0;Puer和Xishuang种群间的遗传距离最大,为0.199.最大简约树和贝叶斯树拓扑结构基本一致,均以较高支持率聚为两支.结合云南省的地形地貌及丰富的水系特征,推测云南省日本三角涡虫可能是中部起源,扩散至边缘,也可能相反.究竟哪种推测更为可靠,尚待进一步研究.     

日本三角涡虫Caspase-7基因的克隆及功能研究

本文以日本三角涡虫Dugesia japonica为研究对象,通过c DNA末端快速扩增技术首次克隆得到了涡虫Caspase-7基因,全长935 bp,编码251个氨基酸,5'-UTR和3'-UTR长度分别为86 bp和93 bp。涡虫Caspase-7具有Caspase家族保守而关键的LSHG与QAC(Q/R) G两大结构域。此外,基于SWISS-MODEL同源建模对涡虫Caspase-7蛋白三维结构的预测和分析,发现其包含2个催化单位,且潜在催化位点由4个表面环构成。进化分析也显示,涡虫Caspase-7基因未与扁形动物门Platyhelminthes物种聚为一支,而与刺胞动物门Cnidaria水螅Hydra vulgaris有较近的亲缘关系,说明Caspase-7基因可能发生了趋同进化。本文通过实时荧光定量PCR检测了Caspase-7基因在涡虫再生不同时间段的表达变化,发现在涡虫切后再生6 h和3 d,Caspase-7基因表达量升高,这2个时间点是涡虫切后凋亡发生的2个高峰期。此外,通过喂食ds RNA干扰涡虫体内Caspase-7基因的表达,结果发现,干扰Caspase-7基因并不影响涡虫的再生,但再生完成后或未切割的成体涡虫在饥饿环境下,受Caspase-7基因干扰,虫体逐渐溶解直至死亡,而Djclg-3及PCNA基因的表达量也显著降低,说明干扰Caspase-7基因表达可能引起涡虫细胞凋亡与增殖减少,涡虫组织重塑失衡,导致虫体溶解并死亡。该结果揭示Caspase-7基因可能在涡虫组织重塑中起关键作用。     

日本林蛙食性分析

本次调查是在贵州省绥阳县内进行,此区分布的日本林蛙系日本林娃指名亚种(及Ranajanponica janponica),属主要农田蛙类之一。过去国内曾有文章对青蛙、沼蛙、泽蛙和中华大蟾蜍的食性作过报道,但对于日本林蛙的食性分析报道较少。为了摸清日本林蛙的有益程度,提供对其进行人工驯养的理论依据以及保护措施,我们对212只日本林蛙的食物组成进行了解剖分析,现将结果分述如下。     

河北3产地日本三角涡虫的染色体变异与核型多样性分析

利用空气干燥法,对采自河北省邯郸市漳河、朝阳湖和邢台市秦王湖3产地日本三角涡虫(Dugesiajaponica)染色体核型进行了研究,结果表明,日本三角涡虫漳河种群与秦王湖种群体细胞中染色体数目以16条为主(2n=2x=16=16m),分别占81.07%和68.47%,少数为24条(2n=3x=24=24m),分别占8.28%和11.71%,为二倍体和三倍体的混合倍体;日本三角涡虫朝阳湖种群体细胞中染色体数目以24条为主(2n=3x=24=24m),占64.60%,少数为16条(2n=2x=16=16m),占7.45%,为三倍体和二倍体的混合倍体。值得注意的是朝阳湖种群部分体细胞中染色体在结构上发生变异,使其核型呈现多型性。文中根据核型分析结果对上述3产地日本三角涡虫染色体及核型的多样性作了初步讨论。     

草甘膦、乙草胺对日本三角涡虫摄食与再生的影响

研究了草甘膦和乙草胺对日本三角涡虫的急性毒性及其摄食与再生的影响.结果表明,草甘膦和乙草胺对日本三角涡虫的24和48 h LC₅₀分别为41.78和12.22 mg·L^-1、35.48和8.41 mg·L^-1.≥6.20 mg·L^-1的草甘膦和≥1.00 mg·L^-1的乙草胺对涡虫的再生影响显著（P<0.05）,且其影响均随处理时间的延长而逐渐减小;术后84 h,除1.40和2.00 mg·L^-1乙草胺处理外,其余浓度乙草胺和各浓度草甘膦处理的涡虫均完成再生.表明乙草胺对日本三角涡虫的急性毒性及其摄食与再生的影响均大于草甘膦.表明日本三角涡虫可作为监测草甘膦和乙草胺污染的指示生物.     

三角头涡虫的简易诱捕法

用猪肝或其它动物肝脏、肺、鱼鳃做诱铒诱捕三头涡虫的采集方法,简便易得,捕获量大。关键是采集地和下饵点的选择。用白色塑料泡沫做浮标,既可在山涧乱石中明显指示下饵点,又可避免诱饵丢失,提高工作效率。     

中国云南三产地淡水三角涡虫核型分析

利用空气干燥法,对采自云南省丽江市束河古镇、保山市龙王塘和香格里拉市小中甸3产地淡水三角涡虫(Dugesia sp.)的染色体和核型进行分析,结果表明:丽江市束河古镇淡水三角涡虫体细胞的染色体数目以16条为主,为二倍体(2n=2x=16=16m);保山市龙王塘淡水三角涡虫体细胞的染色体数目以24条为主(2n=3x=24=24m),少数为16条(2n=2x=16=16m),为三倍体和为二倍体的混合倍体;值得注意的是:香格里拉市小中甸淡水三角涡虫体细胞的染色体数目以极少见的26条为主(2n=3x+2=24+2=21m+3st+2m),少数为25条(2n=3x+1=24+1=21m+3st+1m)和24条(2n=3x=24=21m+3st),为三倍性混合倍体。研究根据核型结果对上述三产地淡水三角涡虫的分类和染色体非整倍性进行了分析。     

三角真涡虫生态因子初测

三角真涡虫(Dugesia gonocephala)为淡水中生活的一种扁虫。属于扁形动物门涡虫纲三肠目。在动物演化史上处于三胚层动物的低级阶段。是教学与科研的常备材料。鉴于目前国内尚未真涡虫生态因子研究的报道,笔者自1984年开始,通过观察、培养与实验,就所得初步资料综述如下:     

云南省日本三角涡虫不同地理种群mtDNA COⅠ基因序列分析及其系统发育

对采自中国云南省的日本三角涡虫(Dugesia japonica)13个地理种群的细胞色素C氧化酶I亚基基因(CO I)的部分片段进行PCR扩增、克隆和测序,以采自河南省的日本三角涡虫Luoyang种群为外群,用Clustal X 1.80、MEGA 4.0、PAUP*4.0、MrBayes 3.1.1等程序对其进行序...